m***o
发帖数: 272 | 1 IGF1 mw 17kd，mature protein 8kd。
说检测不到不准确。就是最高的是48h 10moi时可清楚看到17kd，看不到8kd。但是在
48h 5moi时17kd条带很淡。72h时17kd都十分的淡。mature的8kd蛋白都看不到，跑的20
%gel。
Qpcr可检测到mRNA的表达。是蛋白都分泌出去了吗？但是细胞内多少也该有啊？
有谁做过分泌蛋白的表达吗？什么看法？ |
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m***o
发帖数: 272 | 2 可能没表达清楚，现在是想确定这个病毒确实可以表达IGF1，因为已经注射给老鼠，没
看到明显的体重变化，所以做细胞确认一下。因为买的病毒，直接就给老鼠了。
血清也做wb，什么看不到，也做了老鼠的liver tissue，也是什么都没看到（不论17kd
还是8kd），所以比较疑惑。细胞怎么48小时有表达（只有17kd），72小时反而没了？
比较确定实验中没有犯低级错误，比如加的不准什么的。 |
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t****y
发帖数: 168 | 3 这也很奇怪。一直和楼主一样转的。永远有带。而且丽春红染色就看的到。
除非有两种可能就是1 楼主用某些商业化的裂解液，太温和了，核根本没有破。
另外就是 转膜的时候没有转上17kd的带。 |
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