g*********r
发帖数: 9366 | 1 ahvy 教授， 有人给你留言啦
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1 bibbylin 在 2011-10-22 23:52:29 留言
可以找我啊，虽然我不是学生物，但是我认真，而且很卖力，不想在外国长期发展，就
想发几篇好文章回国当教授。我学物理出身，4年来做化学，早上10点起床，晚上3点回
去睡觉，有点生物生物基础，因为我做生物探针的。s**********[email protected] |
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c*******o
发帖数: 27734 | 2 发信人: deliver (自动发信系统), 信区:
标 题: crashinfo 封 ahvy 在 Returnee 版
发信站: BBS 未名空间站自动发信系统 (Thu Jan 14 08:00:01 2010)
【此篇文章是由自动发信系统所张贴】
由于 ahvy 在 Returnee 版的 言语粗俗 行为，
被暂时取消在本版的发文权力 3 天。
版主:crashinfo
Thu Jan 14 07:59:55 2010 |
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S*******C
发帖数: 7325 | 3 ☆─────────────────────────────────────☆
Teller (yy) 于 (Sun Mar 21 03:40:12 2010, 美东) 提到:
前边讨论日本二战功亏一篑的时候，我又考虑了一下。
日本如果要成功，需要有适当的起止，没有适当的起，则所有的战略都是镜花水月
，没有适当的止，则都是沙上建塔，难以稳固。
而二战之前，或者说918的时候，从世界局势上来讲，是日本真正侵略东北的好时机
，注意我说的是东北而不是中国。交通技术的发展让日本有登陆大陆的技术上的可
能性，而现代化的国家概念还没有正式形成，也给日本登陆形成了政治可能性。
总之，日本侵入东北的事实证明在起点上是成功了。
如何维系这个成功就在于一个合适的止步点。
前边讨论的也指出了，日本政界内部有人看到了这个止步点，就是占领东北，裹足
不前，自我消化。
问题是，这之前，没有人认为占领东北会如此容易，也就没怎么去多想占领东北后
的止步问题。
打个比方说，这就像是铺建了一条高速的铁路，然后大家建了一个始发站，在中途
车站和终点站还没有确定在哪里开建的时候，发了一辆列车出去，此时如何停下来
就... 阅读全帖 |
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G*********e
发帖数: 2091 | 4 相当多的索男索女儒家思想影响太重，虽然经过五四和文革，还是思想极端保守。自己
是被种族主义白人歧视的有色人种，还歧视黑莫同，不愿意对其他有色人种出让一寸利
益，又不敢向白人争取利益。
儒家思想远比共和党还保守，歧视妇女和社会下层人士，其程度远超美国右翼共和党。
不过ABC的思想不是索男索女能控制的。大势所趋，索男索女的种族主义思想在美国也
就是螳臂当车，一代而亡。
[在 ahvy (生命不息) 的大作中提到：]
：不论你认同不认同同性婚姻的法律
：亚裔要在美国地位上升，还是只能和美国的左派联合。
：........... |
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a***u
发帖数: 22 | 5 清华的经管和光华+CCER没什么可比的。
物理生物在一个水准线上？？
文史类拖后腿？？？
地质天文拖后腿？？？？
只能说这个ahvy 实在是对北大的情况一无所知， 可以不用在这里误导大众了吧。 |
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s***s
发帖数: 855 | 6 我们是注册在同一个州，然后把两个人都加在保险上。nn［在 ahvy (生命不息) 的大
作中提到：］n :自己弄自己的保险, 然后把对方加到计划里? 还是有办法能够有一起
的package, 省点n:钱?n:n:...........n n[发自未名空间iPhone版] |
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A******y
发帖数: 2041 | 7 ahvy is right, and leebrennan's explanation is correct on the PI mechanism.
