a****8
发帖数: 2771 | 1 现在还有多少server用freeBSD? 你太搞笑了
http://news.netcraft.com/
Most Reliable Hosting Company Sites in January 2012
Rank Company site OS Outage
hh:mm:ss Failed
Req% DNS Connect First
byte Total
1 Swishmail FreeBSD 0:00:00 0.004 0.100 0.073 0.147
0.330
2 INetU Windows Server 2008 0:00:00 0.007 0.063 0.045 0
.172 0.314
3 Multacom FreeBSD 0:00:00 0.007 0.186 0.093 0.188 0
.398
4 Server Intellect Windows Serv... 阅读全帖 |
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b******y
发帖数: 547 | 2 听说Business intelligence是热门？
Business intelligence (BI) refers to computer-based techniques used in
identifying, extracting and analyzing business data, such as sales revenue
by products and/or departments, or by associated costs and incomes.
BI technologies provide historical, current and predictive views of business
operations. Common functions of business intelligence technologies are
reporting, online analytical processing, analytics, data mining, business
performance management, benchmarking... 阅读全帖 |
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c*****d
发帖数: 6045 | 3 3.
举个例子，当学习bitmap index的时候，
a. 什么是bitmap index
b. 为什么要用bitmap index
c. bitmap index和b-tree index在应用上有什么区别？谁适合oltp,谁适合dss？
d. 为什么有这样的区别，bitmap index和b-tree index在结构上有什么区别？
e. b-tree index存储null值吗？bitmap呢？
f. 怎么证明b-tree or bitmap index是否存储null值？ |
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c*****d
发帖数: 6045 | 4 3.
举个例子，当学习bitmap index的时候，
a. 什么是bitmap index
b. 为什么要用bitmap index
c. bitmap index和b-tree index在应用上有什么区别？谁适合oltp,谁适合dss？
d. 为什么有这样的区别，bitmap index和b-tree index在结构上有什么区别？
e. b-tree index存储null值吗？bitmap呢？
f. 怎么证明b-tree or bitmap index是否存储null值？ |
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n**********l
发帖数: 271 | 5 你们怎么做PCI DSS compliance的？ |
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c****3
发帖数: 10787 | 6 国内的视频网站现在搞得好，在线视频，1080p，720p有乐视盒子，小米盒子之类的专
门网络播放器。乐视网的我是歌手第二季，全屏播放超过5亿人次，流量比美国的视频
网站高多了。
乐视流媒体服务器是用C++写的，所以能撑住这种流量。好奇看了它的流媒体招聘广告
，要求是C/C++开发，熟悉DSS、Helix等项目，有Linux平台开发经验 |
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n******e
发帖数: 623 | 8 跟SKY-MAP.ORG比较了一下，极限星等大约有14等，虽然数据量不如SKY-MAP.ORG的DSS
survey，不过速度很快，亮度和颜色增强也做得没那么假。可以打开星座连线提示，还
有行星位置。当作在线星图用还不错。 |
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s****9
发帖数: 932 | 9 I would recommend colitis model. Both Fiona's one (needs adaptive transfer)
and DSS treated model (no transfer requirement) are fine.
For EAE, CIA, Th17 cells mediated disease pathogenesis as well. IFNgKO mice
have exacerbated EAE and CIA, whereas IFNgKO or TbetKO mice do not develop
colitis. |
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s**u
发帖数: 9035 | 10 NEW T32 Training Grant in Cancer Biology at the University of Maryland
We are very pleased to announce that the application for an NIH T32 Training
Grant in Cancer Biology that was submitted in January 2010 was approved for
funding by the National Cancer Institute.
We are funded for a 5 year period, with 4 slots in the first year and 8
slots in the subsequent years. NCI has limitations on the categories of
trainees, with a 1:3 ratio of graduate students to postdoctoral trainees.
At this time, ... 阅读全帖 |
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s**u
发帖数: 9035 | 11 NEW T32 Training Grant in Cancer Biology at the University of Maryland
We are very pleased to announce that the application for an NIH T32 Training
Grant in Cancer Biology that was submitted in January 2010 was approved for
funding by the National Cancer Institute.
We are funded for a 5 year period, with 4 slots in the first year and 8
slots in the subsequent years. NCI has limitations on the categories of
trainees, with a 1:3 ratio of graduate students to postdoctoral trainees.
