k****o
发帖数: 728 | 1 外行请教： 有没有什么酶或者方法能够让protein disulfide bonds（最好是intra-
chain disulfide bond）scramble/exchange。 大概搜了一下，protein disulfide
isomerase （PDI） 好像是能够纠正incorrect disulfide bond回到原来的能让
protein稳定的correct disulfide bond。而我是想让正常的disulfide去和nearby的
disulfide bonds exchange，然后研究protein和其他target的binding。 不知道PDI能
不能做到这个？要怎么控制条件去故意打乱disulfide bond的配对？ 或者其他更好的
enzyme？
多谢！ |
|
f**********r
发帖数: 91 | 2 【 以下文字转载自 Chemistry 讨论区 】
发信人: flyingwisher (flyingwisher), 信区: Chemistry
标 题: 含有disulfide键的polymer为什么在THF中会降解？谢谢了。
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Dec 16 14:30:59 2011, 美东)
用THF溶解polymer（含有20%左右的disulfide键）做GPC的时候，发现含有disulfide
键的polymer在THF中会降解，过几个小时，分子量会变小一些，但是不知道为什么，按
理说这种polymer对氧气不敏感，氧气应该是往省城disulfide键的方向的。谢谢了。 |
|
f**********r
发帖数: 91 | 3 用THF溶解polymer（含有20%左右的disulfide键）做GPC的时候，发现含有disulfide
键的polymer在THF中会降解，过几个小时，分子量会变小一些，但是不知道为什么，按
理说这种polymer对氧气不敏感，氧气应该是往省城disulfide键的方向的。谢谢了。 |
|
s********d
发帖数: 47 | 4 你前期处理注意disulfide bond shuffeling这个问题了吗？
我做过很多用质谱定位二硫键的实验。发现最大的问题是disulfide bond shuffeling.
解谱用软件就好了，再加手工判断一下谱图的质量。有成熟的软件可分析。如果有兴趣
，给我留言或者发邮件吧。 |
|
B******1
发帖数: 9094 | 5 Theoretically, you need to know the reaction rate for intramolecular and
intermolecular disulfide-formation. Then you can decide how dilute you want
to go to maximize the yield of intramolecular disulfide bond formation.
Running the same reaction under different concentrations and temperatures,
among other things, would give you some hard data to work with. Hopefully
after a few rounds you would be able to find out the optimal conditions.
If your goal is simply to have a few mg of the desired |
|
|
f**********r
发帖数: 91 | 7 【 以下文字转载自 Chemistry 讨论区 】
发信人: flyingwisher (flyingwisher), 信区: Chemistry
标 题: 请问：DTT 还原/断裂二硫键（disulfide bond）时反应条件，谢谢了。
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Dec 8 12:53:37 2011, 美东)
PH>7. DTT如果浓度在0.5mM，有还原能力吗？这种还原/断裂反应一般需要多长时间
？谢谢了。 |
|
|
w****6
发帖数: 169 | 9 可以用pymol把这个结构打开，然后show disulfides就能看见了.
这个protein里第一条链 ：c22-c92， c195-c140。第二条链：c23-c88，c133-c193 |
|
A******o
发帖数: 143 | 10 用pep finder 软件不难做的。软件可以试用2个月
Disulfide bond shuffling 是常见 |
|
r****1
发帖数: 2299 | 11 做了一个PEPTIDE，里面有两个CYS，想让这两个CYS FORM DISULFIDE BRIDGE。应该如
何做才能加速这个反应，而且还要避免INTERMOLECULAR CROSS LINK而形成DIMER。 |
|
P***e
发帖数: 804 | 12 Run LC-MS to monitor disulfide peptide change over time.
If no MS connected to LC, collect fractions then run MALDI.
