D******r
发帖数: 5237 | 1 前阵子冲动购物买了个肉裤，买来才发现免费资源不算很多，没有亚马逊prime
很多都看不了。幸好可以看油管，这下很多中文电视都可以看了，效果不错就是
要在电脑上挑好剧集才能在肉裤上放。不知道是否值得为这搞个亚马逊prime，
还有什么别的免费资源啊，我加了pbs给娃看结果发现就是pbs网上有的那些有限
剧集，跟正经pbs电视台放的还是没法比。
有没有谁用肉裤看付费电视的，有什么价廉物美的推荐么 |
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c*******u
发帖数: 12899 | 2 ☆─────────────────────────────────────☆
aprilxu (妞妞是个乖宝宝) 于 (Fri Mar 30 00:33:44 2012, 美东) 提到:
我已经很久很久不发帖了，自从我女儿确诊以后，我就再没有心思在网上发帖和回帖了
。这几天看了一些关于残疾孩子和流产的帖子，我忍不住想说几句我自己的经历，也算
是一种倾诉吧。
我女儿快三岁了，又漂亮又聪明，可是，她不会走路，而且永远也不会。她患有SMA (
Spinal Muscular Atrophy) 。这是一种genetic disorder，由于基因缺失身体无
法制造一种蛋白，严重影响她的运动神经元和所控制的肌肉，导致肌张力低下。SMA是
一种罕见病，发病率仅为万分之一，由于我和我老公都是携带者（我们都不知道，也没
有家族史），我们的孩子有四分之一的几率患病，我的女儿很不幸。
但是幸运的是，我的女儿不是最严重的情况。Type 1，也就是最严重的情况，孩子一般
不会活过两岁。我女儿属于type 2，医生没说能活多久，只是告诉我们，最终依靠仪器
，她也许能活到成年，能上college，但是... 阅读全帖 |
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E***z
发帖数: 519 | 4 大家先来理清楚什么是歧视，如何形成，我们才能面对歧视，泰然处之。
与其他事物中多数不一样，就是歧。和大多数对事物看法不一样，是歧义；和大多数人
不一样，招来的就是歧视。被歧视的人是否优劣，和歧视并无干系。
中国人，广一些，亚洲人，和白人就是不一样，无论是外表的长相和体态，还是内在的
文化和观念。外在和内在的差异造成了交往上的不便，甚至隔阂。物以类聚，人以群分
，观念相近，特征相似的人自然会更容易交流，也就更容易结成群体，社会和自然规律
使然。国人成堆，正是如此。第一代移民，原有文化根深蒂固，更易形成所谓小团体，
为人歧视。第二代移民，所谓融入所谓主流，观念基本是被欧美文化同化，外表却不可
改变，深为尴尬。歧视，不仅无处不在，还将长期存在。
我们在这里就是与众不同，自然会被歧视；没有什么大惊小怪，他人表现出来，象lz一
样泰然处之。
PBS 有个节目，25年前的了，放在PBS网上了，值得一看.
A Class Divided
http://www.pbs.org/wgbh/pages/frontline/shows/divided/ |
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B******1
发帖数: 9094 | 5 PBS uncovered new eyewitness video that casts doubt on the conduct of Border
Patrol agents in the May 2010 death of Anastacio Hernández-Rojas, who was
caught trying to enter the country illegally.
Hernández-Rojas was deported from America after he was caught shoplifting.
