z****u
发帖数: 1007 | 1 我一直用200mg的。。没问题。
另外有个感觉，好像我的喂dox food的老鼠比别的老鼠要壮实些，然后把dox food和普
通食物混一起，老鼠好像更喜欢dox一些。 |
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s******y
发帖数: 220 | 2 本来用的是dox in drinking water，现在想换成diet， 看到harlan的 dox diet 有两
个浓度，200mg/kg 和 625mg/kg, 怎么选择呢？
请教有经验的同学，谢谢。 |
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s******y
发帖数: 220 | 3 用dox的水喂养inducible transgenic mouse， 没有autoclave水，过了两个星期，发
现里面长了些东西，有影响吗？
需要处理水还是定期多换水？
谢谢！ |
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r***e
发帖数: 2539 | 4 这个水不能放很久，要勤换，一是DOx不稳定，二是里面加了糖会长菌。我们现在都用d
ox feed啦。 |
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s******y
发帖数: 220 | 6 不稳定的话，那老的dox水还能induce 吗？
谢谢！
用d |
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O*******f
发帖数: 926 | 7 从理论上讲，只看这个linker部分，这个酸性释放是可能的。
但是我还有几个问题（1）dox由于其细胞活性不够，对癌细胞的杀灭不是很有效，再加
上抗药性，dox已经不常用了；（2）由于albumin的最活泼的cys只有cys34，但albumin
又是最常见的一般药物的载体（非共价键结合），所以这个Aldoxorubicin有多少比例
结合到albumin上（共价+非共价），还需要测定；（3）文章中似乎暗示药物是在tumor
tissue释放的，但据我所知，albumin 在 蛋白gp60 的帮助下，是可以进入到癌细胞
内部的，而癌细胞内的pH最低可以到3，一般是4-5，所以在癌细胞内，这个albumin-
emch-dox更容易释放。tumor tisse的酸度，我记不清了，但pH一定是高于细胞内的。
药物到底在哪里释放的，还需要进一步确证；（4）其它带有cys的蛋白（比如cys,gsh
）的影响也要检测。
我觉得最大的问题是 Aldoxorubicin 是和 dox 比较的 (phase IIb)，结果还是另人振
奋的，但dox本身的空间一再被其它kinase inhibitors... 阅读全帖 |
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j*********r
发帖数: 24733 | 8 #CNNBlackmail: Outrage after network appears to threaten Reddit user
CNN was facing almost universal backlash on Wednesday after running an
article on the Reddit user who made an anti-CNN, wrestling-themed GIF
tweeted by President Trump over the weekend – and seeming to imply the
network would reveal the person’s identity if he reneged on an apology.
Andrew Kaczynski, the senior editor and founding member of the cable network
's KFile investigative team, tweeted several defenses of the article, ... 阅读全帖 |
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m*******m
发帖数: 127 | 9 关于dox的浓度，取决于cell line.
I"d recommend doing a titration and choosing
the lowest concentration that provides sufficient
expression but no toxicity. Because the unwanted
effect of dox, having a control without transfene treated
with and without dox is important.
Some cells even 0.2 ug/ml dox already inhibits cell
growth, and some can tolerate 1ug/ml dox very well. |
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m*********D
发帖数: 1727 | 10 Right. For tet-on system (in stable cell line), we even test different dox
concentration to see our protein expression level. Higher dox does induce
more our protein expression. So if you prefer a certainly level, you may
have to test.
yes.
Never tried that long. 2 days with 2 ug/ml would not kill 293 cells at my
hands. Dox has low toxicity to mammalian cells. I think it might be ok.
However, I would suggest you to test dox alone.
1-5 ug/ml is recommended. I myself used 2 ug/ml for tet-off syste... 阅读全帖 |
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m*********D
发帖数: 1727 | 11 Right. For tet-on system (in stable cell line), we even test different dox
concentration to see our protein expression level. Higher dox does induce
more our protein expression. So if you prefer a certainly level, you may
have to test.
yes.
Never tried that long. 2 days with 2 ug/ml would not kill 293 cells at my
hands. Dox has low toxicity to mammalian cells. I think it might be ok.
However, I would suggest you to test dox alone.
