发帖数: 1 | 1 Ticker: GNC
日期：2-25- 18
当前价格：4.42美元
目标价：5.75美元
时间周期：6个月
基于以下几点，我们建议在4.5美元以下买入GNC，目标价5.75:
短期债务问题已基本解决
美国的生意趋于稳定而和哈制药的合作提供了在国内加速发展的可能， 基
于这两点，目前EV/EBITDA的估值偏低
较高的卖空率提供了短期挤空的可能
GNC的股价从2017最高11美元下跌至目前4-5美元区间，短期债务问题是主要原因。
然而，上周五的债务延期公告加上哈制药300M的投资，我们认为GNC的短期债务问
题已基本解决。 上周五的公告主要针对GNC 1.13B 2019的现有定期债（Term
Loan），有以下几点：
87%的债权人同意延期债权
尽管没有达到哈制药原来要求的90％的标准线，哈制药同意继续300M的投资
同意延期的债权人持有大约0.87*1.13B=983M, 其中275M将转为2022到期的
资产抵押债（ABL），利息Libor＋700bps，剩下的708M将... 阅读全帖 |
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s****9
发帖数: 932 | 2 I am also doing in situ with DIG probe. None of the probes from my designs
show any signal while other probes from other lab works very well as
positive control. Do you have any suggestion for probe design?
The mRNA is 1.5kb. I desgined three probes, full length, C-terminal half (
700bp), and N terminal half (700bp). |
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b******s
发帖数: 1089 | 3 谢谢建议。很有道理。我准备再耐心一点，看看事情怎么发展。想好了再跟她谈一次。
现在我的优势是，所有的东西都很熟悉，做起来非常快。而且脑子里已经想好文章的框
架。只需再多一点数据即可。
另一个有利于我的方面是，老板招的人看起来入门比较慢。我老板美国人，有时精明，
有时糊涂。她招了一个拉丁裔的学生和一个黑人博后。拉丁裔的学生来自一个很差的
college，研究生第二年了，让她定primer扩增一个700bp的片段，她还问是不是要定
700bp的primer。。。。一点基础都没有。但是能说会道，经常喜欢问问题，然后装作
恍然大悟状。老板也很喜欢。黑人是来自同一个城市的主要是本科教育的大学的博士，
没文章。老板招他们的理由就是：他们是少数民族，女性，美国公民。很可能能拿到
fellowship。。。想想美国人进top藤校真是再容易不过了。把课题交给他们，多半得
折腾好几年。
另一个是，老板一直担心其中一个课题会被scooped。我暑假会参加一些会议，会
present一些结果。到时候可以跟老板提及不早发表会被scooped这个可能。
劣势是，老板过去的文章几乎都有我的名字。她可能不想这样。而且... 阅读全帖 |
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x********e
发帖数: 35261 | 4 昨晚有人念念不忘PRRA，我就给H1和H3做了个全基因组序列比对，确认两者都有PRRA插
入。这个序列比对结果显示，H1和H3最明显的差异是Orf1ab大概490-700bp之间的两段
碱基插入/缺失。
根据其他冠状病毒研究看，这段插入/缺失会影响Nsp1蛋白。前期研究表明这个蛋白可
以调控宿主细胞的免疫反应，影响病毒的毒性。所以我把SARS-CoV-2-H1，SARS-CoV-2-
H3以及SARS-CoV的nsp1蛋白序列用ClustalW做了个比对。
从图上也可以看出，代表Bgroup的H3与SARS Nsp1更加接近。我推测在武汉流行的H1应
该是somehow缺失了两段碱基。
三个蛋白的3D蛋白结构预测用Phyre2模拟，同时参考了SARS nsp1的NMR实测蛋白结构。
H1缺失的两段序列用白色箭头标出来了。因为蛋白结构预测是局部比对，3D图呈现出来
变成了不连续肽段。我推测H1无法正常折叠成nsp1蛋白。 |
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C****1
发帖数: 63 | 5 随着11月23日下午开曼群岛大法院（以下简称“开曼法院”）驳回山水水泥（00691.HK
）现任董事会提交的清盘及委任临时清算人的请求，山水水泥控制权之争结果逐渐明晰
起来。
但摆脱清盘“厄运”的山水水泥本月爆发的债务违约事件，带来的影响却大大超乎市场
的想象：不到两周的时间，导致40多家企业总额近470亿元的发债融资计划搁浅。
“因为一家公司债务违约而引发如此大规模的信用债发行集中取消可谓前所未有。”锐
财经行业分析师王政11月24日对《华夏时报》记者表示，境内市场利率近期走势平稳，
国债、国开债等利率债发行顺利。
惊心动魄的角力战
债务危机显然是山水水泥现任董事会提出清盘的由头。
在王政看来，从11月5日山水水泥发布公告表示“公司于12日到期的20亿元超短融偿付
存在不确定性”开始，几方已经展开一场惊心动魄的角力。
11月11日，山水水泥公告称，因无力偿还12日到期的20亿元超短融券，公司12日到期的
超短融债券将违约，因此在10日向开曼法院提交了清盘呈请，并申请委任清盘人。
根据山水水泥的申请，其清盘聆讯将在当地时间11日10时（北京时间11日晚上11时）举
行，但已有防备的天瑞... 阅读全帖 |
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h*******0
发帖数: 14 | 6 正在克隆700bp片段到17kb质粒，试了好久，未果。试过将片段插入到pBlueskript(3kb
