m********n
发帖数: 47 | 1 还在shipping途中，Homeclick下单的，现在改变主意了，觉得现有的挺好，不想换了
，但是退掉太不划算
，要charge各种费，所以想来问问有没有人正想买马桶的,两个一起买，分开买都可以
的。
昨天寄出的，估计这周之内能收到，20mile以内可以给送（地点在Bedford）
第一个，原价$438.37, 折后$407.68买来的，现在$370转
TOTO: UltraMax II One-Piece Toilet, 1.28GPF - MS604114CEFG
Choose Color / Finish: Cotton White
http://www.homeclick.com/toto-ms604114cefg-ultramax-ii-one-piec
第二个，原价$322.14, 折后$299.59买来的，现在$270转
TOTO: Drake II High Efficiency Two Piece Toilet (HET) with Sanagloss -
CST454CEFG
Choose Toilet Color: Cotton White
http://www... 阅读全帖 |
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r*******F
发帖数: 250 | 2 不需要.
airchina.com 的网站上就有写清楚了.
11. 如果在国航转机，是否需要领取行李并重新托运？
对于从国内城市启程、在北京转机乘坐国内/国际/地区航班的乘客，如果已经办理了将
行李托运至目的地的手续，则无需在北京领取行李。此规定适用于SHE-PEK-CAN 或SHE-
PEK-SFO等航线。
对于从海外/地区城市启程并在北京转机乘坐国际/地区航班的乘客，如果已经办理了将
行李托运至目的地的手续，则无需在北京领取行李。此规定适用于ICN-PEK-ARN或FRA-
PEK-HKG等航线。
从海外/地区城市起飞并在北京转机乘坐国内航班的乘客，需要领取行李并接受海关检
查。此规定适用于JFK-PEK-HET等航线。
http://www.airchina.us/cn/customerservice/FAQ/baggage.html |
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m**********1
发帖数: 361 | 3 Kobe is just playing the game
nothing wrong with that
het over the saving face crap |
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t*******y
发帖数: 10477 | 4 what about sharing a bed with a female student at super8 during a conference, and eat 2 days of McDonald's to save
money and buy het lingerie?
[引用: GoooG (pumpkin) ]
All these posts seem no cheating invo ............ |
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h*********r
发帖数: 1943 | 5 750、550UCS和HET三种需要配合好镜子的顶级步枪都有皮轨，一般CZ自带的镜环质量比
很多市面上卖的还好，而且能送回去把1寸的免费换成30mm |
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J*********n
发帖数: 6974 | 6 1568年，因反抗西班牙国王的中央集权和对新教加尔文派的迫害，爆发了北方省反抗西
班牙的八十年战争。1579年北方省中的七省（現在荷蘭、比利時和卢森堡的區域）成立
了乌得勒支同盟，共同反对西班牙统治。这被认为现代荷兰的开始。1581连盟正式宣布
独立。战争在继续，直到1648年西班牙国王菲利普四世才签订《明斯特条约》，承认七
低地（尼德蘭）／七省聯合共和國（Republiek der Zeven Verenigde Nederlanden/
Provinciën），從西班牙獲得獨立之後，荷蘭發展成為17世紀航海和貿易強國。
17世纪后期，荷兰先后与英国、法国交战，在海上荷兰败于英国（英荷战争），在陆地
荷兰败于法国（法荷战争），从而衰落下来。1795年荷兰被法国占领。
在1815年被拿破崙統治的法國佔領結束後，荷蘭和現在的比利時、盧森堡組成荷蘭王國
（Het Verenigd Koninkrijk der Nederlanden）。比利時很快在1830年獨立，盧森堡
也緊隨其後。
————from wiki
参考：1776年7月4日, 美國獨立. |
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H******u
发帖数: 36 | 7 摔倒三次，第一次是跳水，自己承认了，说自己很stupid，不应该这样。
后面的两个都应该是点球。
http://www.telegraaf.nl/telesport/voetbal/oranje/22797768/__Rob
Robben: 'Sorry voor schwalbe'
Van onze Telesportredactie
Arjen Robben had vlak voor rust een penalty verdiend, maar bekende dat hij
in de eerste heflt ook een keer zonder reden naar de grond ging. "Ik wil
mijn excuses aanbieden. Ik maakte een schwalbe. Soms verwacht je een schop,
maar ik moet dit niet doen. Echt verschrikkelijk stom."