1-5 ug/ml is recommended. I myself used 2 ug/ml for tet-off syste... 阅读全帖 |
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f*******y
发帖数: 421 | 12 很有意思，不知道等的时间久了，还能不能激活？
2012年05月17日
Learning and memory: Artificial activation of a memory trace
记忆是如何在神经元水平上被表现的是神经科学的一个主要问题。它被认为是被一个神
经元群所编码的一个学习经验，从而形成了一个记忆印记或痕迹。如今，发表在《科学
》和《自然》杂志上的两篇论文表明，不同的记忆在海马体中具有不同的记忆痕迹，并
且一个记忆痕迹能够被人为地激活从而引发恐惧行为。
这两项研究应用了类似的方法来锁定被一段学习经验激活的神经元。Liu等人使用了紫
红质通道蛋白2（ChR2）能够在激活的齿状回（DG）颗粒细胞中被特定表达——通过使
其至于c-fos基因启动子的控制之下——的转基因小鼠。Garner等人则使用了表达一种
被认为是在激活的（表达c-Fos）神经元中的hM3Dq的DREADD（设计的受体完全由设计的
药物所激活）的小鼠。通过光线激活ChR2，或通过氯氮平-N-氧化物（CNO）激活hM3Dq
，能够导致表达这些受体的细胞开火。利用这些方法，作者能够人为再度恢复与一段特
... 阅读全帖 |
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j********r
发帖数: 156 | 13 Thanks for the replies. I do have the scramble control, and there is no
difference between minus dox and plus dox. Also another shRNA (which does
not knockdown the target gene expression pretty much based on rt and western
data) doesn't show dox-induced cell death.
This gene product seems highly transforming. I am wondering how cell death
occurs in the presence of increased phosphorylation of those growth/
transformation-correlated factors, like s6 and Erk. (though it is possible
they might co-e... 阅读全帖 |
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D*****l
发帖数: 554 | 14 四。五年前，我们实验室一个博后，玩了一个可诱导的转基因老鼠，和我knockout的老
鼠是同一个基因，那个老兄三年前离开实验室。后来这个老鼠系传到我手上，当时不知
道这个老鼠系能不能诱导（Doxcycline),所以没有人愿意接手， 老板一定要我接手，
我试了一下，加了DOX后，转基因量提高了10---20 倍，觉得还行，能用。然后我就把
这个可诱导的转基因和癌基因交配在一起，这个癌基因能导致皮肤癌。我选了50个皮肤
肿瘤都含有癌基因和可诱导的转基因， 25个作对照，25个用DOX.
DOX处理组，13个肿瘤两个星期消退，其余12个肿瘤慢慢在退。
对照组，25个肿瘤几乎不变。
老板很高兴， 道听途说，拿了一大堆的计划，做不完。
实验室资金不足，人手不够，活儿太多，真要我的命！ |
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i*******n
发帖数: 48 | 15 我以前用dox-containing water,浓度没那么高，不会沉淀。（水里加点糖，老鼠可能
不喜欢喝dox水）
现在我们把dox做到food里面。
灌胃对小鼠伤害太大。
doxycycline |
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s*****g
发帖数: 7857 | 16 你们在引发TET-ON一天后就有蛋白水平反应
那么再用药物处理细胞时，是否还要让DOX和处理的药物共存在培养基中？
DOX如果处理一周，细胞会死亡么？
针对你们的细胞，DOX的浓度是多少？
谢谢！ |
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s*****g
发帖数: 7857 | 17 你们在引发TET-ON一天后就有蛋白水平反应
那么再用药物处理细胞时，是否还要让DOX和处理的药物共存在培养基中？
DOX如果处理一周，细胞会死亡么？
针对你们的细胞，DOX的浓度是多少？
谢谢！ |
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x****d
发帖数: 2239 | 18 所以说你们猪党就是一帮猪。
Democratic Staffer For Sheila Jackson Lee Arrested In GOP Doxing
A 27-year-old intern for Rep. Sheila Jackson Lee (D-TX) has been arrested by
the US Capitol Police for posting private, identifying information (Doxing)
of several Senators to Wikipedia, according to the USCP, after the personal
information of Republican Senators Lindsey Graham, Mike Lee and Orrin Hatch