In terms of purification, HPLC is the way to go.
not |
|
o****e
发帖数: 1011 | 13
广义说来，浓度再低，DTT也都有还原能力。
浓度主要影响的是反应速率。一般情况是浓度越低，反应速率越慢。
除了反应物(DTT，-S-S-)的浓度，影响这个反应的因素还很多，反应时间几分钟、
几小时都有可能。比如pH对DTT的还原性能影响很大，pH10一般要比pH7要快很多；
另外比如小分子的disulfide bond一般比"包在里面的"、大分子里的要容易反应。
当然，条件许可的话，升温也能加速反应。 |
|
f**********r
发帖数: 91 | 14 双硫键（disulfide）的稳定性如何，热稳定性，多少温度没问题，酸碱稳定性？保
存条件？看到文献tlc走硅胶板，产物纯化的时候换成了碱性氧化铝，是不是怕酸性硅
胶柱子分解它啊？做过的高手指点一下，谢谢了。 |
|
x*o
发帖数: 1037 | 15 【 以下文字转载自 Chemistry 讨论区,原文如下 】
发信人: xmo (复仇之火), 信区: Chemistry
标 题: Question about disulfide bond in protein
发信站: The unknown SPACE (Tue Oct 8 17:42:06 2002) WWW-POST
听说有一种不含硫的还原剂能够阻止巯基的氧化及形成双硫键
想知道这种化合物是什么，谢谢！ |
|
s******9
发帖数: 283 | 16 NCBI protein database一般都有标注吧。
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..503
/organism="Homo sapiens"
/db_xref="taxon:9606"
gene 1..503
/gene="TGFBR1"
/gene_synonym="ALK5"
/gene_synonym="SKR4"
Protein 1..503
/gene="TGFBR1"
/gene_synonym="ALK5"
/gene_synonym="SKR4"
... 阅读全帖 |
|
f*****y
发帖数: 142 | 17 service manual上面经常会提到silicone grease和molybdenum disulfide两种
grease，但是去了dealer，也找不到。ft。
这次在TSB里面找到了详细的介绍。原来一个是
Dow Corning DC111: silicone based
Molykote M77: molybdenum disulfide based
一个用于非金属的润滑，另外一个就是金属和金属之间，尤其是
不经常动的那种。
另外，M77就是honda在brake pad里面提供的那一小包brake grease。
有antiseized的作用。
刚刚找到了M77的P/N，08798-9010，居然$12一管。hoho....
spec: http://www.endustriteknik.com/molykote_paste_v-e.asp
正在查找DC111的代码。:o P/N: 08798-9013
结果DC111居然是食用级别的润滑剂，也非常的便宜。可以在plumbing的
类别里面找到。:p
再给一个中文的代理连接，估计就更明白了。
http: |
|
|
c**i
发帖数: 6973 | 19 (1) Leave "ruomu" alone.
He is certainly guilty of piracy/theft of itellectual property right, by
copying a (so called) news report without attribution--but nothing else.
And we do not shoot a messenger.
Don't kill the messenger. The Phrase Finder, undated.
http://www.phrases.org.uk/bulletin
_board/3/messages/520.html
In fact this is a terrific "teachable moment."
(2) Judging from the timing, I presume ruomu's piracy is inspired by my
recent posting:
兰州拉面 in Manhattan. Food Board, Feb 3, 2011.
... 阅读全帖 |
|
发帖数: 1 | 20 ◇◇新语丝(www.xys.org)(newxys.com)(xys10.dxiong.com)◇◇
举报南京大学生命学院院长华子春学术不端
方先生您好！
我们反映南京大学生命学院院长、长江、杰青、 国家科技进步奖获得者、
国重主任华子春长期存在学术不端问题。 附件是我们发现的第一批四组共9篇文
章。
1. 2000-C和2000-E两篇文章皆为英文稿， 分布发表于南京大学学报和
Protein Expression and Purification。华教授是通讯作者。 南京大学学报的
内容系于后者的文字上做了删掉，无文字改写。 例如：
前者的第一、二段：
Human cardiac-specific homeobox protein (hCsx2 or Nkx2.5) encodes
a homeobox transcription factor of 323 amino acids containing six
cysteines and is composed of three domains: the TN-domain, the
homeobox- domain, and t... 阅读全帖 |
|
s***k
发帖数: 29 | 21 自己想要表达一个蛋白，里面有几个disulfide bonds。文献中使用DsbC来完成
refolding process。在网上查了下，这种enzyme价格很贵。有没有其他disulfide
isomerase可以用来作为它的替代物？自己目前几乎没有生物背景，希望版上诸位前辈
能多多指教。 |
|
|
s**********r
发帖数: 67 | 23 I need two papers. I will be appreciated if someone can download those for
me.
