L*****o
发帖数: 48 | 1 从转基因小鼠里提取了一些primary cell，准备做一些细胞实验。想请问一下，可以直
接加soluble Cre敲除带有lox-P的细胞吗？还是应该用adeno-cre transfect?多谢！ |
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a******p
发帖数: 414 | 2 我想做个AAV vector，从tailvein打老鼠， 在liver里高表达我的基因。， 那个牛人
自己做AAV， 想要请教一下，多谢了 |
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p******d
发帖数: 3737 | 3 实验要用到adenovirus做瞬时表达，用的细胞是p53 deficient的。一般用的
adenovirus应该是敲除了E1A 和E1B，这样应该在p53 deficient的细胞中不会复制吧？
要是用的细胞同时是p53和Rb deficient呢？是不是这样的细胞就不太可以用adeno做瞬
时表达了，否则都被裂解了？ |
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l*******d
发帖数: 278 | 4 我正在准备绿卡申请，需审稿机会！ 希望能得到你们的推荐。 我已发表paper 12篇，
为2个SCI杂志审过稿。我的研究方向关键词cardiovascular disease, myocardial
infarction, pulmonary hypertension, adeno-associated virus, pharmacology,
oxidative stress, apoptosis.
谢谢!! |
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w********r
发帖数: 1431 | 6 是mature muscle么？
直接electroporation质粒或者siRNA都可以，效果都不错。
试过virus （retro-, adeno-），效果不如electroporation。 |
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w********r
发帖数: 1431 | 7 嗯，听说AAV效果不错，但没用过。
手头正好有retro和adeno就试了一下，效果不好，
然后又顺便试了一下电转，本来打算如果电转效果不好的话就搞AAV，
发现效果不错就懒得搞了。
年纪大了，懒得去折腾构建质粒包装病毒这些事了 |
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r***e
发帖数: 2539 | 8 有的病毒载体不整合（比如adeno），但是能整合的（比如lenti），只要进去了就是～
100%整合，因为它们有帮助整合的元件。
你说的瞬转和筛选没问题。 |
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h********n
发帖数: 4079 | 9 再说说我的看法吧.
LoxP-stop-LoxP-geneX system will leak more or less. You did not find
protein expression only means the leakage is too low for your detection.
When a LSL-geneX mouse grows to adult and Cre recombinase is introduced by
adeno or lenti, the "newly" expressed geneX will not be recognized as a
foreign protein by mouse immune system.
and |
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S*********s
发帖数: 304 | 10 用过lenti/retro
感觉表达差不多，基本要2-3天。
lenti titer比较高 > retro.
两者包装的片段大小都有限，<80KD, 再大一点的蛋白对病毒滴度影响很大，一般需要
浓缩。
retro 较 lenti安全一些。包装retro的时候可以选择pCL-Eco, pCL-Ampho,etc等
不同的外壳蛋白。pCL-Eco只能介导感染mouse cell,在做oncongene的时候尤为重要。
你不希望用个EGFR mutant or K-Ras mutant的lentivirus 去感染你的小鼠or细胞，一
旦泄露，有oncogenesis的风险。
另外retro只感染分裂的细胞，生长很慢的细胞用retro感染效率很低。
另外从整合到基因组上的位点来看，lenti有 hotspot，retro更倾向于插入
transcription active的region。所以很多random mutagenesis是retro based的。
Adeno没用过，据说插入基因的size可以更大，但做载体比较麻烦,没经验。 |
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c******r
发帖数: 3778 | 11 兄弟总结得真好，非常感谢！
还真没注意这个表达快慢的问题。Adeno的好处是titer可以非常高，比retro要高不少
。而且也比较安全，即使感染人也没什么大问题。 |
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l**********1
发帖数: 5204 | 12 Why not try combination of transposon and adenoviral and lentiviral vector
just 1-2 days,
Zhang W et al., (2013).
Hybrid adeno-associated viral vectors utilizing transposase-mediated somatic
integration for stable transgene expression
in human cells.
PLoS One. 8: e76771.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24116154 |
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w********r
发帖数: 1431 | 13 adeno很快，infect之后24小时之内就可以看见GFP表达了。 |
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K**R
发帖数: 193 | 14 我觉得adeno 快些吧，lenti 咋说还的整合到chromosome里。 另外应该是lenti，比
如retro安全吧，可能titration低一点？ lenti是retro 替换性产品，应为我当时当
销售买过的。 |
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D*******D
发帖数: 100 | 15 我的经验adeno是第二天就能看到不错的GFP了，lenti也不是很慢但是GFP上升趋势缓慢
。 |
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T****u
发帖数: 424 | 17 培美曲塞与紫杉醇对肺癌来说都不是一线药物。
取决于oncogene的状态，EGFR mutation
一线治疗还是TKI(Iressa,tarceva).国产的浙江贝达凯美纳。
复发后现在主要是化疗(cisplatin类，培美曲塞等)。复发突变主要是T790M.