Robben vond dat hij vlak voor rust in één situatie... 阅读全帖 |
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T*********k
发帖数: 1621 | 8 i withdrew 400 on feb 24th, still het nothing fron them yet |
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j*****g
发帖数: 552 | 9 这次xxx，第一次游览西欧的国家，德国（Germany）和比利时（Belgium）。
欧洲这个地方总感觉是富人，懒人和老人玩的地方，让人提不起精神，还是喜欢第三世
界国家（勤快年轻的穷人？）。
xxx。
我呢，自己的假当然舍不得用，所以就辛苦辛苦，前前中中后后挤出些时间，居然也参
观了德国，比利时各两个城市。
包括德国的法兰克福（Frankfurt）和腓特烈港（Friedrichshafen），以及比利时的科
特赖克（Kortrijk）和布鲁塞尔（Brussels）。
一路上还看到了四个世界遗产，全部在比利时，德国就一个没有。
四个世界遗产是：
1 Flemish Béguinages (1998) - Béguinage de Kortrijk (Courtrail) Kortrijk (
Courtrail), West-Vlaanderen, Flanders, Belgium
2 Belfries of Belgium and France (1999, 2005) - Het Belfort of Halletoren
Kortrijk, Grote Markt, West- |
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k********k
发帖数: 5617 | 10 《海俠》（科西嘉海盜）
高麗國立芭蕾舞團
金姬英（荷蘭國家芭蕾舞團）-- 米多拉
金永傑（巴黎歌劇院芭蕾舞團）-- 康拉德
金勳雄（韓國國立芭蕾舞團） -- 阿里（奴隸）
Le Corsaire Pas de Trois
Korea National Ballet 2005
Medora: Ji-young Kim (HET National Ballet)
Conrad: Yong Geol Kim (Paris Opera Ballet)
Ali: Hyun-woong Kim (Korean National Ballet)
Uploaded on Mar 13, 2011
http://www.youtube.com/watch?v=aLu3_PyLHmE |
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k********k
发帖数: 5617 | 11 《海俠》（科西嘉海盜）
高麗國立芭蕾舞團
金姬英（荷蘭國家芭蕾舞團）-- 米多拉
金永傑（巴黎歌劇院芭蕾舞團）-- 康拉德
金勳雄（韓國國立芭蕾舞團） -- 阿里（奴隸）
Le Corsaire Pas de Trois
Korea National Ballet 2005
Medora: Ji-young Kim (HET National Ballet)
Conrad: Yong Geol Kim (Paris Opera Ballet)
Ali: Hyun-woong Kim (Korean National Ballet)
Uploaded on Mar 13, 2011
http://www.youtube.com/watch?v=aLu3_PyLHmE |
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i*****0
发帖数: 2327 | 14 部分评论
dwtomczyk
11 MINUTES AGO
cockroache's are less expensive
ReplyFlag as AbusivePermalink
+1
rate uprate down
madddddddddddddd
21 MINUTES AGO
this is a great tale,,,,,,,,,,,,,does it end in duck soup???????????????????
???????
ReplyFlag as AbusivePermalink
rate uprate down
onlyway2goisup
24 MINUTES AGO
I'll go quakers if those ducks are hurt coz you better duck if one feather
gets plucked!
ReplyFlag as AbusivePermalink
rate uprate down
1 reply to onlyway2goisup's comment
Naturally safe
2 MINUT... 阅读全帖 |
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r***e
发帖数: 10135 | 15 Shivangi Saxena, Doing Machine Learning before it beca... (more)
8 upvotes by Quora User, Abhinav Srinivasan, Het Thakkar, Ashish Bardhan, (
more)
I had researched on the topic as a part of a project which never took off.
Some key observations:
1. Focus on differentiation of skin and non-skin pixels. The skin pixels
have a specific color range which can be configured in the code.