Thanks in advance.
1st:
R. Krishna Kumara, Phil Olsena & Vasulinga T. Ravikumara, An Alternative
Advantageous Protocol for Efficient Synthesis of Phosphorothioate
Oligonucleotides Utilizing Phenylacetyl Disulfide (PADS), Nucleosides,
Nucleotides and Nucleic Acids, Volume 26, Issue 2, 2007, 181-188
2nd:
Zacharia S. Cheruvallatha, Patrick D. Wheelera, Douglas L. Colea & Vasulinga
T. Ravikumara, Use of Phenylacetyl Disul... 阅读全帖 |
|
b*******y
发帖数: 4304 | 24 中药的科学研究丰碑（修改版）
饶毅1 黎润红2 张大庆2
中国 北京 100871北京大学 1生命科学学院 2医学部
摘要
1970年代早期，多数中国科学家，在文化大革命中努力生存而无机会开展研究。两位年
轻的研究者屠呦呦和张亭栋，分别在发现抗疟新药青蒿素和揭示砒霜化学成分三氧化二
砷对白血病的治疗作用的过程中起了关键作用。回顾四十年前开始的历程，不乏曲折和
反讽。青蒿素工作源于中国帮助越南抵抗美国，三氧化二砷源于观察、验证和改进乡村
中医的实践。虽然他们的药物挽救了世界上很多生命，两位研究者迄今未获国内外充分
肯定，屠呦呦有争议、张亭栋基本默默无闻。相关的文献埋没于冷僻的杂志和一般不易
看到的内部会议资料。基于原始中文论文、文件和采访，我们在此呈现这些发现的历史
概貌。没有逃脱我们的注意，在古代和近现代中文文献及医疗实践中，可能还有尚待重
新发现的珍宝。
引言
在中国使用了上千年的传统药物，能否改善现代人类的健康？在中国，有些人不认为这
是问题，而在中国以外的世界，中药并非现代人类普遍使用药物的主要来源。
对中药有两种截然相反的看法：在现代医学进展到今天后中药意义很小，甚至毫... 阅读全帖 |
|
x********i
发帖数: 905 | 25 Intel STS 2015 Finalists
Anandapadmanaban, Eswar
Dr. Ronald E. McNair Academic High School, Jersey City, NJ
The ThereNIM: A Touch-less Respiratory Monitor
Ashkin, Emily Lorin
Providence Day School, Charlotte, NC
A Novel Synergistic Approach for Enhancing Immunotherapy in the Treatment of
Melanoma
Chemparathy, Augustine George
Dougherty Valley High School, San Ramon, CA
Accumulation of the Biodiesel Precursor Triacylglycerol Offsets Oxidative
Stress in the Model Alga Chlamydomonas reinhardtii
Cui... 阅读全帖 |
|
d******r
发帖数: 16947 | 26 作者：紫霞狼
链接：https://www.zhihu.com/question/60058987/answer/171961719
来源：知乎
著作权归作者所有。商业转载请联系作者获得授权，非商业转载请注明出处。
用砒霜治病，中药有传统，西方也曾用过。含砷的中药有砒霜、砒石、雄黄、雌黄等。
北宋的《开宝详定本草》、明朝李时珍的《本草纲目》都记载了砒霜的药性。西方在十
九世纪和二十世纪三十年代也曾用三氧化二砷治疗白血病，但未获普遍接受。
在巡回医疗过程中，哈尔滨医科大学第一附属医院的药师韩太云从民间中医得知用砒
霜、轻粉（氯化亚汞）和蟾酥等治疗淋巴结核和癌症。1971年3月，韩太云将它们改制
水针剂，称"713"或"癌灵"注射液，通过肌肉注射，对某些肿瘤病例见效，曾在当地风
行一时，但因毒性太大而放弃。
哈尔滨医科大学附属第一医院中医科的张亭栋与韩太云合作继续此工作。1972年后，
张亭栋等一方面主要集中做白血病，而不是无选择地应用于很多疾病，另一方面他们分
别检测“癌灵”的组分，发现只要有砒霜就有效，而轻粉带来肾脏毒性、蟾酥带来升高
血压的副作用，后两者无治疗作用。
他们的第一篇论文... 阅读全帖 |
|
r*s
发帖数: 2555 | 27 Brendt Christensen
Brendt Christensen
PhD Candidate at University of Illinois at Urbana-Champaign
Champaign, IllinoisResearch
Current
University of Illinois at Urbana-Champaign
Previous
University of Wisconsin-Madison
Education
University of Illinois at Urbana-Champaign
14
connections
View Brendt’s full profile. It's free!
