由买买提看人间百态

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全部话题 - 话题: p38
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m**********d
发帖数: 137
1
分别看p38,JNK,ERK三个pathway的signaling activity,对于p38 pathway,大家认为
哪个phosphorylation target对于p38 pathway特异性更好一些?谢谢
m******5
发帖数: 1383
2
the financial situation is a little bit tight
so there would be no chance for me to try too many antibodies……
so could you recommend a pair of antibody anti p38 and phorsphorylated p38
to detect if this pathway is elevated?
Thank you much!
M*****2
发帖数: 379
3
最近需要test p38 pathway, 用了specific inhibitor SB 203580
但是居然发现在2种不同cell line里, SB 203580都明显的增加了phospho-p38,而且
做了个dose-dependent试验,单纯只加SB 203580,不但没有inhibit,反而activate
了p38。
已经试过了Cayman和 Sigma 2家的chemical,而且也serum free12h, pre-
treatment2小时过,能troubleshoot的都想过了,还是这种相反的结果,实在是想不通
怎么回事?
请教大家有过类似的问题么? 有可能是什么原因呢? 等着这个inhibition做最后的in
vitro试验,折腾好久了。。。
s*******n
发帖数: 37
4
你不能用phospho P38去检测p38 inhibitor,inhibitor 结合kinase domain,和
activation domain 的磷酸化是两回事。你应该用p38底物(mapkapk1?)的磷酸化去确
定抑制剂的效果。

activate
in
h******y
发帖数: 1374
5
CST:
Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (D3F9) XP™ Rabbit mAb #4511
1:2000 dilution
c**a
发帖数: 94
6
目前做的是1个小时serum starvation, 细胞受各种treatment. western 总是得不到
phospho信号, 不知道有没有什么试剂是可以诱导明显的p38磷酸化增加,这样我可以用
来做positive control. 抗体用的是cell signaling的. 用cell signaling 的cell
extract跑western, 这个抗体可以很好的识别phospho-p38.
求指教.
S****r
发帖数: 982
7
Taking anisomycin or UV treated CHO as positive control. There are decent
amount of p38 in CHO, but anti-pp38 from Cell Signaling may not work well to p38 from CHO.
c**********r
发帖数: 2372
8
total的 p38和mapk
有前辈用过不?求推荐品牌~
p38最好不要是mouse的
ERK最好不要是rabbit的
多谢啦
y****g
发帖数: 36950
9
来自主题: Military版 - P38应该是零式克星吧
玩过1942 1944都知道,一个P38能打掉成千上万架零式
而且这是日本人自己做的。
t*****a
发帖数: 5180
10
来自主题: Military版 - P38应该是零式克星吧
屁38是一代杰作机,垂直机动能力比零式强,格斗能力不行.
屁38早期型号,俯冲的时候跨音速了,导致飞机失控,后期型号专门安装了减速板解
决这个问题.

玩过1942 1944都知道,一个P38能打掉成千上万架零式
s******u
发帖数: 538
11
来自主题: GunsAndGears版 - 今天有类似WALTHER P38 造型的手枪么?
这种枪管从滑套里伸出来的造型 也就是Walther P38/P1/P4和Ruger Mark II/III了
F******p
发帖数: 2099
12
p38量很低
F******p
发帖数: 2099
13
p38量很低
a*******n
发帖数: 156
14
你确定你那个抗体对仓鼠有反应?
我印像中cell signaling的P38是单抗
l**********1
发帖数: 5204
15
try
Human Phospho-MAPK Array kit
(R&D Systems, Minneapolis, MN).
link:
//www.biocompare.com/ProductDetails/3015549/Proteome-Profiler-Human-Phospho-
MAPK-Array-Kit-NEW.html
cited from 2011 paper:
Activation of p38 mitogen-activated protein kinase by norepinephrine in T-
lineage cells.
