s******y 发帖数: 28562 | 1 Clontech 有卖的,很好使,可以分开GFP/YFP 之类。 |
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s******y 发帖数: 28562 | 6 Clontech 有卖的,很好使,可以分开GFP/YFP 之类。 |
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w*e 发帖数: 740 | 10 为什么不就造一个pCAG-mCherry-miRNA binding : site-PolyA的小鼠,然后再和全身
都表达gfp的小鼠再杂交呢?这样还简单点,以后你这个简单的小鼠还可以更灵活运用
。。。 |
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a*q 发帖数: 2109 | 11 405 nm 激发 450 nm 荧光 (例如DAPI)
488 nm 激发 510 nm 荧光 (例如GFP,Alexa 488)
561 nm 激发 570 nm 荧光 (例如mCherry,Alexa 555)
647 nm 激发 670 nm 荧光 (例如Cy5,Alexa 647)
以上为四色同时成像的常见选择,基本没有太多Crosstalk。 |
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c**p 发帖数: 34 | 12 你的智商的确比较低,文章有些问题很正常,有问题你还狡辩就是你的问题了。什么叫
‘不管gfp还是mcherry结论是一样的’?可笑。 |
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z****u 发帖数: 1007 | 13 能看到发光。用UV flash light 照。带上专用的眼镜。就能直接看到荧光。
都不用genotype/. |
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y***n 发帖数: 109 | 15 我用TRIF 看转染了mCherry的、体外培养的海马体神经细胞,总是会看到很多洞一样的
结构,感觉好像soma没有完全贴到玻片上。类似于下面两张图片:
不知道有没有人遇到类似的情况?是因为细胞长的不好吗?还是玻片的问题? |
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q******g 发帖数: 3858 | 16 我也不太懂,随便说一下。
我想你需要观察动物的乳腺,看该蛋白是否有表达。
如果你有红色的荧光蛋白,mCherry, Tomato之类的,肯定不存在自发荧光干扰得问题
。这应该是最好的选择。
但考虑到你看的自发乳腺癌,离表皮比较近, 或许干扰比较小。这你需要查下文献。
luciferase用于活体观察没有问题。但如果你想分离乳腺细胞,做流式细胞仪分析,可
能荧光蛋白更好。 |
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b******s 发帖数: 1089 | 18 基本功能即可,能容纳large nozzle size (100 microns). 最好有laser setup可用于
大部分荧光蛋白GFP/YFP/Venus (488), mCherry, RFP (561), and CFP (405 or 436).
越便宜越好。。。谢谢! |
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H****s 发帖数: 301 | 20 不同细胞系应该不一样。绿荧光蛋白在真核细胞内的半衰期大概是26小时(Corrish P
,1999),这里的绿荧光蛋白是不带任何tag或者是fusion的,否则半衰期可以很短很
短(Li X,1998)。我估计红荧光蛋白应该差不多,所以如果你做定量的话,应该可以
看到区别。 |
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H****s 发帖数: 301 | 22 不同细胞系应该不一样。绿荧光蛋白在真核细胞内的半衰期大概是26小时(Corrish P
,1999),这里的绿荧光蛋白是不带任何tag或者是fusion的,否则半衰期可以很短很
短(Li X,1998)。我估计红荧光蛋白应该差不多,所以如果你做定量的话,应该可以
看到区别。 |
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