I know most people don't read R01 instruction...ever. Other than K award
and some very hard to get private grants (Pew, Searle, etc.) your funding
opportunity is kind of limited. |
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c**********e
发帖数: 534 | 8 前辈，加拿大的几所top的商学院怎么样？
[在 ahvy (生命不息) 的大作中提到：]
：加拿大大学教授美国人很多
：我原来的系有40%美国教授，40%的加拿大人，20%的中国人
：........... |
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j******l
发帖数: 2790 | 9 励志故事读太少了，很多美国教授甚至大牛大学里刚开始的成绩可能都一般或者很差，
遇到了一位不吝指导“差学生”的牛人指点才有了学习的积极性，不过那位牛人对教学
上心也不是为了追求所谓的“成就感”罢了
[在 ahvy (生命不息) 的大作中提到：]
:不明白有什么必要用自己的想法去judge别人
:我相信很多人会觉得teaching， 特别是质量很差的学生，本来就没有什么成就感
:Service的话，校内的很多都是无聊的committee。
:越是好的学校 越没有人看得起这些闲事 |
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h***e
发帖数: 20195 | 10 【 以下文字转载自 TopArticle 讨论区 】
发信人: ahvy (生命不息), 信区: Biology
标 题: 请问你们对老板要求周末工作怎么看？
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Oct 22 14:46:21 2011, 美东)
AP，招了新薄厚，工作不主动。
周一到周五基本都是9点以后到，下午6点走，中间回家吃饭一个多小时。
周末偶尔来一下实验室，也许2个小时？
实验上没什么进展。昨天早上教了要做的实验，昨晚没盯着又作错了（已经教了很多次
了）。
和系里面其他老师说，他们都建议再看看，到3个月不行就fire掉
但是感觉这样子，他也没地方去。回国也没办法找工作吧。
我想直接跟他要求增加工作时间，看看能不能改善工作进度。希望他周末能工作一天，
或者2个下午。其实系里面50%以上的周六都在工作。不知道是不是太过分？
有没有薄厚或者学生能讲讲想法么？ |
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a**y
发帖数: 464 | 11 【 以下文字转载自 Investment 讨论区 】
发信人: ahvy (niuniu), 信区: Investment
标 题: 请问要是h1b身份做兼职的话
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Jul 21 19:44:05 2008)
怎么让公司pay钱？
按照道理肯定是不可以的。不过应该也有方法能够绕过美国的规定吧？
因为我是在non－profit，如果要求公司按照fellowship的形式资助，可能吗？该怎么
办呢？
或者公司有中国分部，从中国走帐可能吗？
谢谢 |
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m****s
发帖数: 18160 | 12 【 以下文字转载自 Postdoc 讨论区 】
发信人: ahvy (生命不息), 信区: Postdoc
标 题: Postdoc Position at UC Riverside
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Oct 22 20:18:54 2012, 美东)
http://research.chem.ucr.edu/groups/ai/index.html
We are looking for a coworker with solid background in chemical biology (
organic sythesis and molecular biology), or a coworker with previous
experiences in phage display, yeast surface display or mammalian cell
genetics (cell culture, cell sorting and genetic modification). Please
submit your application to ... 阅读全帖 |
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f******r
发帖数: 301 | 13 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: ahvy (生命不息), 信区: Biology
标 题: 请问你们对老板要求周末工作怎么看？
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Oct 22 14:46:21 2011, 美东)
AP，招了新薄厚，工作不主动。
周一到周五基本都是9点以后到，下午6点走，中间回家吃饭一个多小时。
周末偶尔来一下实验室，也许2个小时？
实验上没什么进展。昨天早上教了要做的实验，昨晚没盯着又作错了（已经教了很多次
了）。
和系里面其他老师说，他们都建议再看看，到3个月不行就fire掉
但是感觉这样子，他也没地方去。回国也没办法找工作吧。
我想直接跟他要求增加工作时间，看看能不能改善工作进度。希望他周末能工作一天，
或者2个下午。其实系里面50%以上的周六都在工作。不知道是不是太过分？
有没有薄厚或者学生能讲讲想法么？ |
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r**w
发帖数: 880 | 14 你是说noble families?
