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m********r
发帖数: 811 | 2 【 以下文字转载自 deals 俱乐部 】
发信人: miniplayer (mplayer), 信区: deals
标 题: Best Buy has the Western Digital Scorpio Blue 320GB (5400 r
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Jun 27 23:35:10 2010, 美东)
Best Buy has the Western Digital Scorpio Blue 320GB (5400 rpm) 2.5" Internal
Notebook Hard Drive (OEM) for $35 with free shipping. Next lowest on
Google Products, after shipping is factored in, is $45. |
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b*****t
发帖数: 3396 | 3 Western Digital WD Elements 1.5 TB USB 2.0 Desktop External Hard Drive
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z***q
发帖数: 907 | 4 【 以下文字转载自 Hardware 讨论区 】
发信人: zypsq (妈妈的小猪), 信区: Hardware
标 题: Western Digital my passport vs Seagate Freeagent?
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Nov 25 11:27:04 2010, 美东)
请问这两个牌子的硬盘哪个更好用一点？感恩节想买个2.5寸的移动硬盘，看到staples
2个deal:
Western Digital my passport 750GB----$70
Seagate Freeagent 1TB---$90
请问哪个deal更好一点呢？
新人求教，万分感谢！！！ |
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j*e
发帖数: 1987 | 5 citi dividend有2% for utility. 管道煤气费应该算吧。只不过我们这儿National
Grid的煤气费是通过第三方的Western Union Speedpay来收信用卡，一笔收$2.25手续
费，Max pay$600。如果一次pay $600，拿回$12 cash back,还是比用cash pay合算。
就是不知道通过Western Union Speedpay那个category还算utility charge吗？有谁用
过吗？谢谢！ |
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z***s
发帖数: 2760 | 6 夏天住了3次best western，得到了一张 free night voucher，可以住北美和加勒比任
何一家best western一晚，top level的200－300的也都可以，
一转眼冬天到了，看着明年1月底过期，却不知道怎么用掉，住在波士顿，也不知道该
去哪里比较好？纽约，华盛顿都去过了，过段时间回国，也没有时间出远门
眼看就要整月整月的下雪了，大家说怎么用掉呢？ |
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s********3
发帖数: 16 | 7 现在出售North Western C Garage 趴一枚。到八月中旬新学期开始时过期。North
Western Garage对面就是EE，MSEE，物理系等楼，非常方便。现售价$55，有意者请联
系c************[email protected]。 |
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t***s
发帖数: 422 | 8 【 以下文字转载自 Parenting 讨论区 】
发信人: trans (反了), 信区: Parenting
标 题: 姐姐打算把孩子送过来读高中WESTERN CHRISTIAN HIGH SCHOOL
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Mar 25 06:48:15 2011, 美东)
名字叫WESTERN CHRISTIAN HIGH SCHOOL，位于LA边上的Upland, California。
不知道是不是野鸡高中，有知道的朋友能不能讲一讲？
多谢了！
哎，现在的父母真是有病乱投医，外甥在国内学习一塌糊涂，难道跑到国外突然就爱学
习了？！ |
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y*******5
发帖数: 5023 | 9 今天去那里取钱，居然跟我说要现金的话，就要交10块钱，要支票就免费。
我当时觉得就不太对劲，当时只得要了支票。
回来给western union客服打电话，真相大白，根本没有收10块钱一说，他们这么做的
原因是如果顾客选择支票提钱，western union会给那个agency一些好处，commission/
promotion之类的。
我感觉相当气愤，这些人就是欺负很多去那里寄钱/取钱的同胞不懂英文，所以他们说
什么就得听什么。他们就为了自己的一点小利，私自改规矩，不管顾客是否方便。
其实如果他们跟顾客说实话，说如果你选支票的话他们会拿到些好处，说不定很多人就
做个好人选择支票了。
总之，我是非常痛恨这种对同胞take advantage的人。btw，他们的服务态度也是蛮差
的。 |
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C*****s
发帖数: 116 | 10 朋友女同时被Ohio State University 和Case Western Reserve University商学院录
取，她申请的是Supply Chain专业。