Immunology. 2011 Feb;132(2):197-
link:
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21039464
>Phospho-MAPK protein array
>Following exposure to NE (150 lM, 15 min), total cellular
>protein was obtained using the reagents and proto... 阅读全帖
k****o
发帖数: 589
16
一个小时starvation太短了吧,文献里各种细胞很多都是6-24小时
你total p38有信号没?
w***a
发帖数: 1053
17
p38量很低,你可以弄个uv照一下,或者+tgf-beta做个阳性对照
a*******s
发帖数: 117
18
来源:神州学人
http://www.chisa.edu.cn/szxrzz/qikan/2012no9/201209/t20120912_4
文/本刊记者 杨宇
在厦门大学一隅,有几座用彩钢板搭建的简易小楼,韩家淮的实验室就在这里,虽是暑
期,仍有不少学生在里面神情专注地做实验。
一见面,韩家淮就说:“采访是学校派下来的任务,无非就是我的实验室发了几篇
文章嘛,没什么好报道的。”
这是韩家淮一贯的作风,他为人低调,除了“圈里人”,很少有人知道这位生命科
学领域的优秀海归科学家和他的研究方向。
从p38到RIP3
韩家淮带领的团队对炎症反应机理的研究一直处于世界前沿,他所发现的p38信号
通路在炎症反应中起着极其重要的作用。2010年,“炎症和疾病的关系”被《科学》杂
志列为近10年最大的科学发现之一。
p38丝裂原蛋白激酶家族是一个在真核生物中高度保守的激酶家族。细胞内存在多
条信号通路,以介导不同的生物学反应。p38信号通路是细胞内最重要的信号通路之一
,它在外界的几乎所有刺激下都会被激活,在许多生物学反应包括细胞周期调控、细胞
增殖、发育、分化、衰老、凋亡和免疫反应中起重... 阅读全帖
s**b
发帖数: 169
19
来自主题: Military版 - Re: 汽油标号的趣闻
【 以下文字转载自 Automobile 讨论区 】
发信人: felixcat (felixcat), 信区: Automobile
标 题: Re: 汽油标号的趣闻
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Oct 11 23:34:18 2007)
苏联的了解不多,就先不说了。咋们继续主题。
话说当年老美答应卖667架P38给英国和法国,在export control之下,老美做了如下改
动:
1. 国内使用的P38,左右两个螺旋桨分别朝反方向转动:也就是说你面对着飞机头,左
边的螺旋桨是逆时针转动,右边的螺旋桨则是顺时针转动。据说这样的设计可以抵消每
台发动机转动时产生的扭矩,使得飞机操控性更加好。而出口到英国和法国的P38,老
美却把它们制造成两个螺旋桨朝同一个方向转,于是操控性立马打折扣。
2. 出口的P38上面取消了涡轮增压。
更加糟糕的是,那时候英国使用的汽油,最高的标号比美国的低不少,影响发动机功率
之余还很伤部件。总之,英国空军接收了前三架,测试了一下发现飞机最高速度只能达
到480kmh,并且操控变得很糟糕。英国一气之下取消了整个订单,但这时候美国的工厂
已经把英
M******8
发帖数: 10589
20
来自主题: Military版 - CardesignPics汽车设计圈
2014-02-20 CardesignPics汽车设计圈 CardesignPics汽车设计圈 微信号
功能介绍
CardesignPics是成立在2014年1月1日,全球首家专业的汽车设计自媒体

今年是甲午年,中日之间的形势已经日趋紧张,看安倍政府的嚣张气焰,具有血性的中
国青年汽车设计学生不感到血脉贲张吗?以史为鉴,小编将抽时间回顾二战历史上的军
事武器,尤其是那些侵略我国的臭名昭著的日式武器,更重要介绍那些痛扁鬼子的重要
武器设计。
首先上台的第一款武器设计为P38,这款飞机从造型上看丑急了,两个机身加一个机头
三个并排,附加两个机尾,简直就是怪胎!还能再丑点么?但是人不可貌相,它的分量
