a****d
发帖数: 1919 | 1 准备建一个hESC reporter line, 有几个问题向有经验的大牛们请教。
我准备在目的gene末端插入XFP，那么在HDR之间是否应该这个顺序： last exon(stop
codon removed)-T2A-XFP-UTR？
目前在last exon上面找到了一些sgRNA序列，在stop codon上游大概50-150bp. 请问在
这个距离上double nicking是否可行？
另外选择好了sgRNA后，选择HDR是不是按照double nicking位置向上游选700-1000bp，
然后从last exon(stop codon removed)-T2A-XFP-UTR开始向下游选700-1000bp？没有
其他的特殊要求？
准备donor plasmid时，考虑到很难找到特异的酶切位点去匹配几个不同的片段，这种
几个大片段连接，是不是选择Gibson Assembly Cloning更容易一些？ |
|
s*n
发帖数: 2603 | 2 Foxconn product:
Accessory Parts
Accessory
Audio Jack
Audio Jack Connector
Automotive
USCAR
Backplane Connector
Backplane Conn Backplane Connector Cable End Connector
Din 41612 Conn Foxtral 2mm Conn Future Bus 2mm Conn
Hard Metric 2mm Conn
Board to Board Connector
Board to Board Connector
Board-to-Board Connector
Board to Board Connector ... 阅读全帖 |
|
t*******r
发帖数: 3271 | 3 说啥? 交换机及相关技术我是不懂.
不过, MX是路由器, 是有L2功能的路由器, 你们都说是switch, 这一点我完全不能理解
以太网接口很多就是交换机么? 还有, 别告诉我MX只有以太网接口啊~
http://www.juniper.net/us/en/products-services/routing/mx-serie
PB-1OC48-SON-B-SFP
PB-4OC3-1OC12-SON2-SFP
PB-4OC3-4OC12-SON-SFP
PB-4CHOC12-STM4-IQE-SFP
PB-1CHOC48-STM16-IQE-SFP
PC-1OC192-SON-VSR
PC-1OC192-SON-XFP
PC-1OC192-SON-XFP
PC-4OC48-SON-SFP
这些板卡都是和M320/T640/T1600通用的.
你见过7600的板卡和GSR/CRS通用的么?
你见过ASR9K的板卡和GSR/CRS通用的么?
我承认GSR/CRS都是真正的路由器.
从这一个角度来讲, 我觉得7600和ASR9K都是交换机 #_#
/8
地... 阅读全帖 |
|
l**********s
发帖数: 20 | 4 姓名: 梁安辉 性别: 男 职称: 教授 职务: “千人计划”国家特聘专家、校学术
委员会副主任、光通信研究所所长 导师类别:博士生导师、硕士生导师
个人简介:
梁安辉教授，国家“千人计划”获得者(全职，A类），国家特聘专家， “千人计划”
全国代表大会代表(全国仅有155名，光纤通信领域唯一代表 )，南京邮电大学学术委员
会副主任，南京邮电大学校长专聘教授，南京邮电大学光电工程学院光通信研究所所长
。曾在美国、日本、中国（香港）等国家从事尖端的光纤通信方面的学术及研发工作二
十余载。曾在多家美国著名的企业担任高级研发职位。如曾在美国Tyco Submarine
Systems（其前身为著名的AT&T贝尔实验室）担任资深研究员，当时在世界著名科学家
林清隆的实验室从事海底光纤通信的研究工作。曾担任湖北省特聘专家。曾任武汉邮电
科学研究院（即烽火科技）光纤通信技术和网络国家重点实验室首席科学家（系统和模
块）， WTD首席科学家（模块）。曾任武汉邮电科学研究院特聘专家。曾任湖北省留学
人员协会理事，武汉市高层次人才协会理事。是国家及省级各种人才计划的评委（面试
和网评... 阅读全帖 |
|
P**H
发帖数: 2272 | 5 这些都这两年5块以下的
上周的收盘价:
SYMBOL 5/20/2011
UFS 102.81
LULU 96.29
LCAPA 87.50
DTG 80.90
HTWR 77.61
APKT 77.33
PPO 68.69
TPX 64.05
VRTS 55.41
VECO 54.79
TRW 54.59
DDS 53.26
ULTA 52.50
SHS 52.31
ROC 51.65
TCK 50.00
MSI 46.78