Your colleagues, classmates, and 500 million other professionals are on
LinkedIn.
View Brendt’s Full Profile
Summary
I am a PhD candidate in experimental condensed ma... 阅读全帖 |
|
T****t
发帖数: 11162 | 28 https://www.linkedin.com/in/brendt-christensen-0007207a/
Brendt Christensen
PhD Candidate at University of Illinois at Urbana-Champaign
University of Illinois at Urbana-Champaign University of Illinois at
Urbana-Champaign
Experience
University of Illinois at Urbana-Champaign
PhD Student Researcher
Company NameUniversity of Illinois at Urbana-Champaign
Dates EmployedJan 2014 – Present Employment Duration3 yrs 7 mos
LocationUrbana, IL
Current research:
-Transport in thin flakes of Molybdenum Di... 阅读全帖 |
|
|
I*****n
发帖数: 90 | 30 paypal is fine with me too.
PM please. my email: i************[email protected]
多谢!!!
Bioinformatics (2011) 27 (16): 2224-2230. doi: 10.1093/bioinformatics/
btr387 First published online: June 29, 2011
title: Improving the prediction of disulfide bonds in Eukaryotes with
machine learning methods and protein subcellular localization
Author: Castrense Savojardo1,2,
Piero Fariselli1,2,*,
Monther Alhamdoosh1,
Pier Luigi Martelli1,
Andrea Pierleoni3 and
Rita Casadio1 |
|
t*******n
发帖数: 4445 | 31 The issue seems to be how you and your OB feel about risk of these drugs for
a mild medical condition now - as there is always the option of waiting
till after delivery.
Selsun Blue at 1% selenium disulfide is OTC, but does not work as well as 2.
5% by prescription. There is also an OTC 2% ketoconazole shampoo.
But it might be better to get a prescription if you can. |
|
t*******n
发帖数: 4445 | 32 Try Selsun Blue on your own, or any other generic shampoo that contains 1%
selenium disulfide.
If not working, doctors (I'd say try family doctor first) can check & maybe
prescribe something stronger. |
|
s********e
发帖数: 427 | 33 "生物/螯合疗法（二）
香港拯救天使提供的自闭症（孤独症）的生物（biomedical）/螯合（chelation）疗法
排毒前的准备
1． 尽量减少孩子对各种毒素的接触：不打用thimerosal作防腐剂的疫苗，不吃大的
鱼，不用银粉补牙，……
2． 治疗孩子的肠胃：
a) 尝试无牛奶制品无麦类的饮食（Gluten Free / Casein Free (GF/CF）)：
1446位家长中有65%认为 限制牛奶制品及麦类的饮食对孩子有帮助。[1]
b) 给孩子服用消化酶。可以试 Kirkmanlab 的 Enzyme Complete, 或Houston
Enzymes
c) 给孩子服用益生菌 (probiotics). 很多孩子有肠内酵母菌（yeast）过多的
问题。硫辛酸（Alpha-Lipoic Acid, (ALA)）及口服的DMSA会使酵母菌过多的问题更严
重。益生菌可以克制酵母菌。不要给孩子吃糖，葡萄干，或其它甜的东西。水果中梨子
最好.( 酵母菌不喜欢梨子中的糖). 如果孩子酵母菌问题较严重，可用kirkmanlab的
Y... 阅读全帖 |
|
r*****u
发帖数: 56 | 34 A postdoctoral position is immediately available in the newly established
Cheng Lab, Department of Human Nutrition, Food and Exercise, Virginia Tech.