很重,在太平洋战争中击落日军战机最多的就是它。尤其是发动珍珠港的元凶日本山本
五十六就是被P38击毙的!在很多电子游戏中,尤其是红白机以及操纵杆游戏中,P38出
现的次数也是很多的。记得以前就有投币式的飞机游戏中,驾驶着P38双机身战机去轰
炸日军航母的关卡。
P-38“闪电”式战斗机是二战时期由美国洛克希德公司生产的一款双引擎战斗机。为了
满足美国陆军航空军(USAAF,美国空军前身)... 阅读全帖
r********0
发帖数: 116
21
这里的一个就很有水平,而且中美通吃,韩家淮,厦门大学教授,美国Scripps
Research Institute教授。
韩家淮教授是p38信号通路的发现者。细胞内存在多条信号通路以介导不同的生物学反
应。p38信号通路是细胞内最重要的信号通路之一,它在许多生物学反应包括细胞周期
调控、细胞增殖、发育、分化、衰老、凋亡、免疫反应及肿瘤发生中起重要作用。韩家
淮教授领导的实验室在p38信号通路的研究领域一直保持世界领先地位。
迄今已在世界主流学术刊物上发表论文200余篇,其中9篇发表在Cell、Nature、
Science上(6篇为通讯作者),14篇发表在Cell和Nature的姊妹杂志上(8篇为通讯作
者),并获美国专利多项。截止至2012年1月,论文被他人引用20000余次,单篇最高引
用率2000余次
牛人呀,这才是中国需要引进的。
c**a
发帖数: 94
22
来自主题: Biology版 - 求教这到底是不是同一个蛋白
如图, 做western的时候, 用phospho-p38抗体标记,总是有多条带,其中两条带如图 (绿
色示意), 这个抗体识别所有phospho-p38. 但是如果用 p38 alpha 抗体标出来像红色
示意的地方. 这个红色跟上面那条绿色, 有时候像是重叠有时候又不像, 请问,上面这
条绿色的带到底是不是p38alpha??
s******8
发帖数: 7105
23
(本文全部摘自《海角寻古今》一书P38-42“寻访老将军(马白山)”一节。《海角
寻古今》,作者:马大正,系新疆人民出版社“边地文化探踪丛书”其中一部。新疆人
民出版社2000年2月第1版)
马大正:中国社会科学院中国边疆史地研究中心副主任、研究员。1938年9月19日生,
浙江省鄞县人,汉族。
浮水洲,白龙尾岛
浮水洲,白龙尾岛
马白山简介:海南省澄迈县人,1927年加入中国共产党,担任过村支部书记、区委书记
。后在上海从事党的地下工作。1933年回海南以教书为掩护,开展党的秘密活动,为发
展琼西地区党的组织和抗日救亡运动进行了艰苦的斗争。抗日战争爆发后,他历任广东
省民众抗日自卫团副队长、琼崖抗日独立总队副总队长、支队 长,率部开展游击战,
巩固和发展抗日根据地。
解放战争时期,他历任琼崖纵队参谋长、总队长兼政委、纵队副司令员,为海南人
民的解放事业立下了功勋。海南解放后,他历任海南军区副司令员、海南军区顾问。
他1955年被授予少将军衔。他是第一届全国政协委员,第四、第五届全国人大代表。马
白山同志因病于1992年8月3日在海口逝世,终年86岁。(源自人民网)
核心提示:... 阅读全帖
f*******n
发帖数: 1406
24
【 以下文字转载自 History 讨论区 】
发信人: ssgo2008 (上山打虎,下山拔毛), 信区: History
标 题: 珍贵史料:中国1957年向越南移交白龙尾岛纪实
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Sep 21 20:55:25 2014, 美东)
(本文全部摘自《海角寻古今》一书P38-42“寻访老将军(马白山)”一节。《海角
寻古今》,作者:马大正,系新疆人民出版社“边地文化探踪丛书”其中一部。新疆人
民出版社2000年2月第1版)
马大正:中国社会科学院中国边疆史地研究中心副主任、研究员。1938年9月19日生,
浙江省鄞县人,汉族。
浮水洲,白龙尾岛
浮水洲,白龙尾岛
马白山简介:海南省澄迈县人,1927年加入中国共产党,担任过村支部书记、区委书记
。后在上海从事党的地下工作。1933年回海南以教书为掩护,开展党的秘密活动,为发
展琼西地区党的组织和抗日救亡运动进行了艰苦的斗争。抗日战争爆发后,他历任广东
