T*****n 发帖数: 519 | 1 二手交易风险自负!请自行验证是否合法和一手卡!:
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T*****n 发帖数: 519 | 2 二手交易风险自负!请自行验证是否合法和一手卡!:
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e***o 发帖数: 344 | 3 想在一个细胞里同时表达GFP, RFP,BFP,不知道用什么办法能让这几个蛋白成像时各
自分得比较开,没有overlapping,(就像做DNA FISH那样),
不用很大的放大倍数就可以把几个蛋白分开.
不知道用弱启动子,或是加特殊的信号肽,比如锚定到细胞膜上或囊泡上什么的。
谢谢各位! |
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d*****r 发帖数: 39446 | 4 【此篇文章是由自动发信系统所张贴】
bfp 已经退出本俱乐部, 特此通知. |
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z*****n 发帖数: 633 | 5 来自主题: ChineseMed版 - 乌鸡白凤丸 乌鸡白凤丸
本方起源于明朝《普济方》,《寿世保元》改进处方后称之为“乌鸡丸”,近代多以乌
鸡白凤丸命名。该品为黑褐色至黑色的水蜜丸、小蜜丸或大蜜丸;味甜、微苦。乌鸡
(去毛爪肠)640g 鹿角胶 128g 鳖甲(制) 64g 牡蛎(煅)48g桑螵蛸48g 人参128g
黄芪32g 当归144g白芍128g 香附(醋制)128g 天冬 64g 甘草32g地黄256g 熟地黄
256g 川芎64g 银柴胡 26g丹参128g 山药128g 芡实 (炒)64g 鹿角霜 48g
编辑本段制法
以上二十味,熟地黄、地黄、川芎、鹿角霜、银柴胡、芡实、山药、丹参八味粉碎
成粗粉,其余乌鸡等十二味,分别酌予碎断,置罐中,另加黄酒 1500g,加盖封闭,隔
水炖至酒尽,取出,与上述粗粉掺匀,低温干燥,再粉碎成细粉,过筛,混匀。每100g
粉末加炼蜜30~40g 与适量的水,泛丸,干燥,制成水蜜丸;或加炼蜜90~120g制成小
蜜丸或大蜜丸,即得。
编辑本段药理作用
其处方中君药纯乌鸡为原料以补血益阴治疗崩中止带及一切虚损,养血生津,宁神
益智。臣药熟地、当归、白芍养血活血,川芎、丹参活血行血,充分发挥活... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 6 借着韩春雨的光,生物版这么火。想再来跟大家探讨一下一个用流式细胞仪双荧光筛选
系统来鉴定并筛选出那种两个allele都被成功编辑的干细胞。
具体思路:
1。CRISPR-Cas9和gRNA在靶标上引入双链断裂。
2。donor模版,模版上带有两段1000bp的同源臂和突变碱基,同源臂之间带有荧光标签
(GFP,BFP,或者RFP等等),同源臂之外donor的backbone上面带有与同源臂之间不同
的荧光标签。
3。每次电转的时候转入细胞:Cas9质粒,gRNA质粒,带有GFP的donor,带有RFP的
donor(两个donor的backbone上面都带有BFP用以排除random integration)。
4。电转过后几天等细胞长到足够数量筛选细胞,GFP+/RFP+/BFP-的细胞应该就是那种
两个allele都被成功编辑的。
5。很多人担心这个荧光标签无法移出,实际上可以使用Loxp系统,筛选出来的细胞直
接过表达CRE可以把荧光标签切除,虽然会有34bp的loxp位点遗留下来,但是你可以把
这个遗留位点选在intron不影响mRNA。或者可以使用piggyBac系统做到无缝... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 7 GFP/RFP在两个同源臂的中间,自带promoter,不需要在exon上,为了移除荧光标签,
标签的两边连LOXP或者PiggyBac的TTAA-ITR。
左同源臂-ttaa-ITR-promoter-GFP-polyA-ITR-ttaa-右同源臂-promoter-BFP-polyA-
donor backbone
通过同源重组之后,左同源臂-ttaa-ITR-promoter-GFP-polyA-ITR-ttaa-右同源臂 会
进入基因组,如果donor存在randon integration,那么BFP也会表达,筛选BFP
negative/GFP positive/RFP positive的细胞即可。
然后过表达piggyBac transposase之后,筛选标签移除,变成左同源臂-ttaa-右同
源臂,
突变成功。
在设计左同源臂和右同源臂的时候,选择带有ttaa的位点分界,ttaa不要包括在同源臂
内。
说到这里,你是不是应该去补习一下基础理论知识。 |
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c*******u 发帖数: 12899 | 9 ☆─────────────────────────────────────☆
happypigs (cat) 于 h 提到:
看到版上那么多人讨论要不要生第二个或为什么要生第二个,我也来凑凑热闹吧。本人
