b******s
发帖数: 1089 | 1 正在构建几个带ccd的质粒。我们实验室的DH3.1以前都是用来转化构建好的质粒。转连
接产物效率好低！谁能给我一份比较好用的protocol做高效的DB3.1感受态细胞，谢谢
！ |
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h**********r
发帖数: 671 | 2 不知道版上有没有同修用BioBrick？例如NEB的http://www.neb.com/nebecomm/products/productE0546.asp或iGEM的。我以前没有接触过。最近要从别的实验室要到一个质粒，带有BioBrick。我有几个疑问：
1. 扩增克隆质粒是不是必须用E. coli DB3.1?
BioBrick上带有ccdB。ccdB is a lethal gene that targets DNA gyrase。E. coli
DB3.1上有gyrA462的突变。可是JM109，DH5a还有XL1-Blue上有gyrA96的突变。实验室
没有DB3.1，但有JM109。不知道可以替代不？Invitrogen有新一代的One Shot®
ccdB Survival 2 T1R Competent Cells出来。可是贵啊，没有买感受态细胞的
习惯。
2. 虽然ccdB是个negative selection marker,感觉不像sacB那样有用,在biobrick里面
有点多此一举吧。还是我的理解不够深入？
http://partsregistry.... 阅读全帖 |
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h*******o
发帖数: 1 | 9 最近准备换工作，从Developer改成DBA了，Job Description和Title完全不同，种类也
从DB3换成EB2。
请教大家，以前批准的140的Priority Date还可以保持吧，如果以前公司不Revoke 140
的话。谢谢！ |
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b****i
发帖数: 4824 | 11 eb2终于又current了，不知道relink回去还有多久才能绿
大家都来排个队啊，互相打打气。 |
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r****8
发帖数: 144 | 15 排队的请同时报上pd，哪个center,我的是 Rd 2014.5. Pd 2011.4，nsc. |
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r****8
发帖数: 144 | 17 确认pd 没错？
[在 tommydidi1 (南瓜头) 的大作中提到：]
：me, pd 05/2015 |
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c*********y
发帖数: 172 | 22 去年2月降级 主申请人去年11月RFE 然后2月绿的
副申请人啥动静都没有 也没RFE
PD 9/10/2010 |
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d*****e
发帖数: 16730 | 24 你算算 rb +wr+qb 这才3个 剩下选进攻球员的 难道不是基本就剩ol胖子了？
db3个剩下也就 十几个dl 胖子了
position award：
1. how many qbs selected in round 1? 1
2. how many wrs selected in round 1? 2
3. how many rbs selected in round 1? 0
4. how many secondaries (cb/saftey) in round 1? 3 |
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A*****a
发帖数: 52743 | 25 RW3, RG3, CK3
PM3, TB3, DB3 |
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r********m
发帖数: 593 | 26 这楼是Estee Lauder
Re-Nutriv 白金系列 图1
除非特别注明, 小样均为瓶装.
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T****r
发帖数: 22092 | 27 “高铁引发地质灾害”纯属恶作剧
本是针对看帖不仔细网友的恶搞作品，不料在网上引发巨大传播效应
类别:国内新闻 浏览量:
4570
版次:AA20 版名:网眼 稿源:南方都市报 2010-11-03
作者:谭人玮 原创 手机看新闻 全国订报编辑此文
摘要：9月8日开始，《高铁——— 悄悄开启群发性地质灾害的魔盒》一帖(以下简
称《高铁》)在网上传得到处都是，帖子称，中科院西安地球环境研究所的张拾迈教
授经过全面、细致的研究，得出 “中国的地质不适合建高铁”的结论。因此文影响
过大，中科院地球环境研究所还专门发声明澄清并无这么一位教授。南都记者调查
发现，这是一篇“钓鱼文”。
南都讯 记者谭人玮 9月8日开始，《高铁———悄悄开启群发性地质灾害的魔
盒》一帖(以下简称《高铁》)在网上传得到处都是，帖子称，中科院西安地球环境
研究所的张拾迈教授经过全面、细致的研究，得出“中国的地质不适合建高铁”的
结论。因此文影响过大，中科院地球环境研究所还专门发声明澄清并无这么一位教
授。南都记者调查发现，这是一篇“钓鱼文”。“钓鱼”是一种网络恶作剧行为，
目的是嘲笑和打... 阅读全帖 |
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m******t
发帖数: 635 | 30 IBM一向高举开源大旗，也没看它把DB2给开源了，同时也没看到它在卖力推db3的样子
，比较奇怪 |
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L*****t
发帖数: 56 | 33 你把pLXSH空载体转DB3.1之类耐ccdB的菌株，Amp+CM平板划线挑几个克隆做Miniprep再
试试看。
我以前听人提过慢病毒系列的Gateway载体因为重复序列较多，存放久了构象会改变导
致克隆失败，但是本身序列没变所以重新转化提新鲜的质粒就行了。 |
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