L***s 发帖数: 133 | 1 做了只转基因小鼠,lox-STOP-lox-gene-EGFP,EGFP是fuse在gene的C末端,target的
位置是ROSA26。
体外细胞试验很好, Cre转染后大量的GFP表达,功能也没问题,该基因不toxic。
好了,小鼠做好后,与Nestin-Cre line 杂交后,兴冲冲做了IHC (rabbit GFP Ab, invitrogen) ,结果很失望,发现GFP表达弱,且阳性细胞少;同样的Cre line 和ROSA26-YFP杂交后,同样的染色,YFP表达很强,阳性细胞很多。
帮忙分析一下原因
1. Fusion protein的问题?可能是fusion protein 表达量低?或是表达量可能并不那
么低,但在PFA fix时导致fusion protein被mask了,所以IHC看不到,证据是lox/lox
比lox/+的阳性细胞要多些。试了citrate buffer antigen retrieval (pH6, 95C,
15min), 结果更差,一点阳性细胞也没有了。其他可行的antigen retrieval 方
法?
2. 因为target的位置... 阅读全帖 |
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l**********1 发帖数: 5204 | 2 >Inorganic Additives
There are several different types of inorganic additives in blood collection
tubes. These include those that are completely inorganic in composition, (
eg, silica and sodium fluoride), and those that are alkaline metal salts
of organic acids, [(eg, disodium ethylenediaminetetraacetic acid (Na2EDTA),
K3 or K2EDTA, trisodium citrate, and potassium oxalate].
Most dry additives tend not to be a limiting factor in determining the shelf
life of the evacuated tube.
For hematology a... 阅读全帖 |
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F*****e 发帖数: 182 | 3 Our tamoxifen is T5648. I checked T9262 and found it is "Tamoxifen citrate
salt", maybe that's the problem... |
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g***y 发帖数: 201 | 4 CaM Kinase II alpha subunit (AB-1),mouse monoclonal, from calbiochem, cat#
NB12
works on 4%PFA fixed paraffin section, need citrate buffer antigen retrieval
though, dilution 1:200-1:500
also works on crysection.
爱卿免跪平身,千万别忘了给我几个包子! |
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l*******d 发帖数: 278 | 5 http://journals.prous.com/journals/servlet/xmlxsl/pk_journals.x
A new method for plasma citrate determination by revised-phase high-
performance liquid chromatography after ultrafiltration extraction: An
example for bioequivalence evaluation of a medicine endogenous substance (in
Method Find Experiment Clinical Pharmacology 2008, 30(7): 513
Thanks!
Email: y******[email protected] |
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a*****v 发帖数: 128 | 6 有核磁的文章是用1%DMSO做蛋白质滴定的么?
这个破药物,就是一个咪唑环还能带点点,其他的根本没法成盐啊...
他们做细胞实验的时候也是用DMSO溶解的。
但是核磁,真的是希望完全溶解的...
文章中说的口服药是in a vehicle contained 33.3% Simple Syrup and 66.6% 0.1 M
citrate buffer.也没说syrup的配方,柠檬水也没说啥... |
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l********s 发帖数: 70 | 7 先做成鼠,实验室买的是 tamoxifen-citrate 注射的。估计这个只能feed,不能注射
谢过这位大哥了! |
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l********s 发帖数: 70 | 8 非常有用!,谢谢,我看很多是酒精稀释的。 我们暂买的是 tamoxifen-citrate
非常感谢您!
7 |
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g***y 发帖数: 201 | 9 MAP2 from sigma, mouse monoclonal, #M9942
We use it on mouse brain sections all the time.
For paraffin section, it requires antigen retrieval step (microwaving in pH6
.0 10mM citrate buffer).