先别nobel了，还是用中文说清楚了再说
不过还真想知道这位教授哪学的nobel english
ahvy (niuniu) 的大作中提到: 】 |
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b*****9
发帖数: 8922 | 15 ☆─────────────────────────────────────☆
woshimajia77 (幸福的小猪) 于 (Wed Oct 5 00:08:21 2011, 美东) 提到:
我是80后，来美国两年多了。前一段时间回国呆了半年，坚定了海归的想法。
国内很多亲戚包括同学都说拼命想出去还没有机会，怎么我还想回去呢？跟他们没有办
法解释，因为不会理解的……
我只想说，美国很多地方都很好，对于女生来说环境，物价，社会稳定……甚至某种程
度上女生在美国要好混的多……
但是在美国每次经过咖啡馆或者酒吧看到那些在室外三五美国人坐在一起喝酒/喝咖啡
，开心的胡吹滥砍的时候，我心生羡慕：这才是在自己的国家的生活状态！
于是我回国期间有事没事就找同学，朋友出去喝酒，喝茶，喝咖啡，泡夜店，吃烧烤，
吃火锅……那一个时刻，我终于可以内心平静的说：我的地盘我做主！
如果要归的话，我准备归广州或者深圳……虽然空气比不上美国，人比美国多多了……
但是每次开车走在深圳滨海大道上的时候，你会特别真实的感慨：生活在中国有什么不
好呢？！
☆──────────────────────────... 阅读全帖 |
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a**y
发帖数: 464 | 16 【 以下文字转载自 Investment 讨论区 】
发信人: ahvy (niuniu), 信区: Investment
标 题: 请问要是h1b身份做兼职的话
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Jul 21 19:44:05 2008)
怎么让公司pay钱？
按照道理肯定是不可以的。不过应该也有方法能够绕过美国的规定吧？
因为我是在non－profit，如果要求公司按照fellowship的形式资助，可能吗？该怎么
办呢？
或者公司有中国分部，从中国走帐可能吗？
谢谢 |
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p******e
发帖数: 17163 | 17 表示嫉妒
[在 ahvy (生命不息) 的大作中提到：]
：她老婆漂亮 温婉 有博士学位的社会学者 富二代
：所以你不要嫉妒了
：........... |
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j****e
发帖数: 12067 | 18 ahvy水平真差
过薪水的涨幅，感觉像是国民党快到台时候的情形。人民的不满积攒了四十年，终于在
六四 |
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a**y
发帖数: 464 | 19 【 以下文字转载自 Money 讨论区 】
发信人: ahvy (niuniu), 信区: Money
标 题: 最佳答案有包子：cash加拿大寄来的check，哪家银行便宜？
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Aug 21 13:22:10 2010, 美东)
多谢
提供最佳答案的，给2个包子，多谢 |
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h***e
发帖数: 20195 | 20 【 以下文字转载自 TopArticle 讨论区 】
发信人: ahvy (生命不息), 信区: Biology
标 题: 请问你们对老板要求周末工作怎么看？
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Oct 22 14:46:21 2011, 美东)
AP，招了新薄厚，工作不主动。
周一到周五基本都是9点以后到，下午6点走，中间回家吃饭一个多小时。
周末偶尔来一下实验室，也许2个小时？
实验上没什么进展。昨天早上教了要做的实验，昨晚没盯着又作错了（已经教了很多次
了）。
和系里面其他老师说，他们都建议再看看，到3个月不行就fire掉
