g*********3
发帖数: 177 | 1 不知道版上有实验室做过flp-in Trex jurkat？ Invitrogen只提供Flp-In jurkat，如
果要trex得自己再做一步PCDNA6/TR稳转。如果哪位能提供，不胜感激。
谢谢。 |
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w*********n
发帖数: 439 | 2 dicty 大虾, 今天我按你的protocol试了，还是没转进去。我怀疑我的细胞有问题或者
我的电击仪没设置好。
请问你平时怎么养Jurkat T的，
另外请帮我看一下电击仪的连接设置，多谢！ |
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e**r
发帖数: 1144 | 3 为什么ATCC会有很多特定基因缺失的Jurkat cell？
这些subline是怎么得到的？ |
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S******G
发帖数: 965 | 6 http://en.wikipedia.org/wiki/Cell_culture
我以前做的project就研究小分子的cycotoxicity以及他们对不同的cell line的选择性
。常用的cell line有breast cancer cell line， HeLa， Jurkat。通常用normal
breast cell line做对照。
在intro screen里面，据我所知，有很多小分子药物对于某些正常细胞没有毒性，但是
对某些cancer cell line的IC５０可以达到nM级别。 |
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s*****g
发帖数: 7857 | 7 APL (NB4)(Leukemia)
&
Lymphoma (ramos, Granta, Jurkat, SUDHL4, HF-1...)
cell lines are 悬浮培养. |
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s***o
发帖数: 58 | 9 Archives of Toxicology
Volume 83, Number 11, 1009-1019, DOI: 10.1007/s00204-009-0443-x
Title ;Brevetoxins 2, 3, 6, and 9 show variability in potency and cause
significant induction of DNA damage and apoptosis in Jurkat E6-1 cells |
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w*********n
发帖数: 439 | 10 本人最近刚开始学作JurkatT细胞的转染.网上有说拿电转的,也有说拿Fugene6转的,请
问有哪位大虾有经验做过转染JurkatT cell,麻烦贴个protocol.多谢了. |
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d***y
发帖数: 299 | 12 electroporation: 1.3 x 107 cells with 10 μg DNA in serum free medium for 10
min and then electroporated the cells using settings of 300
V, 800 μF, and 24 ohms. works well, cheap.
or use amaxa nucleofection. works extremely well. a little bit expensive. |
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w*********n
发帖数: 439 | 13 在把1.3X107细胞和DNA混合以后是在冰上放10min？ 电击完了以后是在室温放10min吗？
10 |
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d***y
发帖数: 299 | 14
RT, 1.3X107cell+10ug DNA in 300ul Serum free medium, RT 10 min.
电击完了以后是在室温放10min吗？
Put cells in medium (10ml) immediately after electroporation.
BTW: use 4mm gap cuvettes for electroporation |
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I*****y
发帖数: 6402 | 15 记得我以前就用Lipofectamine转，work的还不错，以前实验室有个特殊的protocol,我
现在都忘了 |
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T*****u
发帖数: 3257 | 20 我也有同样的问题，电转化学转都试过了，都没work。 |
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d***y
发帖数: 299 | 21 就是RPMI+10%FBS养的。不过可能细胞的克隆不一样，会有点差别。我们是一个个试，
试出这个条件的。
我看不懂你的电击仪的连接设置，跟我们的不一样，我们是BTX-ECM600。
实在不行，就用amaxa nucleofection吧，不过如果你们试验室没有那个仪器，得问问
别的试验室有没有可以借。 |
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c**i
发帖数: 265 | 22 老板突然要做inducible apoptosis，不知Staurosporine可以么？ 我看到Progema的
Caspase－9 GLo kit 用这个诱导Jurkat cells， 不知能不能用在HEK293上？ 谢谢。 |
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a****k
发帖数: 1130 | 23 HT29 cell: TNF-α + Smac mimetic + z-VAD-fmk
FADD null human T cell leukemia Jurkat cells: TNF-α
HeLa cell: ectopic expression of RIP3 + knock down caspase-8 + TNF-α +
Smac mimetic
etc......... |
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l******n
发帖数: 298 | 24 abcam有的我用过，ab76533，很好用。75kd左右，jurkat做control |
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r***e
发帖数: 2539 | 25 cyto-spin?
or spin the whole plate with cells.
一般做免疫荧光都没问题，比如Jurkat cell。
就是不知道你准备怎么洗。 |
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s*****g
发帖数: 7857 | 26 买个没有缺失的不就可以了么?
首先,T-细胞,就会有和B-细胞不同的特点.如BCR 和TCR不同.工作机理就会不同.
另,同样T-细胞癌细胞系之间也有不同特点(如是否有些不同的细胞MARKER?) |
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