l******n
发帖数: 298 | 1 ER老鼠，4OHT太贵，sigma买的，一小瓶25毫克就是几百块。
想打tamoxifen,还怕效果不好。。。。
请支招 |
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S******9
发帖数: 2837 | 2 不是也可以打一般的Tamoxifen吗？
我是用的普通的 |
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a*******n
发帖数: 156 | 3 联系国内的化学公司，买回来打个质谱做个NMR确认一下就好了 |
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b*****n
发帖数: 1841 | 7 坑爹的，4OHT诱导效率高但真太贵，我们用不起只好还是用tamoxifen |
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t******k
发帖数: 599 | 8 我用的也是一般的tamoxifen，原来老板也想买4oht，然后我说还是tamoxifen吧，咱省
钱。。。 |
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D*a
发帖数: 6830 | 9 还是先看看效率吧，老鼠可是最基础的实验材料，省了这几百块，后面kit抗体时间赔
的更多啊。 |
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l******n
发帖数: 298 | 10 看来玩tamoxifen的战友还不少啊。
dua说的对，我也想先看看效率。打了5天，好像没啥效果！想用OHT主要是看richard
lee还有几个大牛发好文章都用OHT,我就想人家也不傻干嘛非用OHT啊。
dua你打OHT一般几天见效果重组？ |
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D*a
发帖数: 6830 | 11 我自己不做这个，我们实验室有做的，我也是道听途说。或者你要用便宜的，好像是怎
么经过肝脏之后才能有效，可能就更慢点？ 他们当年不光查pubmed文献还查了药代动
力学，市面上各种tam的分子的区别和代谢途径（胃or注射）的区别什么的。
好像应该是五天以后才慢慢积累到足够剂量吧，所以要再等几天才能KO
我们都是至少一个月以后再看KO效率的 |
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D*a
发帖数: 6830 | 13 今天刚问了，OHT是tam肝脏代谢后的产物，也是真正有毒性和产生KO的分子。
我们实验室里他们用的是普通的tam，打成年鼠。 |
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P*******1
发帖数: 169 | 14 There is no problem with tamoxifen at all. if efficiency is low, don't blame
tamoxifen. It's your CreER level being too low. |
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l******n
发帖数: 298 | 16 多谢你。是的，tam代谢以后成为有活性的4-OHT.我再鼓捣鼓捣。刚开始用这个ER老鼠
，还不太熟悉。 |
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l******n
发帖数: 298 | 17 高手，谢谢哦。你说对了，我这个ER表达很低。不过我这个不是cre-ER system的KO.我
这个是knockin一个human transgene on top of endogenous gene, to check the
ectopic overexpress of the protein.我老板说ER正常情况下抑制这个蛋白，一旦加
了OHT,蛋白就活了，我不太懂原理，就是跟着做了。
这种情况tam or OHT有区别吗？
blame |
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D*a
发帖数: 6830 | 18 你还是要自己摸索条件，新模型逃不了证明efficiency这一关
另外前期好好试有很多好处的，听很多人说打tam打死一批老鼠的，我们就没有这种情
况，因为条件摸得好，基本上不损失老鼠，KO效率也很高。 |
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G********e
发帖数: 528 | 19 麦克马洪2002dev bio的文章应该是最早的，我读了好多遍
不过后来的各路ER出现之后，条件真是千变万化
浓度跨越20倍
最搞笑的莫过于myh启动子的Cre+2Mer
各路神仙发了一堆文章之后发现这个老鼠没有flox的情况之下
他摸细分是会诱导急性心肌病
然后就有如何调控剂量的文章，或者采用raloxifen替代tamoxifen
死活就没人做tam的药代动力学和cre的关系
我认为低剂量长期给应该是一个比较好的办法
土土的想的，没试过 |
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D*a
发帖数: 6830 | 21 这个不好意思，因为我只是打酱油的，所以不方便说太详细，只能说说大概。
反正我们选creER之前基本上都是把市面上的所有我们想要的cell line的cre的papers
和引这个cre的papers看了一遍，确定Tam之前也差不多是这么弄的，后来又自己试了两
三个dose。 |
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