),效率很高，估计是载体问题。用一般的Qiagen柱子胶回收不了这个酶切过的质粒,只
好用spin-x,但效率很低，还需要PC8。我估计提高质粒的产量和质量会有助提高连接效
率。轻高手指教一下，谢谢。 |
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s******r
发帖数: 2876 | 7 你可以试试低熔点胶。
正在克隆700bp片段到17kb质粒，试了好久，未果。试过将片段插入到pBlueskript(3kb
),效率很高，估计是载体问题。用一般的Qiagen柱子胶回收不了这个酶切过的质粒,只
好用spin-x,但效率很低，还需要PC8。我估计提高质粒的产量和质量会有助提高连接效
率。轻高手指教一下，谢谢。 |
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M******t
发帖数: 555 | 8 比如要用一段700bp左右片断作探针，怎么判断是否含过多的repeats，会影响专化性。
谢了。 |
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Z******5
发帖数: 435 | 9 自己调几个参数试试吧。 我用国产的，26%功率，超声5秒，停25秒，进行25个cycles
，得到的片段大约700bp左右。 不同细胞系，细胞密度不一样，得到的结果也会有差别
，还是自己试试比较好。
做ChIP？ 最近在做，用upstate的EZ-ChIP，感觉好烂啊。protocol做的不够好，很多
细节要做过一次之后才能发现问题。 |
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b******s
发帖数: 1089 | 11 I tried to amply 2XGFP by one PCR and subclone it into some vectors. The
template contains two tandem GFPs but PCR can produce only one 700bp band.
The 1.4K band is very weak and smeared. Before redesigning long gateway
primers to include a little flanking regions, I want to see if anybody have
trick for such PCR? Thanks a lot! |
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l**********1
发帖数: 5204 | 12 454 GS FLX+
● Up to 1000bp
● 99.997% accuracy
● 1M reads, 700bp
0.7 Gbase/day
● Homopolymer issue
● Cost ~$14K for run
● $500K instrument
$20K/Gbase
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or soon later you can try:
Ion Torrent PGM
● Long Reads and Fast
● No optics, CMOS chip sensor
● Uses standard nucleotides
● Up to 300bp reads (going to 400bp)
● >99.5% raw
● >99.999% consensus
● 318 (11M wells) >1Gbase in 3 hours
● 8 Gbase/day possible
● Micron sized well, 22mmx22mm chip
moving to 1 Billion wells per chip
● $700 per run (1 Gbas... 阅读全帖 |
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n******d
发帖数: 680 | 13 没有觉得阿，上周刚在楼下的facility测了两个PCR片段，一个700bp一个450bp，单引
物测序，结果都非常不错的阿。
我只用了Qiagen的kit做了一次胶回收纯化，然后用30 ul的dH2O洗脱，最后用乙醇浓缩
了一下下。因为我这里的测序的要求是，PCR产物浓度应该达到10ng/ul。 |
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e***o
发帖数: 344 | 14 最近跑DNA胶很邪门，首先是基因组DNA的条带大小在不同的胶里跑得不一样。做3C-
library，所以在提取的过程中没有除去蛋白质，用裂解液裂解细胞后，离心收集细胞
核，再分别用SDS和Triton X-100裂解细胞核后跑的琼脂糖胶。
其中2，3泳道是刚提取完时跑的电泳条带，1，4孔道是将同样的样品放置6个小时左右
后跑的电泳条带，结果条带大小就发生了改变，有15000bp左右减小到了几百bp，而且
每次跑胶，电泳条带的大小都不固定，大多都只有几百bp，和基因组大小不符！
然后是回收cDNA500-700bp的带加adapter,扩PCR也出现这种飘移现象。到别的lab也试
了，还是这样。跑别的特异PCR扩增和酶切质粒都是好好地。真是邪门了。
请大家分析下是什么原因造成的。谢谢！ |
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B***v
发帖数: 113 | 15 电话里告诉我的：
minicircle without insert 1.2k bp
CMV 350 bp (这个很小，一般600-700bp)
SV40polyA 131 bp（这个也很小）
总觉得这个1.2还包括其他东西。 |
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