有博士学位,曾在GOOGLE工作,为了生第二个娃,辞去工作,在家全职养娃。自从没了
工作后,再接再厉又生了几个。为什么要这么多娃呢? 即不是为了给娃找伴,更不图
娃给我养老。图的是养娃的过程带给自己的乐趣:怀孕时的HIGH和众星捧月,新生儿的
粉嫩,娃的天真,娃的傻,娃的调皮,娃的坏。。。养娃真是一种享受呀。新生儿有新
生儿的可爱,一岁又有一岁时的调皮,每天都在变,都在长。每天都很刺激。家里永远
都不会死气沉沉。一次我女儿过生日,我化很长时间点缀鸭子蛋糕,儿子就一直坐在我
身边,不停的问东问西,“妈妈你做的啥呀?”,“妈妈你这个蛋糕好不好吃?”。。
。小嘴喋喋不休,而且只许我回答,不让他的小姐姐带答。 我说:小胖你怎么这么多
话呀? 儿子的回答:“妈妈我就想和你说话呀。”不满三岁的儿子知道陪老妈唠嗑了
!不知道长大了还会陪么?扯远了。一个娃带给你欢乐,两个会带给你远远多于双... 阅读全帖 |
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c****1 发帖数: 5654 | 10 only talk about BMI or BFP doesn't make much sense, need to chat about
both.
asians, any range 10-20% BFP, BMI 19-28 works! |
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n*****n 发帖数: 1029 | 11 你的理念和我简直是惊人的相似。呵呵。不过我只是理论上有一套,实践上还刚刚起步。
本人男,170 cm,体重从大学时的120 lbs慢慢涨到现在的168 lbs,这五年来体力耐力
下降明显。觉得这样下去不是个事,7周前找了个personal trainer,打算开始serious
life style change。训练每周三次力量,一次HIIT,其他时候每天30分钟有氧。现在
觉得体能上升明显,但是体重和BFP没有任何变化。
饮食上,没有非常aggressive的change,因为不追求短期效果,而是life style
change。每天早上改为牛奶(俺5岁以后从来不喝奶的),全麦cereal,一个煮鸡蛋。
午餐减了大约20%,下午有一个小snack,比较健康的那种,晚餐减半。碳水每次不超过
一个tennis ball size。
俺感觉能做的正确的事都做了,希望今后的某一个时刻会出现体重和BFP的质变,呵呵。 |
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w***w 发帖数: 6301 | 12 Galfond challenges Congress to million dollar freezeout
Ok, it’s a publicity stunt that’s never going anywhere, but we’re suckers
for a good headline, and this stunt provides that. BlueFirePoker, the new
online training site headed up by high stakes pro Phil Galfond, issued an
open letter of sorts today to President Obama and Congress, challenging
Obama or any member of Congress to a poker game against any of BFP’s pros.
BFP would put up a million bucks, to be donated to the charity of their
opp |
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n**b 发帖数: 13203 | 13 看看愤怒的群众
By
Guohui Zhang (BALLWIN, MO, US) - See all my reviews
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desktop computer (Thinkstation E20) when I ordered a laptop computer? I have
purcahsed 8GB memory for this laptop. I need figure out how to handle this
memory.
By
TANER - See all my reviews
Amazon Verified Purchase(Wha... 阅读全帖 |
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w*******n 发帖数: 35 | 14 请教版上各位大牛牛小牛牛:
想用一个本身表达了多种萤光蛋白 (GFP, Cherry, BFP)的细胞系做cell cycle
staining+flow cytometry 实验。为了防止这些萤光蛋白(GFP, Cherry, BFP )的萤
光信号妨碍 cell cycle staining 的信号,想要彻底去掉这些萤光蛋白的萤光,应该
怎么处理细胞?
