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m*s 发帖数: 6855 | 2 这儿有没有? 我是0.58买的,被我1.35卖了,ca |
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y*k 发帖数: 90 | 3 (三)、组织细胞的保存:
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现
变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,最佳的
策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深
低温保存法(-70℃—-196C)的特点。
细胞深低温保存的基本原理是:在-79C以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于
完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0C-20C阶段的处理过
程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。用电镜观察,可见细胞
的核膜上有大量针尖样小孔。
生化研究发现,在此温度范围内,钾离子和钠离子集聚在细胞两侧,具有细胞毒性。因
此,为了避免0C——20C冰晶的形成和细胞膜两侧离子平衡的破坏,需要加保护剂。目前
常用的保护剂有甘油和二甲基亚矾(DM50),它们可降低冰点,在缓慢的冻结条件下,能
使细胞内水分在冻结前透出
细胞外。贮存在-130C以下低温中能减少冰晶形成,DMSO和甘油对细胞无毒性,分子量小
,溶解度大,易穿透细胞,使用浓度范围为5%—15%, |
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