a****r
发帖数: 12375 | 1 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: pokerfuker (mike), 信区: Military
标 题: 我老板有个坏习惯就是爱抠脚
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Oct 5 11:38:47 2017, 美东)
我老板特爱抠脚，挺恶心的。
他平常上班，到了办公室就换拖鞋，然后喜欢穿着拖鞋在实验室走来走去。有一次我
就问他为什么要穿拖鞋，他说穿旅游鞋穿一整天要捂出脚气。后来有几次去他办公室
talk 数据，狗日的居然在抠脚。见我进来急急忙忙把脚从凳子上放下来，装模作样的
。我也就装着没发现。
有一次组会，他刚拿到一个RO1，一个DOD大grant，在那儿牛屄哄哄得意忘形，talk
idea什么的。然后就开始翘起脚在那儿抠脚。抠完皮屑还弹出去，时不时还闻一下。我
们一众奴工、学生都看呆了。一个白牛technician直冲我做鬼脸。
其实他只要不影响我，我都懒得说这些事情。上个星期吧，我筛CRISPR CAS克隆，进
展缓慢，他就怪我养细胞的方法不对，说要给我做个示范。我一开始还挺高兴。结果过
了几天我所有细胞都他娘的污染了。
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k*****c
发帖数: 1670 | 2 第129章 酒泉试验（一）
“我隶属华夏国家安全部十九局，同时也是华夏科学院下属生物研究所酒泉实验室
的一级研究员。在逃亡到美国前，我是102小组的副组长……”
“102小组？”
“对不起。”龙岐偷偷观察着王直的神色，犹豫不安的答道。“这个编号是从国安
部K局沿用过来的，编号本身并没有什么意义，其实我们更习惯叫它‘血魔’小组……”
“血魔小组？”王直目无表情的重复了一遍，龙岐惴惴不安地看着他，但他只是说
了一句：“说下去。”
“102小组的组长是酒泉生化实验室的主任黄正泽，他同时也是酒泉实验中心的主
任。副组长是我和另外一个年轻人，他叫黄安德，是黄正泽的侄子……”
王直心里微微跳动了一下，但没有再干扰龙岐的叙述。
“……我主要负责原理性方面的研究，试图找出……变异的原因和机理，而黄安德
的研究则偏重于实用，也就是武器和实用化方面的研究。我们的研究开始于2012年11月
8日下午，研究对象是……”
龙岐再次停顿了一下，王直问道：“我身体的一部分？”
“对。”龙岐如释重负，很快补充道，“事实上，只是右臂肱骨的四分之一及以下
部分的残肢。”
王直冷冷地瞪了他一眼，他连忙低下头，开始步入正题。... 阅读全帖 |
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c****t
发帖数: 19049 | 3 459 夜尽天明
“站住，不准你去找蟑螂哥，这些天他一直在为聚集地十万人口操劳，你怎么能为这些
小事儿去打扰他休息，明天他还要为大撤退做最后的抵抗……。”
许梦竹不想将这件事儿捅到张小强那儿去，便拿大义去压小东，哪知道小东不吃这一套
，他停步子猛地转身，冲许梦竹吼道：
“对他是小事儿，对我是大事儿，反正他也不在乎你，让你早点解脱不是更好么？放心
吧，就算拼了命，我也会将你从那个屠夫手里抢回来……。”
小东想要找张小强拼命，却不知道他将要做的是自寻死路，张小强和他打了两次架，每
一次都是留了手的，真的想要取他的小命，只要抽出NP22，用动态视觉就能干净利索的
杀掉他。
“就算蟑螂哥不要我，我也不会喜欢你这个懦夫……。”
许梦竹急了，说出伤人的话，将小东打击的头晕脑旋。
“你就是个懦夫，别人都在墙头上抵抗丧尸，你却躲在营地里当起缩头乌龟，蟑螂哥不
喜欢我又怎么样？我喜欢他，他是个真男人，他敢和丧尸作战，敢承担十万人的生死，
你敢么？你就会躲在角落里挖他的墙角，你就是一个小人，我瞎了眼也不会看上你，我
宁愿嫁个一个和丧尸作战受伤的残废，也不会多看你一眼……。”
许梦竹再怎么说也是大学文化，平... 阅读全帖 |
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s***e
发帖数: 911 | 4 1. DNA一端固定在玻片上, 另外一锻悬挂磁球. 磁场中磁矩和场的相互作用能是:
U=-m \dot B, 于是bead上的力是F=Gradient[m \dot B].