但是感觉这样子，他也没地方去。回国也没办法找工作吧。
我想直接跟他要求增加工作时间，看看能不能改善工作进度。希望他周末能工作一天，
或者2个下午。其实系里面50%以上的周六都在工作。不知道是不是太过分？
有没有薄厚或者学生能讲讲想法么？ |
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t******n
发帖数: 2939 | 21 ☆─────────────────────────────────────☆
luobo (菠萝) 于 (Tue Jun 4 11:34:28 2013, 美东) 提到:
虽然没有亲自参与过24年前的反独裁、反贪腐、反暴政的天安门民主运动，但在此纪念
日沉痛悼念所有在此运动中被残暴屠杀的青年学子以及之后的清算运动中被残酷清洗处
决的中华同胞！中共在六四中和之后丢失的人心象溃堤的大水一样，永远收不回去了。
在六四中为反抗独裁、贪腐和暴政而牺牲的所有中华儿女永垂不朽！！！
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gddg (gddg) 于 (Tue Jun 4 11:43:34 2013, 美东) 提到:
re
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rsshuang (江晚正愁) 于 (Tue Jun 4 13:11:33 2013, 美东) 提到:
纪念那一辈的热血青年。
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iMaJia... 阅读全帖 |
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t******n
发帖数: 2939 | 22 ☆─────────────────────────────────────☆
mynight (一束星光) 于 (Mon Jun 29 11:46:07 2015, 美东) 提到:
美国最高法院作出了同性婚姻合法的司法判决，同时也点燃了一场大讨论，同性婚姻到
底该不该上升到法律定义去确立它的合法地位？
那位反对的首席大法官，从婚姻的历史定义，阐述了为何同性婚姻“不合法”。 但是
可笑的是，如果婚姻在当今社会，真的要遵从它的历史定义的话，请大法官先生先恢复
“通奸罪”作为它必须的“有益补充”， 要知道，父母通奸对于儿童心理上的伤害远
远大于单亲，如果异性恋婚外情可以大行其道而不受惩罚，比如加州就奉行“无过错离
婚”， 就是由于出轨造成的婚姻破裂不可以申诉惩罚性财产分割， 那么婚姻其实早就
沦落成只是保护共同经济利益的工具而已，那么同性伴侣， 作为人类的一分子，他们
一样有权利要求法律赋予同样的经济利益保护， 现代社会法律的意义在于它应该平等
的惠及“所有适用公民”， 而不是选择性地基于宗教，信仰和个人道德偏好把某些人
的相关利益排除在外。
在我看来，同性婚姻合法，是人类文明的... 阅读全帖 |
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t******n
发帖数: 2939 | 23 ☆─────────────────────────────────────☆
mynight (一束星光) 于 (Mon Jun 29 11:46:07 2015, 美东) 提到:
美国最高法院作出了同性婚姻合法的司法判决，同时也点燃了一场大讨论，同性婚姻到
底该不该上升到法律定义去确立它的合法地位？
那位反对的首席大法官，从婚姻的历史定义，阐述了为何同性婚姻“不合法”。 但是
可笑的是，如果婚姻在当今社会，真的要遵从它的历史定义的话，请大法官先生先恢复
“通奸罪”作为它必须的“有益补充”， 要知道，父母通奸对于儿童心理上的伤害远
远大于单亲，如果异性恋婚外情可以大行其道而不受惩罚，比如加州就奉行“无过错离
婚”， 就是由于出轨造成的婚姻破裂不可以申诉惩罚性财产分割， 那么婚姻其实早就
沦落成只是保护共同经济利益的工具而已，那么同性伴侣， 作为人类的一分子，他们
一样有权利要求法律赋予同样的经济利益保护， 现代社会法律的意义在于它应该平等
的惠及“所有适用公民”， 而不是选择性地基于宗教，信仰和个人道德偏好把某些人
的相关利益排除在外。
在我看来，同性婚姻合法，是人类文明的... 阅读全帖 |
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p********a