He tried to enter the country again in May 2010 near San Diego to return to
his wife and five children, who were still living in California. According
to new eyewitness testimony and video in the Need to Know on PBS documentary
... 阅读全帖 |
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t*******r
发帖数: 22634 | 6 或者用另一个比方，如果 magic school bus 可以和
PBS Kids 的 “Fetch! With Ruff Ruffman” 类比
的话，那么 juvenile non-fiction science 差不多
可以跟 "PBS NOVA ScienceNOW" 类比，而 adult
non-fiction science 差不多可以跟 “PBS NOVA”
类比。 |
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t*******r
发帖数: 22634 | 7 看 PBS kids 的人多了去了。。。又不是我们一家。。。
大娃其实可以开始看些 PBS 而不是 PBS kids 了，不过不急。。。 |
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t*******r
发帖数: 22634 | 8 俺回一下你这个，同时也是回你上面的 strong-willed 和跟 kids 的 bond 的问题。
是这样，我认为 kids 不是单单有一个 trait，而是多个不同 trait 的混合体。
比如俺的娃，俺的观察（包括从老师搜集的反应），俺觉得是 strong-willed，
同时又是 logical/analytical。所以俺的策略不仅是比娃更 strong-willed，
同时经常用 logical/analytical 去 “trick” 娃，目的是 promote 娃自己的
logical/analytical function 来 regulate 娃的 will power。
比如今天刚刚实战的，最近小娃着迷 PBS 的 “Super Why!”，但今天早上打开电视
里正好是 PBS 的 “Cat in the Hat”，小娃吵着要看电脑里的 “Super Why!”
（小娃知道电脑里的随时都可以放）。但俺觉得一来看的 TV program 应该
diversify，二来不能由着性子。所以俺装着要去弄电脑，突然说 “I wanna
go poop-poop”。。。然后... 阅读全帖 |
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t*******r
发帖数: 22634 | 9 对于大一点的娃：
Stephen Hawkings：Into the Universe
Stephen Hawkings：Grand Design
PBS NOVA: The fabric of Cosmos -- Brain Greene
Discovery: MythBusters
PBS Food: The mind of a chef
另有许许多多 PBS NOVA / Nature，略，自己去找。 |
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t*******r
发帖数: 22634 | 10 你娃如果喜欢解题的话，你可以在家里搞 MOEMS 或者 AMC8，这样娃可能就不会那么无
聊。
如果你娃喜欢超前学习的话，五年级可以让娃看写给娃自学看的中学代数书，你给娃答
疑就好。美帝初中开始，数学分快慢班了，所以五年级开始，不用再担心数学在内容方
面的超前学习。
science 方面，图书馆有很多娃版书，我娃三年级和四年级时横扫了一遍，也能解决无
聊的问题。
另外可以看 PBS NOVA。比如 cosmology 方面，娃版图书很少，NOVA 比较形象。PBS
NOVA 还有 life science 的内容。
总之别让娃太闲了，闲着也会闲出篓子出来。。。我娃三年级初就是太闲了，搞得从
living room 走过就找个茬，搞得大家要对吼，晚上又抱怨睡不着，搞得家里鸡飞狗跳
。。。后来我就带娃去图书馆搬一堆砖头回来，外加 regulate 读小说的量。。。我娃
那段时间，有时要靠放 Celtic Women 的音乐 video，或者看 PBS NOVA 的 life
science 的节目，来帮助睡觉。。。 |
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t*******r
发帖数: 22634 | 11 二年级的电视，俺记得俺大娃喜欢下面几个:
PBS Kids: Fetch! with Ruff Ruffman
PBS Kids: Cyberchase
PBS Kids: WildKratts （不过这个 4 岁娃就能全看懂了。年龄 rating 低一些。可能
也别让看太多？）
另外俺娃是女娃。 |
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t*******r
发帖数: 22634 | 12 其实 non-fiction 也会有 age-appropriate 的问题，只是图书管
娃版 non-fiction section 已经给筛选过了。。。
比如俺娃看 PBS NOVA，俺不一定陪看。。。但是如果看 PBS FRONTLINE,
那俺目前一定陪看，当中俺给 guidance。。。俺跟娃说，把 PBS FRONTLINE