若磁场方向固定(z方向),且磁矩是常量, F=m_{z}*Grad[B].
可见力是沿磁场强度的梯度方向.
2. 显微镜镜可以测量z方向拉伸的长度, 和x-y平面上磁球的运动. 若x-y平面上
磁球的横向fluctuation幅度相比DNA长度是小量, 其运动就是x-y平面的简谐
运动. x-y平面磁力分量是F_{t}=F*Sin[w]=F*w=F*r/L=(F/L)*r, 其中L是DNA当前长度,
r是x-y平面径向长度. 作为谐振子, (F/L)就是弹簧的force constant k, 弹簧能量
大家都知道的, 是(1/2)*k*r^2. 这个能量来自热激发, 于是根据热力学能量均分定理,
(1/2)*k*r^2=(1/2) K_{B}*T, 最后得到关系:
(F/L)=(K_{B}*T)/r^2
其中K_{B}是所谓Boltzmann常数, T是绝对温度, 室温大概是300(开耳文). 于是测量L
和r^ |
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m*n
发帖数: 695 | 6 玻片置柠檬酸缓冲液中，微波炉先大火到沸腾然后小火维持将沸不沸的水平十分钟，自
然冷却 |
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m******e
发帖数: 18 | 7 我用的CLONTECH的NucleoBond Maxi Kit 提的BAC 和 YAC DNA 做FISH 探针。产量是很
低，BAC得到大约100ug，YAC是从yeast里提的，大约50ug. BAC通常几百个Kb,低拷贝，
说明书上建议1200ml culture.1ug DNA 可以标记2个玻片，50ug够用几次了。 |
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D***a
发帖数: 516 | 8 希望找一个能像HEK293一样容易转，但细胞个头要大，能在玻片上铺得开的。
另外问个问题，transfection效率跟细胞的什么性质有关？为什么有的细胞好转，有的
难转？ |
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c*********r
发帖数: 1312 | 9 盖玻片和镜头是匹配的吗？我遇到过盖玻片太薄或太厚，或者镜头与样本距离太远被盖
玻片挡住了时，背景噪音很大的情况。 |
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l*****a
发帖数: 1431 | 12 我们用过poly-L-lysine coated的slides，不过固定的是lymphblast。有一部分能
attach上，但大多数还是漂着。 |
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s******s
发帖数: 13035 | 13 superfrost的片片？要么直接上cytospun (是这么拼？） |
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I***a
发帖数: 13467 | 14 我用的是HL-60
刚才找到了一点poly-L-lysine 试了一下，加上collagen
有点效果 |
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I***a
发帖数: 13467 | 15 我是这样的，
因为要用到共聚焦观察，片子要长菌，再加细胞，
所以用dish，就是dish上挖了个空，贴上coverslip，东西在coverslip上， |
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w***a
发帖数: 1053 | 16 高浓度细胞悬液滴片？培养2小时再+medium |
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s******y
发帖数: 28562 | 18 离心。
可以直接把东西放在swing bucket rotor 上离心。 |
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g*********5
发帖数: 2533 | 19 有种化合物，很贵，类似藤壶等贝类分泌的粘液，粘在岩石，贝壳，乌龟壳上的，忘掉
名字了... |
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j***i
发帖数: 61 | 20 用Poly-Lysine试试看把
冷泉港实验室的protocol上有非常详细的说明，很好用。