发帖数: 535 | 24 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: ahvy (生命不息), 信区: Biology
标 题: 请问你们对老板要求周末工作怎么看？
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Oct 22 14:46:21 2011, 美东)
AP，招了新薄厚，工作不主动。
周一到周五基本都是9点以后到，下午6点走，中间回家吃饭一个多小时。
周末偶尔来一下实验室，也许2个小时？
实验上没什么进展。昨天早上教了要做的实验，昨晚没盯着又作错了（已经教了很多次
了）。
和系里面其他老师说，他们都建议再看看，到3个月不行就fire掉
但是感觉这样子，他也没地方去。回国也没办法找工作吧。
我想直接跟他要求增加工作时间，看看能不能改善工作进度。希望他周末能工作一天，
或者2个下午。其实系里面50%以上的周六都在工作。不知道是不是太过分？
有没有薄厚或者学生能讲讲想法么？ |
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p********a
发帖数: 535 | 25 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: ahvy (生命不息), 信区: Biology
标 题: 请问你们对老板要求周末工作怎么看？
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Oct 22 14:46:21 2011, 美东)
AP，招了新薄厚，工作不主动。
周一到周五基本都是9点以后到，下午6点走，中间回家吃饭一个多小时。
周末偶尔来一下实验室，也许2个小时？
实验上没什么进展。昨天早上教了要做的实验，昨晚没盯着又作错了（已经教了很多次
了）。
和系里面其他老师说，他们都建议再看看，到3个月不行就fire掉
但是感觉这样子，他也没地方去。回国也没办法找工作吧。
我想直接跟他要求增加工作时间，看看能不能改善工作进度。希望他周末能工作一天，
或者2个下午。其实系里面50%以上的周六都在工作。不知道是不是太过分？
有没有薄厚或者学生能讲讲想法么？ |
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z*****3
发帖数: 15515 | 26 【 以下文字转载自 Apple 讨论区 】
发信人: ahvy (生命不息), 信区: Apple
标 题: 终于明白苹果的伟大其实是因为客服
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Jul 20 19:21:43 2013, 美东)
2年前买了一个27寸的imac,没有买apple care
最近坏了, 拿去苹果修理 他们修理了20天没修好
我在这个过程中间感觉有点frustrated
今天打了客服去抱怨, 竟然同意给我一台新的2013
的imac, 修理费也不用付. 因为新的没有光驱了
竟然还付送一个USB光驱
有点惊喜, 就算有抱怨也烟消云散了... |
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a**y
发帖数: 464 | 27 【 以下文字转载自 Piebridge 讨论区 】
发信人: ahvy (生命不息), 信区: Piebridge
标 题: 一下子意识到, 其实我们每个人都是接盘男
发信站: BBS 未名空间站 (Mon May 6 22:23:06 2013, 美东)
只能想方设法翻过自己心理的那到槛?
去参加一个女性朋友的婚礼, 郎才女貌, 琴瑟和鸣的感觉. 朋友也算稍微有点姿色的.
新郎也是高富帅.
家里为了结婚, 在这座城市最贵最好的区域全款给他们买了新房. 一切看起来都很美.
周围的人也都
是高声祝福.
不过我认识这位朋友很多很多年了. 历史算是很悠久. 知道她的过往, 先不说我知道的
她过去的3任正式
男友. 大学本科的时候压力大, 我是知道她其实有在外面一夜情过. 刚到美国, 见到白
人, 她和好
几个白人同学有过关系. 回来了还很暧昧的跟我说, 洋人技术好. 要不是因为和她太熟
悉了, 肯定我也
会和她上过床 (我只和她谈起过做爱的事情). 去年她遇到了这个现任高富帅, 一下子
反而矜持了好久.
然后竟然决定谈婚论嫁了.