最近AstraZeneca的AZD9291 Phase I结果出来，显示对T790M病人有效果（56%
response rate）。
国内明年应该会在广东启动临床实验。
国内几家的 T790M抑制剂也在加速开发。
目前的这些药物都是针对腺癌(Adeno)的，对鳞癌(SCC)的效果都不好。
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建议去好点的医院问。 |
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a****l
发帖数: 125 | 18 现在用 tail vein injection 在老鼠里表达adenovirus－Cre, 想用这个方法在 flox
animal 上做肝脏里的knockout. 打了两次knockout efficiency 只有 40%－50%。 觉
得远远不够。看不到phenotype. 有什么方法可以增加knockout 的efficiency 吗？
多谢 |
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T****u
发帖数: 424 | 19 Why not cross with Liver specific CreER and induce with tamoxifen |
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a****l
发帖数: 125 | 20 Crossing is better, but slow. Adenovirus-Cre will be faster. |
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d*******3
发帖数: 8598 | 22 今又生 adeno-p53, 科研的比较保守，风投要他使劲吹嘘
国内有些是做科研的使劲吹嘘， |
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C*******9
发帖数: 8 | 23 上次无意中在刷微薄的时候看到了一篇老外在Amazon上购买马应龙痔疮膏好评的贴子.
我就无聊搜索了一个 "Yunnanbaiyao"结果发现美国好多兽医都script白药帮助许多美
国人的狗狗治疗因为肿瘤引起的内脏出血.
不少好评,而且价格也不贵,虽然治疗不好肿瘤,但是可以延长宠物的寿命和life
quality.
以下是截的amazon好评
http://www.amazon.com/Yunnan-Baiyao-Capsule-Supplement-Capsules
By Eve K. Searle on February 27, 2009
Item Package Quantity: 1
I found Yunnan Baiyao to be excellent for the care of a dog with adeno
carcinoma. I used Yunnan on the advice of a veterinarian, to control nasal
bleeding, which it did very well, and I also think tha... 阅读全帖 |
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k**********n
发帖数: 438 | 24 ☆─────────────────────────────────────☆
dreamcatchin (dreaming) 于 (Sat Sep 6 14:53:33 2008)
提到:
PS里有特殊字符, ASCII不认, 当时没注意, 但是在PS里是?.看着扎眼, 觉得现眼.
由于PS已经被发给很多PROGRAM, 现在只能看, 不能改. 对于已经发出的申请, 怎么才
能把PS里的错改了呢?
我重新生成了一个改好的PS. 以后就用它了, 不知道可不可以用新的代替原来那个有错
的.
各位请帮忙 多谢!
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adeno (天夺其魄) 于 (Sat Sep 6 14:58:53 2008) 提
到:
call them. Maybe there is still something that could be done
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knockingdown (麦地撂E倒) 于 (Sat Sep 6 15:01 |
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z****a
发帖数: 150 | 25 ☆─────────────────────────────────────☆
ihope (ihope) 于 (Tue Jul 22 23:50:15 2008) 提到:
看step 2 的资料对 step 1 有没有帮助，请各位给点意见。
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adeno (天夺其魄) 于 (Wed Jul 23 00:10:04 2008) 提到:
don't bite more than you can chew :)
Focus, Focus, Focus
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dachangfox (大昌) 于 (Wed Jul 23 01:56:42 2008) 提到:
复习step1时,看点step2的资料也没什么不好的.当时我就是一块看得.