was posted to Wikipedia Thursday during the hearing of Supreme Court
nominee Judge Brett Kavanaugh, which included h... 阅读全帖 |
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r***e
发帖数: 2539 | 19 lentivector 转录整个病毒RNA的promoter在5UTR 前面，内部还有自己的Promoter。
有时候内部的Promoter和你的基因配合不好，但是还可以从外部promoter表达。
一个例子就是Tet on vector，要感染才能用dox调控，转染的话，不用dox都表达，就是
从外部promoter。
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z*******t
发帖数: 21 | 20 我也用的是pTRIPZ，In-vivo用的是水加Dox。配方如下：
0.5gDox溶于23mL 50% 蔗糖溶液中，注入230mL（8OZ)袋装水中。终浓度：Dox，2mg/mL
，蔗糖，5%。水上盖锡箔纸避光，一周一换。
用qPCR可以检测到RFP表达，说明此浓度可用。
试过注射和灌胃。灌胃伤害太大，腹腔注射好像导致了腹水，原因不明。也试过食物（
找别人借的），老鼠不太爱吃，不过效果不错，也可以诱导RFP表达，只是太贵，好像
一买就是一个大包装，我用不了那么多，后来就一直用水了。 |
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s*****i
发帖数: 315 | 21 tet off要天天喂DOX，是不是太贵了？而且我听说tet-off leakage也不小，不知道有
没有文章介绍两个系统的比较
Clontech的 3G系统更加灵敏，他们的TRE sequence 和 Tet protein都有变化，3G的
Tet protein 可以识别原来的TRE sequence，但是反过来我没有试过。
感觉好像是3G的Tet protein对 DOX更敏感，3G的TRE会降低leakage |
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m******t
发帖数: 109 | 22 在用LACZ 作 LINEAGE TRACING。 LACZ 是DOX INDUCED的。 现在的问题是没有蓝色出
来了。同时的POSITIVE CONTROL是有的， 说明染色是没问题的。 可能１， DOX没作用
到， ２ 多次CROSS把哪里弄坏了。 请有经验的各位指导一下。 多谢 |
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s*****g
发帖数: 7857 | 23 我做了浓度梯度3天测试。找出毒性小的最高浓度。做了4 天的处理。
24h DOX Induction, then 3 days Drug treatment with DOX.
至于蛋白量需要WB 检测。但是MTS显示了我预期的结果。显微镜下也看到了细胞形状的
变化(Apoptosis/cell death)。
Negative control and shRNA knockdown 在细胞viability上有着显著的差异！
万分感谢！ |
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d****o
发帖数: 32610 | 25 在落后5年后美帝人民终于发明出了人肉搜索——doxing |
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b********n
发帖数: 38600 | 26 Havocscope Black Market
http://www.havocscope.com/
AK-47 and Other Guns on the Black Market
Afghanistan$1,500
Afghanistan-Kabul$1,500 for US issued Night Vision Googles
Australia$15,493 in Sydney
Average price of AK-47 worldwide$534
Canada$2,000 for handgun, $600 to rent
Europe$400 to $900 for Rocket Launchers and AK-47s
Iraq$800, with Osama Bin Laden’s favorite model for $2,000
Iraq-Bullets$0.15 to $0.45 per bullet
Iraq-Rocket Launcher$100, $50 per grenade
Mexico-AK-47$1,400 on US border/$3,000... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 27 事实证明赢取美丽白妞还是要靠老将！
Top comments
My boyfriend is Chinese and he explained this whole thing to me, including
the whole chinese dissident context. To those chinese students who support
CCP that much that they doxed someone who felt different about CCP and
verbally threatened him, you dont deserve my respect or anything beautiful
of the free world.