当成 PG 的分级好了。。。 |
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t*******r
发帖数: 22634 | 13 我觉得这个问题很值得讨论。
我遇到的首先的问题，是我娃不喜欢写作。She basically hate it。
其次我觉得对于写作这个问题，或者说，实用写作这个问题，对贪玩的 STEM 娃，这个
费效比太低了。
我现在有个不成熟的想法，就好比针对 STEM 娃的娃版 foundation of mathematics
那样，针对 STEM 娃可能也存在娃版 foundation of writing skills。这个
fundamental 的想法虽然不成熟，但精神是仿效 PBS NOVA / PBS American
Experience / PBS Frontline 等等的手法，对 STEM 而言，绕过繁琐的 fiction
writing，直接 Seal Team Six 机降 non-fiction 八股文 writing 的四合院大本营？
不过目前只是个想法，还不知道可行否。 |
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t*******r
发帖数: 22634 | 14 你这个是 PG13？
其实要引导兴趣，那还不如 PBS : Your Inner Fish 系列，或者 PBS Frontline 有关
superbug 的，或者 PBS NOVA 有关 Neanderthals 的，等等 documentaries 更直接
有效。不过那些娃都看过了，我觉得她的问题在于读娃版 medical book 要上一点深度
，这样才能 kill time。另外实际上我也要 cut down 娃的 screen time。 |
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a****e
发帖数: 9589 | 17 ZZ
Best Places To Watch Fireworks in Atlanta:
•Lenox Square Mall: 免费，7月4号，9:40 p.m焰火开始（本人去过，很不错）
The absolute biggest and best fireworks demonstration in the Southeast takes
place every July 4 at Lenox Square Mall. The daylong celebration begins at
noon with a family festival and live entertainment. At precisely 9:40 p.m.,
the night sky over Buckhead explodes with more than three tons of fireworks
in a spectacular display of light, sound and color. The show lasts 15
minutes and is spectac... 阅读全帖 |
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P********e
发帖数: 387 | 18 再问下m前辈，
4 WDAF (Fox-KC)*
5 KCTV (CBS-KC)*
6 Sunflower 6*
7 KCPT (PBS-KC)*
8 KSNT (NBC-Topeka)*
9 KMBC (ABC-KC)*
10 QVC*
11 KTWU (PBS-Topeka)*
12 KTKA (ABC-Topeka)*
13 WIBW (CBS-Topeka)*
14 KSHB (NBC-KC)*
这些和Fox，PBS，NBC播出的节目有什么不同呢？全是local的内容吗？还有你用silver的网络够用吗？ |
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B******1
发帖数: 9094 | 19 【 以下文字转载自 Parenting 讨论区 】
发信人: Beida101 (北大学子), 信区: Parenting
标 题: Truth???
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Apr 19 16:50:35 2012, 美东)
PBS uncovered new eyewitness video that casts doubt on the conduct of Border
Patrol agents in the May 2010 death of Anastacio Hernández-Rojas, who was
caught trying to enter the country illegally.
Hernández-Rojas was deported from America after he was caught shoplifting.
He tried to enter the country again in May 2010 near San Diego to return to
his wife and five children, w... 阅读全帖 |
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l******m
发帖数: 31446 | 22 在UA新改版的777上，看了一路的电影电视剧。印象最深的是这部纪念约翰列侬的片子
，是PBS在2010年列侬诞辰70周年的时候拍的。全片将近俩小时，忒好看了。
PBS该片网址：http://www.pbs.org/wnet/americanmasters/episodes/lennonyc/about-the-film/1551/
