c**r
发帖数: 2019 | 1 可以考虑用稀盐酸(5%以下)-thiourea(中文叫“硫脲”，CH4N2S)溶液。Thiourea是
一种化学缓蚀剂，特点是在金属表面发生定向吸附(硫的外层电子填充到金属原子的
外层空轨道中形成配位键)，抑制阳极电化学反应的进行，从而延缓腐蚀。Thiourea不
能和金属氧化物形成配位键，故此金属氧化物将被酸液洗掉。通常情况下氟化物都
不溶于稀盐酸，因此不用担心FeF3被溶解。不过你最好先试验一下。
但是这里有一点儿问题。铝的表面极易被氧化，一接触空气Al2O3立即生成。难道你
要在无氧环境下进行酸洗吗？但愿你们有glove box，呵呵。 |
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s****a
发帖数: 436 | 2 Purification of biotinylated proteins on streptavidin resin: A protocol for
quantitative elution。
For elution of biotinylated proteins, 500 mL
release solution (2% SDS, 30 mM biotin, 50 mM phosphate,
100 mM NaCl, 6 M urea, 2 M thiourea, pH ,12)
were added to the resin and incubated for 15 min at RT,
followed by incubation for 15 min at 96C. Afterwards, the
resin was pelleted by centrifugation for 5 min at 16 100g |
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W*********n
发帖数: 775 | 3 几个问题：
1）" Most ppl use 60-65 degree 20-30 minutes instead of boiling" ,这样做就不
会引起carbamylation之类的问题了吧？对质谱分析结果不会有影响了？
2）LCMSMS分析到底需要多少上样最好？ 听做质谱的老师讲不要超过25ug, 20ug左右应
该最好，几个ug就可以获取一些数据。请问1ug和20ug上样量作出的结果到底相差多大？
3）我的实验就想看看把一个信号传导比较上游的蛋白酶给抑制掉之后，看看下游的蛋
白及受其影响的蛋白的变化情况，在蛋白水平上看看一些效益蛋白的变化，在磷酸化水
平上看看受这个蛋白酶磷酸化调控的蛋白（这个蛋白磷酸化调控很多下游蛋白）的情况
。这样的蛋白应该是pY or pS/pT都有的吧？
4）我的样品是低等动物的单层细胞的肠，而且样品很少，你觉得什么方法处理最好，
是否8M Urea 最好？还有，这个质朴实验室用一种IEF buffer(7M Urea, 2M thiourea,
4%CHAPS), 是否这个也行？
谢谢！
ppl |
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b****u
发帖数: 2771 | 4 1）" Most ppl use 60-65 degree 20-30 minutes instead of boiling" ,这样做就不
会引起carbamylation之类的问题了吧？对质谱分析结果不会有影响了？
Use tris buffer to scavenge cyante ions if heating is necessary.
2）LCMSMS分析到底需要多少上样最好？ 听做质谱的老师讲不要超过25ug, 20ug左右应
该最好，几个ug就可以获取一些数据。请问1ug和20ug上样量作出的结果到底相差多大？
even 20 ug is overkilled for most proteomic labs with nano or cap lc setup.
for phosphoproteomics, you need more starting materials and enrichment will
take care of the loading capacity.
3）我的实验就想看看把一个信号传导比较上游的蛋白酶给抑制掉之后，看看下游的蛋
白及受其影响的... 阅读全帖 |
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s******y
发帖数: 28562 | 5 你帖子里说的那个 IEF buffer (7M Urea, 2M thiourea,4%CHAPS) 更好。
那个其实就是8M Urea的改良版，适合于处理总蛋白加上膜蛋白。
20--30 min 加热时间太长了。我建议你在IEF buffer 里加
0.2M Tris-Cl,pH6.8, 然后75 oC 加热10~15 分钟。
其他处理倒是没有什么大问题
for
could
for |
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a*****m
发帖数: 13 | 6 因为怀疑现在用的一些含硫脲的化合物可能与蛋白质中的半胱氨酸缓慢起反应，但是不
太确定，问问二者能其反应么？是生成二硫键么？
谢了 |
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s***r
发帖数: 67 | 7 标题: A novel organocatalytic tool for the iminium activation of alpha,beta-
unsaturated ketones
作者: Bartoli, G; Melchiorre, P
来源出版物: SYNLETT 期: 12 页: 1759-1772 出版年: 2008
标题: Bronsted Acid-Thiourea Co-catalysis: Asymmetric Synthesis of Functionalized 1,4-Dihydropyridines from beta-Enamino Esters and alpha,beta-Unsaturated Aldehydes
作者: Yoshida, K; Inokuma, T; Takasu, K, et al.
来源出版物: SYNLETT 期: 12 页: 1865-1869 出版年: 2010
标题: Divergent stereoinduction mechanisms in urea-catalyzed additio... 阅读全帖 |
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r******3
发帖数: 2 | 8 招聘岗位：博士后 10人
岗位待遇：
1、年薪不少于22万元（含市财政给予的生活补助12万元/年）；特别优秀者可申请
校长卓越博士后，年薪可达30万元。
2、可作为负责人申请博士后科学基金、国家自然科学基金及省、市各级课题；
3、出站后留深圳工作可申请10万元科研启动经费；
4、符合市后备级人才条件的可以申请获得相应的住房补贴；
5、海外博士留深工作可以申请孔雀计划80-100万住房补贴，并有机会获得300-500
万科研启动经费。
岗位要求：
1、拥有有机化学专业博士学位，具有扎实的有机合成功底，接受过严格的专业训
练，有很好的实验操作能力和良好的独立思考、独立领导项目、独立解决问题的能力。
从事过天然产物全合成研究者将得到优先考虑。
2、热爱科学研究并有志于做出一流的科研成果，勤奋努力、服从安排、踏实好学。
3、具有良好的英语听说读写能力，能够独立撰写英文报告和论文。
课题组简介：
南方科技大学化学系张绪穆课题组成立于2015年7月，启动经费1000万，科研团队
目前拥有博士后5人， 秘书1人。课题组实验室目前位于南科... 阅读全帖 |
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r******3
发帖数: 2 | 9 招聘岗位：博士后 10人
岗位待遇：
1、年薪不少于22万元（含市财政给予的生活补助12万元/年）；特别优秀者可申请
校长卓越博士后，年薪可达30万元。
2、可作为负责人申请博士后科学基金、国家自然科学基金及省、市各级课题；
3、出站后留深圳工作可申请10万元科研启动经费；
4、符合市后备级人才条件的可以申请获得相应的住房补贴；
5、海外博士留深工作可以申请孔雀计划80-100万住房补贴，并有机会获得300-500
万科研启动经费。
岗位要求：
1、拥有有机化学专业博士学位，具有扎实的有机合成功底，接受过严格的专业训
练，有很好的实验操作能力和良好的独立思考、独立领导项目、独立解决问题的能力。
从事过天然产物全合成研究者将得到优先考虑。
2、热爱科学研究并有志于做出一流的科研成果，勤奋努力、服从安排、踏实好学。
3、具有良好的英语听说读写能力，能够独立撰写英文报告和论文。
课题组简介：
南方科技大学化学系张绪穆课题组成立于2015年7月，启动经费1000万，科研团队
目前拥有博士后5人， 秘书1人。课题组实验室目前位于南科... 阅读全帖 |
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