由买买提看人间百态

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全部话题 - 话题: mitotic
1 (共1页)
S*********s
发帖数: 304
1
请教做cell cycle的大拿~
有没有在mitotic phase or cytokinesis过程中stablize的蛋白~最好是通过post-
translational来调节的
如APC control G1 phase,SCF control S/G2/M phase的蛋白~
Thanks
s***e
发帖数: 911
2
你举的例子都太复杂了. 我举个更简单的, 已经足以说明很多生物复杂问题需要依赖直
接测量才能有效定量化. Mitotic chromosome究竟是有个rigid protein scaffold,
DNA绕在上面; 还是一个DNA network, protein只是提供网格节点的稳定性? 以前猜东
猜西, 也不如抓住一个chromosome, 测量它的力学响应, 以及MNase对这个力学响应的
理解深刻. 结论是mitotic chromosome是一个DNA network. 而且是一个非常松散的网
络.
Poirier MG, Marko JF. Free in PMC Mitotic chromosomes are chromatin networks
without a mechanically contiguous protein scaffold. Proc Natl Acad Sci U S
A. 2002 Nov 26;99(24):15393-7. Epub 2002 Nov 18.
A********e
发帖数: 354
3
【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: albertsmwk (.)(.), 信区: Biology
标 题: 第一批“青年千人计划”生物类@publication列表@
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Aug 18 15:04:16 2011, 美东)
花了一个小时,深深的鄙视一下自己的无聊行径!!
125 蔡亮 男 1980年11月 复旦大学 生命
科学 2007年12月毕业于[美国]北卡大学 [美国]加州大学旧金山分校 博士后
Cai L, Mostov K. Polarity is destiny. Cell. 2009 Nov 13;139(4):660-2. PubMed
PMID: 19914162; PubMed Central PMCID: PMC2900917.
Cai L, Makhov AM, Schafer DA, Bear JE. Coronin 1B antagonizes cortactin and
remodels Arp2/3-containing actin branche... 阅读全帖
p*******g
发帖数: 2976
4
【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
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标 题: 第一批“青年千人计划”生物类@publication列表@
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Aug 18 15:04:16 2011, 美东)
花了一个小时,深深的鄙视一下自己的无聊行径!!
125 蔡亮 男 1980年11月 复旦大学 生命
科学 2007年12月毕业于[美国]北卡大学 [美国]加州大学旧金山分校 博士后
Cai L, Mostov K. Polarity is destiny. Cell. 2009 Nov 13;139(4):660-2. PubMed
PMID: 19914162; PubMed Central PMCID: PMC2900917.
Cai L, Makhov AM, Schafer DA, Bear JE. Coronin 1B antagonizes cortactin and
remodels Arp2/3-containing actin branche... 阅读全帖
O***n
发帖数: 13127
5
【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
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标 题: 第一批“青年千人计划”生物类@publication列表@
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Aug 18 15:04:16 2011, 美东)
花了一个小时,深深的鄙视一下自己的无聊行径!!
125 蔡亮 男 1980年11月 复旦大学 生命
科学 2007年12月毕业于[美国]北卡大学 [美国]加州大学旧金山分校 博士后
Cai L, Mostov K. Polarity is destiny. Cell. 2009 Nov 13;139(4):660-2. PubMed
PMID: 19914162; PubMed Central PMCID: PMC2900917.
Cai L, Makhov AM, Schafer DA, Bear JE. Coronin 1B antagonizes cortactin and
remodels Arp2/3-containing actin branche... 阅读全帖
a********k
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6
花了一个小时,深深的鄙视一下自己的无聊行径!!
125 蔡亮 男 1980年11月 复旦大学 生命
科学 2007年12月毕业于[美国]北卡大学 [美国]加州大学旧金山分校 博士后
Cai L, Mostov K. Polarity is destiny. Cell. 2009 Nov 13;139(4):660-2. PubMed
PMID: 19914162; PubMed Central PMCID: PMC2900917.
