s*****t
发帖数: 107 | |
s*********s
发帖数: 110 | 2 4X(SDS sampling) 50mL
6.25ml 1M Tris,pH 6.8
20ml glycerol
20ml 20% SDS
5mL BME
0.5mL 2% Brom-blue(10mlstock:0.2g/10mLEtoH)
5X, 6X 适当增减
【在 s*****t 的大作中提到】
: 请回帖或站内
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c*********r
发帖数: 1312 | 3 有人知道这个SDS protein sample buffer浓度最高可以到几个X吗？想尽可能加大有效
上样量。。。 |
m**z
发帖数: 787 | 4 用过10x的
【在 c*********r 的大作中提到】
: 有人知道这个SDS protein sample buffer浓度最高可以到几个X吗？想尽可能加大有效
: 上样量。。。
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m**z
发帖数: 787 | 5 是在体积大浓度稀的话可以考虑先TCA precipitation
【在 c*********r 的大作中提到】
: 有人知道这个SDS protein sample buffer浓度最高可以到几个X吗？想尽可能加大有效
: 上样量。。。
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m******5
发帖数: 1383 | 6 求tca precipitation 组织液protocol
【在 m**z 的大作中提到】
: 是在体积大浓度稀的话可以考虑先TCA precipitation
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s*****g
发帖数: 7857 | 7 用过10X 和6X的.网上google的配方.也工作的很好. |
c*********r
发帖数: 1312 | 8 TCA沉淀会有选择性吗？比如某些蛋白会比其它蛋白更容易或者更不容易被沉淀，进而
导致蛋白的相对浓度变化？
【在 m**z 的大作中提到】
: 是在体积大浓度稀的话可以考虑先TCA precipitation
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c*********r
发帖数: 1312 | 9 多谢！^_^
【在 m**z 的大作中提到】
: 用过10x的
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c*********r
发帖数: 1312 | 10 多谢，明天就去试一下10X的。^_^
【在 s*****g 的大作中提到】
: 用过10X 和6X的.网上google的配方.也工作的很好.
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f*********r
发帖数: 1233 | 11 你不如用1x的buffer直接去裂解组织/细胞。加样的时候，孔有多大就多大量sample。
如果嫌蛋白还不够多，就减少buffer用量，以增加蛋白浓度。
【在 c*********r 的大作中提到】
: 有人知道这个SDS protein sample buffer浓度最高可以到几个X吗？想尽可能加大有效
: 上样量。。。
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m**z
发帖数: 787 | 12 有没有选择性倒是不知道。。。
【在 c*********r 的大作中提到】
: TCA沉淀会有选择性吗？比如某些蛋白会比其它蛋白更容易或者更不容易被沉淀，进而
: 导致蛋白的相对浓度变化？
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c*********r
发帖数: 1312 | 13 多谢！有时候裂解细胞跑蛋白胶的话，我们是直接用5Xsample buffer的。但是有的时
候，比如Co-IP的样品，浓度不高，就得考虑体积因素了。^_^
【在 f*********r 的大作中提到】
: 你不如用1x的buffer直接去裂解组织/细胞。加样的时候，孔有多大就多大量sample。
: 如果嫌蛋白还不够多，就减少buffer用量，以增加蛋白浓度。
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c*********r
发帖数: 1312 | 14 简单的搜了一下，似乎TCA沉淀会有损失，而且有的蛋白可能会不溶解。。。
有机会的话试一下。
【在 m**z 的大作中提到】
: 有没有选择性倒是不知道。。。
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