For IHC on crysections, no AR is required. |
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s***k 发帖数: 29 | 10 用protein A column分离IgG1,选择citrate pH=6.0的buffer,IgG1出来的速度很慢。
请问是什么缘故? |
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g*****n 发帖数: 250 | 11 1。不要干燥。組织已经固定,没有必要干燥。
2。Retrieve antigen. 在Citrate buffer里煮几分钟,或其它方法。 |
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m******g 发帖数: 467 | 12 哇,拖了好多……最近会补上的,不会坑掉。
交流群:342148521 (开心读文献贵在坚持,加群请输入最喜欢的科学家、杂志或领域
的名称或者其他什么,无附加信息不予通过,希望大家一起参与呢)
Science 13.11.29
推荐:
1. Primate transcript and protein expression levels evolve under
compensatory selection pressures
概述文:Protein Expression Under Pressure
Protein level more conserved than mRNA
基本是as expected,不过能够measure一下是很重要的
自问:有没有可能是方法本身的精确性
导致了信号的压缩呢
自答:应该不会
因为看mRNA浓度跨度是3-4个数量级
而蛋白的浓度是4-6个数量级
2. The Innate Growth Bistability and Fitness Landscapes of Antibiotic-
Resistant Bacteria
Translation-... 阅读全帖 |
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m******g 发帖数: 467 | 13 哇,拖了好多……最近会补上的,不会坑掉。
交流群:342148521 (开心读文献贵在坚持,加群请输入最喜欢的科学家、杂志或领域
的名称或者其他什么,无附加信息不予通过,希望大家一起参与呢)
Science 13.11.29
推荐:
1. Primate transcript and protein expression levels evolve under
compensatory selection pressures
概述文:Protein Expression Under Pressure
Protein level more conserved than mRNA
基本是as expected,不过能够measure一下是很重要的
自问:有没有可能是方法本身的精确性
导致了信号的压缩呢
自答:应该不会
因为看mRNA浓度跨度是3-4个数量级
而蛋白的浓度是4-6个数量级
2. The Innate Growth Bistability and Fitness Landscapes of Antibiotic-
Resistant Bacteria
Translation-... 阅读全帖 |
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m****m 发帖数: 395 | 15 想配一个Citrate Phosphate Buffer,网上的配方只说要配pH6.6的溶液取
36.4ml 0.2M的Na2HPO4 stock + 13.6ml 0.1M的citric acid stock 然后稀释至100ml。
请问这个溶液最终的盐浓度(buffer strength)是多少呢?怎么算?由于实验特殊需要
,盐浓度不能太高,以前只配过tris buffer,规定是20mM,10mM。
弱问了,求解 |
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q****i 发帖数: 6923 | 18 那是你查文献的功底不行。用你查到的那个信息,去查scifinder。
还有一个办法就是查书,查综述。
citrate |
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m*******o 发帖数: 108 | 19 I have tried scifinder with HAuCl4 and citrate, no result. I'll try the lib.
But if anyone can help or give me a clue, I appreciate. Thanks. |
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s*******h 发帖数: 3731 | 20 我偶像说话有点冲,我给你陪不是了。。。其实这个东西你可以看看书,这个citrate
当还原剂也不是一天半天了。。。
lib. |
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q****i 发帖数: 6923 | 21 我说话怎么冲了?我查文献的功底也不好呢。我就因为一篇文献查不出来,有篇文章到
现在也没发。
citrate |
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S*****n 发帖数: 6055 | 22 有时候老板是很难convince的。。。何况citrate氧化产物确实很多种可能
CO2是极端的产物,还可能有其他中间产物,嗯,复杂着呢。。。 |
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q****i 发帖数: 6923 | 23 嗯,我花了5分钟
Among the conventional methods of synthesis of
AuNPs by reduction of gold(III) derivatives, the most
popular one for a long time has been that using
citrate reduction of HAuCl4 in water, which was
introduced by Turkevitch in 1951.12 It leads to AuNPs
of ca. 20 nm. In an early effort, reported in 1973 by
Frens,13 to obtain AuNPs of prechosen size (between
16 and 147 nm) via their controlled formation, a
method was proposed where the ratio between the
reducing/stabilizing agents (the tris |
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m*******o 发帖数: 108 | 24 谢谢。冲一点没关系阿,也许是我问题没说清楚把。我正要去查书呢。主要是要找到出
处convince我老板……唉他心血一来潮,都耽误我几天了……
citrate |
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K****l 发帖数: 861 | 25 这个到真没做?不知道具体是怎么一个步骤?
