k*****o
发帖数: 1486 | 1 Only 30kb? Just E. coli. Maybe DH5alpha or others. Anyway, people use it all the time. |
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v********a
发帖数: 646 | 2 两个问题请教：
1、30kb的大质粒，应该如何转染，才能达到最高的转染效率？
2、这个质粒携带的是mouse gene，但是cmv启动子来自于pEGFP-N1质粒，可以转染人细
胞株么？
谢谢！ |
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b****e
发帖数: 685 | 3 1.对于30kb的质粒，不管是电转还是liposome效率都很难达到很高，即便是293这种好
转的细胞，虽然电转的效率高一点儿，但是这么大的size,在电转的时候会kill掉很大
比例的细胞。所以对于这么大的Size,要想高转染效率，估计只有包成Helper
Dependent Adenoviral Vector.
2.要看你转的是哪种细胞，mouse gene没有问题，但CMV在一些细胞里会表达很差，或
不表达。 |
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v********a
发帖数: 646 | 4 两个问题请教：
1、30kb的大质粒，应该如何转染，才能达到最高的转染效率？
2、这个质粒携带的是mouse gene，但是cmv启动子来自于pEGFP-N1质粒，可以转染人细
胞株么？
谢谢！ |
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b****e
发帖数: 685 | 5 1.对于30kb的质粒，不管是电转还是liposome效率都很难达到很高，即便是293这种好
转的细胞，虽然电转的效率高一点儿，但是这么大的size,在电转的时候会kill掉很大
比例的细胞。所以对于这么大的Size,要想高转染效率，估计只有包成Helper
Dependent Adenoviral Vector.
2.要看你转的是哪种细胞，mouse gene没有问题，但CMV在一些细胞里会表达很差，或
不表达。 |
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g****e
发帖数: 45 | 6 31.5¢ per MMS sent (0-30kb)
84¢ per MMS sent (>30kb)
国际的
30¢ per MMS (0-30kb)
80¢ per MMS (>30kb)
收不要钱的...
sunperks可以换voucher,还可以换电影票,400分可以换两张,而且都是在首映之前的预映
场 |
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T*********r
发帖数: 11175 | 7 http://arxiv.org/abs/hep-ph/0305062
Destruction of Nuclear Bombs Using Ultra-High Energy Neutrino Beam
Hirotaka Sugawara (Univ. of Hawaii), Hiroyuki Hagura (KEK), Toshiya Sanami (
KEK)
(Submitted on 7 May 2003 (v1), last revised 29 Jun 2003 (this version, v2))
We discuss the possibility of utilizing the ultra-high energy neutrino beam
(about 1000 TeV) to detect and destroy the nuclear bombs wherever they are
and whoever possess them.
Comments: 18 pages, 8 figures, LaTeX2e; Typos corrected, so... 阅读全帖 |
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D**********r
发帖数: 602 | 8 符合公务员招考笔试加分条件的报考者，按照以下标准加分：
1、烈士的配偶、子女加20分；
2、回族考生加10分；
3、因公牺牲人民警察的配偶、子女加10分；
同一名报考者累积加分不超过20分。
http://www.nxpta.gov.cn/gongwuyuankaoshi/2015-03-20/2484.html
宁夏回族自治区2015年考试录用公务员（参照公务员法管理单位工作人员）公告
时间：2015-03-20 18:15:15 来源： 编辑：
为满足我区各级机关和参照公务员法管理单位补充工作人员的需要，根据《中华
人民共和国公务员法》、《公务员录用规定（试行）》、《宁夏回族自治区公务员录用
暂行办法》等有关规定，自治区公务员主管部门将组织实施2015年统一考试录用公务员
工作，面向社会公开考试录用担任主任科员以下及其他相当职务层次非领导职务的公务
员（参照公务员法管理单位人员）共1316名。现将有关事项公告如下：
一、招考对象
（一）2015年3月25日之前具有宁夏回族自治区常住户口的人员。
（二）以下六类人员报考不受宁夏户口限制：
1.在宁夏服务期满两年且考核合格... 阅读全帖 |
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D****8
发帖数: 408 | 9 你知道2019-nCoV基因组有多大么？30kb！
你去看看现在已经测序的从病人体内提取的病毒基因组序列，差别有多大了，这才发生
了几天？ |
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D****8
发帖数: 408 | 10 你文科生么？对量化一点没感觉？
The genomes of RNA viruses are characterized by their extremely small size
and extremely high mutation rates (typically 10 kb and 10−4/base/
replication cycle, respectively).
https://genome.cshlp.org/content/17/10/1496.full
2019-nCov的基因组30kb, 复制一次，估计可达3个核酸的突变。
4%的基因组差别是1200个核酸的不同。
你自己看看，这是很难的一件事情么。 |
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p*********o
发帖数: 27 | 13 给宝宝办旅行证，使馆说要到 ppt.mfa.gov.cn 填信息预约，需要上传数码照片（48mm
* 33mm, 30kb ~ 80kb），我们准备好符合要求的照片，点击“上传”却一点反应都没
有，无法上传。 领事馆建议使用ie7，8，9，我们尝试了ie9，chrome和firefox都不行
，请问版上有没有做过旅行证预约的朋友，当时数码照片是怎么上传的？ |
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M7
发帖数: 219 | 14 来自主题: JobHunting版 - MS面经。 非名校CS PHD, 5月毕业。去年12月网投的，一周后说要电面。
电面：
1. 博士做什么题目？最挑战的部分是什么？
2. If you started this (your research) over, what do you want to do first fo
r the same project?