Michelle Brueggenthies, Australia13 hours ago
106
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X****i
发帖数: 1877 | 28 【 以下文字转载自 Stock 讨论区 】
发信人: XiuShi (致力为花街散财，造福散户), 信区: Stock
标 题: $【2018年9月13日700个股票的短期谷底高峰预测】$
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Aug 3 10:33:45 2018, 美东)
$【2018年9月13日最新的700个股票的短期谷底和高峰价的预测】$
【顶到99楼，就发更多得多最新并且更好机会的预测。】
【本想提供一千五百个预测，最后决定只提供一部分。】
【原因是，股版XMJDH的居多，忌才，典型劣币驱逐良币。】
对比预测，如果股价越极端，散户获暴利的机会和风险其实反而越佳。
花街的捣蛋，挤空或砸价，其实是制造极端价供精明的散户收割暴利。
花街这么做绝非善意，而是要吓唬散户在其人为的极端价割肉出局。
花街有用之不尽的代理基金和资金充炮灰，可以任性的挤高峰砸谷底。
花街有别人的代理钱来任性，用大量炮灰钱可以买出涨价，砸出跌价。
股票最不定因素，就是花街每天对散户的捣蛋，尤其挤高峰和砸谷底。
以下是为蝌蚪们提供的最基本，炒股绝对须要遵守，的注意事项：
1. 预备大量(>=50%)现金，准... 阅读全帖 |
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X****i
发帖数: 1877 | 29 【 以下文字转载自 Stock 讨论区 】
发信人: XiuShi (致力为花街散财，造福散户), 信区: Stock
标 题: Re: $【2018年9月17日700个股票的短期谷底高峰预测】$
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Sep 15 16:42:57 2018, 美东)
$【2018年9月17日最新的700个股票的短期谷底和高峰价的预测】$
【顶到99楼，就发更多得多最新并且更好机会的预测。】
【本想提供一千五百个预测，最后决定只提供一部分。】
【原因是，股版XMJDH的居多，忌才，典型劣币驱逐良币。】
对比预测，如果股价越极端，散户获暴利的机会和风险其实反而越佳。
花街的捣蛋，挤空或砸价，其实是制造极端价供精明的散户收割暴利。
花街这么做绝非善意，而是要吓唬散户在其人为的极端价割肉出局。
花街有用之不尽的代理基金和资金充炮灰，可以任性的挤高峰砸谷底。
花街有别人的代理钱来任性，用大量炮灰钱可以买出涨价，砸出跌价。
股票最不定因素，就是花街每天对散户的捣蛋，尤其挤高峰和砸谷底。
以下是为蝌蚪们提供的最基本，炒股绝对须要遵守，的注意事项：
1. 预备大量(>=50%)... 阅读全帖 |
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X****i
发帖数: 1877 | 30 【 以下文字转载自 Stock 讨论区 】
发信人: XiuShi (致力为花街散财，造福散户), 信区: Stock
标 题: 【2019年1月9日的 1,200 个股票的短期谷底和高峰的预测】
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Jan 9 19:01:30 2019, 美东)
【2019年1月9日的 1,200 个股票的短期谷底和高峰的预测】
熊市策略是逢高峰就卖空，谷底补空平仓，如此周而复始。要少做多。
熊市性质是多数日子前盘价位高，后盘价位低，如此制造下跌的趋势。
对比预测，如果股价越极端，散户获暴利的机会和风险其实反而越佳。
花街的捣蛋，挤空或砸价，其实是制造极端价供精明的散户收割暴利。
花街这么做绝非善意，而是要吓唬散户在其人为的极端价割肉出局。
花街有用之不尽的代理基金和资金充炮灰，可以任性的挤高峰砸谷底。
花街有别人的代理钱来任性，用大量炮灰钱可以买出涨价，砸出跌价。
股票最不定因素，就是花街每天对散户的捣蛋，尤其挤高峰和砸谷底。
以下是为蝌蚪们提供的最基本，炒股绝对须要遵守，的注意事项：
1. 预备大量(>=50%)现金，准备用来收割花街人为制造的捣蛋极端价... 阅读全帖 |
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X****i
发帖数: 1877 | 31 【 以下文字转载自 Stock 讨论区 】
发信人: XiuShi (致力为花街散财，造福散户), 信区: Stock
标 题: 【2019年1月11日 888 个股票的短期谷底高峰预测】
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jan 11 09:45:27 2019, 美东)
【2019年1月11日 888 个股票的短期谷底高峰预测】
【2019年1月11日的 888 个股票的短期谷底和高峰的预测】
熊市策略是逢高峰就卖空，谷底补空平仓，如此周而复始。要少做多。
熊市性质是多数日子前盘价位高，后盘价位低，如此制造下跌的趋势。
对比预测，如果股价越极端，散户获暴利的机会和风险其实反而越佳。
花街的捣蛋，挤空或砸价，其实是制造极端价供精明的散户收割暴利。
花街这么做绝非善意，而是要吓唬散户在其人为的极端价割肉出局。
花街有用之不尽的代理基金和资金充炮灰，可以任性的挤高峰砸谷底。
花街有别人的代理钱来任性，用大量炮灰钱可以买出涨价，砸出跌价。
股票最不定因素，就是花街每天对散户的捣蛋，尤其挤高峰和砸谷底。
以下是为蝌蚪们提供的最基本，炒股绝对须要遵守，的注意事项：
1. 预备大量(>=... 阅读全帖 |
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X****i
发帖数: 1877 | 32 【 以下文字转载自 Stock 讨论区 】
发信人: XiuShi (致力为花街散财，造福散户), 信区: Stock
标 题: 【2019年2月6日 666 个股票的短期谷底高峰预测】
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Feb 6 08:58:12 2019, 美东)