省民众抗日自卫团副队长、琼崖抗日独立总队副总队长、支队 长,率部开展游击战,
巩固和发展抗日根据地。
解放战争时期,他历任琼崖纵队参谋长、... 阅读全帖
w********2
发帖数: 632
25
来自主题: Military版 - 二战初期零式战斗机太厉害
你如果说的真是P38,那就错了。
P38的速度比零式强大的不是一个数量级。只要不比水平机动就行。美国第一王牌和零
式比水平机动,自己马上完蛋。他当时已有40颗星。
w********2
发帖数: 632
26
来自主题: Military版 - 二战初期零式战斗机太厉害
飞虎队从来没有P38,只有P40。
BOOM AND ZOOM是能量机的打法。零战的俯冲速度相比P40都差很多,更别提P38。
w********2
发帖数: 632
27
来自主题: Military版 - 二战初期零式战斗机太厉害
P38对零战从来就是胜多负少。P38,P47,P51,F6F,F4U是美二战二代机。零战不如美二
战二代机。
r*****y
发帖数: 53800
28
国军的美援和接收日军武器.
2007-09-06 16:02
我发现很多左左在这个小问题上很弱,上来就是800万美械国军,或者中央军全是美械.国
军接收的日军武器好,84在东北是拿破烂,还有的说国军拿的美国军援比苏联还多......
.......
要说正而八经的美国武器,就是2战援助的那39个简易版美械师装备,
2战以后,美国成立了一个叫战争财产管理机构,简称WAA的组织,专门处理价值340亿美圆
的剩余物资.东西很多.有个叫罗伯特,莱托,约翰的57岁少将专门领导这个组织.美国军
工生产在2战占世界的50%,生产的多,自然剩余的就多.为了推销这些东西.先是创造性的
把防空气球拖着大广告在国会大厦办展销会.大甩卖.
到了48年他手下有50000员工,管理着4000000种剩余物资,光目录就有28本,落一起有1米
多高.东西分布在各地的181个仓库里面.他们是奇招百出呀.先是把钢盔改成洗脸盆,一
下子就卖了100000个.把教练弹改成台灯座,履带战车比拖拉机还好用,还便宜.几万个医
药瓶卖给了靶场.医用绷带给了辛辛那提的工厂做了西服垫肩的填充物,500000条干扰铝
带,给圣诞树当了装饰... 阅读全帖
p**8
发帖数: 3883
29
来自主题: Stock版 - 版主,请求删帖。
发信人: p838 (挣钱快乐!), 信区: Stock
标 题: 上周末,没胆赌。现在有啥好叫的??
发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 4 21:09:39 2013, 美东)
http://www.mitbbs.com/article_t0/Stock/34733205.html
///
发信人: p838 (挣钱快乐!), 信区: Stock
标 题: Re: 有胆就来赌,没胆一边呆着!!
发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 4 21:07:31 2013, 美东)
上周末,没胆赌。现在有啥好叫的??
发信人: magskyic (天子), 信区: Stock
标 题: Re: P38, 你连伪币都想赖帐么?
发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 4 10:04:14 2013, 美东)
师父,别呼唤了,有的人你还不了解吗.
发信人: iHot (蒙古大夫(暂)), 信区: Stock
标 题: P38, 送首歌给你
发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 4 10:00:00 2013, 美东)
赌品即人品, 你看着办... 阅读全帖
p**8
发帖数: 3883
30
来自主题: Stock版 - 啥人?
发信人: p838 (挣钱快乐!), 信区: Stock
标 题: Re: 版主,请求删帖。
发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 4 22:58:19 2013, 美东)
发信人: p838 (挣钱快乐!), 信区: Stock
标 题: 上周末,没胆赌。现在有啥好叫的??