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dachangfox (大昌) 于 (Wed Jul 23 02:09:09 2008) 提到 |
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e***s
发帖数: 138 | 26 来自主题: MedicalCareer版 - cs体会 终于通过了，长出一口大气。首先，感谢在这里分享考试经验的同学们，比如说adeno,
picasab,knockingdown,failedcsonce,shyj,还有好多好多的同学，在这就不一一谢过
了。还有一起练习的同学们，都非常有才，学习了不少东西，就不点名了。
闲话说完了，唠叨几点体会，大多也是重复前人的东西，希望能给后来考试同学一个参考
。我的总结通常都很干，用处可能不大，但是如果能帮助一两个同学，我也就很高兴了。
第一，不要太轻视这个考试，不少同学一二三周准备cs就通过了,但是也有同学准备
几个月也没通过。我个人是刚考完了第二步笔试，当时已经完全是对学习疲惫厌倦，也对cs没有给与太多的重视。以至于考完后，非常担心自己的错误，懊悔没有全力准备。一定要勤于练习，练习练习再练习，要有一个固定的protocol,练习要完整包括体检和写病历，多练习FA,加上uw,nerraj notes也很重要。我尤其后悔没有多练习写病历，超多单词写不出。病历也是我所有项目中表现最差的。
第二，这次出结果是第一次连通过的同学也有一个performance profile,可以回顾总结
自己考试准备的长 |
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c*********r
发帖数: 541 | 27 我今天无意间又翻到了我去年申请期间的email，感慨万千。
当时申请的时候重点骚扰了 Dejadream, shoemaker, gira, madmice, 等前辈和adeno,
KD，ben 等同志。其中还剽窃了aloha的很多知识产权。还有很多没有未名id的朋友。
看了看当时给很多前辈和同修们诉苦的信，让我想起当时等待面试，等待match结果的
那种煎熬。可是现在却好像都忘记了。其实再痛苦咬咬牙就挺过来了，因为进了
intership才发现，痛苦才刚刚开始。
最后送给大家鞋匠给我的email里面的一句话，“对自己要有信心”。等待的过程是痛
苦的，请大家尽量能enjoy,苦中作乐。祝每一位今年申请的同学们都能够心想事成。
另外，转一篇老刀的文章，精华中的精华。
http://www.mitbbs.com/pc/pccon.php?id=2289&nid=47175 |
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s**j
发帖数: 196 | 28 谢谢鼓励，也祝LZ住院医顺利。
我有一个很阿Q的方法对于减轻自己的忧虑有点效果，各位别见笑。我碰到事情很烦躁
的时候就想，如果我不是在局中，而是在外面看这些事情，看自己的种种表现，是不是
会觉得自己的言谈举止很可笑，忧虑完全没有必要，也没有任何帮助。这样一想，常常
就可以看开些，不会那么焦躁了。其实很多事情，如果把自己稍稍置于局外，就会发现
这个事情其实很有意思，也对于个人的性格培养很有帮助，只要自己不是完全拘泥于结
果的话。如果我们能够从痛苦和挣扎中学到东西，完善我们自己的性格态度的话，就会
发现其实现在我们所经历的这个journey，就像我们以前挣扎过来的其余journey一样，
都是很有意思，很有帮助的，其实也蛮好玩的。
不要误会我是劝大家不努力而等天降好运，我的建议是，我们万事都尽力，但不要太患
得患失，尽量以平常心看待走过的路。其实看人生，如果仅仅看开始和结果，那所有的
一切都是没有意义的，还不是尘归尘，土归土，但我们在这旅程中所经历的悲欢离合，
所付出的努力，所得到的人生感悟，对于我而言，才是人生的意义。一家之言，仅供一
笑。
adeno, |
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s*********7
发帖数: 34 | 29 当时真的很痛苦！尤其是知道了面试同样一家医院别人拿了pre-match而我没有，本来
就不是很自信就变得几乎像个偏执狂，每天都在想是不是自己这里说错了，哪里没有注
意？以至于拿到了自己喜欢的Prematch也不是很高兴了。
adeno, |
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s**********9
发帖数: 54 | 30 Adeno 的帖子写得挺好的了, 我也写不出啥新的东西. 而且我自己也没有临床经验，完
全纸上谈兵. 不过最近可能很多人要考Step 3, 还是说说我的一点点感受吧.
大部分cases 会提前结束，比如 "请外科会诊"，"给了某种特效药"，或者"某项操作"
之后，5-minute screen 就跳出来了. 所以，检查和治疗的先后顺序很重要. 我有一个
case, 术前准备还没完全做好，随手输入的 "外科会诊" 回来了，病人被送去手术，这
个case 立刻结束. 想补救，也只能在 5-minute screen 出来之后了.
正式的软件，和UW 的软件还是有很多不一样的地方. UW 软件里 "请会诊" 没有用的.
正式软件，"会诊" 往往很有用，也很强大. 还有一种正相反情况，想让病人去 "手术"，
外科会诊死活不同意. 这时候应该想一下，到底是没有必要手术呢，还是漏了哪个很
重要的术前检查. 软件设计得比较有意思. 有时候要等 "影响学检查" 结果回来之后，
再请外科会诊，才同意手术，请早了是没有用的.