原来对列侬的印象一直是个神，看了这个片子，发现了很多他非常可爱的地方。尤其是
七十年代末从LA搬回纽约，和大野洋子复合并有了儿子之后的那段日子。
另外，还有列侬对纽约这个城市的喜爱。他，一个英国人，居然被勒令离境，并熬了四
年多，打官司到最高法院，才拿到绿卡。可以天妒英才，刚刚步入正规，就让人给枪杀
了。。。
去过纽约很多次，非常喜欢这个城市。国内总有人把上海比作纽约，但我觉得上海缺乏
纽约的那种大气。纽约从人文上来讲，倒是和北京更接近：包容、自我、爱谁谁。娜娜
阿姨妹妹不要生气。。。 |
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b*s
发帖数: 82482 | 23 轰炸德国
大约半年前，看过一本关于二战期间美军对于德国空袭的书，《To Kingdom Come: an
epic saga of survival in the air war over Germany》。读完了以后，很久都想写
一下关于这本书的感想，但是后来杂事太多，一直都没有付诸实施，结果一拖再拖。终
于，今天晚饭后决心写出来，顺便混些包子。
关于二战期间空袭德国的故事，一直都很感兴趣，看过很多相关的纪录片和电影。印象
特别深刻的有格利高里•派克的《12 O’Clock High》：
http://www.youtube.com/watch?v=2DvbilSwec4
在YouTube上有全长的电影
还有PBS的一个纪录片《The Bombing of Germany》
http://www.pbs.org/wgbh/americanexperience/films/bombing/
在History Channel，Discovery Channel还有Netflix上还看过很多关于B-17，B-24还
有B-29等等的纪录片。空战电影中，几年前Lucas Film... 阅读全帖 |
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m********l
发帖数: 6748 | 24 Time Warner Cable把那些免费台都快砍光了，昨天能看的只有Fox和CW11，PBS Kids都
没有了。我的电视基本都是只看PBS Kids的，一怒之下，把以前买的那块像块塑料板的
天线接到电视，然后搜出60多个台，over the air HD的效果很好，和cable的没有什么
区别，最重要的是PBS Kids有了，哈哈哈哈哈~~~这款天线真是太厉害了，果然比以前
用过的所有天线都强。 |
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g********2
发帖数: 77 | 25 听您的话，刚才真的去装 PBS 等美国新闻频道去了。 谁知道啊，从 roku 网站上看到
PBS，但不允许装。 到 roku 机顶盒哪，roku 商店里，根本看不到 PBS 这些频道。 |
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g*****p
发帖数: 790 | 27 看一个土生土长的中国人如何在美国的记者年会上，用幽默征服了全场美国人，并当面
调侃美国副总统约瑟夫·拜登(Joseph Robinette "Joe" Biden, Jr)，而他用这种幽默
也带给我们思考，中国和美国到底差在哪里?中国又将怎么进步?!
My name is Joe Wong. But to most people, I am known as “Who?” which is
actually my mother’s maiden name, and the answer to my credit card security
question.
我叫黄西，但对于大多数人来说，我叫“Who”（HU），这实际上是我妈妈的娘家姓，
也是我信用卡密保问题的答案。
（开场先是自嘲下自己默默无闻不为所知，然后利用中英文谐音，再联系到信用卡密码
保护，因为网上注册时选择用于取回密码的验证问题里，最常见的就是妈妈的姓氏是什
么。）
Joking aside, I want to reassure you that I am invited here tonight.
抛开玩笑，我想重申今... 阅读全帖 |
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m********r
发帖数: 13 | 33 Seriously, 建议有需要与西人探讨 Tibet 问题的人读一下 M.A.Jones 2007年在PBS上
关于西藏问题反驳英美Pro-Tibet人士的精彩辩论。 内容偏长, 客观， 富于论据。策
略：着眼西藏宏观发展历史，不否认现在有违反人权个案发生，但反对蓄意夸大以及无
据指控。辩论结果是，一英国Pro-Tibet人士 had to concede to some of his points
. 一美国Pro-Tibet人士只剩遭人唾弃的人身攻击了。
http://discussions.pbs.org/viewtopic.pbs?t=68073&sid=ce0b20590dd445725153c83b5ef21c7f
其实，试图改变一个人的政治观点（或偏见）是灰常困难的，即使你已驳得it无言以对
。相信一些Pro-Tibet西方人士还是真心希望藏人过得好些。建议他们捐款或献义工直
接给在西藏的藏人或团体或学校，以帮组发展西藏的文化，经济，教育。不要捐款给那
些海外的具有政治目的蓄意造谣的团体。最后要强调，我们都希望西藏明天会更好。策
略：求同存异。 |
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O******e
发帖数: 4845 | 34 ☆─────────────────────────────────────☆