3. What is a good program?
4. Why do you rate your preferences for SDE, SDET and PM. 我当时perfer SDE。
面试官要我be flexible.
5. A game is about to ship, how do you want to to test it?
6. Given a year and unlimited funding, what do you want to do?
没有coding问题。说是三到四周给回音。结果两天后（而且是在周末）recruiter就说通
过了。要onsite SDET。
Onsite:
10:30和recruiter聊了一下: why MS?
11... 阅读全帖 |
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m**********a
发帖数: 10817 | 15 关于中国驻休斯敦总领馆赴阿拉巴马州伯明翰市现场办公的通知
为切实打造好海外民生工程，更好地服务广大华侨和中国学生、学者，将领事证件服务
延伸到领区各地，中国驻休斯敦总领馆将于2014年6月21日（星期六）赴阿拉巴马州伯
明翰（Birmingham, AL）现场受理领区内中国公民护照、旅行证及健在证明申请，欢迎
有关申请人届时前往办理。现就有关办证要求通知如下（请仔细阅读并留意黑体字内容
）：
一、办证时间：6月21日上午10:00至下午3:00
二、办证地址：Community Meeting Room
Avondale Library, 509 40th St S, Birmingham, AL 35222
三、受理办证范围
因时间所限，此次仅受理以下申请：
（一）护照换发、颁发、补发申请。
（二）中国公民在美出生儿童旅行证申请。
（三）健在证明申请。
提醒1：签证、公证认证等申请，恕无法现场受理，可由本人或请亲友到我馆办理。烦
请相互转告。
四、办证程序
第一步骤：预约
现场办公实行预约办证（健在证明无需预约，随到随办）。
请申请人访问中国公民海外申请护照在线预约网站（网址为：ht... 阅读全帖 |
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l****z
发帖数: 29846 | 16 资讯安全专家发现，早前被揭发擅自上传用户资料到北京伺服器的国产小米手机，虽然
生产商已经就事件道歉并更新程式堵塞漏洞，但手机资讯仍然自动频密外泄，接收的伺
服器这次不在北京，而在新加坡一个身份不明的租用伺服器
苹果日报委托资讯保安专家杨和生及资讯安全公司Nexusguard进行测试，发现更新后的
红米1S，即使在静止状态，每隔半小时便会自动上传手机资料到新加坡一个租用的伺服
器。小米回应称，与伺服器连线只为客户更新日历、天气等系统，不涉私隐。业界与专
家直指情况不寻常，有泄漏客户私隐之嫌。
上月有电脑保安公司发现，小米3及红米1S两款手机会将用家的手机序号及电话号码，
传送到小米位于北京的伺服器；而以手机发送短讯时，更会连接收短讯者的电话也传到
同一伺服器。事后小米发声明道歉，并向用户提供OTA更新包，指已解决有关问题，声
称安装后便可“安心使用”。该更新包适用于所有小米手机。
苹果日报于是委托互联网协会网络保安及私隐小组召集人杨和生，为香港版红米1S手机
进行为期13天的监察测试；供测试的红米是全新机，开封后立即连接由杨设立的WiFi网
络，以便监察手机有否向互联网发放资料。
监察期... 阅读全帖 |
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t*a
发帖数: 18880 | 17 http://houston.china-consulate.org/chn/zytz/t1284368.htm
首页
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关于中国驻休斯敦总领馆赴佛罗里达州奥兰多市现场办公的通知
2015/07/28
为切实打造好海外民生工程，更好地服务广大华侨和中国学生、学者，将领事证件
服务延伸到领区各地，中国驻休斯敦总领馆将于2015年8月29日（星期六）赴佛罗里达
州奥兰多市现场受理领区内中国公民护照、旅行证及健在证明申请，欢迎领区内申请人
届时前往办理。现就有关办证要求通知如下（请仔细阅读并留意黑体字内容）：
一、办证时间：2015年8月29日上午10：00至下午4：00
二、办证地点：奥兰多市（具体地点另行通知）
三、受理办证范围
此次现场办公受理以下申请：
（一）护照换发、颁发、补发申请。
（二）中国公民在美出生儿童旅行证申请。
（三）健在证明申请。
提醒1：签证、公证认证等申请，恕无法现场受理。公证须由本人前往总领... 阅读全帖 |
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g**q
发帖数: 96 | 18 http://houston.china-consulate.org/chn/zytz/t1159329.htm
为切实打造好海外民生工程，更好地服务广大华侨和中国学生、学者，将领事证件服务
延伸到领区各地，中国驻休斯敦总领馆将于2014年6月21日（星期六）赴阿拉巴马州伯
明翰（Birmingham, AL）现场受理领区内中国公民护照、旅行证及健在证明申请，欢迎
有关申请人届时前往办理。现就有关办证要求通知如下（请仔细阅读并留意黑体字内容
）：
一、办证时间：6月21日上午10:00至下午3:00
二、办证地址：Community Meeting Room
Avondale Library, 509 40th St S, Birmingham, AL 35222
三、受理办证范围
因时间所限，此次仅受理以下申请：
（一）护照换发、颁发、补发申请。
（二）中国公民在美出生儿童旅行证申请。
（三）健在证明申请。
提醒1：签证、公证认证等申请，恕无法现场受理，可由本人或请亲友到我馆办理
。烦请相互转告。
四、办证程序
第一步骤：预约
现场办公实行预约办证（健在证明无需预约，随到随办）。
请... 阅读全帖 |
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q**a
发帖数: 75 | 19 I can get around 30kB/s for download. |
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g******8
发帖数: 153 | 20 最近刚从国内带了一个小米盒子，在家试了一下，发现卡的要命！
我的网是comcast的50Mbps的网，按理说应该够快了，可是用小米里面自带的iCNTV测速
才只有30Kb，看啥都卡。
不知道这边有没有人用过小米盒子的，咋解决这个问题？要改什么DNS之类的么？
谢谢！ |
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s******u
发帖数: 60 | 21 我设好FTP了，试了一下，只有25-30KB的速度，
以最小的档案来算，180MB 至少要一个小时四十分，
我可以把他们放到HUST 上吗?