我知道这一步很重要
好像按照文献的说法,我用在Matrix里面的Ammonium Citrate大概是这个作用
具体能说解释一下吗?
谢谢了... |
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h***o 发帖数: 350 | 26 Synthesis and Characterization of High-Tc Superconducting Oxides by the
Modified Citrate Gel Process
R. S. Liu, W. N. Wang, C. T. Chang and P. T. Wu
Jpn. J. Appl. Phys. 28 (1989) pp. L2155-L2157
http://jjap.jsap.jp/link?JJAP/28/L2155
Thank you very much. |
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m****m 发帖数: 395 | 27 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: mymmym (sweet girl), 信区: Biology
标 题: 请教一个关于buffer的问题
发信站: BBS 未名空间站 (Thu May 29 16:21:12 2014, 美东)
想配一个Citrate Phosphate Buffer,网上的配方只说要配pH6.6的溶液取
36.4ml 0.2M的Na2HPO4 stock + 13.6ml 0.1M的citric acid stock 然后稀释至100ml。
请问这个溶液最终的盐浓度(buffer strength)是多少呢?怎么算?由于实验特殊需要
,盐浓度不能太高,以前只配过tris buffer,规定是20mM,10mM。
弱问了,求解 |
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b******n 发帖数: 80 | 28 请教高手:
为了产生H2Se,我用Se粉分散在EtOH中,然后用NaBH4水溶液还原Se到NaHSe,整个过程
用N2保护,然后用另外一个管道通入Cd(NO3)2的水溶液中,用sodium citrate作为表
面活性剂。
当Se充分溶解后,希硫酸溶液加入前一个反应瓶,可以看到剧烈的气体产生,这时由缓
慢的N2流入第一个反应瓶来推动H2Se气体到第二个反应瓶去,反应了半天,一点颜色变
化都没有,说明根本就没有和Cd2+反应。
这时,我加大N2的流量,发现第二个反应瓶迅速变成红色,同时收集废弃的瓶子也变成
红色,这应该不是H2Se。过了一天,红色溶液底部有褐色沉淀物。
问,到底是SeO2还是Se?
我整个过程有哪里出错,为什么没有CdSe NPs?
BTW,
1. H2Se极错,我用防毒面具也能闻到,什么办法可以隔绝这玩意?
2. 我做了阵子CdS和CdSe,回家居然闻不到茉莉花的香味,我爱人和朋友说那个香味非
常浓,我怎么没闻到,我是不是杯具了? |
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y***e 发帖数: 6082 | 29 你是照谁的文献做啊,彭晓钢或者Paul的文献比较有权威的说,我当年是照着彭的那篇
JACS做的
请教高手:
为了产生H2Se,我用Se粉分散在EtOH中,然后用NaBH4水溶液还原Se到NaHSe,整个过程
用N2保护,然后用另外一个管道通入Cd(NO3)2的水溶液中,用sodium citrate作为表
面活性剂。
当Se充分溶解后,希硫酸溶液加入前一个反应瓶,可以看到剧烈的气体产生,这时由缓
慢的N2流入第一个反应瓶来推动H2Se气体到第二个反应瓶去,反应了半天,一点颜色变
化都没有,说明根本就没有和Cd2+反应。
这时,我加大N2的流量,发现第二个反应瓶迅速变成红色,同时收集废弃的瓶子也变成
红色,这应该不是H2Se。过了一天,红色溶液底部有褐色沉淀物。
问,到底是SeO2还是Se?
我整个过程有哪里出错,为什么没有CdSe NPs?
BTW,
1. H2Se极错,我用防毒面具也能闻到,什么办法可以隔绝这玩意?
2. 我做了阵子CdS和CdSe,回家居然闻不到茉莉花的香味,我爱人和朋友说那个香味非
常浓,我怎么没闻到,我是不是杯具了? |
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b******n 发帖数: 80 | 30 1. Turkevich method
用沸腾的个sodium citrate 还原金,一般可以得到50nm左右的colloidal gold.
