k****o 发帖数: 728 | 1 首先,ETD的optimized reaction time是proportional to 1/z2。ETD有利于high
charge state(CS>=+3)。不知道你的peptide大都是多少CS。对于tryptic peptides,
基本都是+2-+3,所以大多CID比ETD效果好。而现在越来越多地用到其他酶解的peptide
比如Lys-C, Glu-C等产生long peptide,那ETD的优势就很明显了。
Fusion用的软件比前几代仪器在data-dependent MS2的设计上有很多优化。你可以针对
不同的CS设定适合各自的CID或ETD(包括ETD的reaction time)。比如+2只用CID,+3和
+4的用both CID and ETD。高于+4的只用ETD。ETD对+3CS可以用60ms,+4就是60 * (3/
4)2= 34ms。其他对于>+3 CS的ETD time以此类推。
最后,不知道你对于MS2是用IT检测(低resolution)还是Orbitrap FT检测(high
resolution)。后者有利于看清long peptid... 阅读全帖 |
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k****o 发帖数: 728 | 2 不要追求多MS2。如果你只ID到+2,+3的peptide,那原因就在于MS2的resolution低了。
大的peptide(大多+4以上)需要用15,000 resolution Orbitrap扫MS2。
尤其是如果你的酶是Lys-C一类single amino acid residue cleavage的,那主要就
digest出large peptide了。而large peptide对于protein ID的命中率也高于small
peptide。 |
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n*********y 发帖数: 54 | 3 我最近用fmoc化学固相合成一个11肽,c端含flag tag 序列(8肽),n端是三个疏水氨
基酸。合成产率正常,纯度也不错,可是质镨分析显示分子量多出50。我试过了延长脱
保护时间到16小时,仍然去不掉多出的分子量。MS/MS分析也找不出到底是哪一个氨基
酸出了问题。
我用的试剂都是常见的:DMF,piperidine,HBTU,MMP,OBut-Asp,OBut-Tyr,Boc
-Lys。
恳请大虾指点问题出在哪。 |
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f*********y 发帖数: 498 | 5 蛋白上连接Lys和Cys最容易,前者各种NHS,后者一堆Iodo试剂可以选。 |
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N******o 发帖数: 25 | 6 I guess it's OK to have different gene sequence, but final protein sequence
has to be identical, as FDA mentioned. Minor mofification generally referers
to post-translation modification, including glycosylation, C-terminal Lys
truncation for mAb. FDA does gives small rooms for those known modifications
, especially glycosylation. Those have to be justifitable based on bioassay,
preclinical, even clinical data.
Overall, I believe no sequence variation acceptable in term of biosimilar.
different
... 阅读全帖 |
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l*s 发帖数: 6372 | 7 寄信人: deliver
标 题: lys被取消在Military版的发文权限
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Apr 11 19:25:06 2013)
来 源: 137.
由于您在 Military 版 见备注,我很遗憾地通知您,
您被暂时取消在该版的发文权力 14 天。
此信申请恢复权限。
备注:
主ID发表不恰当文章被封 + 换马甲 PA |
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e*u 发帖数: 10016 | 8 【 以下文字转载自 Complain 讨论区 】
发信人: eau (Kshanti), 信区: Complain
标 题: [投诉]多人弹劾军版版主cynic
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Apr 12 13:06:27 2013, 美东)
投诉人(ID):
eau,feu,lys,voldnuit,Herzog,sautin,hzh9999,thorton
投诉对象及职务(限版主):
cynic
投诉标题:
多人弹劾军版版主cynic
投诉目标(更改处理决定/更改板规/弹劾板主...):
鉴于军版是钻风做版大,cynic作为二把手,基本可以视为版主。所以在此严正要求弹
劾军版版主cynic。
投诉理由及证据:
google一下弹劾版主,就能找到一堆要求弹劾cynic的帖子了。而我的切身体会则是昨
天提到度论云就被他连续封,而用马甲在军版聊其他的,也被他连续封,钻风可以去系
统里看一下就明白了。对于一个长期尸位素餐,看到老大爷发黄图也拍拍屁股下线,按
个人喜好随意删贴封人。这样的版主专门制造矛盾,装深沉,又水平低下,已经引起众
怒,无法称职,实不应继续担任版主一职。 |
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l*s 发帖数: 6372 | 9 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: lys (Upekkha~~~~~~), 信区: Military
标 题: laoyuermm又来贴黄图了
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Dec 9 16:53:36 2011, 美东)
rt |
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l*s 发帖数: 6372 | 10 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: lys (Upekkha~~~~~~), 信区: Military
标 题: 为什么删除“为什么出国就变“左”?”
