y*****y 发帖数: 3433 | 1 ☆─────────────────────────────────────☆
crabber (捕蟹者*一蓑烟雨任平生) 于 (Sat Apr 5 18:51:55 2008) 提到:
经过一番挑选,先后把Specialized Sirrus(太重),Trek 7.5& 7.6 FX (架子的top
tube 太短,而standover height 也不太适合自己:S的太矮,M的太高) 排除了。最
后在Giant FCR (1&2) 和 Cannondale Road Worrior 2 之间做出了选择,原因是Giant
FCR 1 比Warrior 轻,便宜,而且配置更好,至于舒适度 我认为G and C 都差不多;
选 FCR 1而不是2是因为就100块钱的差距 1 比2升级了不少东西。
随便码了点字,供后来买车的人参考。
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crabber (捕蟹者*一蓑烟雨任平生) 于 (Sat Apr 5 18:54:15 2008) 提到:
中午拿到车,下午就去搞了40 miles:累! |
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b******s 发帖数: 5365 | 2 用的抗体和isotype都是和flow一样的.做confocal 时先用4%PFA fix然后用0.1%
triton-X100 permeablize.应该不是通透性的问题,因为我同时染了另一个细胞内蛋白,
那个的染色信号就很好.
请问你用什么做block FcR?你说一起做,是不是指把block FcR的 reagent 和二抗血清
混合一起孵?谢谢!
cofocal
内。 |
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b******s 发帖数: 5365 | 3 从来没有做过B cell,现在要在B cell line里看一个细胞内蛋白,用一样的抗体,flow
cytometry没问题但做cofocal isotype control 的背景很强.目前为止blocking 效果
最好的就是老鼠血清(用的抗体是monoclonal mouse antibody directly conjugated
with Alexa Fluor),但问题是背景没了,信号也弱了好多.这个实验组和isocontrol 比
起来亮不了多少.现在打算用1抗加2抗做,一般是用和二抗同种的血清来做blocking,但
听之前染过这个蛋白的人说,二抗血清对B cell Fc没什么作用.我的问题如下:
1. 不知道这种情况下能不能先做Fc blocking再用二抗血清block?
2.Caltac Laboratories (now belong to Invitrogen)原来有个抗CD32,但不连接荧光
素的已经不卖了,而且那个也是从老鼠养出来的.请问有什么非老鼠的抗体或血清适合做
human B cell FcR blocking?
3. 做co-staining 的... 阅读全帖 |
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o**d 发帖数: 3080 | 4 你做confocal用的isotype control是和做flow用的一样吗?
一般做flow都是先block FcR加封闭(我一般是一起做),再染色,所以我想做cofocal
应该也一样。
你说你的目的蛋白是胞内的,那么做flow的时候一定做了破膜,我对cofocal不是很了
解,但是你是否也应该增加膜的通透性?因为也用可能是你的antibody没有进到细胞内。
希望对你有帮助。 |
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w*****n 发帖数: 142 | 5 【 以下文字转载自 Eb5 俱乐部 】
发信人: windben (不戒), 信区: Eb5
标 题: 纽约NYCRC网队NBA的eb-5项目大揭秘
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Oct 14 12:50:05 2010, 美东)
纽约的主流媒体例如New York Post,Observer(三大纽约主要媒体之二,就差NYTimes
了)加入了报道。最近几天Brooklyn的大汉堡包的投资移民项目吵得沸沸扬扬,区长因
为压力不得不放弃他的中国之行,项目方承认没有新的工作职位额外针对中国投资者的
产生,有中国人的事情。来帮助建设Brooklyn了,呵呵。王石,潘石屹应该加进来,是
个很好的广告呀。
以下内容转自Norman Oder的博客
对于未有读过有关由纽约市区域中心(NYCRC)运行的EB-5投资移民计划及其招揽潜在
中国投资者投资于大西洋场/巴克莱中心项目的宣传论点的报导的人 士,以下是一列
重点关注问题的摘要:
1) 尽管所有宣传材料都是有关巴克莱中心体育场(如下面的图形显示),这个EB-5项
目与篮网队或美国职业篮球协会(NBA)并没有直接的关联。
位于布鲁克林... 阅读全帖 |
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w*****n 发帖数: 142 | 6 纽约的主流媒体例如New York Post,Observer(三大纽约主要媒体之二,就差NYTimes