5-minute screen 跳出来之后该干啥？至少有两件事必须做. 一是要修 |
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e***s
发帖数: 138 | 31 嗯,第一千次地崇拜一下。。。
医学版牛人层出不穷，（大多都是你们师姐师兄），今年当属teabao,牛人的效应威力
是无穷的。当年我就是受到了jimmy,gira555,picasab,adeno牛人们的鼓舞而坚定走上
这条路的。想来今年的teabao又会激励很多人成功地走上usmle之路。 |
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L*****r
发帖数: 722 | 32 来自主题: MedicalCareer版 - 智力小问答
我怀疑出题的人甲状腺有毛病。
那个小茶博士，大概把adrenal gland 错听成 adeno gland了。淋巴结肿大不是叫
adenopathy? 他可能有耳后淋巴结肿大。 |
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m********e
发帖数: 212 | 33 参考精华区的考经吧，adeno说的极是：“要一丝不苟地听精华区的各位大大的话，不
要别出新裁”。自己根据时间和效率再做一些取舍。 |
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l*******8
发帖数: 1745 | 34 呼唤Adeno:-)当然比较难申请，据说是fellowship包括进去了。有的要做7年好像。 |
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z****o
发帖数: 368 | 35 Goblet cell, so intestinal adeno tissue |
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a*****o
发帖数: 174 | 37 看了adeno前辈关于step3 还是 MGH/Wash manual的取舍，突然变得很纠结：
考了step3 估计剩下的时间就不够了；不考，又已经开始复习了，而且之后这么忙的说
。。。
咋办？ |
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R**********n
发帖数: 473 | 38 赞adeno, icetea!写的太好了，这个气场，要好好琢磨琢磨。。。
所以所有跟帖都要看是硬道理啊。赫赫 |
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c*******s
发帖数: 399 | 39 谢谢Adeno, 谢谢你的ccs protocol 和scutsheet。 |
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l********z
发帖数: 810 | 40 也纠结中。而且adeno讲的几点好难做到啊，别拍我啊。 |
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s********o
发帖数: 3319 | 42 麦地的各路大侠：
武学末进skyscorpio这厢有理啦！
在原先自由化思潮泛滥无政府主义盛行的麦地做版主，真的是相当的不容易。托麦地先
辈们的洪福，版上的次序已经逐渐恢复正常。可惜我也被搞得人困马乏的，想靠自己去
搞气氛也已经是有心无力了。现在特地邀请你们麦地的毕业生们回来搞搞气氛，大家一
起努力，重振麦地。你们如果现在再不回来，以后再回来时说不定谁都不认识了，考版
生都管你们叫小朋友了。
我翻了翻精华区，找到一些我很喜欢的ID名字，我对你们真的是崇拜得一塌糊涂，不由
得产生出一种似曾相识的感觉，觉得你们也许说不定也会这么想，呵呵。列在这里吧(
漏了哪个大侠别公开砸我，PM就行）:
acne,adeno,alohaahola,againstwind,benpu,chipmunk,clamchowder,dreamcathcing,
Drhedgehog,EcoRne,feelfeel,gira555,harrywfu,JDJ,jimmyzhang,knockingdown,lilx
,lzumc2008,oldray,polarbear08,soaplover,spreadking,... 阅读全帖 |
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l*******8
发帖数: 1745 | 43 除了lilx,在加州的病理的宝妈，其它的好像大家联系还是挺平凡的。
Adeno好像有好久不见了，去哪里冬眠啦：）。 |
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n***a
发帖数: 1373 | 44 FCVS一旦批准，办各洲license时超级好用。建议大家办一办。象adeno所说要早办。有
的agent聪明，通过ECFMG，不用又去找回医学院。 |
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发帖数: 1 | 45 adeno (天夺其魄) 于 (Wed May 6 16:22:43 2009) 提到:
成绩出来了，涉险挤入了９９队伍。总的来说，准备的不是很充份，详见以前贴的＂我
的step ３经历＂，主要是在吃CK的老本；其他乏善可陈，成绩单里唯一的一个星号是
给了CCS，这里就说一说CCS好了。
以前总把CCS和CS混淆，其实这两个有一个共同点就是open choices和uncertainty。在