Cai L, Makhov AM, Schafer DA, Bear JE. Coronin 1B antagonizes cortactin and
remodels Arp2/3-containing actin branches in lamellipodia. Cell. 2008 Sep
5;134(5):828-42. PubMed PMID: 18775315; PubMed Central PMCID: PMC2570342.
Cai L, Makhov AM, Bear JE. F-actin... 阅读全帖
n****n
发帖数: 434
7
来自主题: Biology版 - Nuclear actin distribution
some proteins (residing in the cytoplasm in non-mitotic cells) can be
wrapped into the nucleus at/after mitotic exit.
A******r
发帖数: 974
8
来自主题: Biology版 - 求文(PDF),包子感谢
1.
Mol Gen Genet. 1988 Dec;215(1):10-8.
The detection of mitotic and meiotic aneuploidy in yeast using a gene dosage
selection system.
Whittaker SG, Rockmill BM, Blechl AE, Maloney DH, Resnick MA, Fogel S.
Link:
http://www.springerlink.com/content/l30231v828l8w7q4/fulltext.p
2.
Mutation Research/Genetic Toxicology
Volume 242, Issue 3, November 1990, Pages 231-258
The detection of mitotic and meiotic chromosome gain in the yeast
Saccharomyces cerevisiae: Effects of methyl benzimidazol-2-yl carbam... 阅读全帖
h*******o
发帖数: 4884
9
For primary neurons, we use neurobasal media +B 27. It is selective towards
neurons and glia usually cannot survive for long term in NBM+B27. With that
said, there is no pure neuronal culture. Anyway, cultured neurons do exhibit
some glial properties, such as glucose transporter expression, metabolic
activity, etc.
For embryonic glial culture, we use DMEM/F12 (1:1) +10% FBS. Because glial
cells are mitotic whereas neurons are post-mitotic, neurons will be easily
outnumbered by proliferative glia... 阅读全帖
p*******g
发帖数: 2976
10
【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: albertsmwk (.)(.), 信区: Biology
标 题: 第一批“青年千人计划”生物类@publication列表@
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Aug 18 15:04:16 2011, 美东)
花了一个小时,深深的鄙视一下自己的无聊行径!!
125 蔡亮 男 1980年11月 复旦大学 生命
科学 2007年12月毕业于[美国]北卡大学 [美国]加州大学旧金山分校 博士后
Cai L, Mostov K. Polarity is destiny. Cell. 2009 Nov 13;139(4):660-2. PubMed
PMID: 19914162; PubMed Central PMCID: PMC2900917.
Cai L, Makhov AM, Schafer DA, Bear JE. Coronin 1B antagonizes cortactin and
remodels Arp2/3-containing actin branche... 阅读全帖
j*******4
发帖数: 5
11

/* */谢谢!!!
不好意思,我忘了把简历贴上。谢谢大家的帮忙!!!
Fei Jiang
PROFILE
Master of Public Health candidate concentrating in Biostatistics.
Experienced in study design, data collection, database management, the
methods and techniques of statistical analysis such as linear regression,
logistic regression, survival data analysis and correlated data analysis.
Over 5 years’ experience utilizing statistical analysis software SAS and
SPSS. Efficient in both a team environment and working independently.
Exceptional wri... 阅读全帖

发帖数: 1
12
来自主题: Faculty版 - Jan's lab : 这里有弟子么?