2. seed mediated method.(El-Sayed)
先用NaBH4 还原纳米金颗粒,用CTAB做活性剂,然后,用此稀释的seed solution 加入
到Au+ CTAB, 用大量ascorbic acid作为还原剂,可以得到立方体的金颗粒。
我做实验时发现要是鸡婆搅拌超过10s,会有很多别的形状,还请高手解答下下。
谢谢。 |
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b******n 发帖数: 80 | 31 1. Turkevich method
用沸腾的个sodium citrate 还原金,一般可以得到50nm左右的colloidal gold.
2. seed mediated method.(El-Sayed)
先用NaBH4 还原纳米金颗粒,用CTAB做活性剂,然后,用此稀释的seed solution 加入
到Au+ CTAB, 用大量ascorbic acid作为还原剂,可以得到立方体的金颗粒。
我做实验时发现要是鸡婆搅拌超过10s,会有很多别的形状,还请高手解答下下。
谢谢。 |
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b******n 发帖数: 80 | 32 又落入个的饭碗。
最简单的球形的Ag NS方法:
1. Ag+ 和tri-sodium citrate (TSC), NaBH4还原剂即可。
TSC 也可以用PVP代替。
2. Ag+ 加入 TSC沸腾水中。
Ag nanocubes;
小的的可以用Younan xia的办法,加点S2-,然后EG还原。
大点的直接EG还原
我觉得最好的办法是CTAB和glucose 在反应釜里做。
3. Ag nanorods, 用Murphy的办法
4. Ag nanoprism, 用Rao Jin 在Science上的文章说,很容易,可以用PVP代替其中一
个stabilizer.
4. 哥最近做rod-like Ag nanobelt. 老板很不喜欢纳米的方向,认为是笨蛋才做,聪
明人是做organmetallic.关系非常不好,吵架了,把哥的一篇文章当了2年不发,哥差
点比不了业。日,回国自己做去。NND |
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f*********j 发帖数: 1955 | 33 我用sodium citrate 方法,加过量Ag,倒是合成出来了,但是为啥离心后的产物成了
一坨,好像没法再溶于水了啊。。啥毛病啊? |
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i****f 发帖数: 473 | 34 iblicf comment : 现在中国已经是世界第二大IT市场,所以整个中国医药业还要10年左
右才能达到现在IT业的兴旺局面。
2010年中国将成为全球第5大医药市场
冷焰 发表于 2006-4-5 16:38:00
分析人士预测,到2010年中国将一举超越英国与意大利,成为全球第5大医药市场。波士
顿咨询公司Melanie Lee指出,1年内中国的医药销售额有望在2005年130亿美元的基础上
翻番,实现销售收入250亿美元。
虽然目前西药市场只占据不到1/4的市场份额,本地产非专利药与中药依然是中国医
药市场主流。但普华永道分析人士认为,中国庞大的人口数量、老龄人口的增加以及经济
的快速增长将带动西药市场的发展,到2050年可能超越美国,成为全球最大的医药市场。
2004年,国家知识产权总局宣告辉瑞公司枸橼酸西地那非(sildenafil citrate,万
艾可,Viagra)中国专利权无效,曾一度冷却国外药企的对华投资热情,然而,中国加入
WTO 后,产权保护措施的逐步改善以及中国市场的巨大潜力又一次拉 |
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l*******d 发帖数: 278 | 35 http://journals.prous.com/journals/servlet/xmlxsl/pk_journals.x
A new method for plasma citrate determination by revised-phase high-
performance liquid chromatography after ultrafiltration extraction: An
example for bioequivalence evaluation of a medicine endogenous substance (in
Method Find Experiment Clinical Pharmacology 2008, 30(7): 513
Thanks,
PLEASE SEND TO:y******[email protected] |
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a*******e 发帖数: 121 | 36 家里老人和朋友最近都健康不好,想帮忙也不知道怎么忙,来这里问问。
一个是乳腺癌,30岁出头,已经切除了一侧,国内医生建议吃药一年以防转移到另一侧
。大概就是抑制激素的药,国内的据说副作用比较大,推荐美国Tamoxifen Citrate
Tablets。我看了看都要处方才能买,不知道有什么办法不需要处方可以买到的。或者
其他什么我在美国可以帮忙的。
还有一个是家里老人,80多了,食道癌喷门癌,确诊了而且也转移了,手术化疗都没什
么用了,人也年纪大了。具体的病情我也不大清楚,不知道我在美国可以有什么帮忙的
,有什么药物可以帮忙维持的,或者其他一些治疗方法。