朋友当然我是从心底祝福她的婚姻. 但是我想她LG要是知道这... 阅读全帖 |
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N**********3
发帖数: 49 | 28 TO ahvy: 是啊,没你这么牛,都奔向MASTER或者PHD了吧 |
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c*******o
发帖数: 27734 | 29 ☆─────────────────────────────────────☆
applephiles (swear off...) 于 (Sat Jun 19 21:50:21 2010, 美东) 提到:
你是男的女的？
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ahvy (niuniu) 于 (Sat Jun 19 21:53:15 2010, 美东) 提到:
男的
☆─────────────────────────────────────☆
coask (同问) 于 (Sat Jun 19 21:53:34 2010, 美东) 提到:
上模板，
☆─────────────────────────────────────☆
applephiles (swear off...) 于 (Sat Jun 19 21:54:54 2010, 美东) 提到:
好吧，我应征
☆─────────────────────────────────────☆
repeating (random) 于 (Sat |
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h*********d
发帖数: 115 | 30 BLESS
你是和 ahvy 约定好了的吗？两个人一起发的征婚帖子？ |
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g*******0
发帖数: 2152 | 31 同意ahvy, 从别人的经历中总结对自己有用的东东最重要。绝对的公平是没有的，我知
道发在 CNS 的，有的实验上技术难度不大，但观点很取巧。你同事的文章，不是胜在
她 solid data, 那就是在idea了。Nature 毕竟还是王牌杂志，再有关系，也不是挂个
名就上的。 |
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b****n
发帖数: 311 | 32 我提议由ahvy牵头，众biowsguy联署驱逐饶施骗子先。然后由oncogene斑竹牵头联名能
敦促政府政治改革。 |
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z********g
发帖数: 48 | 35 咳！看来没人把STED原理讲清楚，我就简单说一下吧。
因为任何可见光发光点都有半波长衍射极限，所以光学分辨的理论极限是可见光下限
400nm的一半。
STED（stimulated emission depletion），中文可译为受激发射损耗。
STED的核心思想是，用一束光斑象面包圈(Donut)的、波长比激发光略长的激光将荧光
分子的受激荧光强制损耗掉。
也就是用Donut laser强行让激发态的电子回到基态(stimulated emission)，这个过程
也会发出荧光，但与正常跃迁的荧光波长不一样，可被过滤。
于是只剩下如一根针似的荧光，在XY平面上的分辨率就大大提高了，据称可以达到50nm
以下，但在Z方向的分辨率仍没有改善。
地狱先生（Stefan W. Hell）在读博的时候狂热于超分辨显微技术，1990年博士毕业之
后在家待业一年，发明了4Pi显微镜。然后大概在93年做第二个博后时，某天看光学物
理书，突发灵感，发明了STED，原理就是利用了光学中的受激发射跃迁(Stimulated
emission)。
娃娃鱼拼错了stimulated。simulate是模拟。... 阅读全帖 |
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z********g
发帖数: 48 | 36 咳！看来没人把STED原理讲清楚，我就简单说一下吧。
因为任何可见光发光点都有半波长衍射极限，所以光学分辨的理论极限是可见光下限
400nm的一半。
STED（stimulated emission depletion），中文可译为受激发射损耗。
STED的核心思想是，用一束光斑象面包圈(Donut)的、波长比激发光略长的激光将荧光