Download pdf published by SfN (Chapter from 'The History of Neuroscience in
Autobiography, Volume 8' edited by Larry R. Squire)
Yuh-Nung Jan's CV
Lily Jan's CV
Yuh-Nung Jan and Lily Jan
Birth
Family History and Growing Up
National Taiwan University
The Hiking Trip to Shitou in the Spring of 1967
Graduate School Application
Graduate Study at Caltech (1968锟974)
Seymour Benzer Lab (1974锟977)
Steve Kuffler锟絪 Lab at H... 阅读全帖

发帖数: 1
13
【 以下文字转载自 Joke 讨论区 】
发信人: CornucopiaX (VE  RI  TAS), 信区: Joke
标 题: 巴德年是满人。。。哈哈哈哈。。汉人真萎啊
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Oct 24 12:00:26 2017, 美东)
巴德年 编辑
巴德年,吉林省四平市人。 免疫学家。中国工程院院士。
原中国医学科学院院长、中国协和医科大学校长、教授,浙江大学医学院院长[1] 。
兼任中国医学科学院中国协和医科大学顾问、中华医学会副会长、《中华医学杂志》总
编、中国免疫学会名誉理事长、中国生物医学工程学会名誉理事长、中国生物医学工程
学会名誉理事长、国务院学位委员会委员。[1] 第九届、第十届全国政协委员。[2]
巴德年长期致力于肿瘤免疫研究和高等医学教育改革及浙大医学学科的全面繁荣。在二
十世纪80年代初,因其免疫学的研究有多项成果在国内国际处于领先水平,成为中国癌
生物疗法的学术带头人之一;二十一世纪初,巴德年任浙江大学医学院院长期间,主持
的科研和教改成果在中国处于领先水平。
中文名
巴德年
国 籍
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h**l
发帖数: 7
14
来自主题: Medicine版 - 求助:子宫肌瘤癌变
非常感谢Myshoestring的回贴。医生在做手术的时候确实用一种溶液检查过盆腔内的
淋巴结,呈阴性,从而认为没有癌细胞扩散至盆腔内的淋巴结。现在已看到病理检查报
告:
This uterine smooth muscle tumor shows diffuse moderate to severe cytologic
atypia. There is a hemorrhage and focal necrosis. In addition, the mitotic
rate is as high as 10/10hpf. Based these parameters, it is classified as an
intermediate grade leiomyosarcoma.
下面是我的大致翻译:
这一子宫平滑肌瘤显示从中度到快速扩散非典型细胞。此外,有出血和病灶坏死。细胞
有丝分裂速率高达10/10hpf. 基于这些参数,这一子宫肌瘤划分为中度平滑肌肉瘤(癌)。
刚见过肿瘤医生,他首先安排CAT扫描,检查肺和别的器官是否被侵入,并建议伤口好
后,做第二次手术,切除子宫颈,卵
s*******o
发帖数: 951
15
http://sourcedb.simm.cas.cn/zw/qrjh/201101/t20110117_3063242.ht
姓 名:  王卫 性 别:  男
职 称:  研究员 学 历:  博士
电 话:   传 真:
电子邮件:  w*****[email protected] 个人主页:
通讯地址:  上海市浦东新区张江海科路501号 201203

简历:
1988 年毕业于南京师范大学化学系,获理学学士学位,1993 年从中国科学院上海药物
研究所获得硕士研究生学位, 1996 年赴美学习研究生课程,并于 2000 年获得美国北
卡州立大学有机化学专业的博士学位。随后转入亚利桑那大学从事博士后研究工作。
2002 年在跨国制药公司诺华(Novartis)基因组研究所担任研究员。2003 年受聘于美国
新墨西哥大学化学,先后担任助理教授和副教授,2009年入选中科院上海药物所“千人
计划”人才引进,担任研究员、 课题组长。
研究方向:
主要从事有机/药物化学和化学生物学交叉学科的研究工作,致力于研发新的高效化学
合成和化学生物学方法和技术: 有机化学合成方法学-有机小分... 阅读全帖

发帖数: 1
16
巴德年 编辑
巴德年,吉林省四平市人。 免疫学家。中国工程院院士。
原中国医学科学院院长、中国协和医科大学校长、教授,浙江大学医学院院长[1] 。
兼任中国医学科学院中国协和医科大学顾问、中华医学会副会长、《中华医学杂志》总
编、中国免疫学会名誉理事长、中国生物医学工程学会名誉理事长、中国生物医学工程
学会名誉理事长、国务院学位委员会委员。[1] 第九届、第十届全国政协委员。[2]
巴德年长期致力于肿瘤免疫研究和高等医学教育改革及浙大医学学科的全面繁荣。在二
十世纪80年代初,因其免疫学的研究有多项成果在国内国际处于领先水平,成为中国癌
生物疗法的学术带头人之一;二十一世纪初,巴德年任浙江大学医学院院长期间,主持
