m***o
发帖数: 272 | 1 其实很多文献谈qPCR内参的。可以google一下。这里说一下我的体会。18sRNA 做内参
的一个确定是他不是mRNA,另外他的ct太小。但是有时他还是比较准确。比如我做不同
老鼠的脂肪组织就比较好。而且有片文献专门比较了脂肪组织不同的几个内参，发现
18RNA是最好的一个，而且 在dilute很多的cDNA里，发现变化也不是很大。
不过，我只是在找不到别的mRNA内参时用18sRNA.楼上说用GAPDH，actin，做内参，实
际GAPDH 不是个好的内参，很多时候会变化。我推荐用rpt18.不过再做自己样品时，是
要比较一下不同的内参的。搜搜版上，这个问题好像讨论过。 |
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m***o
发帖数: 272 | 2 十分感谢！文章有些难，需要数学背景，打算再用文章里的UBC和rps18检测。如果都和
actin有类似的降低，说明那个样品就是低。用18SRNA总是觉得量太高，无法真正
normalization。而且18s是rRNA。 |
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S*********s
发帖数: 304 | 3 多选几个内参
b2m
18sRNA
GAPDH
看看内参之间是否一致。
一般尽量保证input RNA量是一样的 |
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b**********8
发帖数: 349 | 4 谢谢你详细的意见，我最近几次的PCR中也发现，
18sRNA CT值只有8点多，但是确实很稳定，不同处理之间的变异几乎可以忽略。 |
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