E****A
发帖数: 184 | 1 看qiagen的说明书上，For removal of RNase contamination, we recommend
autoclaving the disposable probes(15 minutes, 120°C).
15 minutes, 120°这能完全灭火RNase么？
thanks a lot~ |
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V***b
发帖数: 3419 | 2 多谢各位回复。
抗体重要是肯定的。我觉得epitope unmask/retrieval也很重要，不够不行，过了估计
也不行。你们都是怎么做的？我是用买的retrieval buffer，autoclave，20 min。还
是用citrate buffer，100C，boiling？ |
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w***e
发帖数: 269 | 3 细菌污染是最好辨认的.显微镜下看细菌形状规则,颗粒状,细小,大小均一,就像一层沙
子,要是蛋白质杂质或者细胞碎片,都是大大小小形状无规则.有的细菌长的慢.我有次细
胞感染细菌,每次都是六七天后才很明显.所以你可以把细胞养久一些,确定没有问题之
后再做后面的实验.再贡献一点经验,如果细胞确定感染细菌了,别费心思慢慢排除是什
么原因,也不要省钱.所有的东西(medium, trypsin,serum etc)全部扔掉,都用新的.然
后cell culture hood里面东西全部扔掉,cell culture hood里面仔细用70%酒精擦干一
遍.incubator里面的夹层隔板能拿出来的都拿出来autoclave.再用70%酒精把incubator
里面擦一遍.如果是细菌感染的话,问题应该就被解决了. |
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o**i
发帖数: 1165 | 5 我以前有阵子买散装tip
不装盒 autoclave以后 直接用
拿手套抓 |
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l*********s
发帖数: 5409 | 6 according to google it is ok |
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f*****Y
发帖数: 20 | 9 谢谢两位的回复。autoclave的过程中难道不会改变agarose的浓度或者使agarose dry
up？ |
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c*****e
发帖数: 619 | 10 有文献说是shake,不知道怎么操作。还有说是autoclave,
想问问有人做过吗？ 哪个克操作性最强。
谢谢 |
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c*****e
发帖数: 619 | 11 我做GISH, 跟fish有点不一样。 发现还是autoclave最好 |
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c*********r
发帖数: 1312 | 12 tube如果是DNase free的，我们直接用了，至今没问题。tip有的灭，有的不灭，也是
DNase free的，refill的那种。 |
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s******r
发帖数: 2876 | 15 我看着不溶，autoclave了半小时，还是没动静，又转了一晚上，看来是溶不了了。
stir + heat over night |
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s******y
发帖数: 28562 | 16 HEPES 高温后分子会被水解破坏，对于有些特别严格要求分子式的场合
会有麻烦（比方说作为protein crosslinking buffer)
用来提蛋白的Buffer 嘛，只要pH不变，应该还是可以用的。
所以你最好测一下pH. 如果担心的话就倒了重新配
HEPES 的好处是pH对温度不敏感，Tris在室温和4度的pH 差的很多。
但是HEPES 容易被破坏。 |
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j****x
发帖数: 1704 | 17
HEPES高温水解之后pH会不变吗？即使不变，缓冲能力也丧失了吧？ |
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M****m
发帖数: 2142 | 18 多谢，那还是重新配吧，就是调pH很麻烦，等了好久才调好 :-S
后面还真要做crosslinkng。。。 |
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s******y
发帖数: 28562 | 19 不会全部都水解掉的，还是会有大部分留下来的。如果是不重要的场合就无所谓了。
重要的场合当然不行 |
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y***i
发帖数: 11639 | 20 铺板前冷却时要用stur bar搅动 （stur bar和LB一起 autoclave). |
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c*****o
发帖数: 18 | 21 it should be the sugar. The culture broth contains high ammount of glucose(
20g/L), so after autoclave the broth color is dark brown. active fraction
eluted from HPLC has even more dark color.