icepiao (icepiao) 于 (Sun Sep 17 00:44:40 2006) 提到:
我转染后利用Anti-V5-FITC进行荧光染色，买的是invitrogen的抗体，目的是看
plasmid transfection后一个protein的表达情况，V5是该蛋白的Fusion protein tag
，因此只要该protein表达，理论上V5应该也表达，基因的启动子是CMV启动子。
步骤为首先co-transfection，利用另外一个report plasmid看transfection
efficiency, 48小时后PBS洗两遍，利用100%甲醇固定5min,然后PBS洗5遍，2min每次，
加入含10%胎牛血清的PBS Block20分钟，然后加入荧光抗体，置暗处1h,然后荧光显微
镜下观察，但是在荧光显微镜下几乎什么也看不到，偶尔有几个有可能有荧光的细胞，
但是太少了。
随后我也采用了4% PFA fix 0.1%Triton x-100 permeabilize, |
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s********n
发帖数: 248 | 35 M-CSF培养的bone marrow macrophage，stimulate以后western blot 磷酸化的AKT/ERK
/STAT1，其他两个都blot的很好，但是pAKT总是没有想要的带，貌似出来的带都是二抗
结合的非特异性带。
请问版上高人，有blot过pAKT的没有？能否帮我看看问题出在什么地方了啊？
我用的WASHING BUFFER是TBST with 0.05%Tween 20，
BLOCKING BUFFER:5%BSA/TBST,
一抗就dilute在blocking buffer里边。
protocol:
室温block 1h，一抗4度过夜，洗3次×10min；二抗室温30min，洗3次×15min。
我初步怀疑是tween 20量加多了，又看到班上有用pbs做washing buffer的，貌似pbs更
温和一些，不知道用pbs会不会好一些？
小女子多谢了先！ |
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s*********a
发帖数: 1409 | 36 老板要交grant，天天逼data，我快被逼疯了。
实验室学生切的片子，是PBS perfuse的小鼠脑子，然后在4%PFA 4度过夜fix，然后放
到pbs里，室温切片，40UM厚。我第一次觉得片子太厚了，用了漂片法，荧光染色，染
完了再mount到slides上，效果还马马虎虎。可是老板不喜欢荧光，喜欢DAB染色。说是
同时有人的脑染色，人脑用的是DAB，鼠脑也要用DAB才行。我也不知道是什么理论。我
只好又做DAB染色。可是我没做过DAB，完全照实验室的protocol做了两次，没做出来。
用的是贴片法，我想是不是片子太厚了，所以染不出来。可我老板偏认定是抗体浓度的
问题，让我继续试抗体浓度。我觉得真不是浓度问题，因为啥也没出来。
这个实验室染色用的protocol和我以前lab的很不一样。我们以前都是pbs+PfA灌流，然
后fix过夜，蔗糖沉降，oct包埋冷冻切片，从来没超过10um厚，然后荧光染色。这个
lab染色就没怎么做出来过，可是老板偏要按照他那套来。我觉得他就是火星来的。 |
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s*********a
发帖数: 1409 | 37 老板要交grant，天天逼data，我快被逼疯了。
实验室学生切的片子，是PBS perfuse的小鼠脑子，然后在4%PFA 4度过夜fix，然后放
到pbs里，室温切片，40UM厚。我第一次觉得片子太厚了，用了漂片法，荧光染色，染
完了再mount到slides上，效果还马马虎虎。可是老板不喜欢荧光，喜欢DAB染色。说是
同时有人的脑染色，人脑用的是DAB，鼠脑也要用DAB才行。我也不知道是什么理论。我
只好又做DAB染色。可是我没做过DAB，完全照实验室的protocol做了两次，没做出来。
用的是贴片法，我想是不是片子太厚了，所以染不出来。可我老板偏认定是抗体浓度的
问题，让我继续试抗体浓度。我觉得真不是浓度问题，因为啥也没出来。
这个实验室染色用的protocol和我以前lab的很不一样。我们以前都是pbs+PfA灌流，然
后fix过夜，蔗糖沉降，oct包埋冷冻切片，从来没超过10um厚，然后荧光染色。这个
lab染色就没怎么做出来过，可是老板偏要按照他那套来。我觉得他就是火星来的。 |
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c*********r
发帖数: 1312 | 38 多谢啦！Protocol奉上。
我们是用小鼠胚胎的软骨和骨头染色的protocol。染软骨的话只用Alcian Blue即可。
最后胚胎用BABB处理就会变得透明。BABB危险，而且会腐蚀显微镜，使用时要小心。很
多动物的胚胎都可以用类似的方法染骨头（红色）和软骨（蓝色）：鼠，龟，蛇，鸡，
鱼，蜥蜴，变色龙，蝙蝠。。。而且都很漂亮！
比如这个人，做了好多不同动物的染色还到处办展览：
http://www.shinsekai-th.com/en/photo.php
Protocol：
1. Skeletal Preparations- Cartilage and Bone staining
1.1 Cartilage staining in mouse embryos from E12.5 - E13.5
Dissect out embryos, rinse in 1 x PBS, and place in ice-cold 95% Ethanol for
1 hour.