2003NCAAChamp001.mpg 453 MB Aug 17 00:12
2003NCAAChamp002.mpg 305 MB Aug 17 22:43
2003NCAAChamp003.mpg 242 MB Aug 17 23:10
2003NCAAChamp004.mpg 267 MB Aug 17 23:40
2003NCAAChamp005.mpg 184 MB Aug 17 23:59
2002WorldCupBrazilRussia.mpg 1010 MB Aug 16 10:58 |
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s****n
发帖数: 4902 | 22 才2，30kb／s。还cable呢，比不上dial-up。
大家的网速怎么样啊？ |
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h*e
发帖数: 10233 | 23 我把能关的都关了，还是有平均30KB/s的上载。在task manager里看不出来有什么可疑
的东西。如果不能的话有什么软件可以看？谢谢。 |
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l***h
发帖数: 9308 | 24 看完后，就用最开始的那个范本，简单设置了一下，基本上起作用了。
Outbound Rate Max 300 kbit/s，
P2P设为class E (1%-1% limit）
打开emule，把限制上下传限制取消。最后上传稳定在25K-30B/s，跟番茄real time
review (平均250 kbit/s 30KB/s，峰值在380kbit/s 47KB/s）
不过，www页面打开还是慢，outbound class设置为10%-80%
，设
review，
止。 |
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r********g
发帖数: 402 | 25 现在用的是QNAP TS251. 系统升级到最新的版本了。
最开始的时候还能用nas自带的download station做bt下载。但是速度比较慢，试着下
载过很多的文件，最快也就20-30kb/s。 用电脑上装的软件直接下载，速度非常快，至
少1-3M/s,确定不是下载源的问题。
现在的问题是不论怎么试，下载速度就是0. 另外QNAP的这个download station号称能
够搜索bt种子，最最开始的一小段时间还行，但是后来就没有办法搜到任何的种子。
请问一下，我是哪里设置有误？
我在网上搜这个问题，有的人说需要设置port。请问这个是干什么的？如何设置？
谢谢 |
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M*****n
发帖数: 16729 | 26 I need subclone a big promoter, which makes the plasmid over 30 kb.
What kind of bacterial strain should I use to propogate the plasmid and for
subcloning?
What kind of plasmid preparation kit should I use for the plasmid?
Thanks a lot for sharing your experience. |
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M*****n
发帖数: 16729 | 27 any strain should work?
I will need make a Cre-ER construct, do I need to use a special strain? |
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k*****o
发帖数: 1486 | 28 Size doesn't matter, cos a regular cosmid/fosmid would be over 30 kb. Sorry
that I don't know anything about "Cre-ER construct", but I think it's the
protein that you want to express really matters. But not the size. |
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C*******e
发帖数: 4348 | 29 Invitrogen 的DH10B是适合做大Plasmid还有cosmid的
不好的是本身有Sp抗性
for |
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M*****n
发帖数: 16729 | 32 ok. thanks.
我就先试试heat-shock 转化吧。 |
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C*******e
发帖数: 4348 | 33 不是，不过Invitrogen的MegaX DH10B是电转的感受态细胞
挺好用的 |
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q*****d
发帖数: 445 | 35 我是做合成生物学的，想构建一个新的代谢通路，需要表达很多基因，但是不知道酵母
细胞转化质粒的大小上限是多少？比喻一个30KB的质粒能够通过LiAc方法转化吗？BTW:
我做过最大质粒整合是15KB的。 |
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j*****9
发帖数: 716 | 37 应该取决于你用的是什么细胞，比如293， COS-7这样的很容易就转进去了 |
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j*****9
发帖数: 716 | 40 应该取决于你用的是什么细胞，比如293， COS-7这样的很容易就转进去了 |
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