p*****9
发帖数: 32 | 1 本人想用nocodazole treat NIH3T3 cell 看G2/M phase arrest. 请问用100ng/ml
treat 20 hour 后细胞形态应该是什麽样的呢？ G2/M phase 的细胞都应该是圆圆的吗
，好象还比较小。
以前没用过nocodazole, 请用过的人指点一二。多谢 |
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y***i
发帖数: 11639 | 2 google Nocodazole synchronization
必须用 Thymidine-Nocodazole double treatment。而且之前必须从让cell不断的分
裂几次，让cell处在活跃的proliferation 状态才行。结果好坏部分靠运气。最好能到
7~80%。
%, |
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p*****9
发帖数: 32 | 3 请问Nocodazole treat 后 多少percentage 的细胞会变圆, arrest 到G2/M? 是 100%,
或是大多数的细胞吗? 我做只有10-20% 细胞变圆, 感觉不太对头呀.
多谢了. |
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l******g
发帖数: 83 | 4 3T3 用Nocodazole synchronization 的效果是不太好，我以前做的时候，几个cell
line， 3T3 treat后变圆的比例最少。用在Hela 还有293 上效果很好。
%, |
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p*****9
发帖数: 32 | 8 多谢高人指点, 请问在 double thymidine treat 前, 一般plate 多少cell density
比较合适? 自己觉得不能plate 太高的density, 20% 左右(double thymidine
treatment 开始时) 合适吗? |
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k****n
发帖数: 158 | 9 最近老板要我同步化MEF(mouse embryonic fibroblast) 在G2期然后释放（release）
，分析
细胞分裂（cell division）；
请问有什么效率比较高的protocol推荐吗，只考虑用化学试剂的方法来诱导--我认为这
样最省事；-
）。
当然在发帖之前我也google了一下，没有找到一个非常通用的方法，一些文献说用血清
饥饿法（serum
starvation）；我担心效率不会太高，而且好像同步在G1期，还有一些提到离心分离的
方法，这个对
我来说就太麻烦了。
最后找到下面的组合：
1）Thymidine-Nocodazole block
2）Aphidicolin and Hoechst
各位在做细胞分裂的大虾们，能不能提点下比较好的方法，或者帮我分析分析如上方法
是否可行？
不胜感激！ |
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s******y
发帖数: 28562 | 10 1）Thymidine-Nocodazole block
这个是比较常用的。 |
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