分子的受激荧光强制损耗掉。
也就是用Donut laser强行让激发态的电子回到基态(stimulated emission)，这个过程
也会发出荧光，但与正常跃迁的荧光波长不一样，可被过滤。
于是只剩下如一根针似的荧光，在XY平面上的分辨率就大大提高了，据称可以达到50nm
以下，但在Z方向的分辨率仍没有改善。
地狱先生（Stefan W. Hell）在读博的时候狂热于超分辨显微技术，1990年博士毕业之
后在家待业一年，发明了4Pi显微镜。然后大概在93年做第
二个博后时，某天看光学物理书，突发灵感，发明了STED，原理就是利用了光学中的受
激发射跃迁(Stimulated emission)。
荧光分子的标记问题一直存在，但如果不标记就无法看见，TR... 阅读全帖 |
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z********g
发帖数: 48 | 37 4Pi是用两个相对的物镜变相地把数值孔径变大了，其在Z轴上的分辨率在100nm左右。
而且两个直接相对、距离很近的物镜，把样品的厚度也限制了，大概在数十微米以下。
在此基础上加入STED，难度不是一般的大啊！
旋转样品的方法倒是不错，如果用油镜或水镜就麻烦了。
我知道 Yale 的年轻AP Dr. Joerg Bewersdorf，把STED与TIRF结合起来，这样可以把Z
轴的分辨率做到50nm以下。
这也是一种结合型的创新，但这种方法也受制于TIRF的局限，只能用于观察细胞表面的
活动，不能观察到细胞内部生物大分子的活动。
娃娃鱼同学给我们解释了很多光学物理的原理，让大伙受益非浅。
西瓜同学的解卷积想法很有启发。
学化学的同学，对于分子的概念很强。
学生物的同学，对于biological events很熟悉。
多来点学光学、学物理的同行，大家一起交流，共同进步。
第一页中，Sunnyday说的荧光强度呈现某种非线性分布（如高斯分布），可用数学或光
学方法进行过滤优化分辨率，但我怀疑这种处理可能不能使分辨率远小于200nm。专家
指点一下吧。
ahvy, don't take it ... 阅读全帖 |
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s******y
发帖数: 28562 | 38 我汗一下，看来是因为我引起的，所以我还是再澄清一下吧，
因为我本身其实不是做光学的，仅仅是用户而已，所以对那些原理的问题一向
都是一知半懂。我说的那个定点激发，其实是以前别人向我解释某某显微镜的
时候这么简单的告诉我的。
但是后来有人追着问我到底怎么个定点激发，我只好乱举了一种我知道的貌似
可以用的技术而已。正如后来的人指出的那样，我那个例子在机械上貌似
比较贴近STED或者near-field spec （需要准确定点然后进行扫描，所以
在这个角度上ahvy其实也不算说错了）, 但是在光学上又貌似不是（比方说
没有指出需要donut，所以在这个角度上你是对的)。但是我作为一个用户，
真的知道不了那么深（比方说那个donut），所以只是比较浅的谈了一个
理论上貌似可以的例子而已，我在原贴中一开头就指出了，必须由俺师姐
娃娃鱼说的为准。所以大家也别再为这个我信口扯出来的例子伤脑筋和伤和气了。
呵呵。
至于near-field spec， 据说也是可以突破200um 的（貌似在探头那里
动些手脚就可以了？）。原理貌似和扫描电镜差不多。不过没有什么人用，
因为要把探头弄得和样品特别近才行，估... 阅读全帖 |
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z********g
发帖数: 48 | 39 咳！看来没人把STED原理讲清楚，我就简单说一下吧。
因为任何可见光发光点都有半波长衍射极限，所以光学分辨的理论极限是可见光下限
400nm的一半。
STED（stimulated emission depletion），中文可译为受激发射损耗。
STED的核心思想是，用一束光斑象面包圈(Donut)的、波长比激发光略长的激光将荧光
分子的受激荧光强制损耗掉。
也就是用Donut laser强行让激发态的电子回到基态(stimulated emission)，这个过程
也会发出荧光，但与正常跃迁的荧光波长不一样，可被过滤。
于是只剩下如一根针似的荧光，在XY平面上的分辨率就大大提高了，据称可以达到50nm
以下，但在Z方向的分辨率仍没有改善。
地狱先生（Stefan W. Hell）在读博的时候狂热于超分辨显微技术，1990年博士毕业之
后在家待业一年，发明了4Pi显微镜。然后大概在93年做第二个博后时，某天看光学物