1）俄亥俄州立大学的供应链专业可以排到美国第七，商学院排在25，综合排在55，排
名都还不错。
2）Case Western Reserve University.这个学校的专业排名在20名以外，商学院排名
是85，惟一优过俄亥俄州立的是综合排名，俄亥俄州立的综合排名是55，而凯斯西储的
是38。
我对这两个大学不是太了解，请Ohio州的朋友指点一下，多谢！ |
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C*****s
发帖数: 116 | 11 朋友女同时被Ohio State University 和Case Western Reserve University商学院录
取，她申请的是Supply Chain专业。
1）俄亥俄州立大学的供应链专业可以排到美国第七，商学院排在25，综合排在55，排
名都还不错。
2）Case Western Reserve University.这个学校的专业排名在20名以外，商学院排名
是85，惟一优过俄亥俄州立的是综合排名，俄亥俄州立的综合排名是55，而凯斯西储的
是38。
我对这两个大学不是太了解，请Ohio州的朋友指点一下，多谢！ |
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H****y
发帖数: 156 | 12 年中左右要搬到cleveland，想住在case western校园附近，租或买房都在考虑中。
现住在外州，想向大家请教，case western校园怎样？没有小孩，所以不用考虑校区，
只想找一个较安全和安静，并离学校近的小区。
先谢谢了！ |
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t****e
发帖数: 33 | 13 craigslist看到的，挺便宜的。
联系他说 可以进去后western union给钱，应该没问题吧？
感觉很多骗子都用western union，有点担心。。 |
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i***i
发帖数: 1632 | 14 看明白了，他是用这种方法蒙混别人的：在加州理工学习过，有博士学位。
Pacific Western就是又一个克莱登。
http://tech.sina.com.cn/i/2010-07-06/11424391745.shtml
“我的整体的经历是，在日本攻读了五年的博士，最后一刻我在日本放弃了博士论文答
辩去了美国，到了美国以后我也试图在各个学校寻找一些继续通过论文转成博士的形式
，最后我在美国的叫Pacificwestern的私立大学进行了他们的辅导做了一些研究，最后
拿到了Pacific Western大学的博士学位，这些都有证书在。”
“确实我在加州理工大学曾经有过一段研究的经验；但是我确实是拿到了博士，虽然不
是加州理工大学的博士。” |
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D**0
发帖数: 2048 | 15 ☆─────────────────────────────────────☆
iceui (iceui) 于 (Tue Jul 6 00:57:29 2010, 美东) 提到:
看明白了，他是用这种方法蒙混别人的：在加州理工学习过，有博士学位。
Pacific Western就是又一个克莱登。
http://tech.sina.com.cn/i/2010-07-06/11424391745.shtml
“我的整体的经历是，在日本攻读了五年的博士，最后一刻我在日本放弃了博士论文答
辩去了美国，到了美国以后我也试图在各个学校寻找一些继续通过论文转成博士的形式
，最后我在美国的叫Pacificwestern的私立大学进行了他们的辅导做了一些研究，最后
拿到了Pacific Western大学的博士学位，这些都有证书在。”
“确实我在加州理工大学曾经有过一段研究的经验；但是我确实是拿到了博士，虽然不
是加州理工大学的博士。”
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foolsgold (Hero Suarez!) 于 (Tue Ju |
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h**d
发帖数: 5161 | 17 来个指南，近2年战绩：
只打过一次tounament，水平难说
2010 Berkley open 冠军
灭过范义勇
2010 US nationals 冠军
2010 Concord open 冠军
不认识
2009 China open 女子16强，2009 Western open 冠军，2010 Western open 亚军 |
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s******p
发帖数: 819 | 18 ran with a group led by Phil McCarthy, 48hr run usa record holder (257.7 miles). imagine how tough that is. yet he's a super low key and friendly guy.
it's an interesting group. one guy finished 37 consecutive nyc marathons and will run his 38th this year. another guy finished leadville sub 20hr last year. learnt some good tips from him.
all these people are very low key. wearing very old shirts/shorts/shoes. reminds me of the funny claim that running is an expensive sports because of gear. the ... 阅读全帖 |
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s*********4
发帖数: 3362 | 19 I am western SHBH.