Change to fresh 95% ETOH and rock overnight at room temper... 阅读全帖 |
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l**********1
发帖数: 5204 | 39 楼主 做STORM 吗?
0.1% sodium borohydride in PBS (pH 8.0)
NB: ice-cold PBS bufffer plus stiring bar then add weight NaBH4 little
by little
web link:
HTTP//www.cyto.purdue.edu/archive/flowcyt/research/cytotech/apopto/data/
capri1.htm
or NIKON STORM protocol:
>Immediately before use prepare 0.1% NaBH4 in PBS
>HTTPS //nic.med.harvard.edu/sites/nic.med.harvard.edu/files/user_files/N-
STORM%20SAMPLE%20PREP.pdf |
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n***w
发帖数: 2405 | 40 you can dissolve in PBS and I think the solubility is up to 10mg/ml in PBS,
if I remember correctly. You can also check the package insert for L-NAME or
the MSDS to find such information.
I make mine at 5mg/ml in PBS and the dose is 30mg/kg body weight.
The half-time of L-NAME varies in literature but the ballpark is around
250min to 300min.
I do i.p. injection and do my experiments after 2 hours. I see an effective
lowering of Nitrate+Nitrite level. Some papers even do it after 1 hour.
If you w... 阅读全帖 |
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s********n
发帖数: 248 | 41 update：
我上周四按照板上的建议，把CFSE浓度降低到0.5uM,10^7cell/ml室温label 8分钟。
昨天取popliteal LN FACS了一下，所有老鼠的都有很多的OTI细胞，也有很好的
proliferation，在wt/ht/mt里边proliferation的区别也看到了。
估计是我之前用的CFSE浓度太高了，T细胞CFSE label以后都死光了。
真心感谢版上大家的帮忙！
需要比较WT和MT的dendritic cell antigen presentation的差异，因为MT的老鼠本书T
/B细胞和wt有差异,所以把老鼠breed 到RAG deficient background里。
实验是这样设计的，把OTI/OTII （2-5×10^6 cell/mouse） 细胞通过静脉注射打进老
鼠体内，一天以后footpad注射OVA+LPS. 再过72小时harvest popliteal lymph node，
看OTI/OTII增殖情况。因为是RAG deficient 老鼠，所以做tail vein injection前没
有irradiate老... 阅读全帖 |
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w*******d
发帖数: 396 | 42 我试过下面的方法。材料是小鼠肝脏。供参考。
加PBS，匀浆（homogenize)，离心，裂掉RBC，加PBS，离心，用PBS洗一次，这时的上
清不再是浑浊的了，用RIPA buffer裂解细胞，离心，收集上清，BCA测蛋白浓度，
normalize. |
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m*********D
发帖数: 1727 | 43 转化完后，我等一天，让细胞recovery.然后就上selection. G418用得比较多，你最好
在转化之前据测一个dose,看多少量能在7-10天杀死里的所有host cell. 太高太低都会
有问题。
看细胞生长速度。一般24小时divide一次的细胞，筛选一般要两三个礼拜。我习惯用
100 mm dish,一直加G418，到肉眼可以看到colonies,然后用20 ul的pipette,带消毒过
的tip，在显微镜下挑。
挑的过程如下：
100 mm dish用PBS洗两次，然后放10-12 ml PBS在dish里面。显微镜放进hood,放dish
的平台在hood门后面，保持消毒状态。把dish放上去，显微镜下找到colony,先把
pipette里的空气打出来，再用tip对准colony,轻轻撮一下，让细胞脱离dish,然后手指
一松，就把那团细胞吸进了tip。这20 ul的细胞带PBS放进96-well的平板里，加20 ul
trypsin, RT处理5-10分钟，加100 ul medium就可以转移到别的平板里了。看colony大
小，很多时候我就直接进24-we... 阅读全帖 |
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M*******C
发帖数: 183 | 44 对，AlexFluor 488. 问了Qiagen的技术服务，回信说得固定，那就简单了。
Yes. It is hard to visualize with PBS. It is also difficult to see the
green fluorescence without washing with PBS due to excess non-specific
fluorescence.
