V**F 发帖数: 164 | 1 不做这个很多年,有点糊涂了
想在已有的vector 加一个ampicillin resistance gene (AmpR),除了加 promoter (
-10 和-35), AmpR的coding sequence外,还要加terminator sequence 或者polyA
signal吗?AmpR 只需要在E.coli里面表达就行了,参照了很多vector,都没有指明有没
有terminator或者polyA signal. |
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H*******i 发帖数: 196 | 2 CB只是稳定/难降解一些,但对AmpR/Bla没区别,这个问题的关键AmpR/Bla是个分泌蛋
白,而且只有分泌了才产生抗性
我有时候做克隆有意避免使用Amp。。 |
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g*********5 发帖数: 2533 | 3 amp+ expire quickly...
make fresh plates with fresh ampr |
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a***o 发帖数: 129 | 5 why don't you use entry plasmids with kanR? Is it likely when you cut out
the ampR there is a hidden restriction site between attL1 and L2 and you don
't know about? |
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n****3 发帖数: 543 | 6 最后一贴,启动子的危害不象在动物内那么显著,但所有用的都是高表达启动子。你用
它来转基因,如产不饱和脂肪酸上去了,但该品系的其他营养成分就会下降,当然不是
所有的都下降
至于产生抗生素,Ampr和卡那是常用的还有很多。大家愿意吃就吃吧,我也偶尔吃吃,
反正不马上死人,老年人建议少吃,哈哈
绝不再发,如有逻辑和常识性错误,请告知我删贴,免得害人 |
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w***a 发帖数: 4361 | 7 你这常识错误也太多了,ampr,kana抗性基因表达的是酶好不好?
还抗生素呢,你是学生物的,还是来黑我们生物wsn的? |
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