发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 4 21:09:39 2013, 美东)
http://www.mitbbs.com/article_t0/Stock/34733205.html
///
发信人: p838 (挣钱快乐!), 信区: Stock
标 题: Re: 有胆就来赌,没胆一边呆着!!
发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 4 21:07:31 2013, 美东)
上周末,没胆赌。现在有啥好叫的??
发信人: magskyic (天子), 信区: Stock
标 题: Re: P38, 你连伪币都想赖帐么?
发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 4 10:04:14 2013, 美东)
师父,别呼唤了,有的人你还不了解吗.
发信人: iHot (... 阅读全帖
L****n
发帖数: 12932
31
来自主题: Stock版 - 大夫的马后炮都是5倍10倍
尼玛猴急什么, 跟我13年67刀叫长DIS六个月一样, 一进场跌了两天, P38在这蹦跶
的欢, 最后还不是妥妥的5x收官? p38后来。。。就没有后来了。 NMBL的我就不说你
了, 自己放的挑子, 给我八次机会连着马前炮3天,永远退出股版, 最后怎样? 也
老大不小的人了, 活得这么不要脸也是少见。
l*******r
发帖数: 4
32
刘文兰,男,现就职于美国新墨西哥大学药学院,虽然“学术近亲繁殖” 在某些高校
依然存
在,但我们对这种现象也不能一棒子打死,正如某些支持“学术近亲繁殖” 的人所说
的,“这
种繁殖有利于研究团队的内部团结,增强内部稳定性”,但是,这种现象势必会造成不
公平
竞争,让一些同等竞争力的人才失去发挥才能的机会。
他的个人主页:
http://hsc.unm.edu/pharmacy/directory/index.cfm?personId=127
刘文兰,本科毕业于山东医科大学,不知道怎么3年后进入了湖南医科大学,后来与郭
迅结
婚,而郭迅是当时湘雅医学院教授、博士生导师郭兆贵的女儿,这样一来,刘文兰自然
成了
郭兆贵的女婿,所以一路顺风顺水,当上了郭兆贵的博士研究生,跟郭迅还在一个实验
室,
以后都不用回家吃饭了,家就是实验室,实验室就是他们家,这种以学校为家的精神,
真是
值得我们佩服。
让我们看看他们发表的文章,更是体现了这种近亲繁殖的团结精神:
1、发表于《中国药理学报英文版》2002年第3期的文章,雌激素通过对p38和p44/42
CCDPK
的相反作用阻止TNF—α诱导牛主动脉内... 阅读全帖
b*******r
发帖数: 6655
33
Since P38 will tax you way more than P30, you'd better defeat P38 first so
you will have more money left over.
b*******r
发帖数: 6655
34
Since P38 will tax you way more than P30, you'd better defeat P38 first so
you will have more money left over.
C*******r
发帖数: 10345
35
来自主题: GunsAndGears版 - 周末去了一趟缸兽,喜欢上HK P30了
无奈俺对倭涩印象不佳,大概用过P22, P38/P1这些,都感觉很不好。特别是P22,觉得
比礼拜六特价枪还差劲,卡蛋,.22都能震歪前准星,不一而足。HK是因为P7确实精美
,倭涩的P38简直就不止差几个档次。
H****r
发帖数: 16240
36
来自主题: GunsAndGears版 - CZ 75 PCR or 2075 RAMI
突然想到,
德国人在用新材料上还是挺锐意进取的
比如比较早用塑料握把片的,P38、PPK算先锋吧
然后P1从P38的钢枪身改成铝合金,也算很早了
塑料枪身,VP70以及AUG,反正奥地利和德国也都差不多……

800
C*******r
发帖数: 10345
37
来自主题: GunsAndGears版 - walther p1
不是P38血统,就是P38,只是把frame换成铝的。aimsurplus新的广告email,不是卖319?