2. Edge detection for some specific parts. Machine Learning to follow.
3. Usage of color schemes is very important. T... 阅读全帖 |
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c******n
发帖数: 16666 | 16 he she之后加t代表是变性后的性别
het shet 哈哈 |
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C****i
发帖数: 1776 | 17 CHAPTER I
Of the Holy Scripture
I. Although the light of nature, and the works of creation and providence do
so far manifest the goodness, wisdom, and power of God, as to leave men une
xcusable;[1] yet are they not sufficient to give that knowledge of God, and
of his will, which is necessary unto salvation.[2] Therefore it pleased the
Lord, at sundry times, and in divers manners, to reveal himself, and to decl
are that his will unto his church;[3] and afterwards, for the better preserv
ing and p... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 18 村民老梁：肖传国的申诉信中的笑点
美国ACH医院的Tuite团队发表了一篇否定肖氏手术的论文，肖传国很不服气，给杂志社
写了一篇斗志昂扬的申诉信。在申诉信中，肖传国说道：
我立即强烈反对，并列出2个主要理由：1，肖氏手术已被许多医学中心证明有效，包
括3家著名美国医院（Beaumont医院，纽约大学医学中心，路易桑拿州立大学医院），
并均有高水平专业学术文章发表，所以还将此特大手术在儿童，而且还是脊膜膨出残疾
儿童，进行双盲实验，既不需要，更违反医学伦理；。。。
那么，在ACH的双盲实验开始之前，真的有包括三家美国著名医院的多中心发表了高水
平专业学术文章吗？我们看看肖传国所说的高水平专业文章都是什么。在中文信中，肖
传国没有给出相关的参考文献，但是在英文版中，是有参考文献的。
First, Xiaoprocedure had been proved to be a very effective procedure by
many centers withthousand cases and formal publications [123] including
those in ... 阅读全帖 |
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p*****s
发帖数: 344 | 19 十年前做femtocell research还可以，现在要做het net，small cell
物理层没什么了，网络要和SDN挂钩 |
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h****g
发帖数: 105 | 20 请问现在有公司做het net 或者是femtocell wifi的SDN吗？ |
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f*******e
发帖数: 354 | 22 理论上可能，但是。。。
虽然我发生过5个KO加一个Het，还是觉得。。。10个啊 8个可都是很大的数字了 |
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O******e
发帖数: 4845 | 23 I would first make sure the genotyping is really working as expected.
HET |
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y******8
发帖数: 1764 | 24 Have you tried to get the hets of Del E4/Del E5? |
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f*******e
发帖数: 354 | 25 方法 2+6 失败
2+2+2+2 失败
MDI 失败
MDI+troglitazone 失败
MDI+troglitazone+BMP4 失败
MEF C57 （backcrossed 10g+）
同时的KO MEF 分化的很凶猛
到底是什么问题，头大，有没有人遇到过类似的情况
WT/Het(6+3)共九株原代 都不行
KO 每株都行
aaaa，谁来救救我！！！ |
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s******y
发帖数: 220 | 26 本人老鼠新手，菜鸟上路就要cross三个转基因。
起始条件是：三个蛋白，蛋白C KO，蛋白S overexpression, 蛋白R point mutation
Knock in.
我杂交了 male （C het，S overexpression） 和female （R homo）。
现在第二代开始得到我想要的 Cnull, S overexprssion, R homo.