my forehand is semi-western. |
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c*********o
发帖数: 1734 | 20 请各位献计献策。多谢。
我正手是Semi-western grip， 打上旋。 现在想多增加一些平击球，提高球速。是应
该在打平击球的时候改成eastern grip呢，还是grip不变，稍微改一下动作。
尝试了几次用eastern grip,用semi-western的动作，球都飞上了天。 |
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z*********n
发帖数: 94654 | 21 很早以前是eastern，后来试图改semi，自己也没留心改成western了
刚参加一个drill，教练说，你的grip是western，太伤手腕了，最好不要这么extreme
仔细研究了一下果然如此，我靠，不知道啥时候开始就这么过分了，唉 |
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g*****y
发帖数: 7271 | 22 那是western吧，semi还是可以flat out的吧，其实western也可以flat out，no？ |
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z*********n
发帖数: 94654 | 23 见过几个都是低手这么打球的，我恨不得上去踢他一脚，旁观太。。。。。。。。。。
。。别扭了
社会上很多自称western的根本没这么极端。其实就是semi western而已
pro嘛，竟是这么握的，人打得流畅看着就没那么别扭了 |
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r******l
发帖数: 10760 | 24 在很多地方都看到Best Western一个奇怪的地方，就是距离很近就有两家不同的旅馆，
都是Best Western旗下的。有的甚至就是面对面在路两边。这样不是自相竞争吗？别的
旅店似乎都没有这样的。 |
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h******t
发帖数: 478 | 25 【 以下文字转载自 FleaMarket 讨论区 】
发信人: happymyt (Ashley), 信区: FleaMarket
标 题: [出售]Best Western HOTEL 住宿2 晚@ $100
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Nov 29 12:42:58 2010, 美东)
2010-12-1 UPDATE:
刚转让了一张voucher,还剩一张。
有意者可先打电话到你想入住的bestwestern,问对方“I have a best western free night voucher which I got from "stay two night get one night free promotion" this summer, can I use this voucher to stay one night in your hotel?"
另外，voucher上已经注明了是可以转让的，所以voucher 上虽然是我的名字，您是可以使用的。 |
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M**********n
发帖数: 4964 | 27 【 以下文字转载自 Money 讨论区 】
发信人: MitbbsDragon (中國龍), 信区: Money
标 题: Western Union: Send Money Online
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Aug 14 18:57:12 2012, 美东)
寄钱到中国，为什么每次都显示 U2408 Sorry, that transaction is currently
unavailable...
客服的回复是：Unfortunately, it looks like we weren't able to verify some or
all of the information you provided and the only option at this time would
be to send the money from a Western Union agent location, We apologize for
any inconvenience.
非常奇怪，为什么不能verify我的information，以前都寄得好好的。同样的寄法，现... 阅读全帖 |
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K****N
发帖数: 10783 | 28 http://danielmiessler.com/blog/10-facts-every-westerner-should-know-about-the-middle-east
Most Westerners know very little about the Middle East and the people that
live there. This lack of knowledge hurts our ability to understand, and
engage in intelligent discussion about, current events.
For example, frighteningly few know the difference between Sunni and Shia
Muslims, and most think the words “Arab” and “Muslim” are pretty much
interchangeable. They aren’t. So here’s a very brief primer aim |
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a******5
发帖数: 18 | 31 我是新手做western， 我想问问 我lyse cell 以后， 得到supernatant， 然后加入