理书，突发灵感，发明了STED，原理就是利用了光学中的受激发射跃迁(Stimulated
emission)。
娃娃鱼拼错了stimulated。simulate是模拟。... 阅读全帖 |
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z********g
发帖数: 48 | 40 咳！看来没人把STED原理讲清楚，我就简单说一下吧。
因为任何可见光发光点都有半波长衍射极限，所以光学分辨的理论极限是可见光下限
400nm的一半。
STED（stimulated emission depletion），中文可译为受激发射损耗。
STED的核心思想是，用一束光斑象面包圈(Donut)的、波长比激发光略长的激光将荧光
分子的受激荧光强制损耗掉。
也就是用Donut laser强行让激发态的电子回到基态(stimulated emission)，这个过程
也会发出荧光，但与正常跃迁的荧光波长不一样，可被过滤。
于是只剩下如一根针似的荧光，在XY平面上的分辨率就大大提高了，据称可以达到50nm
以下，但在Z方向的分辨率仍没有改善。
地狱先生（Stefan W. Hell）在读博的时候狂热于超分辨显微技术，1990年博士毕业之
后在家待业一年，发明了4Pi显微镜。然后大概在93年做第
二个博后时，某天看光学物理书，突发灵感，发明了STED，原理就是利用了光学中的受
激发射跃迁(Stimulated emission)。
荧光分子的标记问题一直存在，但如果不标记就无法看见，TR... 阅读全帖 |
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z********g
发帖数: 48 | 41 4Pi是用两个相对的物镜变相地把数值孔径变大了，其在Z轴上的分辨率在100nm左右。
而且两个直接相对、距离很近的物镜，把样品的厚度也限制了，大概在数十微米以下。
在此基础上加入STED，难度不是一般的大啊！
旋转样品的方法倒是不错，如果用油镜或水镜就麻烦了。
我知道 Yale 的年轻AP Dr. Joerg Bewersdorf，把STED与TIRF结合起来，这样可以把Z
轴的分辨率做到50nm以下。
这也是一种结合型的创新，但这种方法也受制于TIRF的局限，只能用于观察细胞表面的
活动，不能观察到细胞内部生物大分子的活动。
娃娃鱼同学给我们解释了很多光学物理的原理，让大伙受益非浅。
西瓜同学的解卷积想法很有启发。
学化学的同学，对于分子的概念很强。
学生物的同学，对于biological events很熟悉。
多来点学光学、学物理的同行，大家一起交流，共同进步。
第一页中，Sunnyday说的荧光强度呈现某种非线性分布（如高斯分布），可用数学或光
学方法进行过滤优化分辨率，但我怀疑这种处理可能不能使分辨率远小于200nm。专家
指点一下吧。
ahvy, don't take it ... 阅读全帖 |
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s******y
发帖数: 28562 | 42 我汗一下，看来是因为我引起的，所以我还是再澄清一下吧，
因为我本身其实不是做光学的，仅仅是用户而已，所以对那些原理的问题一向
都是一知半懂。我说的那个定点激发，其实是以前别人向我解释某某显微镜的
时候这么简单的告诉我的。
但是后来有人追着问我到底怎么个定点激发，我只好乱举了一种我知道的貌似
可以用的技术而已。正如后来的人指出的那样，我那个例子在机械上貌似
比较贴近STED或者near-field spec （需要准确定点然后进行扫描，所以
在这个角度上ahvy其实也不算说错了）, 但是在光学上又貌似不是（比方说
没有指出需要donut，所以在这个角度上你是对的)。但是我作为一个用户，
真的知道不了那么深（比方说那个donut），所以只是比较浅的谈了一个
理论上貌似可以的例子而已，我在原贴中一开头就指出了，必须由俺师姐
娃娃鱼说的为准。所以大家也别再为这个我信口扯出来的例子伤脑筋和伤和气了。
呵呵。
至于near-field spec， 据说也是可以突破200um 的（貌似在探头那里
动些手脚就可以了？）。原理貌似和扫描电镜差不多。不过没有什么人用，
因为要把探头弄得和样品特别近才行，估... 阅读全帖 |
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c****c
发帖数: 36 | 43 这个ahvy还真有点得理不饶人哎
problem, |
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