it also looks like difficult to diaysis.... |
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g*********5
发帖数: 2533 | 22 请问您用的是sigma的F4375 Ficoll® PM 400 - Type 400吗？
溶液浓度是20%吗？溶液配好后是autoclave还是filter？谢谢 |
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g*********5
发帖数: 2533 | 23 请问您用的是sigma的F4375 Ficoll® PM 400 - Type 400吗？
溶液浓度是20%吗？溶液配好后是autoclave还是filter？谢谢 |
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z****u
发帖数: 1007 | 24 microdissection是我们的daily work. 在dissection microsope下面解剖E10.5 mouse
embryo的first branchial arch..整个长度不超过2mm吧。然后把distal part ,
proximal part 分开，体外培养。
楼主需要的agar dish.2% agar加入碳粉让它变黑，然后autoclave之后铺petri dish.
black agar dish 背景解剖容易得多。
finescience的那些工具不错，我们一直都用它。
一定需要人带着做一遍。 |
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s**f
发帖数: 365 | 26 I know her! She is from TW.
Used our Autoclave machine ALL THE Time since they didn't have one. |
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f******g
发帖数: 1003 | 27 i met the same problem as you had. finally, it turned out that my competent
cells is contaminated.
Based on your statement, it looks like that your LB medium or plate or '
curvetee' which is used to do electro-transformation is contaminated.
I suggest you order new LB medium and new plate and autoclave your curvetee.
One more improtant thing is re-purify your plasmid which could be
contaminated as well by gel-purification. |
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T**********t
发帖数: 1604 | 28 以前实验室直接用millipore的超纯水，现在的实验室把超纯水再autoclave一下，没啥
问题，用来溶的DNA或者RNA样品放室温几个星期跑出来的胶还是干净的。 |
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c*****u
发帖数: 357 | 29 之前网上看过autoclave可以出去Rnase的 |
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T**********t
发帖数: 1604 | 30 我个人是认为autoclave超纯水属于多此一举。但是这个新实验室惯例如此。If it
works, don't try to fix it。 |
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w********h
发帖数: 12367 | 31 我在那买过一个autoclave，
CO2 incubator还是买个新的好，干净而且耐用。 |
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l**********1
发帖数: 5204 | 32 Please try go to
//www.emsdiasum.com/microscopy/products/cryofixation/cryogenic_labels.aspx
Cryogenic Labels, Tags, and Markers
Laser Cryo-Babies® and Cryo-Tag®
Labels for Cryogenic Storage
Temperature-Resistant – From -196°C to 150°C. Cryo-Babies and Cryo-Tags withstand freezer
temperatures down to -196°C (liquid and vapor phase nitrogen), boiling water baths (100°C), autoclaving
and moderate oven temperatures (150°C).
8. Laser Cryo-Tags Tough-Spot Set
77574-W White 68 4 17 1,360 60.0... 阅读全帖 |
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s******y
发帖数: 28562 | 33 谢谢你提供的信息！ 我也一直在找这个东西呢
withstand freezer
water baths (100°C), autoclaving |
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s******s
发帖数: 13035 | 34 谢谢啦
withstand freezer
water baths (100°C), autoclaving |
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z*****7
发帖数: 367 | 35 最近收到两次如下opening信件（不知道是不是骗子），大家着急找工作的有兴趣可以
联系一下。如果是骗子，请给我发个信，我就把他block了，如果不是，以后他发给我
的职位我都直接转到板上。谢谢。。
xxxx,
I hope all is well. My name is Jim Tierney and I'm a recruiter with
Kaztronix. We came across your resume in our database and feel that you
could be qualified for one of our positions with a Research Organization.
The job description is posted below for your review. If you are interested,
please respond with an updated copy of your resume in MS Word format.
Phone calls and faxes will not... 阅读全帖 |
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b**********8
发帖数: 349 | 36 谢谢回复，请问SDS溶液配置好以后能否autoclave？我怀疑黄色的东西是长菌了 |
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h**********r
发帖数: 671 | 38 辛辛苦苦地折腾了大半天，配trace soltuion,配stock,调pH。配完后放4c,一个月后发
现长毛了。请问如何应对？加点CH3CI?又怕太毒了。用之前要autoclave的。培养基是
养微生物的，也做转化实验。
多谢建议！ |
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h**********r
发帖数: 671 | 39 感谢sunnyday MM,培养基的stock solution发霉，不是最后的培养基发霉。这个stock
solution没有autoclave也没有filter除菌。
Thanks! |
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s******y
发帖数: 220 | 40 用dox的水喂养inducible transgenic mouse， 没有autoclave水，过了两个星期，发
现里面长了些东西，有影响吗？
需要处理水还是定期多换水？
谢谢！ |
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l**********1
发帖数: 5204 | 41 RE 孵蛋的学弟/妹 giantbird05 (大鸟)
of course you can do it, just Store it in freezer.