SDS heat 以后sample 就变得sticky了， 这样的sample 能跑western 吗
有人遇到过这样的问题吗， 怎么处理呢 |
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s******r
发帖数: 2876 | 32 sonicate。
我是新手做western， 我想问问 我lyse cell 以后， 得到supernatant， 然后加入
SDS heat 以后sample 就变得sticky了， 这样的sample 能跑western 吗
有人遇到过这样的问题吗， 怎么处理呢 |
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n****e
发帖数: 1677 | 33 30分钟western和overnight western有本质区别。做科学的总抱着“if it's not
broken, don't fix it“的态度怎么可以。
Blotting |
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A***g
发帖数: 191 | 34 所在的实验室是一个烧钱的实验室，做几十个转录因子，实验套路大致就是qPCR和
western结合检测不同基因在不同human cell line中的表达，然后挑出表达合适的细胞
系去做siRNA和Chip-seq，目的呢，找出这些转录因子的binding site以及pathway什么
的。
我其实只是一国内小硕在这里做一小技术员，可是目前实验室没有post-doc，所以这些
实验基本上就着落在我和另一技术员身上，她负责做siRNA，其它的实验都我做。
照着protocol做实验当然没问题啊，遇到不懂的没人问就难办了。可是我成天闷头赶实
验，哪里有空看文献呢，所以就只好跟science脱节了。
做qPCR还好说（其实也有困难，另行发帖请教），我用的是GAPDH作为internal
control来计算相对表达量。可是做western时，我一开始选的是GAPDH做内对照，买的
是Sigma的抗体，做的还挺好的，因为这个GAPDH检测大小是36kd，正好跟我的目的蛋白
50-75kd能分开，我转一张膜，然后剪开就可以同时检测两个抗体。可是老板在我上周
汇报结果时说GAPDH主要在细胞质表达 |
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s******r
发帖数: 2876 | 35 Histon H1 行不行？
所在的实验室是一个烧钱的实验室，做几十个转录因子，实验套路大致就是qPCR和
western结合检测不同基因在不同human cell line中的表达，然后挑出表达合适的细胞
系去做siRNA和Chip-seq，目的呢，找出这些转录因子的binding site以及pathway什么
的。
我其实只是一国内小硕在这里做一小技术员，可是目前实验室没有post-doc，所以这些
实验基本上就着落在我和另一技术员身上，她负责做siRNA，其它的实验都我做。
照着protocol做实验当然没问题啊，遇到不懂的没人问就难办了。可是我成天闷头赶实
验，哪里有空看文献呢，所以就只好跟science脱节了。
做qPCR还好说（其实也有困难，另行发帖请教），我用的是GAPDH作为internal
control来计算相对表达量。可是做western时，我一开始选的是GAPDH做内对照，买的
是Sigma的抗体，做的还挺好的，因为这个GAPDH检测大小是36kd，正好跟我的目的蛋白
50-75kd能分开，我转一张膜，然后剪开就可以同时检测两个抗体。可是老板在我上周
汇报结 |
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f*********e
发帖数: 1144 | 36 用Mass spec测出来差不多2倍差异，想用western验证，可是我不知道western能分辨出
两倍差异么？ |
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f*********e
发帖数: 1144 | 37 赫赫，确实阿。我觉得western确实应该是最准的golden standard. 只是sensitivity
和 high throughput上面差很多。又太依赖抗体了。
一般来说ms和western的结果还是挺一致的，至少差异方向是一致的。
on |
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s*****t
发帖数: 71 | 38 根据我们实验室100多个蛋白western验证MS结果的经验看，在抗体好用的情况下，2倍
MS差异western的成功率低于30%。楼主慎重。MS要比抗体灵敏太多！ |
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n**********1
发帖数: 251 | 39 请推荐一个VEGF-C的抗体，做western的。不知道哪家公司的比较，由于经费有限
，麻烦用过的人推荐一下，最好是具体的货号吗，就是做western的，多谢了。 |
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h*****n
发帖数: 2023 | 40 最近在研究一个很大的蛋白，有2500个氨基酸。我在这个蛋白的N端加了个FLag。筛了
稳定表达细胞系，用FLAG抗体检测不到蛋白的表达，但我用这个蛋白本身的抗体可以检
测到很强的信号。我以为FLAG序列没有表达，然后就做了FLAG IP，接着用蛋白本身的
抗体看看FLag能否沉下蛋白，结果发现FLAG能能沉下蛋白，比INPUT多。因为实验需要
，只能用1xFLAG,而不能用3XFLAG.FLAG抗体做IP比western灵敏吗？为什么我的western
检测不到？ |
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s*********s
发帖数: 110 | 41 所以，IP比1/50 input多是正常的
你前面的结果，对于stable cell line
用蛋白本身的抗体做western，ectopic expression的stable cell line比control
cell line高多少？
我有一个hypothesis,需要你更多的information才能判断.