多谢!! |
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w***w 发帖数: 6301 | 15 Galfond challenges Congress to million dollar freezeout
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t**e 发帖数: 104 | 16 【 以下文字转载自 History 讨论区 】
【 原文由 bfp 所发表 】
http://www.sonicbbs.com/war/topicdisplay.asp?BoardID=1&Page=1&TopicID=29077
重建74军
1947年夏,国军在74师未参战的3个新兵教导团和1个榴弹炮营基础上,加上该师归队
的伤愈官兵,再补充新兵(最大一批补充兵员是广东航空警备旅),重建整编74师,师长
邱维达,下辖第51旅(旅长王梦庚)、第57旅(旅长程有秋)和第58旅(旅长罗幸理)。
邱维达黄埔4期,抗战中在74军担任过团长、旅长,后任第24集团军参谋长、第4方面军参
谋长,后来又回到74军任51师师长,孟良崮战役时任台枣警备司令,所以没有参加战斗,
因他是74军的“老人”,便由他来负责重建,此时的74师,80%是新兵,装备也是日式和
美式混杂。1947年11月,解放军释放了一批国军被俘的连、营、团级军官,其中一些老74
师的一些军官又被派到新74师,而且多数官升一级,这些军官将老74军的训练和传统沿袭
下来,加上还有一些老兵,可以说还有一些74师的骨干,所以新74师战斗 |
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s*****r 发帖数: 11545 | 17 房屋的财产利益可以分割,这20年使用权已经被分割出去,协议当然有效。问题是租户
很可能使用了债务获得房屋使用权,这导致他不是BFP,所以在官司中他可能落败。要
是在美国,原房主肯定输官司,租户也极可能输官司,租户只能通过与原房主打官司来
挽回损失。
美国的title公司主要是查liens,私人间的租赁协议不一定可以查到,这就是为什么要
买TITLEinsurance的原因。不过,要是在美国,那债主可以在该房子上
做个LIEN,也可以附加上租赁协议声明,然后他的SecuredINTERES
T就PERFECT了,这样也就给了CONSTRUCTIVE NOTICE,
既保护了自己的利益,也算给潜在的购房人一个方便。做个LIEN也就几十块钱。
liens |
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b********n 发帖数: 38600 | 18 http://www.counterpunch.org/2014/12/01/defending-dollar-imperia
“The Fed’s ‘need’ to take on an even more active role as foreigners
further slow the purchases of our paper is to put the pedal to the metal on
the currency debasement race now being run in the developed world — a race
which is speeding us all toward the end of the present currency regime.”
– Stephanie Pomboy, MacroMavens
“No matter what our Western counterparts tell us, we can see what’s going
on. NATO is blatantly building up its ... 阅读全帖 |
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n******l 发帖数: 4407 | 19 我想卖的物品:
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m**********n 发帖数: 299 | 23 the detailed specification for this W701, please. |
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n******l 发帖数: 4407 | 27 我想卖的物品:
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j******8 发帖数: 1006 | 28 sometimes your town will require approved plumber to install the bfp, i had
someone installe mine for $360 last year(long island NY).
Vender |
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l*******3 发帖数: 114 | 29 bfp看贴真仔细,是我从记录上抄出来时写错了。MM是对的。 |
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s*********r 发帖数: 409 | 30 mm你的温度趋势跟我很像,我也是测出来LH surge以后,温度是慢慢的升上去,而不是
一下就升上去了。这种温度趋势叫slow riser,你可以自己google一下,slow riser
BBT之类的,就我目前查出来的结果,这个很正常,不影响受孕的,而且我的高温区一
般也就是10到12天左右,这个应该也是正常的。
我也在准备中,一起努力,希望我们都能很快BFP.
天. |
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s*********r 发帖数: 409 | 31 mm你的温度趋势跟我很像,我也是测出来LH surge以后,温度是慢慢的升上去,而不是
一下就升上去了。这种温度趋势叫slow riser,你可以自己google一下,slow riser
BBT之类的,就我目前查出来的结果,这个很正常,不影响受孕的,而且我的高温区一
般也就是10到12天左右,这个应该也是正常的。
我也在准备中,一起努力,希望我们都能很快BFP.