但是我的这些老鼠的genetic background很不一样，我拿到的 breeder male就是很
mixed 的背景，据说主要是FVB/N, 那个breeder female好点，是C57BL/6, 所以这后代
也杂得很厉害。back cross回去，耗时间太久，请教老鼠达人们我不back cross 老鼠
，OK不？
如果是OK的，那我的control就要很严格的match了，现在需要的control 至少是wt，
Cnull S overexpression。 如果我从cross的后代里， 比如说第二代， 得到了这些
control （wt， Cnull S）， 我能不能单独把他们设定为contro... 阅读全帖 |
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s******y
发帖数: 220 | 27 我的摊子已经铺的挺大了，三天两头就是一大窝小鼠。
因为我有三个转基因，所以得到我要的纯种几率很小，
所以我希望拿到纯种配纯种，后面都是纯的了。
然后就有相关control的问题了，
如果我拿到了纯种，然后和平行的het breeder里面得到的wt 和相关control比，
这样OK吗？
btw，我没有backcross他们， 背景比较杂：（ |
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g****0
发帖数: 425 | 28 定错了老鼠，本来要het 去杂交的。现在看看有木有机会了。各位谁breed过吗？多谢
。 |
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z*t
发帖数: 863 | 29 我倒是好奇他们怎么做screen？这方法在我看来的好处是把chimera mating的步骤省了
。但targeted的老鼠是het还是要在后代里回交后自交才能拿到homozygous 的老鼠 |
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r*******y
发帖数: 48 | 30 You may try double het to see if there is any genetic interaction between
these two genes. |
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l******g
发帖数: 1145 | 31 我cross了两个转基因的老鼠，发现大约1／3的老鼠从postnatal 3天到2周，出现不同
程度的体型变小，以及预期中其他的一些表型。老鼠就算只有sibling的1／2大小，但
还是生活自理，三周就可以wean了。
问题1,
现在我想quantify老鼠body size的变化，测体重是比较有效的手段吗？
我担心的是，不是所有老鼠都变小，体重平均后，也许会弱化差异。
ps，下周第一批老鼠要拉去做echo，到时麻倒了，肯定会拍比较照片。
问题2,
如果检测体重的话，需要连续测多久？可以只测到6周成年的时候吗？
concern是，现在的老鼠只是第一次cross后的double het，本来是没预期有表型的。按
计划要继续cross将一个基因完全knockout，预期得到更严重的表型。
所以说，所有的female老鼠都要用来breeding，等到怀孕后，体重肯定就不准了。就算
是公老鼠，用来breed后，都会变肥（难怪男人一结婚就发福），可能体重也不准了。
是不是测体重只能到breeding前？ |
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l******g
发帖数: 1145 | 32 是的，30％左右的penetrance其实已经不错了。
比较意外，是其中一个基因的完全ko完全没有表型，所以没有预期double het会有表型
。现在比较担心完全ko后，就embryonic lethal了，只能分析下genetic interaction。 |
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m******p
发帖数: 67 | 33 thank you very much for the suggestions.
1) now we have already got lots of sequencing data by traditional Sanger
sequencing. can we still use this data to do dome meaningful analysis and
conclusion?
2) 'targeted sequencing toolkit such as Ion Torrent' appears to be able to
distinguish alleles (het vs. homo). Do you know which companies can do this?
again, thank you very much. |
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s********n
发帖数: 248 | 34 update：
我上周四按照板上的建议，把CFSE浓度降低到0.5uM,10^7cell/ml室温label 8分钟。
昨天取popliteal LN FACS了一下，所有老鼠的都有很多的OTI细胞，也有很好的
proliferation，在wt/ht/mt里边proliferation的区别也看到了。
估计是我之前用的CFSE浓度太高了，T细胞CFSE label以后都死光了。
真心感谢版上大家的帮忙！
需要比较WT和MT的dendritic cell antigen presentation的差异，因为MT的老鼠本书T
/B细胞和wt有差异,所以把老鼠breed 到RAG deficient background里。
实验是这样设计的，把OTI/OTII （2-5×10^6 cell/mouse） 细胞通过静脉注射打进老
鼠体内，一天以后footpad注射OVA+LPS. 再过72小时harvest popliteal lymph node，
看OTI/OTII增殖情况。因为是RAG deficient 老鼠，所以做tail vein injection前没
有irradiate老... 阅读全帖 |
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g*********5
发帖数: 2533 | 35 谢谢大家。看到thermo 有现成的敲除的strain卖，就是基因型看得头昏。
Strain Background Genotype
Mat A BY4730 MATa leu2Δ0 met15Δ0 ura3Δ0
Mat Alpha BY4739 MATalpha leu2Δ0 lys2Δ0 ura3Δ0
Mat A BY4741 MATa his3Δ1 leu2Δ0 met15Δ0 ura3Δ0
Mat Alpha BY4742 MATalpha his3Δ1 leu2Δ0 lys2Δ0 ura3Δ0
Het/Hom Dip BY4743 4741/4742
我要的菌株是Yeast HetDip Knock Out Strain YJR045C