PAY 46.62
ROSE 46.14
GRA 45.11
RAX 43.08
VIV 42.20
KWR 41.31
GIII 41.04
TEN 40.10
DNDN 38.98
OXM 38.94
ACTG 38.72
YZC 38.46
IMAX 36.41
TPCG 35.64
OVTI 35.54
RDWR 35.45
APL 34.99
W... 阅读全帖 |
|
D***h
发帖数: 78 | 6 用tar 就可以了(/mnt/usb 是4G的U盘):
cd /; tar cf - * | ( cd /mnt/usb; tar xfp -) |
|
y**b
发帖数: 10166 | 7 大量文件，一次几个T吧，目录也多，有的文件较大，比如几百G。
我试了一下cp或rsync拷贝到usb 3.0外置硬盘(ntfs格式)，
一开始很快，100MB/s,
可是后面就越来越慢，
甚至到了慢的惊人的地步，200kB/s。
把外置硬盘格成ext等格式有帮助吗。
见有人用tar的办法，会更快？
cd /source; tar cf - * | ( cd /target && tar xfp -) |
|
y**b
发帖数: 10166 | 8 是应该tar打包一下，
有人说cd /source; tar cf - * | ( cd /target && tar xfp -)
可以只用1/4时间,
当然这看具体问题,
刚拷完一个750GB的目录，
平均速度18.3MB/s，
这算是不错了。 |
|
a****d
发帖数: 1919 | 9 regular EGFP is fine for stable cell line, it's bright enough. Plus all
there are several great antibodies for EGFP, but not for other XFP. |
|
e***o
发帖数: 344 | 10 wow!! 好专业的回答！
你说的spica是不是2011年底nature method的那篇文章。看起来好象不错，不知道做起
来是否靠铺，因为还没有人重复。另外Luciferase reconstruction based 方法，做
live cell imaging和FACS比不上XFP。上大规模可能活比较多。 看起来MAPPIT比较可
靠，但是是transcription based,可能不够dynamic.应该不能做live cell imaging。
另外，你认为Y2H做核外的，大概会有多少！
btw, 你知道有什么好的方法可以检测RNA Protein 互做的吗？ 除了RNA-IP, CHIP?
谢谢！ |
|
e***o
发帖数: 344 | 11 多谢各位的回复。应该是我没有表达清楚。这几种蛋白的ex/em肯定是可以分开的。我
的目的是想这几个蛋白分子在物理空间上分得比较开。这一点用靠分辨显微镜是比较容
易的，但在一般显微镜下，由于XFP表达都很多，就混在一起了，分子和分子之间分不
开。
最好就像做DNA FISH的染色，分得很开。 |
|
|
l**********k
发帖数: 189 | 13 这是一个非常急需的大鼠。我们已经开始在大鼠上做rosa-loxP-STOP-loxP-XFP, 目的
是为了检测cre expression 特异性的。
不知道在小鼠研究中，神经和心血管领域哪种cre鼠最常用，这样我们在做cre大鼠的时
候，也有一个参考。因为想先做客户范围比较广，在科研领域最常用的，就象免疫研究
里的CD4-Cre, CD19-Cre, FoxP3-Cre, CD11c-Cre等。
谢谢。 |
|
l**********s
发帖数: 20 | 14 姓名: 梁安辉 性别: 男 职称: 教授 职务: “千人计划”国家特聘专家、校学术
委员会副主任、光通信研究所所长 导师类别:博士生导师、硕士生导师
个人简介:
梁安辉教授，国家“千人计划”获得者(全职，A类），国家特聘专家， “千人计划”
全国代表大会代表(全国仅有155名，光纤通信领域唯一代表 )，南京邮电大学学术委员
会副主任，南京邮电大学校长专聘教授，南京邮电大学光电工程学院光通信研究所所长
。曾在美国、日本、中国（香港）等国家从事尖端的光纤通信方面的学术及研发工作二
十余载。曾在多家美国著名的企业担任高级研发职位。如曾在美国Tyco Submarine
Systems（其前身为著名的AT&T贝尔实验室）担任资深研究员，当时在世界著名科学家
林清隆的实验室从事海底光纤通信的研究工作。曾担任湖北省特聘专家。曾任武汉邮电
科学研究院（即烽火科技）光纤通信技术和网络国家重点实验室首席科学家（系统和模
块）， WTD首席科学家（模块）。曾任武汉邮电科学研究院特聘专家。曾任湖北省留学
人员协会理事，武汉市高层次人才协会理事。是国家及省级各种人才计划的评委（面试
和网评... 阅读全帖 |
|