的科研和教改成果在中国处于领先水平。
中文名
巴德年
国 籍
中国
民 族
满族
出生地
吉林省四平市
出生日期
1938年10月27日
职 业
免疫学家
毕业院校
哈尔滨医科大学
信 仰
共产主义
主要成就
首次提出免疫功能异常与高血压发生的关系;获国家级科技进步奖
... 阅读全帖

发帖数: 1
17
【 以下文字转载自 Faculty 讨论区 】
发信人: CornucopiaX (VE  RI  TAS), 信区: Faculty
标 题: 巴德年是满人, 中共党员。。。哈哈哈哈。。汉人真萎啊
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Oct 24 12:01:21 2017, 美东)
发信人: CornucopiaX (VE  RI  TAS), 信区: Joke
标 题: 巴德年是满人。。。哈哈哈哈。。汉人真萎啊
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Oct 24 12:00:26 2017, 美东)
巴德年 编辑
巴德年,吉林省四平市人。 免疫学家。中国工程院院士。
原中国医学科学院院长、中国协和医科大学校长、教授,浙江大学医学院院长[1] 。
兼任中国医学科学院中国协和医科大学顾问、中华医学会副会长、《中华医学杂志》总
编、中国免疫学会名誉理事长、中国生物医学工程学会名誉理事长、中国生物医学工程
学会名誉理事长、国务院学位委员会委员。[1] 第九届、第十届全国政协委员。[2]
巴德年长期致力于肿瘤免疫研究和高等医学教... 阅读全帖
c****i
发帖数: 27
18
哥大副教授
http://crr-cu.org/yin.htm
Yuxin Yin, M.D., Ph.D.
Contact Information
Yuxin Yin
Department of Radiation Oncology
Center for Radiological Research
VC 11-213
630 W. 168th St.
New York, NY 10032
Tel: (212) 305-5699
Fax: (212) 305-3229
email: y***[email protected]
Research Interests
The mechanism of the cellular response to environmental stress
Nuclear PTEN in mitotic checkpoint control and tumor suppression
Network of p53 and PTEN
Academic Training

Graduate:
M.Sc., Medicine, Xian Jiaoto
m**x
发帖数: 8454
19
来自主题: Shanghai版 - 看见一个搞笑的。 (转载)
【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: ibmgoog (mitotic spindle), 信区: Military
标 题: 看见一个搞笑的。
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jun 4 11:29:28 2013, 美东)
rt
s*******y
发帖数: 46535
20
来自主题: Xibei版 - 看见一个搞笑的。 (转载)
【 以下文字转载自 Shanghai 讨论区 】
发信人: mdmx (没大没小), 信区: Shanghai
标 题: 看见一个搞笑的。 (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jun 4 13:26:04 2013, 美东)
发信人: ibmgoog (mitotic spindle), 信区: Military
标 题: 看见一个搞笑的。
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jun 4 11:29:28 2013, 美东)
rt
r**r
发帖数: 171
21
If I am wrong, correct me.
For Q5, if they use CSF extract( a kind of Xenopus extract, which should be
natually mitotic extract, once you add Calcium, a good CSF extract will start
to cycle.), they can avoid the possible artifact. The problem is in their
paper they use all human proteins(separase, securin and cohesin.) If they use
CSF extract, the proteins they can analyze for MS are Xenopus proteins. What I
don't understand is why they use human proteins.
For Q6,
Nagao K, Yanagida M.
Regulating
r**r
发帖数: 171
22
A good CSF extract should be arrested @ metaphase.