天. |
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c*******u 发帖数: 12899 | 32 ☆─────────────────────────────────────☆
yiyibb (yiyi) 于 (Fri Apr 13 22:34:52 2012, 美东) 提到:
今天突然得知了一个噩耗,老公弟弟的儿子刚刚查出可能是髓母细胞脑瘤。我的小侄子
才3岁多,非常活泼可爱,一个月前突然开始天天呕吐,但无其他症状,去北京儿童医
院看了几次都认为是胃动力不足。后来孩子开始出现乏力症状,去儿研所照CT,发现是
脑瘤。送到天坛医院是颅压已经很高,当时就做了引流。已经约到下周四手术,虽然没
有百分百确诊,但专家认为90%是恶性髓母细胞瘤。宝宝版的祝福一直很灵,我来宝宝
版时间不长,只攒了118个包子,恳求大家帮我保佑我的侄子手术顺利,不是恶性肿瘤
,一定不是,一定不是。万分感谢。
————————
对不起,新手第一次发包子,发现自己有的是118块伪币,而不是118个包子。不过穷妈为了小侄子还是要厚着脸皮求大家多多保佑。谢谢。————
——————————
非常感谢宝宝版各位的祝福,上午把我所有的包子发了,可惜只有10个。 trinitas612 建议看的“兜宝的生命日记”也搜... 阅读全帖 |
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c*******u 发帖数: 12899 | 33 ☆─────────────────────────────────────☆
baozhuang12 (唔) 于 (Wed Mar 28 21:29:16 2012, 美东) 提到:
现在我们宝宝有27周了,我们怀这个宝宝真的很不容易。结果25周的时候做B超说宝宝
有先天性心脏病,是大动脉错位。我们当时听了就是天塌了一般。怎么会这样?我们也
没有做害人的事,为什么这么倒霉的事会碰到我们身上。今天去大医院又做了一次,结
果还是一样的。我们都不知道怎么办了。怎么还会有这种病。宝宝生下来必须要做开胸
手术,尽管医生说手术成功率在90%以上,但是这种手术80年代才开始做,目前还没有
更大岁数的病人。不知道大家有没有听说过这种病,希望大家给些这方面的信息。先谢
了。
今天还做了大B超,查的很详细,最好医生说小脑也有可能发育不良,但不是很确定,
只是有可能。怎么办呢?难道我们宝宝智力和身体都不好?现在也不可能中止妊娠了,
怎么办呢?我们接下来该怎么办,真的很无助。
☆─────────────────────────────────────☆
alvdena (晕乎乎) 于 (... 阅读全帖 |
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b*****9 发帖数: 8922 | 34 ☆─────────────────────────────────────☆
caroll (露犹泫) 于 (Mon Oct 17 01:45:29 2011, 美东) 提到:
遇到同一个签证官, 一个年轻的白人小伙。 其他资料都没看,只看了房产证就拒了。 感觉还是在工资
上纠结。 爸妈带的活期存折和25万的定期VO都不看。 不知道VO到底想怎样。 难道拒了一次就难咸鱼
翻身了吗?
同时想问一下:如果3000还遇到此人, 可以要求换VO吗? 觉得这个VO非常偏执。 我父母的确只是想
过来看看我们,同时旅游一下。 根本就不存在带小孩打黑工的问题。
☆─────────────────────────────────────☆
famulus (跟班) 于 (Mon Oct 17 03:24:32 2011, 美东) 提到:
bless!
☆─────────────────────────────────────☆
smalljeep (jeep) 于 (Mon Oct 17 10:22:51 2011, 美东) 提到:
Bless!!
妈妈17号早上在成... 阅读全帖 |
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b*****9 发帖数: 8922 | 35 ☆─────────────────────────────────────☆
cucuzhuang (cucuzhuang) 于 (Tue Nov 1 19:01:08 2011, 美东) 提到:
很遗憾,5000和4000还是失败了.恳求大家建议,是不是我父母进入黑名单了.
签证经过: 问题1:去美国干什么? 回答:去女儿家
问题2:女儿结婚了吗?答:结了
问题3:哪一年结的? 答:2003
问题4:有房产吗? 答:有,并且看了房产证.
然后看我的邀请信,据说看了2遍.我的邀请信不是用的模板,自己写的,我觉得写得很诚恳.看了我的绿卡复印和老公的美国护照复印.
然后不断在电脑上敲,据说弄了10多分钟,最后拒了.
家庭背景: 父母都是公务员退休,有房有存款.只有我一个女儿.我有绿卡,收入稳定.我老公是公民.
我自己觉得背景并没有硬伤。有硬伤的地方是据签次数太多。
我想让他们12月或者1月再去签,大家说可行吗?
-----------------------------------------------------------
昨天查了下,才知道父母这次是4000 和500... 阅读全帖 |
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c**t 发帖数: 9197 | 36 bond made run @ 7:30 today with BFP.
ES just just break out.