Motivated professionals, who are interested in research on type 2 diabetes,
obesity and cancer [1-7], are welcome to apply. Strong background/expertise
in biochemistry, molecular biology and/or cell biology is required. Previous
experience in signal transduction pathway analysis [1-3,5-7], mitochondrial
function [2,6,7], or redox (oxidation/reducti... 阅读全帖 |
|
x******g
发帖数: 289 | 35 物质学院（包括物理、材料、化学等学科）
该学院一共一个正教授，三个助理教授
正教授代表作
1. A First Example of “Wittig Reaction” on a Coordinated Carbon Dioxide
Nickel Complex. Journal of American Chemical Society.
2. Theoretical Study of Carbon Dioxide Coordination in Palladium Complexes.
Applied Organometallic Chemistry.
3. Theoretical Investigation of Ketene Bonding Modes in Bis(phosphine)
Palladium Ketene Complexes. Journal of Coordination Chemistry.
4. Double Insertion of Methylene into Nickel-Phosphorus Bonds: Synthesis and
Structur... 阅读全帖 |
|
B******1
发帖数: 9094 | 36 If you did not see anyone left, it's probably one of your neighbors who did it.
That guy probably is a stay at home type and has quick hands.
What you can do, is to put a FAKE FEDEX package outside your house. Inside
the package is a wrapped gift box. Inside the gift box is a cloth drenched
with C-14 or S-35 labeled CS2, carbon disulfide, and a note:
Did you smell something bad? You are poisoned! Seek medical help immediately
. Call 911 right now! |
|
B******1
发帖数: 9094 | 37 If someone tells you that you can use pyridine or carbon disulfide, do not
follow that instruction! |
|
i***l
发帖数: 468 | 38 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: xiaoxiaoxi (小小溪), 信区: Military
标 题: Re: 全美英特尔科学奖决赛名单公布 13名华裔入围
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Jan 24 16:00:54 2015, 美东)
Intel STS 2015 Finalists
Anandapadmanaban, Eswar
Dr. Ronald E. McNair Academic High School, Jersey City, NJ
The ThereNIM: A Touch-less Respiratory Monitor
Ashkin, Emily Lorin
Providence Day School, Charlotte, NC
A Novel Synergistic Approach for Enhancing Immunotherapy in the Treatment of
Melanoma
Chemparathy, Augustine George
Dougherty Valley High School, Sa... 阅读全帖 |
|
s*****1
发帖数: 2312 | 39 ACP – Auto Colt Pistol
BALL – Full Metal Jacket
BCHP – Bonded Core Hollow Point