western |
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h*******o
发帖数: 4884 | 42 以前都是跑胶之前，100度5-7分钟，都没有问题
最近好几次都出现样品一煮胶就跑的乱七八糟的现象
同样一个样品，没煮的时候跑了一次胶，然出来，条带清晰，western blot出来也干干
净净
放冰箱里面过了一个over weekend (冰箱没问题），煮了再跑出来，染完胶胶就看上去和
火箭电泳一样，有comet尾巴，转的膜做western出来的都不是条带，而是一个一个的
dot
各位大侠知道是怎么回事吗？我怀疑是盐浓度的问题，可是没有理由煮一下盐浓度就变
了啊 |
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W*********n
发帖数: 775 | 43 请问各位大侠，
我想买一个抗体用，结果只查到一个抗体，用途说明中说可以用在dot blot 和 ELISA
及免疫组化中。只是没有说western blot中可用. 我没有做过dot blot. 请问这个可以
用在dot blot的抗体，一般情况下可否用在我的western blot上？浓度一般需要做如何
调整？
谢谢！ |
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m******5
发帖数: 1383 | 44 小弟刚从生化转到发育领域玩
目前正在做一个Homeodomain protein,查10年来的相关的发育领域的文献（DB,
development）非常奇怪地发现都只有in situ 检测蛋白表达和分布，没有免疫组化，
也没有western
我试了市面上所有commercial抗体，也都不能在组织里检测到（western 和免疫组化）
作为阳性对照，转293 overexpress的蛋白检测起来都是没问题的
PS ：我做组织裂解液是用RIPA+超声打散的办法（组织在RIPA buffer里沉淀后直接用
超声打匀，反复三次），理论上也应该没问题？
求指教！
另外还有一个好奇的地方：很多做发育的文章也都只用ｉｎ ｓｉｔｕ来说明问题，这
是什么原因呢？ 是因为组织里免疫检测不到很正常？
另外，没有蛋白水平的检测能说明问题么？ 比如可能蛋白质已经被truncate 了 ，或
者蛋白质aggregate了 ，或者被调控降解了 ，这些都是不能用简单的insitu来证明的
吧？ |
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x*****a
发帖数: 972 | 45 我想测一个muscle/endothelial cell的体系中nitric oxide synthase的表达（只有
endothelial表达）。细胞数量很少，大约10万，所以synthase的表达估计信号也很弱
。我想测刺激
前和刺激后的synthase的表达是否有变化，我估计就算有也非常小。
这种情况下，是不是用flow会更好一点？比如如果增加只是2%，flow的结果会比较
reliable的吧。
我不是很熟western。但是我觉得western对于蛋白表达量要比较高才能看到，而且不能
定量比较（不
知道对不对？），尤其是量差很小的时候，容易被noise掩盖。
请高手指点。 |
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x*****a
发帖数: 972 | 46 confocal那个只能确定是否表达的吧，但是没法量化的比较是否增加。
intracellular staining我以前试过另一个protein，也还能做到。
western是比较band的gray scale的强度？我不太懂western的。
谢谢了啊 |
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w****l
发帖数: 535 | 47 不管那种方法，都要有好的antibody
western最好做，可以先试一下,一目了然，先优化一下antibody的dilution
western检测不出来，试试regular fluorescent microscopy看一下，确认一下
antibody
work,work了做flow比confocal容易
ELISA或者MSD如果有卖的kit可以直接买来试，
要没有需要自己coat plate的话，那就最后试吧，因为需要一对好的antibody,
优化起来最麻烦
population |
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w****l
发帖数: 535 | 48 你要是有能做flow的antibody就做flow呗
做western,load equal volume,不要load equal amount of protein.
有好antibody的情况下，当然prefer flow,不过flow比western更挑antibodys
sort完全没必要，直接gateCD 31+ popluation就行了 |
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m*******1
发帖数: 58 | 49 顺便问一下:
测定一个细胞内蛋白的磷酸化, flow和western哪个更加准确?
一般两者定量结果一致性如何?
我看临床诊断好像偏爱flow? 为什么? 容易定量?
flow和western的precision(%CV)一般由多大? 10%?
谢谢 |
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o*****a
发帖数: 2335 | 50 最近也在看这些技术文章，似乎如果染料结合没饱和的话，这么做也不一定比house
keeping genes差。前不久看过的一个全蛋白做normalization文章：
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2567873/?tool=pubme
另外还有个半定量western的文章提到Ponceau S的局限
It has been found that images acquired with fluorescent staining are better
suited for quantification compared to Ponceau S. This is connected to the
fact that a color staining such as Ponceau S darkens the membrane locally.
Since the color of the membrane cannot become darker than that of the pure
staining color, the... 阅读全帖 |
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