At this time, ... 阅读全帖 |
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k****o
发帖数: 589 | 12 最近几天用Pierce的Seize X Protein A kit做IP，要沉淀的是一个膜受体。用的抗体
（兔IgG）应该没有问题，因为做WB和flow cytometry都成功。使用了DSS让抗体和
Protein A交联。用了300～400 ug total protein沉淀，4度翻转过夜。之后清洗用的
是自己照着kit说明配的PBS,用kit自带酸性elution buffer洗脱，收集了3个组分。可
是之后用SDS-PAGE+WB检测，受体的带完全没有。我知道这个受体肯定是表达的。请问
可能原因有哪些？
另外Seize X的kit刚好用完，有没有什么其他的kit便宜质量又不错的？曾经考虑过
dynabeads，但是貌似还得另买一台磁力沉淀器？
多谢！ |
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V********n
发帖数: 305 | 13 仅供参考。
可能出的状况
1）不理解为什么要用DSS？交联后抗体是否还有活性需要检测。
2）elution buffer是否能洗脱目标蛋白？建议直接加上样buffer。
3）细胞裂解条件是否合适，IP时的buffer条件是否合适？做IP的细胞裂解条件是否和
之前WB检测时的一致。膜蛋白可能需要比较强烈的buffer条件。但同时，IP的buffer条
件可能不能太极端，需要摸条件。 |
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p******i
发帖数: 1092 | 14 你用DSS是因为不想在elution里看到IgG吗？
如果你那个蛋白的size离heavy chain light chain不近，
你先试试不用cross-link做IP好了……
你elution volume是多少？都跑胶了吗？
如果volume大可以concentrate一下，全跑
这个KIT你可以自己order各个试剂，elution buffer也可以找到recipe啊
另外，顶楼上，膜蛋白不好做，搜一搜别人的paper，看用的是什么条件
IP的抗体也要多试几个……
300-400ug有点少啊，多弄点sample啊 |
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k****o
发帖数: 589 | 15
用DSS是为了让抗体不被洗脱，以后还可以重复用agarose beads。交联这一步我是严格
按照厂家的protocol做的。Elution buffer根据厂家描述是酸性，pH2~3。洗脱应该是
没有问题的。洗脱后没有中和pH,但是厂家说这样没有问题。细胞裂解用的是Cell
Signaling的lysis buffer，用来做相同蛋白的WB从没有问题发生过。
你是建议我用Laemmli Sample Buffer洗脱吗？这样即使洗脱，agarose beads也无法重
复用了吧？ |
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k****o
发帖数: 589 | 16
用DSS一是不想看到IgG的带，还有就是当初想重复用agarose beads，因为IP需要的抗
体量太大了，想省钱。
洗脱体积是190 ul，IP前的total protein加了350 ug，洗脱后用了36 ul跑胶。
用那么多蛋白做IP实属无奈，我用的是原代细胞，只有那么多量。
请推荐个浓缩洗脱组分的办法吧，可以的话我打算把剩下的样全跑胶了。 |
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V********n
发帖数: 305 | 17 个人建议。不要光想着省试剂钱，你的时间也很值钱的。不如用最优化的条件做一遍，
得到正结果后再改进来省银子。几点你可能需要注意。
１）SC的抗体很多不靠谱。当然，也有好的。
２）最好不要用DSS。蛋白交联情况和处理时间有关，结果无法用其他实验验证。如果
是这一步的问题，你都无从查找。
３）低PH洗脱液可以从Agarose上洗脱抗体，但是否能保证打开蛋白－抗体的结合未知
，与多种因素相关。
４）你IP时的缓冲体系是什么，不会是１XCS的裂解液吧。
５）你蛋白上样太少了。直接加小体积上样Buffer煮，全上了做WB。
６）膜蛋白IP不好做。 |
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p******i
发帖数: 1092 | 18 虽然SC说抗体能IP，建议你最好用自己的sample做个routine的IP+Western试一下。确
定能IP了，再考虑CROSS LINK？
有关重复用agarose beads的问题
1 IP需要多少抗体？没觉得省很多啊……既然用的是原代细胞，你的DISSECTION和
CULTURE的人工费用应该比抗体贵很多吧
2 要确保经过 1和DSS反应 2被ELUTION buffer摧残 后的抗体仍然好用……
浓缩洗脱组分（随便换buffer或者desalt）可以用spin column，
参见
http://www.life.sci.qut.edu.au/epping/LSB607OLT/607concentrator |
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k****o
发帖数: 589 | 19 多谢大家帮忙！下次试试不加DSS，浓缩洗脱组分。抗体差不多用完了，也可以换家试
试。 |
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S**********e
发帖数: 1789 | 20 给你看看我们系刚进来的助理教授
Vanderbilt University School of Medicine
Fingleton, Barbara Mary , Ph.D. Assistant Professor of Cancer Biology
Publications
Barrett, CW, Fingleton, B, Williams, A, Ning, W, Fischer, MA, Washington, MK
, Chaturvedi, R, Wilson, KT, Hiebert, SW, Williams, CS. MTGR1 is required
for tumorigenesis in the murine AOM/DSS colitis-associated carcinoma model.