多谢多谢!也没其他途径咨询,只要来这里问问,希望可以为朋友和家人尽点微薄之力。 |
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g***f 发帖数: 2 | 37 1, Gonal-f Multi-dose 450IU $150
整盒为开封, 2009 年10月买的, 保质到2010年10月。
并带送将近一盒, 区别是未开封的是liquid 和powder分开装。 这一盒我已经mix了,
但就用了50IU。 当时最后一次就差50IU, 就把一整合mix了, 然后一直放冰箱冷藏了。
我还有药店邮寄的冰袋 和泡沫保温盒, 可以保证邮寄没问题。
2, Menopour 75IU 5 single-dose $100---GONE
整盒为开封, 2009 年10月买的, 保质到2011年01月。
并带送两支,也还是未开封的是liquid 和powder分开装。 和那五只装没区别, 就是5
支装的盒子打开用了三只。
如果哪个姐妹需要,价钱都可商量。优先送以下的。
3,Clomiphene citrate 50mg 10 Tablet. free---GONE
exp 12/2010
4,about 20 tablets lowdose aspirin exp 2011/4, free---GONE
5, 乐夫 排卵检测试纸 10 支, 可买可送
今年六月国 |
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c**********n 发帖数: 172 | 39 更正:colace在ET之后可以用,还有surfak还可,只有这两个是我医生推荐在ET之后用
的。ET之前还可以用magnesium citrate |
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v**********m 发帖数: 5516 | 41 KRX-0401 (perifosine)
Multiple myeloma
Phase 3 ongoing, under SPA
Colorectal cancer
Phase 3 ongoing, under SPA
Multiple other forms of cancer
Phase 2 trials ongoing
ZerenexTM (ferric citrate)
Hyperphosphatemia in patients with end-stage renal disease
U.S. Phase 3 program ongoing under SPA;
Japan Phase 3 program ongoing by sublicensee (JT and Torii)
这些实验结果什么时候会出来? |
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s**********9 发帖数: 846 | 42 好像年底还有一个phaseIII。
Mr. Bentsur commented further, "With approximately $31 million in cash as of
March 31, 2012, and a well-controlled burn rate, we plan to focus our
resources on the pending completion of the Zerenex (ferric citrate) long-
term Phase 3 study for end stage renal disease (ESRD) patients with
hyperphosphatemia, expected in the fourth quarter of 2012, and the New Drug
Application (NDA) filing for Zerenex which will hopefully follow shortly
thereafter."
到9,10 月可以搞搞? |
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B*****e 发帖数: 2413 | 43 KERX mainly relies on Perifosine. Theoretically
Perifosine looks charmimg, but phase III indicates it is
not successful.
If you want to bottom it, it is better to bottom AEZS
but not Kerx because AEZS has their own candidate
compounds.
million in cash as
of
plan to focus our
(ferric citrate) long-
patients with
2012, and the New
Drug
hopefully follow shortly |
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p**g 发帖数: 4595 | 44 calcium citrate 比 calcium carbonate 好吸收
另外带Vitamin D的好吸收
costco kirkland片儿太大了很难吞阿
钙缺的话补补,也不能补过了。最好还是多喝牛奶,晒晒太阳。听说过小孩儿生下来指
甲都是硬的,也有点儿吓人。 |
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