m**********o
发帖数: 2272 | 1 买菜车，换轮胎，经济实用就好
看了两款，价格差不多
Goodyear Eagle GT (400AA, 50k miles)
Hankook Optimo H727 (700AB, 100k miles)
看了review，后者很好，前者也不错
不知道选哪个好？ |
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y***u
发帖数: 135 | 2 我想卖的物品:
US Airway Points 40,0***[email protected]
你可以买一个或者两个40000点，因为它们分属于两个帐户下。
可接受价格(必须明码标价！):
10000 points/ $150 （可以商量）
物品新旧要求:
邮寄方式要求:
我把帐号密码给你，你用完后归还。
买卖双方谁承担邮寄损失(Required if not code only):
na
付款方式说明:
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其他补充说明:
我是新ID， 但我不是骗子，我希望你也不是骗子
如果你是老ID或者是有良好的交易记录，我可以先货后款！
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我的联系方式:
y*******[email protected]
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能否证明是合法的一手卡?(Required ... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 3 如题 最好是50/100/200的几张 谢谢
邮件[email protected]/* */
mitbbs不常上 |
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y***u
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H****s
发帖数: 301 | 6 现在在尝试用原核系统（E.coli)表达一个病毒蛋白（400aa)，T7 promoter，BL21(DE3
) host。现在遇到了一个难题，这个基因怎么也克隆不到原核表达载体里去。转化后有
colonies，但是小提质粒后发现没有插入片段。
首先排除的是克隆问题，同样的片段，同样的酶切位点，使用完全同样的试剂，该基因
很容易就克隆到真核表达载体里去。
尝试了cytoplasm表达载体，periplasm表达载体,和不同的宿主菌，都是同样的结果。
（原核表达老手了，头一次遇到这种情况）。
是不是此蛋白毒性太大，即使是一点点的leaky expression都不行？
我现在在想的试验是：（1）做一个这个基因的文库，来看看到底是哪部分有毒性；（2
）使用GroES的leader peptide试试看。
各位有没有什么建议？谢谢。 |
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