Cancer Res, 71(4), 1302-12, 2011.
Koon, HB, Fingleton, B, Lee, JY, Geyer, JT, Cesarman, E, Parise, RA, Egorin,
MJ, Dezube, BJ... 阅读全帖 |
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m*********r
发帖数: 49 | 21 都准备从Sigma买Protein A beads了然后自己crosslink了，又从Thermo搜到Crosslink
+ CoIP的kit，用的是disuccinmidyl suberate (DSS)，貌似也不贵多少，还省事。有
人用过这个的推荐么？Kit好像也有magnetic和agarose的可以选，是不是一般magnetic
的方便点？ |
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m********8
发帖数: 314 | 22 RNAi治疗现在发展到什么程度了？难道体内药物递送不再是问题了吗？看这篇文献，这
个药物载体的构建都不在正文里提了。 Supplementary Methods里面的图1（S-Figure
1 Schematic diagrams illustrating the preparation of (DSS)6-liposome-siRNA
and the evaluation in vitro）显示SiRNA和带骨靶向多肽的脂质体混一下就能得到有
效装载SiRNA的靶向性药物了。这个是成熟可靠的方法的话，那么RNAi治疗前景应该非
常好？
A delivery system targeting bone formation surfaces to facilitate RNAi-based
anabolic therapy. Nature Medicine 18, 307–314 (2012) doi:10.1038/nm.2617
http://www.nature.com/nm/journal/v18/n2/extref/nm.2617-S1.pdf |
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s********n
发帖数: 319 | 23 PA amazon不错的书(补充：就是REVIEW很不错的）本年度以来我已经看过了10本左右基本没看到书，都很烂，我关注的是Class E, AM, collector modulated, 100 watt左右的，基
本没什么书application notes看得也是tens of,讲得很泛
1970年前后的经典paper有些不错，不能直接用，有变化，保护电路讲得很少
有用的知识都在ham里面的实际design，和数字接口的更少，但是有些DSS的design
基本还是没有类似高速数字设计black magic那类书。
maybe some people have more ideas? |
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R*******t
发帖数: 367 | 26 来自主题: Medicalpractice版 - 两个病例 SITE OF BIOPSY:A: Fine needle aspiration of Breast, right
FINAL CYTOPATHOLOGICAL DIAGNOSIS
Interpretation: NEGATIVE FOR MALIGNANT CELLS.
See microscopic.
MICROSCOPIC:
This aspirate contains small, mature appearing lymphocytes. The
differential
diagnosis includes seroma and intramammary lymph node. Clinical
correlation
suggested.
***Electronically Signed Out***
, MD, Senior Staff Pathologi... 阅读全帖 |
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l*******m
发帖数: 1096 | 28 DSs in google and facebook are usually called quantitative engineers (job
title). Usually, they don't have CS degrees. ML researchers/engineers are
just SE in machine learning. |
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w*******y
发帖数: 60932 | 29 CyberPower
1500VA/900Watts
Un-interruptible Power Supply
8 Outlet
LCD Diagnostic Display
ADDED VALUE: TRVL918 Travel Surge
The Intelligent LCD Series CP1500AVRLCD UPS, designed for mid to high-end
computer systems, features dynamic line conditioning and a LCD diagnostic
display.
Real-time system vitals can be viewed from this Crystal-Blue (see below)
display. The unit can be conveniently mounted in a workstation cabinet, or
directly on the desktop. The CP1500AVRLCD guards against surges/spikes, ... 阅读全帖 |
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t********r
发帖数: 4908 | 32 ☆─────────────────────────────────────☆
sissymom (sleepy......why!) 于 (Mon Feb 1 13:13:57 2010, 美东) 提到:
原来的打算，趁爷爷奶奶在，１年级头半年咱们就不AS了，争取家里有大人在的时候监
督她把作业做了，最好再抓一下中文。等下学期再去AS不迟。
结果今天听说我们这里学校AS很难报名的，半途想进去很困难。;s
☆─────────────────────────────────────☆
lanfear (放养派推妈) 于 (Mon Feb 1 13:35:33 2010, 美东) 提到:
到第二个学期再说吧。到时候小茜对学校熟悉了，就算去不了onsite AS也可以去其它
的吧。从省钱的角度说，就算off site贵一点，也先省了半年银子呢。
不过也要从小朋友的角度来分析，不去AS会不会太闹，爷爷奶奶是否handle的了。我家
那个混世小魔王，大家都说了，一定得去AS。
☆─────────────────────────────────────☆
Frid... 阅读全帖 |
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