我做过B cell的，贴的不错也不影响staining和imaging |
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s*****g
发帖数: 7857 | 21 你就不会不往里插？多把PBST滴到圈里，吸掉--如此反复多洗几次？
mouting我从来都不擦。稍为多点mouting液，用带橡皮头的铅笔轻敲敲盖玻片，然后一
边用个尖tip的真空吸管从边缘把泡吸走了事。最后用指甲液封盖玻片。 |
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x**e
发帖数: 163 | 22 请教各位：做的是水稻种子的原位杂交，大部分切片都在加了杂交液后就脱落了，而且
基本上都掉光了。因为切片是学校实验中心的一个人切的，她告诉我用的是Haupt's
gelatin adhesive。她做的片子给我基本上都掉得厉害，但有时候放在37°烘箱内多烘
一夜会稍微好一点。我现在买了poly lysine coated玻片回来，但不知道还有什么应该
注意的地方：比如说展片用水还是甲醛？烘片的温度，时间等。
另外，有人说做之前用60°烘片一个小时，会不会把蜡都溶了，rna搞降解掉？
请各位不吝赐教。 |
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o****e
发帖数: 22 | 23 Orgene Biotechnologies, Inc. 公司是位于美国纽约市的生物技术股份有限公司，是
纽约地区快速发展的生物技术公司之一。公司现主要销售细胞培养系列产品; 实验室常
用仪器仪表及耗材; 各种玻璃器皿及病理玻片；动物手术器械; 各种蛋白质产品及抗体
; 各种试剂盒（ELISA Kit） 并向客户提供抗体定制服务和市场调查咨询服务等业务。
Orgene公司在美国和中国有数十家合作和生产基地，公司拥有大部分公司产品的生产技
术和知识产权。现随着业务不断拓展，公司急需招聘美东各地区销售代表 ( Sales
Representative)。
Orgene公司期待您的加入和我们共同发展，公司将提供必要的培训和充足的业务支持。
第一年主要以Commission为主要报酬方式，第二年改为Base+Commission的方式。
1, Philadelphia/Hershey Medical Center 地区销售代表
2，NIH地区销售代表/销售经理
3，Boston地区销售代表/销售经理
4，Maryland地区销售代表
5, New Jersey地区销售代表
6, New Yo... 阅读全帖 |
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s*****g
发帖数: 7857 | 24 要不
1。固定，打孔，直接免疫荧光染色，照相？（你会需要一个cytospin的机器把悬浮细
胞离心到玻片上）
2。或 IP-Western
3。 或针对此蛋白做细胞的免疫荧光染色， 再做Flow cytometry
4。灵敏的 ECL 液体也是关键。反正GE 的ECL不行。 我平时都是用GE的加少量
MILLIPORE的。MILLIPORE的太强了，有杂带，还需要更好的分子量marker. （GE的我们
是专门用
来显GAPDH，ACTIN等常规大量蛋白的） |
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发帖数: 1 | 25 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: pokerfuker (mike), 信区: Military
标 题: 我老板有个坏习惯就是爱抠脚
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Oct 5 11:38:47 2017, 美东)
我老板特爱抠脚，挺恶心的。
他平常上班，到了办公室就换拖鞋，然后喜欢穿着拖鞋在实验室走来走去。有一次我
就问他为什么要穿拖鞋，他说穿旅游鞋穿一整天要捂出脚气。后来有几次去他办公室
talk 数据，狗日的居然在抠脚。见我进来急急忙忙把脚从凳子上放下来，装模作样的
。我也就装着没发现。
有一次组会，他刚拿到一个RO1，一个DOD大grant，在那儿牛屄哄哄得意忘形，talk
idea什么的。然后就开始翘起脚在那儿抠脚。抠完皮屑还弹出去，时不时还闻一下。我
们一众奴工、学生都看呆了。一个白牛technician直冲我做鬼脸。
其实他只要不影响我，我都懒得说这些事情。上个星期吧，我筛CRISPR CAS克隆，进
展缓慢，他就怪我养细胞的方法不对，说要给我做个示范。我一开始还挺高兴。结果过
了几天我所有细胞都他娘的污染了。
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