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Dec 19 20:11:47 2011, 美东)
请版主给一个说法。 |
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H****g 发帖数: 14447 | 11 二、公权私用,睚眦必报
证据2:Herzog(Singularity)在2月16日在军版发了一个帖子,题目是”建议中国政
府为三千万下岗工人修建一座纪念碑“。网址为
http://www.mitbbs.com/article0/Military/37256785_0.html
该贴主要内容就是,“我觉得,如果把改开视为一个经济强国的过程,类似于毛泽东时
代的军事强国的过程,那么,这些在改开三十多年里因为国企改革而沉沦为社会底层的
人民,就应当被承认,承认他们就是改开时代的革命烈士,他们如同那些解放战争里牺
牲的千百万普通人一样,为中国的强国事业做出了自己巨大的牺牲和贡献。“
该贴没有任何观点偏激的内容,但是不知道怎么就触动了cynic的神经,连续发了若干
标题类似的水帖,对Herzog进行莫名其妙的挑衅。
========cynic针对网友Herzog发的若干水贴==========
44 应该为所有为抗日战争做出奉献但不为我共认可的老战士 Military Feb
16 0 41
http://www.mitbbs.com/article0/Milita... 阅读全帖 |
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H****g 发帖数: 14447 | 12 二、公权私用,睚眦必报
证据2:Herzog(Singularity)在2月16日在军版发了一个帖子,题目是”建议中国政
府为三千万下岗工人修建一座纪念碑“。网址为
http://www.mitbbs.com/article0/Military/37256785_0.html
该贴主要内容就是,“我觉得,如果把改开视为一个经济强国的过程,类似于毛泽东时
代的军事强国的过程,那么,这些在改开三十多年里因为国企改革而沉沦为社会底层的
人民,就应当被承认,承认他们就是改开时代的革命烈士,他们如同那些解放战争里牺
牲的千百万普通人一样,为中国的强国事业做出了自己巨大的牺牲和贡献。“
该贴没有任何观点偏激的内容,但是不知道怎么就触动了cynic的神经,连续发了若干
标题类似的水帖,对Herzog进行莫名其妙的挑衅。
========cynic针对网友Herzog发的若干水贴==========
44 应该为所有为抗日战争做出奉献但不为我共认可的老战士 Military Feb
16 0 41
http://www.mitbbs.com/article0/Milita... 阅读全帖 |
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e*u 发帖数: 10016 | 13 投诉人(ID):
eau,feu,lys,voldnuit,Herzog,sautin,hzh9999,thorton
投诉对象及职务(限版主):
cynic
投诉标题:
多人弹劾军版版主cynic
投诉目标(更改处理决定/更改板规/弹劾板主...):
鉴于军版是钻风做版大,cynic作为二把手,基本可以视为版主。所以在此严正要求弹
劾军版版主cynic。
投诉理由及证据:
google一下弹劾版主,就能找到一堆要求弹劾cynic的帖子了。而我的切身体会则是昨
天提到度论云就被他连续封,而用马甲在军版聊其他的,也被他连续封,钻风可以去系
统里看一下就明白了。对于一个长期尸位素餐,看到老大爷发黄图也拍拍屁股下线,按
个人喜好随意删贴封人。这样的版主专门制造矛盾,装深沉,又水平低下,已经引起众
怒,无法称职,实不应继续担任版主一职。 |
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l*s 发帖数: 6372 | 14 首先我发的文章并没有达到不恰当值得被封的地步,其次换马甲我也没有PA,我说的是
他再删我的帖子他就是ED,然后他删了。希望钻风秉公执法,按照规章制度办事。
寄信人: deliver
标 题: lys被取消在Military版的发文权限
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Apr 11 19:25:06 2013)
来 源: 137.
由于您在 Military 版 见备注,我很遗憾地通知您,
您被暂时取消在该版的发文权力 14 天。
此信申请恢复权限。
备注:
主ID发表不恰当文章被封 + 换马甲 PA
版主:cynic
Thu Apr 11 19:25:06 2013 |
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a**n 发帖数: 2994 | 15 幸好有个weiminginfo,仅仅两个月里面euv/vue/evu还有无数其他马甲
发帖总数远远超过其他任何一个id,钻风你们到菌斑随机看看这个
euv发帖的内容,全部是录音机水贴,而且euv当年就是那个nyt,
炮制无数马甲,炸版炸信箱,臭名昭著。
这种撒谎成性,马甲成群,本站炸版炸信箱的始祖,
肮脏龌龊事情的刷屏机器,老大爷在euv面前连小学生都不如。
在任何一个正常的网站,euv这种id早被唾弃了,
而euv 10年来在本站如鱼得水,钻风你们对euv百般娇惯纵容,
是不是有什么难言之隐?
排名 ID 帖数
1 xiaobailong 3155
2 euv 2300
3 oldguy 1772
4 meiguohuaren 1760
5 ldxk 1689
6 abcxyz2046 1625
7 ubcumn 1610
8 superphase 1581
9 xiaoju 1415
10 nixonixon 1384
11 brihand ... 阅读全帖 |
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h***e 发帖数: 20195 | 16 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: lys (Upeksa鱼~~~~~~), 信区: Military
标 题: 鸭子势力真大,大家小心了
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Jul 4 19:57:18 2011, 美东)
寄信人: deliver (System Operator)
标 题: feu被取消在Military版的发文权限
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Jul 4 19:42:51 2011)
来 源: mitbbs.com
由于您在 Military 版 人身攻击,我很遗憾地通知您,
您被暂时取消在该版的发文权力 2 天
备注:鸭子找老夫包养啦~!!