a***a
发帖数: 8941
38
来自主题: GunsAndGears版 - 找个合适的pocket gun真难
p38更大
ppk相对p38应该算小了
但是ppk相比现在的lc9,shield之类,就显得又大又重了
而lc9或者shield,相比真正的口袋枪lcp或者bodyguard380之类,又大了一圈,也重了
不少
所以,ppk真的离口袋枪差的远

holds
t****g
发帖数: 35582
39
来自主题: PhotoGear版 - 大图来了,离岛多远?ZT (转载)
不是呀,P38空战赶不过0战,P38很早就装备了,主要优势是航程远,但是笨重。
美国人靠那个把山本打下来的。
P61后期在马里亚纳猎火鸡还有台湾/硫球空战中打得日本没脾气。
日本在零战后搞的各个改型,但是没法跟上美国战斗机的发展水平。
l*******r
发帖数: 4
40
刘文兰,男,现就职于美国新墨西哥大学药学院,虽然“学术近亲繁殖” 在某些高校
依然存在,但我们对这种现象也不能一棒子打死,正如某些支持“学术近亲繁殖” 的
人所说的,“这种繁殖有利于研究团队的内部团结,增强内部稳定性”,但是,这种现
象势必会造成不公平竞争,让一些同等竞争力的人才失去发挥才能的机会。
他的个人主页:
http://hsc.unm.edu/pharmacy/directory/index.cfm?personId=127
刘文兰,本科毕业于山东医科大学,不知道怎么3年后进入了湖南医科大学,后来与郭
迅结婚,而郭迅是当时湘雅医学院教授、博士生导师郭兆贵的女儿,这样一来,刘文兰
自然成了郭兆贵的女婿,所以一路顺风顺水,当上了郭兆贵的博士研究生,跟郭迅还在
一个实验室,以后都不用回家吃饭了,家就是实验室,实验室就是他们家,这种以学校
为家的精神,真是值得我们佩服。
让我们看看他们发表的文章,更是体现了这种近亲繁殖的团结精神:
1、发表于《中国药理学报英文版》2002年第3期的文章,雌激素通过对p38和p44/42
CCDPK的相反作用阻止TNF—α诱导牛主动脉内皮细胞凋亡,第一... 阅读全帖
z***o
发帖数: 2104
41
来自主题: Heart版 - 花未眠这个网名怎么样
第二天,我邀鼠来到山脚下一家宾馆的游泳池。由于夏季将逝,且交通不便,池里只
有十来个人。其中一半是美国住客:
他们与其说是游泳,莫如说是在专心晒日光浴。
这座由旧华族别墅改建成的酒店,有一方芳草凄凄的庭院,游泳池与主建筑之间隔
着一道蔷薇篱笆,沿篱笆爬上略略高出的山坡,海面、港口和街市尽收眼底。
我和鼠在25米长的游泳池里竞相游了几个来回。然后并排躺在轻便折叠椅上,喝着
冰镇可乐。我调整完呼吸抽罢一支烟的时间里,鼠愣愣地望着一个独自尽情游泳的美国
少女。
万里无云的晴空,几架喷气式飞机留下几缕冻僵似的白线,倏然飞去。
“小时候天上的飞机好像更多来着。”鼠望了眼天空说:
“几乎清一色是美军飞机,有一对螺旋浆的双体家伙。记得?”
“p38?”
“不,运输机。比P38大得多,有时飞得很低很低,连空军标志都能看到。……此
外记得的有DC6、DC7,还见过赛巴喷气式哩。”
“够老的了!”
“是啊,还是艾森豪威尔时代。巡洋舰一进港,就满街都是美国军宪和水兵。见过
美国军宪?”
“嗯。”
“好些东西都失去... 阅读全帖
h*****p
发帖数: 1516
42
来自主题: Database版 - 菜鸟双黄包求优化
一定双黄包奉上,多谢!