BCSP – Bonded Core Soft Point
(Bonded or Bonded Core – a bullet in which the lead core is soldered or
chemically bonded to the copper alloy jacket)
BT – Boat Tail
CTFB – Closed Tip Flat Base
Dum-Dum – Flat Nose (usually with X cut in nose)
FMC --- Full Metal Case
FMCF – Full Metal Case Flat
FMJ – Full Metal Jacket
FMJF – Full Metal Jacketed Flat
FNEB – Flat Nose Enclosed Base
FP – Flat Point
Frangible – Limited Penet... 阅读全帖 |
|
T*****n
发帖数: 2456 | 40 来自主题: LeisureTime版 - 说说中医 中药的科学研究丰碑（修改版）
饶毅1 黎润红2 张大庆2
中国 北京 100871北京大学 1生命科学学院 2医学部
摘要
1970年代早期，多数中国科学家，在文化大革命中努力生存而无机会开展研究。两位年
轻的研究者屠呦呦和张亭栋，分别在发现抗疟新药青蒿素和揭示砒霜化学成分三氧化二
砷对白血病的治疗作用的过程中起了关键作用。回顾四十年前开始的历程，不乏曲折和
反讽。青蒿素工作源于中国帮助越南抵抗美国，三氧化二砷源于观察、验证和改进乡村
中医的实践。虽然他们的药物挽救了世界上很多生命，两位研究者迄今未获国内外充分
肯定，屠呦呦有争议、张亭栋基本默默无闻。相关的文献埋没于冷僻的杂志和一般不易
看到的内部会议资料。基于原始中文论文、文件和采访，我们在此呈现这些发现的历史
概貌。没有逃脱我们的注意，在古代和近现代中文文献及医疗实践中，可能还有尚待重
新发现的珍宝。
引言
在中国使用了上千年的传统药物，能否改善现代人类的健康？在中国，有些人不认为这
是问题，而在中国以外的世界，中药并非现代人类普遍使用药物的主要来源。
对中药有两种截然相反的看法：在现代医学进展到今天后中药意义很小，甚至毫... 阅读全帖 |
|
l*****f
发帖数: 13466 | 41 这个报道有点标题党了。 饶毅那篇2011年的文章写的很详细的。注意引用文献里，有
张昌绍1948年在科学杂志发的文章。
http://blog.sciencenet.cn/blog-2237-478156.html
中药的科学研究丰碑（修改版）
饶毅1 黎润红2 张大庆2
中国 北京 100871北京大学 1生命科学学院 2医学部
摘要
1970年代早期，多数中国科学家，在文化大革命中努力生存而无机会开展研究。两位年
轻的研究者屠呦呦和张亭栋，分别在发现抗疟新药青蒿素和揭示砒霜化学成分三氧化二
砷对白血病的治疗作用的过程中起了关键作用。回顾四十年前开始的历程，不乏曲折和
反讽。青蒿素工作源于中国帮助越南抵抗美国，三氧化二砷源于观察、验证和改进乡村
中医的实践。虽然他们的药物挽救了世界上很多生命，两位研究者迄今未获国内外充分
肯定，屠呦呦有争议、张亭栋基本默默无闻。相关的文献埋没于冷僻的杂志和一般不易
看到的内部会议资料。基于原始中文论文、文件和采访，我们在此呈现这些发现的历史
概貌。没有逃脱我们的注意，在古代和近现代中文文献及医疗实践中，可能还有尚待重
新发现的珍宝。
引言
在... 阅读全帖 |
|
H********g
发帖数: 43926 | 42 芦笋尿可以用来处理汞污染
Some[46] of the volatile organic compounds responsible for the smell are:[47
][48]
methanethiol
dimethyl sulfide
dimethyl disulfide
bis(methylthio)methane
dimethyl sulfoxide
dimethyl sulfone
Subjectively, the first two are the most pungent, while the last two (sulfur
-oxidized) give a sweet aroma. A mixture of these compounds form a "
reconstituted asparagus urine" odor. This was first investigated in 1891 by
Marceli Nencki, who attributed the smell to methanethiol.[49] These
compou... 阅读全帖 |
|
C********g
发帖数: 9656 | 43 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: bullmoney (Monk Tang of Stock Market), 信区: Military