难怪盯着老夫要发达,唉,可惜他太丑了,老夫没啥兴趣啊,谁要有兴趣谁包养吧。
未名空间站务组值班站务:mitbbs
Mon Jul 4 19:42:51 2011 |
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a*****a 发帖数: 495 | 17 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: lys (Upeksa~~~~~~), 信区: Military
标 题: xiali022老大爷又来贴黄图啦
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Dec 1 16:34:59 2011, 美东)
re |
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l*s 发帖数: 6372 | 18 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: lys (Upeksa~~~~~~), 信区: Military
标 题: xiali022老大爷又来贴黄图啦
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Dec 1 16:34:59 2011, 美东)
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e*u 发帖数: 10016 | 21 【 以下文字转载自 Complain 讨论区 】
发信人: eau (Kshanti), 信区: Complain
标 题: [投诉]多人弹劾军版版主cynic
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Apr 12 13:06:27 2013, 美东)
投诉人(ID):
eau,feu,lys,voldnuit,Herzog,sautin,hzh9999,thorton
投诉对象及职务(限版主):
cynic
投诉标题:
多人弹劾军版版主cynic
投诉目标(更改处理决定/更改板规/弹劾板主...):
鉴于军版是钻风做版大,cynic作为二把手,基本可以视为版主。所以在此严正要求弹
劾军版版主cynic。
投诉理由及证据:
google一下弹劾版主,就能找到一堆要求弹劾cynic的帖子了。而我的切身体会则是昨
天提到度论云就被他连续封,而用马甲在军版聊其他的,也被他连续封,钻风可以去系
统里看一下就明白了。对于一个长期尸位素餐,看到老大爷发黄图也拍拍屁股下线,按
个人喜好随意删贴封人。这样的版主专门制造矛盾,装深沉,又水平低下,已经引起众
怒,无法称职,实不应继续担任版主一职。 |
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m*********k 发帖数: 10521 | 22 [Military] TempBM Dec 20 ● [新年活动]军版重金征集新年愿望,快快参与吧…
153*100=15300
成功奖励 100 伪币的用户: oldguy, ThreeMore, abcxyz2046, cayil, blli, wqdv, ll111, GreenRiver, ravecat, ceaj, PageA, Beisner, raei, frada, Deanna, ElliottJr, fcsea, redcard, purity, ipeb, joycee, yaz2012, dbnf, kakapo, llttjr, apollomaney, geophysics, lctl, anura, ChenHil, fajn, JGR, Xgeophysics, cyw, wayofflying, ssgo2008, gufengc, OXGBIX, wcnn, meoow, aixin2009, lonerider, BooBair, AngelaS, Farrell, ghassal, StationCC, aiheihei... 阅读全帖 |
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m*********k 发帖数: 10521 | 23 接上页:Rodimus, cnnssb, markh, umner, zzz59, FlyingBrothe, bigbaozi,
harding, atu2010
, Febaugust, goddy, matthewh, bbcool, BeckyHO, IC, oldgordon, cm123,
scoreboard
, Simin, hynek, realman888, lbanzheng, kevinj, vanddany, wobest, wsx123,
Unstoppable, smartkevin, xiaodaigua, astra, yansohu, Biofuel, IPLAW, ovoneL
, almeda, candy1980, dongge, beetle1986, Acartia, graceWA, mttbbs, reign1983
, BRavens, EC2, Skylla, KAROUN, gavin1972, DarkHill, lyufeng, colour, samiya
, erjie, hhaini, pinkplumeria, Mmj... 阅读全帖 |
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i*********5 发帖数: 19210 | 24 You are still my hero, Lance! I'm so happy that I was there on Champs-É
lysées witnessing your 7th TdF title win! |
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i*********5 发帖数: 19210 | 25 今早在FB跟我当年在Champs-Élysées看环法遇到的朋友聊天,他说他店里有
ROTOR Power Meter的现货,左右同时采样,€1,400,还在Skype上show给我看了
看。
drooling badly。。。。。。 |
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d******i 发帖数: 3957 | 26 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: lys (Upekkha~~~~~~), 信区: Military
标 题: 温相居然有五毛专属团队
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Aug 24 20:12:37 2013, 美东)
2004年5月,升任新华社副社长的鲁炜组织了一个专人团队为温家宝的个人形象包装服
务,该团队改变以前对中共领导报道严肃、呆板的做法,他们在报道中大胆刻画温家宝
的个人思想及鲜明个性。该团队的作品包括渲染温家宝出身贫贱、与中国网民交流谈患
脑溢血母亲、下矿井与矿工一起啃吃馒头、邀农民工到中南海会见、探视爱滋村孤儿、
读诗仰望星空、引经据典掉书袋子、替无助的民工讨薪等。[99]鲁炜也因此被称为温家
宝的形像化妆师。[100]
http://zh.wikipedia.org/zh/%E6%B8%A9%E5%AE%B6%E5%AE%9D |
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