(@P1 varchar(30),@P2 varchar(15),@P3 varchar(15),@P4 varchar(15),@P5 varchar
(15),@P6 varchar(15),@P7 varchar(15),@P8 varchar(15),@P9 varchar(15),@P10
varchar(15),@P11 varchar(15),@P12 varchar(15),@P13 varchar(15),@P14 varchar(
15),@P15 varchar(15),@P16 varchar(15),@P17 varchar(15),@P18 varchar(15),@P19
varchar(15),@P20 varchar(15),@P21 varchar(15),@P22 varchar(15),@P23 varchar
(15),@P24 varchar(15),@P25 varchar(15),@P26 varchar(15),@P27 varchar(15),@
P28 varchar(15),@P29 varchar(15)... 阅读全帖
a********e
发帖数: 3771
43
最近一次做western,用NEPER kit提取胞浆里的ERK和p38蛋白。因为用划伤组织做刺激
,脱落不少细胞,我就把medium离心得到这些脱落的细胞。同时在培养皿里加冰PBS,
在冰PBS里刮下剩余的细胞放进脱落的细胞里再次离心。然后用kit里CER lysis buffer
裂解(已加入inhibitor cocktail)。
裂解的时候我vortex两次,每次15sec。NEPER protocol要求vortext一次,15sec即可。
结果照片洗出来什么都没有,连EGF刺激的positive control都没出来。
以前只用过一次NEPER,erk出来band,而且结果可信。不同点在于没有收集脱落的细胞。另外,这次实验煮沸变性的时间长了,用了15min。
所以我考虑是不是多次离心、vortex是蛋白降解,也可能是收集脱落细胞的时候medium
和细胞都没有冷却到ice cold,磷酸酶还在起作用。煮沸时间长我不确定会不会对实验有影响。
另外,p38一直没做出来过。用超声裂解细胞也好,用NEPER vortex裂解也好都没出过
band。
请高手指点,同行探讨。谢谢。
C****o
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做了一年多phospho-p38 的western,用自己配的gel和transfer buffer一直出不来。
可最近用biorad的胶p38就很容易出了band.
我猜是自制gel的问题,transfer的时候不完全。
这个可能性大不大?
Y*Z
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cell signaling works for me
m******5
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m******5
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m****n
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t**d
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这种方法可行吗?比如观察p38的磷酸化,用p-P38 Ab做免疫组化?,但我研究的蛋白
的磷酸化抗体都是针对某一磷酸化位点的,例如p-Tyr,通常用来IP的,如果做组化,假
阳性一堆
d******y
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来自主题: _PathToFinalTruth版 - 且听风吟(1)
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第二天,我邀鼠来到山脚下一家宾馆的游泳池。由于夏季将逝,且交通不便,池里
只有十来个人。其中一半是美国住客:
他们与其说是游泳,莫如说是在专心晒日光浴。
这座由旧华族别墅改建成的酒店,有一方芳草凄凄的庭院,游泳池与主建筑之间隔
着一道蔷薇篱笆,沿篱笆爬上略略高出的山坡,海面、港口和街市尽收眼底。
我和鼠在25米长的游泳池里竞相游了几个来回。然后并排躺在轻便折叠椅上,喝着
冰镇可乐。我调整完呼吸抽罢一支烟的时间里,鼠愣愣地望着一个独自尽情游泳的美国
少女。
万里无云的晴空,几架喷气式飞机留下几缕冻僵似的白线,倏然飞去。
“小时候天上的飞机好像更多来着。”鼠望了眼天空说:
“几乎清一色是美军飞机,有一对螺旋浆的双体家伙。记得?”
“p38?”
“不,运输机。比P38大得多,有时飞得很低很低,连空军标志都能看到。……此
外记得的有DC6、DC7,还见过赛巴喷气式哩。”
“够老的了!”
“是啊,还是艾森豪威尔时代。巡洋舰一进港,就满街都是美国军宪和水兵。见过
美国军宪?”
“嗯。”
“好些东西都失去了。当然不是说我喜欢军人……”
我点点头。
“赛巴那飞机真是厉害,连凝固汽油弹都投得下来。
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