【2019年2月6日 666 个股票的短期谷底高峰预测】
如果股价接近预测的短期高峰或谷底，开市后应对比当天的最高和最低价。
虽然预测窗口是4星期内，多数股票一旦达到或高于预测的高峰后就下跌。
比较后能切身体会预测的犀利度，从而洞悉在预测的高峰价卖空的安全度。
比较多次有利体会超短期，即当日交易(DayTrade)的暴利机会和安全度。
预测的短期谷底和高峰都是特有利的价位，再加分散风险，一般很难不赚
(价格到小数点4未数，只是方便万一是超低价的OTCBB股票时的排列)
以下各栏依次为：
排号，年月日，股票符号，短期谷底价，【收市价】，短期高峰价
所以收市价的左边是短期谷底价，右边是短期高峰价。
这样应该更方便比较，更容易看出股价是接近谷底或高峰。
#001, 190205, AAGIY , 35.4836,... 阅读全帖 |
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b*****d
发帖数: 61690 | 46 愣能把一个对自己有利的事情玩成了不利的事情。真是人才难得。
CNN issued a statement denying that its reporters blackmailed a Reddit user
involved in the making of a viral anti-CNN meme after massive social media
backlash Wednesday.
In the statement, the news network pushes back on reports from Donald Trump
Jr. and others claiming it had "blackmailed" a 15-year-old Reddit user,
saying in a statement that the user was an adult and that he had apologized
before speaking with CNN.
"CNN decided not to publish the name of the Reddi... 阅读全帖 |
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b*****d
发帖数: 61690 | 47 U.S. Capitol Police on Wednesday arrested a suspect for allegedly "doxing"
one or more GOP senators by posting their private information online.
The suspect, 27-year-old Jackson Cosko of Washington, D.C., has been charged
with publicizing restricted personal information, witness tampering, second
-degree burglary, threatening interstate communications, unauthorized use of
a government computer, identity theft, and unlawful entry, according to a
Wednesday press release.
The Capitol Police declin... 阅读全帖 |
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X****i
发帖数: 1877 | 48 【 以下文字转载自 Stock 讨论区 】
发信人: XiuShi (致力为花街散财，造福散户), 信区: Stock
标 题: 【2019年1月9日的 1,200 个股票的短期谷底和高峰的预测】
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Jan 9 19:01:30 2019, 美东)
【2019年1月9日的 1,200 个股票的短期谷底和高峰的预测】
熊市策略是逢高峰就卖空，谷底补空平仓，如此周而复始。要少做多。
熊市性质是多数日子前盘价位高，后盘价位低，如此制造下跌的趋势。
对比预测，如果股价越极端，散户获暴利的机会和风险其实反而越佳。
花街的捣蛋，挤空或砸价，其实是制造极端价供精明的散户收割暴利。
花街这么做绝非善意，而是要吓唬散户在其人为的极端价割肉出局。
花街有用之不尽的代理基金和资金充炮灰，可以任性的挤高峰砸谷底。
花街有别人的代理钱来任性，用大量炮灰钱可以买出涨价，砸出跌价。
股票最不定因素，就是花街每天对散户的捣蛋，尤其挤高峰和砸谷底。
以下是为蝌蚪们提供的最基本，炒股绝对须要遵守，的注意事项：
1. 预备大量(>=50%)现金，准备用来收割花街人为制造的捣蛋极端价... 阅读全帖 |
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r******o
发帖数: 81 | 49 2012 BEETLE 基本款。
19850 + 6%tax + 250 dox fee
was on the way to sign the RAV4 (25000 ODT), and changed the mind then... |
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x*****n
发帖数: 37 | 50 不建议交易打印胖子；胖子是免费的，收费的是服务:
出售/交换物品的名称:
Pampers Coupons
物品类别（coupon：mfc等；血糖仪等）:
MFC:
Pampers $1.50 (5/31/10) X2;
Pampers Diapers or Pants AND Pampers Wipes 60ct+ $2 (5-31-10) X2
Pampers Doxed Diapers (Target Logo, 6-18-10) X2
物品来源（报纸夹页，厂家邮寄等）:
报纸夹页
可接受的价格（必须明码标价，必填）:
$1包邮
邮寄损失方式哪方承担（若需邮寄，必填）:
寄出后,你
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