After the addition of calcium or fertilization which causes a transient
increase in cytoplasmic calcium conc., the CSF will be inactivated, following
by APC activation, cyclin B destruction and mitotic exit. And this process is
roughly 30 min. It is easy to collect phosphorylated separase before the
addition of calcium. To collect the unphosphorylated one, like you say, you
can throw sperm chromatin into extract and monitor the progresstion by D
h******b
发帖数: 312
23
来自主题: Biology版 - Journal club this week
Science. 2003 May 16;300(5622):1152-5.
Distinct cohesin complexes organize meiotic chromosome domains.
Kitajima TS, Yokobayashi S, Yamamoto M, Watanabe Y.
Department of Biophysics and Biochemistry, Graduate School of Science,
University of Tokyo, Tokyo 113-0033, Japan.
Meiotic cohesin complexes at centromeres behave differently from those along
chromosome arms, but the basis for these differences has remained elusive. The
fission yeast cohesin molecule Rec8 largely replaces its mitotic counterpa
n*7
发帖数: 51
24
来自主题: Biology版 - 请帮忙找两篇老文章,先谢了
Shirodkar, S., M. Ewen, J. A. DeCaprio, J. Morgan, D. M. Livingston, and
T. Chittenden. "The Transcription Factor E2F Interacts with the
Retinoblastoma Product and a p107-Cyclin A Complex in a Cell Cycle-
Regulated Manner." Cell 68, no. 1 (1992): 157-166.
Hayles, J., D. Fisher, A. Woollard, and P. Nurse. "Temporal Order of S
Phase and Mitosis in Fission Yeast Is Determined by the State of the
p34cdc2 Mitotic B Cyclin Complex." Cell 78, no. 5 (1994): 813-822.
oaixil AT hotmail.com
J***2
发帖数: 444
25
来自主题: Biology版 - AuroraB comments?
1.Histone H3 Thr-3 Phosphorylation by Haspin Positions Aurora B at
Centromeres in Mitosis
Fangwei Wang, Jun Dai, John R. Daum, Ewa Niedzialkowska, Budhaditya
Banerjee, P. Todd Stukenberg, Gary J. Gorbsky, and Jonathan M. G. Higgins
Published online August 12 2010; 10.1126/science.1189435 (Science
Express Reports)
2.Survivin Reads Phosphorylated Histone H3 Threonine 3 to Activate the
Mitotic Kinase Aurora B
Alexander E. Kelly, Cristina Ghenoiu, John Z. Xue, Christian Zierhut,
Hiroshi
l*****l
发帖数: 1451
26
来自主题: Biology版 - 求paper Methods Molecular Biology 2009
Methods in Molecular Biology, 2009, Volume 545, 21-37, DOI: 10.1007/978-1-
60327-993-2_2
Functional Dissection of Mitotic Regulators Through Gene Targeting in Human
Somatic Cells
n***w
发帖数: 2405
27
来自主题: Biology版 - 一个neuroscience的问题
我原来读过04年neuron上一篇文章:Mitotic spindle regulation by Nde1 controls
cerebral cortical size.
f*****e
发帖数: 223
28
哈医大专家周春水发现乳腺癌新型抑癌基因
http://www.hljnews.cn 2011-03-23 来源:黑龙江新闻网-黑龙江日报
黑龙江新闻网讯 在本月世界顶尖级生物医学杂志《CELL》上,哈佛医学院与哈医
大专家关于PTPN12蛋白为新型抑癌基因的最新研究成果引起国际肿瘤界的普遍关注。
PTPN12是哈佛医学院发现的一个阳性蛋白分子。为了证明该蛋白分子与癌细胞的作
用关系,专家们用小核苷干扰技术抑制PTPN12表达,结果发现PTPN12表达水平降低会引
起正常细胞恶性生长,反之其过量表达可对恶性细胞的生长有一定的抑制作用。哈医大
医学遗传学教授周春水通过实验发现在PTPN12表达受到抑制时,乳腺癌的促癌基因EGFR
受体家族的络氨酸磷酸化有显著增强,而EGFR受体家族正是经过一系列络氨酸磷酸化而
被激活,产生促细胞癌变效应,从而周春水教授成功地确定了PTPN12是一种新型抑癌基
因。
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=zhou%20chunshui%20and%2
Results: 3
1.Activation o... 阅读全帖
j********r
发帖数: 156
29
来自主题: Biology版 - 癌细胞浓度和耐药性的关系
同意oncogene说的。常见的chemo药物很多都是target certain aspect of the
mitotic event. 建议楼主检测一下细胞周期of high/low density of cells
untreated and treated with the drug.
