s*****t
发帖数: 107 | 1 各位大侠，小妹正在做Zhangfeng的LentiCrisper-V2 Vector，
已经按照ZhangFeng lab的Protocol把退火的Primer Pair连接到了
Lenti-Crisper-V2 Vector上。可是怎么知道我的Insert 连到vector上去了呢？
protocol说原载体上两个BsmB1之间有2Kb insert。 我现在把我连出来的Vector
作了个酶切，发现没有这个2kb insert了，但是怎么能排除原载体自连呢？
另外，我自己的insert连进去以后要不要考虑正反向的问题？ |
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z*******g
发帖数: 18 | 2 【 以下文字转载自 JobHunting 讨论区 】
发信人: zhangfeng (feng), 信区: JobHunting
标 题: 问大家一些意见
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Sep 20 10:15:09 2013, 美东)
大家好：
本人从一个排名前100左右的学校物理PhD上个月刚刚毕业，主要做lattice qcd
方面的研究，用很多的C++建模，进行大规模的Monte Carlo simulation, 然后对结果
进行一些统计分析来获得结果。这几个月来也刷了leetcode，也认真地看了effective
c++那本书，同时也学了一些金融方面的知识。这几个月来一直在投quantitative
analyst/researcher和一些码工方面的工作，也拿到一些面试，但都没拿到offer。如
果这里有人能够给我一些建议，或者有相关方面的实习或者工作的机会的话，请站内我
，我可以把简历发给你。
我在这里先谢谢大家了。
祝好！
Zhangfeng |
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f*****n
发帖数: 12752 | 3 crispr开始发现人三个，加zhangfeng，加以后至少一个临床治疗的，人太多结果谁也
不给 |
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z*******g
发帖数: 18 | 4 【 以下文字转载自 CS 讨论区 】
发信人: zhangfeng (feng), 信区: CS
标 题: 问个网页添加filter的问题
发信站: BBS 未名空间站 (Wed May 15 17:34:54 2013, 美东)
我不是学CS的，所以有可能解释的不清楚。如果有哪不清楚，请告诉我。
我的问题是：
有一个网页, 例如http://www.dell.com/us/p/laptops.aspx?ref=tile2。这个网页里有一些选项，就像这个网页左边的的operating system, screen size....，但是我想再加一些他没有的选项，例如weight啥的，然后让这个网页只显示符合新的选项和他自带的那些选项的东西。有方法可以实现吗？
谢谢！ |
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z*******g
发帖数: 18 | 5 大家好：
本人从一个排名前100左右的学校物理PhD上个月刚刚毕业，主要做lattice qcd
方面的研究，用很多的C++建模，进行大规模的Monte Carlo simulation, 然后对结果
进行一些统计分析来获得结果。这几个月来也刷了leetcode，也认真地看了effective
c++那本书，同时也学了一些金融方面的知识。这几个月来一直在投quantitative
analyst/researcher和一些码工方面的工作，也拿到一些面试，但都没拿到offer。如
果这里有人能够给我一些建议，或者有相关方面的实习或者工作的机会的话，请站内我
，我可以把简历发给你。
我在这里先谢谢大家了。
祝好！
Zhangfeng |
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发帖数: 1 | 6 刚子推荐的crsp，ebit和ntla
大家hold的怎么样了，可以add了吗？
ntla我知道，这货我30买的，跌到17我割肉了，再也不买丫的了。
zhangfeng的crsp值不值得买？ |
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H*******a
发帖数: 663 | 7 其实只要被你点评，即使是不好的，我都特开心，你对我这么宽厚的点评，我真挺感动。
我也不会骄傲的，对自己的几斤几两还是有自知自明，遇见很多非专业的女生，都打得
特别好，我心里是仰慕加葱白。
反正我打球就是为了开心和锻炼，大部分我都不在乎输赢，就怕拖累搭档，极个别情况
可能会在乎
专业咋就不能比了，就ecbc遇见的几个女生，球品人品都是顶呱呱
zhangfeng，技术全面不说，那个反手后场就男生看了就会敬畏三分；
高个美女，基本功好，打球漂亮，练过就是不一样，
jackie，我也喜欢她，她也很快，而且技术也全面。 |
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t*******e
发帖数: 723 | 8 冲雪茶（对吗？）这个心态，一定前途无量。
zhangfeng以前更猛，现在一心想把身体素质练回去。
还有个jackie美女？ECBC网罗DC美女，这个路线实在是太好了。
以后我就搬个凳子去看球。
动。 |
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H*******a
发帖数: 663 | 9 怎么叫我都行，只要我知道是我。。。
我以不奢望撒前途，只觉得抱大腿比较实际，呵呵
zhangfeng对自己要求太高了，她就现在这样就很厉害了，呵呵，你帮我问问她周末来
吗？
好久也没看见jackie了，她hk的，人超级nice，我也特喜欢和她打球。我早上已经发
email问候她了 |
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w***t
发帖数: 303 | 10 hehe
zhangfeng might say: i would do the same if i could...