pls refer:
Gelatin/Fibronectin
• Place 0.1g gelatin into a 500 ml glass bottle. Add 500 mL of dH20
and autoclave. The
concentration of gelatin is 0.02%. Fibronectin comes as a 5 mL liquid.
Dilute 1 mL of
fibronectin in 80 mL of 0.02% gelatin in a T-75 flask. Invert to mix.
Immediately
aliquot into 8 tubes of 10 mL. Store in freezer.
Coating Flasks
• All flasks must be coated with gelatin/fibronectin the ... 阅读全帖 |
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s******y
发帖数: 28562 | 42 实验室的细胞培养系统被真菌感染了。先是hood, 然后是incubator。怎么清理都
清理不掉。Hood 最后是花了一笔钱请人来放了个熏烟弹，现在貌似好了些。
Incubator 我把所有能拆的东西都拆了拿去autoclave，还仔细的用bleach then
ethanol 把内壁搽了个遍，然后还是继续有感染！我都要烦死了。。。
一共两个多月，所有的细胞实验都被叫停了，耽误好多事情! 大家有什么建议？
那个incubator能不能也来个熏烟弹fumingation 处理？ |
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B******o
发帖数: 496 | 43 maybe you can try some antibiotics in the medium. For example, anti-anti
from life tech (15240-112). This is the most potent antibiotics I have used
so far and nothing grows in my culture even if I stick my finger in it. So,
maybe worth trying in your case?
As for the incubators, autoclave all the stuff and change new batches of
cells..... that's all you can do..sorry. |
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D********0
发帖数: 409 | 44 甲醛熏了24hrs，之后分别100%，75%擦，紫外灯照。
折腾一个星期就消停了
里面用的水都是autoclave的 |
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b******n
发帖数: 4225 | 45 防真菌其实注意一下就行了
培养箱中水一定要autoclave过的普通蒸馏水（ddH2O伤仪器）
定期灭菌一下（现在的培养箱一般都有sterilization功能）
（一个好玩的事，有个实验室还有做细菌培养的培养箱长了绿藻……）
戴手套取放细胞
另外一个比较重要的是你们的培养溶液是不是被污染了
DMEM/血清之类的放在冰箱里真菌长得慢，不容易看出来
放37度一培养就疯长
建议抗生素，DMEM和血清都扔掉换新的 |
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f*******e
发帖数: 354 | 46 如果是白色絮状的霉菌，加硫酸铜吧，非常有用，可能会影响你的探头的准确性，但是
不会有太大影响。一个月autoclave一下，继续加硫酸铜，两次之后基本就没了的，反
复擦洗和漂白基本是没有用的。酒精就基本没用。
如果是酵母，不知道，
最后甲醛熏蒸绝对是原子弹，但是这个弹影响太大，最好是在假期做，而且culture
room通风系统一定要好，否则长时间异味，伤身。需要检测安全后才能进入实验。
BTW,这种事情还要请公司做啊，国外条件就是好。我们都是过年放完就逃，一个寒假后
，味道还散不干净，太可怕了 |
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i*****g
发帖数: 11893 | 47 哎呀，楼主倒霉了
10来年前，我见过一个实验室折腾真菌，就焦头烂额
话说，平时要注意维护
水都要autoclave 两次再使用
定期要清理CO2 incubator
incubator 现在thermo好像有那种140C sterilization的那种品牌了 |
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l****j
发帖数: 70 | 50 有两笼基因敲除小鼠，Female，六个月，SPF饲养环境，food和bedding是gamma-
irradiation的，水是autoclave的，
最近刚发现小鼠有脱毛现象，一笼是躯干脱毛，另一笼是头顶脱毛，
应该怎么处理这些鼠？有可能是皮炎吗？ |
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