But there is auto-(para-)crine mechanism contributing to the activation of
pro-survival pathway in cells with decent density. The underlying mechanism
大家给科普一下。
A******r
发帖数: 974
30
Mitotic hyperploidy for chromosomes VIII and III in Saccharomyces cerevisiae
Current Genetics
Volume 21, Numbers 4-5, 309-318, DOI: 10.1007/BF00351688
http://www.springerlink.com/content/v11546849n508128/fulltext.p
My email address: f*****************[email protected]
非常感谢!
l**********1
发帖数: 5204
31
来自主题: Biology版 - Confocal microscopy 请教
Please refer:
scanned Bessel beams in conjunction
with structured illumination and/or two-photon excitation to create thinner
light sheets (<0.5 μm) better suited to three-dimensional (3D) subcellular
imaging
PubMed link:
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21378978
Planchon TA, Gao L, et al.
Rapid three-dimensional isotropic imaging of living cells using Bessel beam
plane illumination.
Nat Methods. 2011 May;8(5):417-
>Abstract
>A key challenge when imaging living cells is how to noninvasively extract... 阅读全帖
l**********1
发帖数: 5204
32
NGS illumina or ION miRNAi high-thoughtout screening on epigenetic plant on
the mitotic propagation of epigenetic states.
please refer:
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21399627
from
//meetings.cshl.edu/meetings/symp12.shtml
one key speaker:
//www.unige.ch/sciences/biologie/plantsciences/grpaszkowski/Paszkowski_lab/
Research.html
his web page:
Our research focuses on the transgenerational inheritance of epigenetic
information in plants and on the molecular mechanisms involved in this
process. In ot... 阅读全帖
l******o
发帖数: 103
33
自己的一个project,发现它有mitotic phosphorylation,但是做过实验,发现
1 对它本身的蛋白稳定性没什么影响。
2 对它和它的well-established binding parterner没太大影响
3 localization没大影响
想不出其他的方向了,大家有这方面的经验吗?谢了。
i*******n
发帖数: 48
l********n
发帖数: 260
35
来自主题: Biology版 - paper help
Science. 2011 Jul 15;333(6040):342-5.
Control of mitotic spindle angle by the RAS-regulated ERK1/2 pathway
determines lung tube shape.
Tang N, Marshall WF, McMahon M, Metzger RJ, Martin GR.
please send to a*************[email protected]
Thanks a lot!!
l**********1
发帖数: 5204
36
HTTP ://www.medicine.mcgill.ca/expmed/emjl/expmed_display.asp?Expmed_ID=3192
EMJL
Experimental Medicine Job Listing
Job Posting
Position Title :
Postdoc
Zone: Université de Montréal - General
Recruiter Information :
VincentArchambault
Principal Investigator
IRIC
Université de Montréal
Montréal,
Project Description:
Drs Damien D'Amours and Vincent Archambault are looking for a postdoc for a
collaborative project on mitotic kinases in human cells. Experience with
RNAi and clonal cell line generati... 阅读全帖
C*********m
发帖数: 213
37
来自主题: Biology版 - 求 cell cycle 2012年文一篇
学校里只能搞到一年前的。
http://www.landesbioscience.com/journals/cc/article/21574/
CEP192 interacts physically and functionally with the K63-deubiquitinase
CYLD to promote mitotic spindle assembly
发到 c*********[email protected]
多谢
q***7
发帖数: 144
38
来自主题: Biology版 - shRNA cloning site of pGIPZ?
