t*****z
发帖数: 1598 | 1 如题，我们最近在抽提BAC质粒，用于转基因，以前用QIAGEN的Large-Construct Kit，
觉得很麻
烦且产量很不稳定，现在想试试PureLink的Miniprep Kit，看说明书好像很简单的样子
，不知效果
如何？请用过这玩意的前辈指点在下。谢了！ |
|
a*****g
发帖数: 543 | 2 protocol基本一样，purelink就是aim QIAGEN的kit做的一个系列。
没有做过head to head的comparison;只能说8kb左右的plasmid没啥问题 |
|
l****e
发帖数: 157 | 3 用了很多年Qiagen的DNA miniprep, midiprep, PCR purification, and gel
extraction kits。最近才发现有其他公司的替代产品，比如Zymo 和 Purelink，要比
Qiagen便宜很多。哪位用过的给个意见？质量上是否一样可靠？谢谢先！ |
|
l****e
发帖数: 157 | 4 谢谢俩位信息！Life Technologies的Purelink Kits在促销最便宜，有用过吗？ |
|
|
i*********0
发帖数: 915 | 6 used before. no difference between the invitrogen one and the fermentas,
sigma ones. |
|
t*****z
发帖数: 1598 | 7 咳，别提了，我半天没抽出多少东西来，试验过QIAGEN Large-Construct Kit，QIAGEN
Plasmid Mini，Invitrogen PureLink HiPure Kit。产量低且不稳定，关键是要做好
心理准备，细菌要好好养，动作要轻，水要热。最后我们直接把含有BAC的细菌株送到
转基因公司去了。他们说可以免费代替我们纯化。 |
|
x********u
发帖数: 430 | 8 You can try alternative heating and cooling for breaking down the cell. 3X[
95C/1min and -80C/5min].
Try to use GoTaq Hot Start DNA polymerase.
If you still cannot get the desired band, try growing the cell in liquid
culture, and make genomic DNA by PureLink gDNA kit.
Since your fragment is around 200bp, why not just synthesize the sigle
strand oligoes and reconstitute your molecule by annealing on a PCR machine.
Good luck! |
|
B******o
发帖数: 496 | 9 Invitrogen的purelink maxiprep kit不错。每次yield都在1500ug左右
可以试试 |
|
h******y
发帖数: 1374 | 10 Invitrogen PureLink HiPure Plasmid Filter Midi⁄Maxi Kit |
|
I*****y
发帖数: 6402 | 11 get the PureLink kit to purify Bacmid |
|
s******y
发帖数: 220 | 12 on column treat 了，
但是我上次把那个DNAse powder 溶解后，忘记放到-20 了，在4度放了近四周，虽然说
明书说可以放到六周，我还是很不放心，用的是purelink的 DNAse set。
主要是tissue sample太宝贵了，错过了要等好久，整个人都变得paranoid了：（ |
|
s********r
发帖数: 312 | 13 Zymo的miniprep的yield比qiagen的低20-30%，但也肯定够用了。他们的pcr和gel纯化
kit很好用，可以用很小的体积elute，做克隆非常方便。 |
|
s******r
发帖数: 1245 | 14 zymo挺好用的，这种kit都没太大差别，哪家便宜用哪家，前一阵还有个啥小公司推销
来着忘了叫啥 |
|
|
|
|
D**A
发帖数: 311 | 18 Qiagen 质量最好，yield也最高，其他的也凑合。但是如果你要用提的dna做生化实验
，还是建议Qiagen. |
|
K**R
发帖数: 193 | 19 zymo 很好，我们经常用，特别是做表观的几个kit。 我们一直评价他家挺物美价廉 |
|