Yes. It is best to wash with PBS and fix to visualize the green fluorescence. |
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B****e
发帖数: 28 | 45 【 以下文字转载自 Linux 讨论区 】
发信人: Betrue (..), 信区: Linux
标 题: 求助：有对linux cluster的maui scheduler熟悉的吗？
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jan 3 13:14:47 2008)
我们实验室的cluster上pbs系统用的是maui scheduler，最近不知道为什么总是会自动
退出，递交的作业排了好久也不运行，查看进程才发现只有pbs_server和pbs_mom在运
行，没有maui的进程。重启pbs后正常几天，maui又会自动关闭。
有没有对cluster管理有经验的能帮忙回答一下这可能是什么问题吗？另外，如果重启
pbs，是不是所有的作业，包括正在运行的和在队列中的作业都要杀掉，然后重新递交？
万分感谢！ |
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k**e
发帖数: 2728 | 46 why dont you add lysis buffer directly into the wells, instead of rinsing ce
lls off the plate with PBS? you can pre-rinse cells with ice cold PBS to mak
e sure they are cold (on ice the whole time), and aspirate off the PBS buffe
r completely, then directly add lysis buffer into the well, and scrape every
thing off with cell scrapers, then collect everything into the tubes. to ext
ract proteins, sit on ice for 10 min then shake for 30 min before spinning d
own for 10 min. the sup will be the ex |
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r******y
发帖数: 146 | 47 赴美多年，生活终有转机。2014 年，贤妻获 BSN 学位，2 岁的儿子已会抱怨爸爸“胡
子扎扎”，而我也进入心仪的 residency program。欣慰感慨之余，不禁要回顾来路、
展望前路。在跨入另一段历程前，写下点东西，希望对自己能是总结，对他人亦有帮助
。此外，前任和现任版主都曾联系我，希望做个讲座来分享经验。但是因为身份问题尚
未完全解决，需在实验室工作到 5 月，PI 希望我能在离开前完成文章初稿。工作繁忙
，只能婉拒。利用试验间隙码字，终于拼凑出下文，就让我从自我介绍开始吧。
Journey: Bachelor of Medicine in 2000, PhD in Beijing in 2006, Sales
Specialist in Shanghai/Shenzhen over 1 year, and Postdoc in the US for 6
years since 2008.
USMLE scores: 244/243/Pass/226, all first attempts.
USCE: part-time OB in a free clinic and... 阅读全帖 |
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z******8
发帖数: 844 | 48 ☆─────────────────────────────────────☆
raynoldy (ray) 于 (Mon May 12 17:25:41 2014, 美东) 提到:
赴美多年，生活终有转机。2014 年，贤妻获 BSN 学位，2 岁的儿子已会抱怨爸爸“胡
子扎扎”，而我也进入心仪的 residency program。欣慰感慨之余，不禁要回顾来路、
展望前路。在跨入另一段历程前，写下点东西，希望对自己能是总结，对他人亦有帮助
。此外，前任和现任版主都曾联系我，希望做个讲座来分享经验。但是因为身份问题尚
未完全解决，需在实验室工作到 5 月，PI 希望我能在离开前完成文章初稿。工作繁忙
，只能婉拒。利用试验间隙码字，终于拼凑出下文，就让我从自我介绍开始吧。
Journey: Bachelor of Medicine in 2000, PhD in Beijing in 2006, Sales
Specialist in Shanghai/Shenzhen over 1 year, and Postdoc in the US for 6
years since ... 阅读全帖 |
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