提小RNA可以用这个公司的Kit 或者他们的试剂。可以同时检测mRNA和小RNA的表达水平
http://www.greenbioresearch.com/mitotal-rnamini-using-qiagen-ki
http://www.greenbioresearch.com/ribozol-trizol-tri-reagent-me/
q***7
发帖数: 144
39
来自主题: Biology版 - shRNA knockdown 实验求助
你如果用的是Qiagen 或其他公司的柱子提的RNA,那你有没有考虑过RNA样品中的洗液
的影响?
尤其是RNA浓度低的样品。因为要调成和浓度高的样品一样的总量,所以要加的比较高
的体积。这样在反转录体系中这个低样品的洗液就多,抑制反转录酶的活性很强。所以
你虽然放了一样多的总RNA,但是大多都没有被反转录。当你所qPCR时,你这个样品的
Ct值会很高,意思就是表达很低。所以就是给你表达低的假现象。你做qPCR时,可以留
意一些低浓度样品的Ct值。很多人发表的qPCR的文章后来表明结果相反,有一些原因是
这些研究者没有考虑这个原因。
这是我给另外一个贴子的回复
Qiagen柱子提取的RNA总是含很多的洗液。后面会影响到反转录酶的活性。如果每个样
品的浓度不一样,你做qPCR时,要调成一样的浓度,这样你做反转录的每一个样品的反
应液里含有的洗液浓度就不一样。不一样的洗液浓度,抑制反转录酶的程度也不一样。
这样你最后出来的qPCR结果肯定不准确。有的样品里表达低,可能是因为洗液多而抑制
了反转录酶造成的,而不是真正的表达低。如果你同一组的样品,有的表达高,有的表
达低,一般都是这个原因造成... 阅读全帖
q***7
发帖数: 144
40
来自主题: Biology版 - shRNA knockdown 实验求助
好多人的Knockdown用qPCR检测时,其实检测到的低表达(高CT值)其实大部分都是由
于里面的洗液抑制了反转录而导致CDNA量少而造成的。尤其是KNOCKDOWN样品的低浓度
时,尤其是如此。可以试一下这个公司的RNA提取盒。可以同时提mRNA和小RNA。
http://www.greenbioresearch.com/mitotal-rnamini-using-qiagen-ki
q***7
发帖数: 144
41
你那测出来的都是洗液(总称solvent)。后面会影响到反转录酶的活性。如果每个样品
的浓度不一样,你做qPCR时,要调成一样的浓度,这样你做反转录的每一个样品的反应
液里含有的洗液浓度就不一样。不一样的洗液浓度,抑制反转录酶的程度也不一样。这
样你最后出来的qPCR结果肯定不准确。有的样品里表达低,可能是因为洗液多而抑制了
反转录酶造成的,而不是真正的表达低。如果你同一组的样品,有的表达高,有的表达
低,一般都是这个原因造成的建议你试一试这个公司的KIT,而且还可以同时检测小RNA
。便宜又好用
http://www.greenbioresearch.com/mitotal-rnamini-using-qiagen-ki
q***7
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q***7
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你如果用的是Qiagen 或其他公司的柱子提的RNA,那你有没有考虑过RNA样品中的洗液
的影响?
尤其是RNA浓度低的样品。因为要调成和浓度高的样品一样的总量,所以要加的比较高
的体积。这样在反转录体系中这个低样品的洗液就多,抑制反转录酶的活性很强。所以
你虽然放了一样多的总RNA,但是大多都没有被反转录。当你所qPCR时,你这个样品的
Ct值会很高,意思就是表达很低。所以就是给你表达低的假现象。你做qPCR时,可以留
意一些低浓度样品的Ct值。很多人发表的qPCR的文章后来表明结果相反,有一些原因是
这些研究者没有考虑这个原因。
这是我给另外一个贴子的回复
Qiagen柱子提取的RNA总是含很多的洗液。后面会影响到反转录酶的活性。如果每个样
品的浓度不一样,你做qPCR时,要调成一样的浓度,这样你做反转录的每一个样品的反
应液里含有的洗液浓度就不一样。不一样的洗液浓度,抑制反转录酶的程度也不一样。
这样你最后出来的qPCR结果肯定不准确。有的样品里表达低,可能是因为洗液多而抑制
了反转录酶造成的,而不是真正的表达低。如果你同一组的样品,有的表达高,有的表
达低,一般都是这个原因造成... 阅读全帖
q***7
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来自主题: Biology版 - 哭求帮助:骨组织提totalRNA
Please try this company's RNA isolation kit which is much better than Qiagen
kit.
