c********n
发帖数: 225 | 1 谈谈和蛋白打交道的日子 （六）
引子
以前常和朋友谈起什么行业就业机会多，有长期稳定发展的潜力。翻来覆去后总结的是
，围绕着“生老病死，衣食住行”就靠谱。说到饮食，应个景，《舌尖上的中国》II谈
到了饮食与人文的关系，也用到了一些科学名词，比较煽情。而我比较喜欢的一档美国
cooking show，是Alton Brown在Food Network的“Good Eats”节目, 真正的touch了
一些美食背后的科学小常识, 做到了寓教于乐，fun。这篇就讲讲和食品相关的一些体
会吧。
第六篇 舌尖上的冒险
我们这里对于牛奶， 奶酪， 冰激凌等的要求是较高的。 对于我，尤其钟情冰激凌。
学校食品系研究生们的课题经常涉及各种口味和口感的冰激凌。他们常做的一个实验是
大众品尝评分， 就是给体验者每次几个相似的样品和一张问卷， 给各项指标（比如口
味，口感，甜度，等等）打分。 一般都安排在春季学期的尾巴和秋季学期的开始，大
约在午饭时间。做研究生的时候刚好在这个系的对面楼里， 每次都可以积极地参与，
经常午饭都省了。
由于大众需求，在食品系的一层，开了一个卖冰激凌的柜台，每过一阵子就有一种... 阅读全帖 |
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s******y
发帖数: 28562 | 2 Just like other gus have already said:
1. Buy another antibody from another specie. (I highly recommend this way)
2. crosslink your antibody to gel particles (CNBr activated Sepharose),
use the gel to pull down your protein,then use high salt(eg., 8M urea) to
seperate your protein.
3. crosslink your antibody to your protein by EDC-NHS method, then your
target will have a higher molecular weight. However, the result can turn out
to be hard to interpreted since the antibody would also bind somethi |
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r****o
发帖数: 105 | 3 本文献给YL
（十四）anfinsen的疑虑
跑完sephacryl柱子，组分就可以过DNA affinity column。DNA affinity column虽然很重
要，但是这一步技术上来说要求很低。买来CNBR活化好的agarose，然后让特定序列的寡聚核
苷酸固定上去就行了，柱子也是最简单便宜的一次性柱子。
亲合层析是目前最常用也最强大的一种蛋白质纯化技术, 纯化效率比别的层析方法可以高出一
两个数量级。这种方法诞生是六十年代的事情。当时是在NIH的Anfinsen实验室。Anfinsen是一
个诺贝尔奖获得者，可以说是蛋白质折叠研究的老祖宗。他主要贡献是通过研究ribonuclease 的
变性和重折叠证明氨基酸序列就可以决定蛋白质最后的三维结构。他实验室那时侯有一个学生一
个project是从葡萄球菌里面提取大量核酸酶，然后研究enzyme-inhibitor interaction。这个纯
化可是很麻烦的事情，用gel filtration, ion-exchange, hydrophobic interaction, 效率都很
低。有人可能会问，怎么不在E.Coli |
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