了)加入了报道。最近几天Brooklyn的大汉堡包的投资移民项目吵得沸沸扬扬,区长因
为压力不得不放弃他的中国之行,项目方承认没有新的工作职位额外针对中国投资者的
产生,有中国人的事情。来帮助建设Brooklyn了,呵呵。王石,潘石屹应该加进来,是
个很好的广告呀。
以下内容转自Norman Oder的博客
对于未有读过有关由纽约市区域中心(NYCRC)运行的EB-5投资移民计划及其招揽潜在
中国投资者投资于大西洋场/巴克莱中心项目的宣传论点的报导的人 士,以下是一列
重点关注问题的摘要:
1) 尽管所有宣传材料都是有关巴克莱中心体育场(如下面的图形显示),这个EB-5项
目与篮网队或美国职业篮球协会(NBA)并没有直接的关联。
位于布鲁克林的发展商——森林城市拉特纳(FCR)——希望取得$2.49亿美元的额外资
金,主要为建立一个新的铁路场。纽约州和地方政府授予特许权给 FCR,以建立一个篮
球馆,并同时允许其企业发展毗邻的地段作为住宅及商业用途,而授予此特许权其中一
条件是FC... 阅读全帖 |
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g*****Q 发帖数: 2 | 7 研究FcR的文章中经常提到用免疫复合物(IC)刺激细胞,有的又是交联FcR啥的,由于
本人周围没有人做自己也是一知半解,所以想请教大家,关于实验中用的免疫复合物地
刺激,是自己购买IgG然后制备的,还是有公司提供商品化地刺激剂呢(如有是什么公
司呢),对于交联FcR的是否有专门的产品还是也用的免疫复合物呢?
如果有人做这方面,希望能给个制备IC的protocol,万分感激。
q******[email protected] |
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S*********4 发帖数: 5125 | 8 美国航天飞机时代宣告结束
张梦然
2011年07月22日07:49 来源:《科技日报》 手机看新闻
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美国东部时间7月21日5时58分(北京时间21日17时58分),美国“阿特兰蒂斯”号航天
飞机成功返回地面。
2003年2月1日,“哥伦比亚”号航天飞机返回地球时发生解体事故。
1986年1月28日,“挑战者”号航天飞机升空73秒后发生爆炸,导致机上7名机组人员全
部罹难。
1995年6月,“阿特兰蒂斯”号与俄罗斯和平号空间站实现历史性的一幕——对接。
美国东部时间7月21日5时58分(北京时间21日17时58分),美国“阿特兰蒂斯”号
航天飞机在肯尼迪航天中心安全着陆。由于这是最后一架穿梭于天际的航天飞机,此次
着陆也意味着美国为期30年的航天飞机项目宣告终结。
美国航天飞机于1981年首次发射,一路走来每一步都是人类航天探索的记忆和感情
。其30载历程,功勋与诟病并存、欢颜与悲歌交会,棋枰荣辱,翻覆如斯。
即便到了航天飞机卸甲归田的这一刻,它的身前身后仍不安宁——回首成败,其身
前事究竟会剩得几行青史几句是非?而在其身... 阅读全帖 |
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l******5 发帖数: 3030 | 9 Please direct contact the Recruiter
Please send MS Word copy of your resume to s****[email protected] as well as
the best number to reach you. I will follow up with you as quickly as
possible.
Position Details:
Pay Rate: ~Based on Experience
Location: Denver, CO
Start Date: Immediate after selected
Length of Position: Long Term
Clearance Level: Active TS/SCI
POSITION DESCRIPTION/OVERVIEW
Performs engineering, implementation, change management and remedial support
to a national security customer tra... 阅读全帖 |
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X****i 发帖数: 1877 | 10 $【2018年7月25日404个股票的短期谷底高峰预测】$
【喜欢就顶,顶到99楼,就再次发最新并且更好更多机会的预测。】
对比预测,如果股价越极端,散户获暴利的机会和风险其实反而越佳。
花街的捣蛋,挤空或砸价,其实是制造极端价供精明的散户收割暴利。
花街这么做绝非善意,而是要吓唬散户在其人为的极端价割肉出局。
花街有用之不尽的代理基金和资金充炮灰,可以任性的挤高峰砸谷底。
花街有别人的代理钱来任性,用大量炮灰钱可以买出涨价,砸出跌价。
股票最不定因素,就是花街每天对散户的捣蛋,尤其挤高峰和砸谷底。
以下是为蝌蚪们提供的最基本,炒股绝对须要遵守,的注意事项:
1. 预备大量(>=50%)现金,准备用来收割花街人为制造的捣蛋极端价。
2. 只用50%的现金做买卖的预算,分散风险在10到20个不同的股票里。
3. 一旦价格接近预测的谷底或高峰,就开始用短期的趋势线跟踪。
4. 如果价格比预测极端,意味花街可能在捣蛋,即挤空或砸价。
5. 既然花街意在制造极端价,那就耐心的避其锐气,袭其惰归。
6. 所以只要短期趋势线没破,就不下单,不加码,不管价位多极端。
7. 这样才能充分利用花街制造的... 阅读全帖 |
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p***o 发帖数: 264 | 11 琢磨了很久,徘徊在Giant FCR 3,Fuji Sunfire 3.0 和Trek 7.2FX之间,一开始敲定
Giant FCR3,毕竟不支持国产,还支持台湾同胞的产品。不巧,跑去local store买的
时候,店里没有现货,需要预定。热情一下子被浇灭。于是转移目标,回到Trek 7.2FX
上,据说美国总统访华就是带着Trek的自行车去的,加上超级偶像Armstrong以前骑着
Trek在环法的表现,决定还是买下7.2。
在网上订购,不用交税,嘿嘿,直接省下50刀,交上运费,结果价格还是差不多。20寸,银色,本人偏好黑色,可惜只有7.3才有黑色,那个贵110刀,省下这笔买了一对Sunlite的驮包。杂七杂八又分别在Amazon买了车前灯和车后灯,mini打气筒;在performance买了无
线码表,本想爽一下在国内一直想买的无线码表,拿到手发现感应有问题,退了回去,
用回在国内陪我走过广州到西藏的Sigma BC800,换上新电池,还挺遛的;水壶和水壶
架;半指手套;简要修车工具;头盔和自行车袋(希望这个从Houston回来时可以用上
);在Campmor买了后架,单人帐篷 |
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i******t 发帖数: 22541 | 14 check out了
1 x ($13.49) CARD READ KST|FCR-HS219/1 R $13.49
1 x ($24.99) MEM 4Gx2|GSKILL F3-10600CL9D-8GBSQ $24.99
1 x ($19.99) FLASH 16G|TRANSC TS16GSDHC10 R $19.99
1 x ($-10.00) DISCOUNT FOR PROMOTION CODE$-10.00
1 x ($-40.00) Redeem GC NEGG891054790406$-40.00
总共实际花 32刀 |
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A*********R 发帖数: 11847 | 15 去年两猫3月十八号打得vaccine,一通下来林林种种加上给多多治ear mite,两娃要
fleas control 的药,花了老妈我四百大洋,刻骨铭心,决定再也不去这个vet 了。 更
心痛的是蜜咪对vaccine 有反应,回家后两天不吃不喝,老妈我给她灌baby milk
replacer,灌水,同时吓个半死,当时想着以后再也不打这鬼针了。
最终理智战胜感情,第一次的rabies只管一年,至少这个还是要打得。 早就瞄上了
petco超便宜的两星期一次的vaccine event, 还正好今天3月19号有,老妈我和着两娃
决定再视死如归一次。
两个carrier被LD放到garage最高的一个架子上,上面还压了不少杂物,好不容易搭梯子
取下来已出了一头汗,才刚刚开始就知此行不易了。清灰,放毯子吹吹和玩具进笼子,
还备了水和针头怕万一要灌水。两猫一番挣扎不用多说,12点上路了。 蜜咪一路小苗
苗叫,多多大多时间没声,肉尔奥一声,就是在笼子了闹出不少动静想出来,不理。
到了petco,一手一个carrier进去,找到长队排上,前面大概有7.8 个各色的狗随着主
人排着,没见一个带猫的,... 阅读全帖 |
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b******s 发帖数: 5365 | 16 唉,都被Nature的大水淹了.继续三伏天头顶三黄包跪求! |
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o**d 发帖数: 3080 | 20 我一直都是做鼠Bcell的flow,而且基本上直标的抗体。而且我们实验室用的FcRblock
是自己养的单抗上清。
看了你的描述,是不是可能用4%PFA固定的时候把抗原给破坏了?如果可能的话,试一
下你做flow用的fix-permeblize buffer和条件来做cofocal。
祝好运。
白, |
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b******s 发帖数: 5365 | 21 恩,我忘记了flow和confocal的差别----flow做的是表面染色(这个蛋白在细胞表面也表
达),当时染色做的是活细胞;而confocal看的是细胞内的蛋白,确实不一样.
谢谢提醒,虽然一时还没想到很好的对策,不过还是很感谢.请接包子!
也欢迎其他免疫牛人指点,我还有一些库存包子.
FcRblock |
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