标 题: 饶毅雄文： 敬请毛轮批判第一段， 第一段以后不用看
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Sep 12 15:51:27 2011, 美东)
中药的科学研究丰碑（修改版）
饶毅1 黎润红2 张大庆2
中国 北京 100871北京大学 1生命科学学院 2医学部
摘要
1970年代早期，多数中国科学家，在文化大革命中努力生存而无机会开展研究。两位年
轻的研究者屠呦呦和张亭栋，分别在发现抗疟新药青蒿素和揭示砒霜化学成分三氧化二
砷对白血病的治疗作用的过程中起了关键作用。回顾四十年前开始的历程，不乏曲折和
反讽。青蒿素工作源于中国帮助越南抵抗美国，三氧化二砷源于观察、验证和改进乡村
中医的实践。虽然他们的药物挽救了世界上很多生命，两位研究者迄今未获国内外充分
肯定，屠呦呦有争议、张亭栋基本默默无闻。相关的文献埋没于冷僻的杂志和一般不易
看到的内部会议资料。基于原始中文论文、文件和采访，我们在此呈现这些发现的历史... 阅读全帖 |
|
C********g
发帖数: 9656 | 44 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: bullmoney (Monk Tang of Stock Market), 信区: Military
标 题: 饶毅雄文： 敬请毛轮批判第一段， 第一段以后不用看
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Sep 12 15:51:27 2011, 美东)
中药的科学研究丰碑（修改版）
饶毅1 黎润红2 张大庆2
中国 北京 100871北京大学 1生命科学学院 2医学部
摘要
1970年代早期，多数中国科学家，在文化大革命中努力生存而无机会开展研究。两位年
轻的研究者屠呦呦和张亭栋，分别在发现抗疟新药青蒿素和揭示砒霜化学成分三氧化二
砷对白血病的治疗作用的过程中起了关键作用。回顾四十年前开始的历程，不乏曲折和
反讽。青蒿素工作源于中国帮助越南抵抗美国，三氧化二砷源于观察、验证和改进乡村
中医的实践。虽然他们的药物挽救了世界上很多生命，两位研究者迄今未获国内外充分
肯定，屠呦呦有争议、张亭栋基本默默无闻。相关的文献埋没于冷僻的杂志和一般不易
看到的内部会议资料。基于原始中文论文、文件和采访，我们在此呈现这些发现的历史... 阅读全帖 |
|
e****s
发帖数: 1125 | 45 多聚也不完全就是disulfide bond. 你要是加了足够的DTT，就算Ni-column组分形成2
硫健，应该
也能打开。
可以试试看变化盐浓度，不知道你现在盐浓度多少。看看提高盐浓度有没有改变多聚和
单聚体间的比
例。另外，有时候盐浓度也能提高浓缩过程的的稳定性，大部分蛋白在100-500mM NaCl
比较稳定。还
有就是浓缩方法也很重要。 |
|
T****s
发帖数: 915 | 46 还是一定会和别的 C 连成disulfide bond ？
thx |
|
K******S
发帖数: 10109 | 47 blush..
I registered this ID long before I knew anything about mass spec.
Usually it's recommend to do reduction/alkylation to break disulfide bonds
and increase sequence coverage. Theoretically, all Cys should have +57 mass
shift. |
|
a******g
发帖数: 71 | 48 endostatin不是简单地一步Ni柱纯化，据我了解，应该是首先破菌，分离包涵体，充分
洗涤包涵体（洗涤过后纯度就达到90%），然后8M urea溶解，过Ni柱，然后有一步最关
键的refolding，也是罗的技术上最牛的地方。endostatin有一对跨越式disulfide
bond，在体外条件下正确形成非常困难。这一步refolding后，50%以上的endostatin能
以可溶性单体存在，其他不能refold的则聚集形成胶体，经盐诱导沉淀后与refolding
成功的部分分离。最终产品的纯度超过99%，银染无杂带。整个工艺应该还是非常
impressive的。
我也不知道前面为什么有人说his tag非得切掉。 |
|
W*****o
发帖数: 1780 | 49 Vector pET22b is good at expression of soluble proteins with disulfide bonds
in E.coli without any tag. |
|
s********n
发帖数: 2939 | 50 18个cysteine，估计有不少的disulfide bonds，你是表达在E. coli的cytoplasm？如
果是的话，misfold的可能性很大。GST增加了fusion的可溶性，切掉以后就沉淀了。 |
|