Seems there is still time difference. |
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m**k 发帖数: 31 | 37 回国了,很多东西要卖。
sofa,dining table and bed希望1月5号才取。
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m**k 发帖数: 31 | 38 4181 CAMINO LITA, SAN DIEGO 92122
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Two pairs of Japanese style wooden slippers for couple. Completely New In
Box, never worn.
lamp
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A pair of metal tissue and kitchen paper towel stand
Fruit basket
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China tea pot, new never used
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CONAIR CS54... 阅读全帖 |
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s*****i 发帖数: 5548 | 39 ☆─────────────────────────────────────☆
havedream (我与梦想) 于 (Fri May 11 22:39:58 2012, 美东) 提到:
最近有朋友要去那里。
☆─────────────────────────────────────☆
steventar (David) 于 (Fri May 11 23:54:10 2012, 美东) 提到:
油气服务公司里仅次于SLB的大公司,公司非常好,富的流油,我朋友在里面
☆─────────────────────────────────────☆
steventar (David) 于 (Fri May 11 23:54:44 2012, 美东) 提到:
油气服务公司里仅次于SLB的大公司,公司非常好,富的流油,我朋友在里面
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havedream (我与梦想) 于 (Fri May 11 23:56:28 2012, 美东) 提到:
请问里面工作压力大么?他们家给的工资水... 阅读全帖 |
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k****i 发帖数: 838 | 40 ☆─────────────────────────────────────☆
kingii (天 行者) 于 (Fri Mar 7 09:44:31 2014, 美东) 提到:
感谢前版主ROC999,不管版内版外,都做了很多又脏又累的工作,版内,制定详细的版规
,没有姑息恶性挑衅,版外,积极组织活动,游行和拥枪讲座。
感谢站方重视Texas版,破天荒一下搞出两了版主。
重申一下我的基本理念:公平公正是版主起码的要求,特别是网上,大家只有说话的权
利,不能偏袒一方而剥夺另一方的说话的权利。但如果捣乱版面,故意挖坑,对不起,
决不姑息!
最近版上比较乱,准备开始清水,请大家注意:
1. 如果你需要继续讨论竞选人的,请出门转右,到版主之家版,这里会清水。
2. 捣乱版面,故意挖坑的,一律封
3. 希望Texas版少点纷争,多点和谐
谢谢大家!
我和MLH都是穷人,我散尽家财,大家排吧!
☆─────────────────────────────────────☆
StephenKing (金博士) 于 (Fri Mar 7 09:46:26 2014, 美东) ... 阅读全帖 |
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k****i 发帖数: 838 | 41 ☆─────────────────────────────────────☆
Markbt (信春哥,身体棒,踢球泡妞中大奖) 于 (Tue Mar 4 23:41:17 2014, 美东) 提到:
德州版竞选投票已经结束。
无论下一任版主是谁,现任版务组都希望德州版能在这次的波折之后继续和谐繁荣的景
象。同时祝福德州版网友们平平安安,开开心心!
请在本帖下回复领包子,多一点正能量和积极的回复,切勿在本帖内进行无意义的争吵。
谢谢!
3000伪币,每人20,发完为止。
☆─────────────────────────────────────☆
yapple (稳似泰山共携手,陶然一笑友情深) 于 (Tue Mar 4 23:43:38 2014, 美东) 提到:
支持Roc999续任版主,严打一切脑残行为
☆─────────────────────────────────────☆
rose11 (rose) 于 (Tue Mar 4 23:46:22 2014, 美东) 提到:
这是进来领平安包子,不要夹带私货,引起二战。
☆───────... 阅读全帖 |
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G**********e 发帖数: 11693 | 42 用户名叫bfp的人,找他试试,他给我offer的我没要,因为我已经有了,给他大包子 |
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T******g 发帖数: 21328 | 43 12%左右吧,肥肉不多,但是肌肉也不多,所以BFP不会太低 |
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c****1 发帖数: 5654 | 46 about how many percentage, it depends on your initial weights
say: if your BMI is 40, sure, 80% is control your input calories first, but
when you reach to BMI 25, 24, it takes 70% exercise to lower down your
weights
while keeping the same BFP. |
|
c****1 发帖数: 5654 | 47 this is so simplified this problem, our bodies are a lot more complicated
than just some pools...
Losing weights is not just lowering down ur weights, u have to watch out
your
BFP too, which i consider is more important. |
|
c****1 发帖数: 5654 | 48
摄入
another extreme example is exercise too much, i played about 15-20 hours/
week
tennis back to 09, and went to BFP 9.7%, plus dark skin, looked 10 years
older,
finally i came back to 11%, gained 10 pounds, those 6 packs in 09 is just
fu yun for me, i like current myself more than the one 2 years back. |
|
c****1 发帖数: 5654 | 49 another my own point is when you are old, like over 35, a little bit
overweight is better than skinny, it makes you look younger, have more
energy, can tolerate cold weather more.
If you think u have fat gene, just lift weights, as long as your BFP is
in your ideal range, BMI is not as important.
? |
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