怎么样的平板才能使敲除的菌株不长啊？能买到板吗？ |
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T****i
发帖数: 15191 | 36 你要先看 yeast KO 的表型，SGD查一下。如果lethal，只好买het，否则买MATa 或
MATalpha都行。Complementation test 的时候也是一样。如果是lethal，那你需要做
plasmid shuffling/exchange；如果不是lethal，那就好办，直接转目标plasmid 就可
以了。 |
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T****i
发帖数: 15191 | 37 补充一下，如果是lethal，het需要先转那个control plasmid （with the yeast
ortholog of your mammalian target) 再sporulate。还有别的策略，一时说不清，最
好周围找个yeast 专家问问。不是lethal，怎么都好办。 |
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t******k
发帖数: 5617 | 38 homo x HET呢？感觉是不是homo的精子或者卵子出了问题，导致早夭？ |
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n***w
发帖数: 2405 | 39 Except when your homo (Cre+ f/f male) has some sort of phenotype that
affects
breeding, using a het (Cre+ f/wt) may be better. The downside of this is
you get fewer experimental mice but you can overcome that by setting up more
breeders. Also this strategy has built-in controls for Cre toxicity and you
don't need a separate Cre wt breeding line ongoing as a control. |
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J*****8
发帖数: 6 | 41 这样解释还挺讲的通的，因为这个蛋白家族里有几个结构类似但功能不清的蛋白，不过
要证明这个理论好像还挺难的。。。
多谢！ |
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b*h
发帖数: 637 | 42 请问在baylor实验外显子基因报告中一下这些列是什么意思？
The 4th column: Position
The 5th column: Isoform
The6th column: Nucleotide
The 7 the column: Amino Acid
The 8th column: Zygosity
The 10th column: AA/EA
以下是一个例子
Gene: BAG3
Position: 121429523
Isoform: NM_004281
Location: exon2
Nucleotide: C341A>G
Amino Acid pY114
Zygosity: Het
Referenc/comments: Novel variant
AA/EA: N/R N/R
PolyPhen 2: Tolerated/Benign
包子求问。多谢！ |
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i********f
发帖数: 206 | 43 Gene: BAG3 (基因的名称 http://www.genenames.org/)
Position: 121429523 (这个突变在染色体上的位置,报告里面应该有说明是哪个基因组
版本，现在比较常见的是GHRC37/hg19)
Isoform: NM_004281 (由于选择性剪切,一般每个基因可以表达出多个蛋白, 这个表示
是哪个transcript,比较好的应该加上版本号,例如 NM_004281.3)
Location: exon2 (这个表示突变发生在哪个exon上,不确定是以转录还是以翻译为开始)
Nucleotide: C341A>G (c.341A>G在DNA基础上的突变,在341的位置由A变成了G, 341是
以翻译点为开始，ATG中的A标号是1)
Amino Acid pY114 (在蛋白基础上的突变，这个应该没写全，应该是p.Y114C)
Zygosity: Het (这个表示只有一条突变了，另一条是正常的，杂合子)
Referenc/comments: Novel variant (全新的突变)
AA/EA: N/R N/R (这个可能是表示popula... 阅读全帖 |
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h****n
发帖数: 333 | 44 啊，你是说你要看注射TALEN以后的第一代吗？那个确实没办法直接PCR测序，本来就是
各种indel的混合。我说的是outcross以后拿到单一allele以后的办法。
其实PCR以后TA cloning以后再sanger测序不难啊，也就顶多一个礼拜的工作量。
用HRMA的办法就可以不用测序了，省事很多。反正第一代本来就是mixture，无所
谓立刻知道到底有哪些indel。outcross以后拿到稳定单一hets再测序确定好了
你们实验室如果有能做HRMA的仪器也行,不差钱就买一台，不然到别的实验室蹭机子用
也成啊lol |
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C***r
发帖数: 759 | 46 【 以下文字转载自 America 讨论区,原文如下 】
发信人: Camer (铁划银钩), 信区: America
标 题: American Economic Association
发信站: The unknown SPACE (Sun Apr 28 13:55:40 2002) WWW-POST
American Economic Association
[Note: Part of the HET Website. This page is not related to or endorsed by
the American Economic Association or any other organization. See the official
A.E.A.
website]
The American Economic Association (AEA), emerged through the almost
single-handed efforts of Richard T. Ely in 1885. To s |
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