http://www.greenbioresearch.com/mitotal-rnamini-using-qiagen-ki
Z******t
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45
看了一下, stemgent只有这个
https://www.stemgent.com/products/show/253#
但是是mitotically inactivated fibroblasts,只能做feeder cells 不能做iPS吧?
m******g
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46
自己吐槽一下,虽然对于看过文献的研究系统/漂亮的图什么的记得比较清楚
但是作者什么的老是不太记得
有时候看到有的人可以一堆一堆地数出来,感觉好厉害啊!
觉得这期science比较有趣,虽然没有那种看得超感动的文章,但是还是有不少很值得
一看的paper的。
Science 13.11.22
推荐:
1. Organization of the Mitotic Chromosome
用5C和Hi-C, 发现分裂中期结构是与位点无关的均质,并用polymer模拟
“A simple, robust model explains higher-order organization of mammalian
chromosomes.”
(最近这类文章真多,好像周周都有?感觉个人不是那么感兴趣了~~~)
2. Two Y Genes Can Replace the Entire Y Chromosome for Assisted Reproduction
in the Mouse
testis determinant factor Sry
spermatogonial proliferatio... 阅读全帖
m******g
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自己吐槽一下,虽然对于看过文献的研究系统/漂亮的图什么的记得比较清楚
但是作者什么的老是不太记得
有时候看到有的人可以一堆一堆地数出来,感觉好厉害啊!
觉得这期science比较有趣,虽然没有那种看得超感动的文章,但是还是有不少很值得
一看的paper的。
Science 13.11.22
推荐:
1. Organization of the Mitotic Chromosome
用5C和Hi-C, 发现分裂中期结构是与位点无关的均质,并用polymer模拟
“A simple, robust model explains higher-order organization of mammalian
chromosomes.”
(最近这类文章真多,好像周周都有?感觉个人不是那么感兴趣了~~~)
2. Two Y Genes Can Replace the Entire Y Chromosome for Assisted Reproduction
in the Mouse
testis determinant factor Sry
spermatogonial proliferatio... 阅读全帖
m******5
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48
弱弱地说一下,我记得plasmid进核基本是一定的,除了植物里importin alpha介导有
人已经说了,哺乳动物细胞是由importin T介导的(STH like that)
另外,我觉得可以做几个thought experiment
1,如果只有M phase plasmid才能趁着核膜解体进核,那酵母里转染基本是mission
impossible了(因为酵母核膜不解体)。
2,如果只有M phase plasmid才能进核,我们转染293T是不可能在24小时后达到80%的
transfection efficiency without doubled cell number.
3,如果M phase plasmid才能进核,是否表达外源质粒早就会被发展成鉴定是否post -
mitotic cell的标准了。
…………我觉得还有很多例子。
最后弱弱地说一下,我之所以想到这些粒子,因为我似乎看到过把质粒转进去再pull
down下来看sequence specific histon deposition的,啊哈哈
h*******o
发帖数: 4884
49
AraC is commonly used to selectively inhibit mitotic cells.
w*********9
发帖数: 3
50
来自主题: Biology版 - 文献求助
Kast, A., Nishikawa, J., Yabe, T., Nanri, H., and Albert, H. (1988).
Circadian rhythm of liver parameters (cellular structures, mitotic activity,
glycogen and lipids in liver and serum) during three consecutive cycles in
phenobarbitaltreated rats. Chronobiol. Int. 5, 363–385.
Please send to: [email protected]
/* */
Thank you very much
1 (共1页)