这总场合，最重要的可能就是要有一个严格的protocol，这样可以尽量避免遗漏。考过
CS的同学都知道LIQOR AAA和PAMHUGSFOSS的重要性。CCS也一样。网上比较流行的是
Neeraj的protocol，用google一搜就能找到。非常有用。我把他的protocol稍微整理了
一下，自以为是更加简洁有条理一些。给几个朋友用了用，有的朋友觉的没有时间应用
，有的朋友用了觉的还成，让我贴出来，最后的决定是如果考出来还行就贴，要不就不
出来吓人了。
象CS一样这个protocol充满了mnemonics，开始考试之前第一件事就是把所有的
mnemonics写下来。下面９个case都可... 阅读全帖 |
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P*****s
发帖数: 375 | 46 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
【 原文由 adeno 所发表 】
从“绝不退却”到“百家争鸣”
——遗传学痛史
·方舟子·
一
那是自中世纪以来对科学家的最大一次迫害。地点在苏联，起因
则是进化论
的两位创建人对进化机制的不同看法：拉马克相信在生物内在欲望的
驱使下的用
进废退是生物适应环境的原因，而达尔文则认为适者生存的自然选择
才是进化的
主要动力。我们或许会觉得，拉马克主义更象是唯心主义，而唯物主
义的达尔文
主义应该更受马克思主义的青睐才对。但苏联的官方哲学，与其说是
马克思主义
的，不如说是唯意志主义的，它更相信所谓“人的主观能动性”。早
在１９０６
年，一位叫斯大林的年轻布尔什维克就已论述说，新拉马克主义正在
战胜新达尔
文主义，而这再一次证明了恩格斯的从量变到质变的唯物辩证法之正
确。但是与
斯大林的预言相反，从二十年代起，遗传学的发展越来越显示了新拉
马克主义的
错误，新达尔文主义的正确，这个遗传学和进化论的综合过程，到五
十年代最终
完成。
苏联政权对遗传学的蓬勃发展抱着深深的敌意，遗传学成了资产
阶级科学的
典型。这除了意识形态的原因，还有实用的因 |
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w******y
发帖数: 4871 | 47 NOVEL THERAPIES
Gene therapy — The identification of the gene responsible for the
dystrophinopathies led to initial excitement that transfer of a functioning
dystrophin protein (whether by transplanted myoblast or direct genetic
manipulation) may provide substantial benefit to or even "cure" affected
patients. Although myoblast transfer has been attempted in humans, the
results have thus far not been encouraging [47]. However, in one patient who
received a bone marrow transplant for severe combi... 阅读全帖 |
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a***o
发帖数: 129 | 48 citi来时应有恨(1)
刘郎去后再无诗(2)
无由识得春风面(3)
多情公子费愁思(4)
(1)citi工愁，文字往往感人肺腑，尽管有时候觉得有点颓废。这些
文字的后面，不知道有着一个怎样敏感的心灵，经历过怎样的千山
万水。//cft citi先。 记得有一次看到citi的一手咏樱花的诗，读
到“愁煞竞夜看花人” 一句， 不禁为之绝倒。这一句本来想用citi
的名字的，非常工整。权衡再三，还是马赛克处理了。
(2)这一句是作者自况，其中典故citi或者知道一二，却不足多道了
(3)citi有个个人主页，收集了她的好多诗，偶经常去看。其中有个
album链接，点进去发现"I am working on that",
一而再，再而三，终于发现citi是不打算公布她的album了：(
谁想机缘巧合，天可怜见adeno, 偶终于从一个地方看见了citi的一
张照片(至于是从什么地方看见的，呵呵，偶不能说)，惊艳之余，想
必是会有些骄傲了，于是到圣殿来吹嘘一番。没想到，帖子刚刚露头
，
就被citi删掉，并发妹晓之以理。呵呵，不爽之至
(4)这句是泛指citi的众多网下崇拜者，据不完全统计，目 |
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a***o
发帖数: 129 | 49 我把车停在学校的大门口。Anny安安静静地坐在台阶上。我当时
并不知道她叫做Anny，如果我知道的话，我会上去对她说，嗨，
Anny,你好，我就是adeno，你的司机。但是当时我并不知道，这
件事要再过十分钟才会发生。后来我对Anny说，当时我已经猜到
你就是Anny，不过我不想太rude, 这时miyi不怀好意地跳出来，
说没想到你这么shy啊。我说我不是shy, 我只不过试着想作一个
gentleman而已。Anny安慰我说，你已经学得很象了。而实际情况
是，我当时坐在汽车里，在茶色玻璃的掩护下，悄悄地注视着她。
在这个城市里，象Anny一样的女孩还是一种珍稀动物。我悄悄地
注视着她，象注视一条安静的河流。 |
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