opt
篇p |
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T****u
发帖数: 424 | 12 远还没有到。
Zhang Feng确实很牛。
但Crisp这一系列的paper，除了第一批和Church back to back的那篇science,后面
的double nick,whole genome都是可以想见的，很多人都在做，只是mit资源（人，物
较其他地方多）。
即使Crisp的第一批次的paper，credit很多程度也属于2012年的Science paper，这篇
基本上确定了大的框架，并指出了可以用于genome editing.
http://www.sciencemag.org/content/337/6096/816.full.html
A Programmable Dual-RNA–Guided DNA Endonuclease in Adaptive
Bacterial Immunity
Martin Jinek,1,2* Krzysztof Chylinski,3,4* Ines Fonfara,4 Michael Hauer,2&#
8224;
Jennifer A. Doudna,1,2,5,6‡ Emmanuelle Charpen... 阅读全帖 |
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s*********s
发帖数: 110 | 13 zhangfeng or Church的方法都可以。
但做Cell line KO还是建议采用Double nick的方法。
off-target还是很严重的。 |
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V******t
发帖数: 444 | 14 重蹈庄小威的覆辙啊
谁都知道zhangfeng 是follow up的啊 |
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S***J
发帖数: 1210 | 15 Re. 真是希望zhangfeng这次能打赢这个patent！
每次看到Doudna那个老妖婆就尼玛不爽，美国学术圈这种出身好的女PI真是占尽各种便
宜。 |
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d****k
发帖数: 2738 | 17 这个vector多大，你的insert多大？这个2kb insert怎么回事？sorry，完全没明白你
的问题？ |
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s*****t
发帖数: 107 | 18 Zhang Feng lab 给的Lenti-Crisper-v2 载体里面两个BsmB1位点之间有一个2kb
Insert。
是方便别人克隆用的，也就是只要把这个原来的２ｋｂ切掉，放入你自己退火的Ｐｒｉ
ｍｅｒＰａｉｒ就行了。我就是问连进去以后怎么鉴定？ |
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l***y
发帖数: 638 | 19 测序，能连进去的都是一个方向的
另外clone之后的质粒不应该再有BsmBI位点 |
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d****k
发帖数: 2738 | 20 能不能切完走胶看size变化，或者直接点，测序，象楼上说的？ |
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S***J
发帖数: 1210 | 22 个人感觉他不大可能拿诺奖，一个年轻华人，根本没有那么多大佬帮他造势。Doudna那
个老妖婆到处到牛地方做报告，各种大佬捧场。
何况，zhangfeng毕竟不是这套系统的发现者，机理也不是他搞清楚的。但他大大推进
了技术发展，最近又鉴定了分子量更小的同样活性的cas9，专利和开公司挣钱是他应得
的！ |
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D*******D
发帖数: 100 | 23 说句老实话，不想说中国pi的坏话，中国pi也很难。但是这里有个屁股问题，你的阶级
决定你看问题的态度。
上面pi说的，push是还算正常的东西，很少有不push又能出东西快得实验室。
但是你要注意的是，这个人找你的原因？还有他有没有故意的骗你？就个人感觉，如果
他想找你是如你所说想你做你们商量好的课题，但是确实客观上做不好，或者说你的想
法有待商榷，这还马马虎虎。如果他找你就是忽悠你来的，根本不是因为想让你做你想
做的。那么他可以再忽悠你一次，等到时候，你要选择就更难了。
个人感觉3个月很短，没有必要要这个人的推荐信。你还是自由的，目前看。
而且所谓上面提到的愣头青pi也是有好有坏的，不是所有愣头青都是真的愣头青。如果
你碰上zhangfeng的老板，前途就不得了了。当然风险也是一样的。
你既然来了美国，那么3个月依然基本适应了。可以去打听，甚至去看看有意向的实验
室。
最后，你虽然要走，尽量还是和这个人保持有礼有节比较好，山不转水转，做不成朋友
，也最好不要成仇就好。当然注意不要给他影响你的机会。
祝好运！ |
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H*********u
发帖数: 4 | 25 zhangfeng和 Jennifer Doudna不是有专利权诉讼吗，怎么还一起开公司？ |
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r******g
发帖数: 600 | 26 感觉提到“china embryonic editing”的事情，容易误导readers，让人觉得跟zhang
有关系
文章里面没有介绍zhangfeng。如果是一个完全不知情的读者，容易产生“zhang是邪恶
派”的感觉 |
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m*********9
发帖数: 232 | 27 至少在IP这块，UBC那边的进程目前看上去基本就是很正常的科研成果商业化的过程，
没什么不正常的。但是zhangfeng这边，从IP的处理方式来看，明显是心急要抢东西的
架势。
我说过，科研成果商业化，给sicientist经济报酬，这都是应该的。
科学家也得吃饭，只不过针对IP这一块，这家伙的吃相难看了点。别把我嫌弃这人吃相
难看误解做我说这人不能吃东西。 |
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m*********9
发帖数: 232 | 28 这个就看具体操作了。UBC那边至少一开始，从申请的时间，申请方式，和claim的
scope，看得出是走的大学通用的商业化流程。结果到了最后发现有人用Prioritize
Track I的方式抢发了patent，这个时候UBC卷起袖子要开抢是正常的啊！这个时候都不
抢了那就是不正常了。
但是zhengfeng他们上来就用Prioritize Track I，说实话，只少我不信他不是为了抢
发patent。
至于UBC的宣传，我倒是不常见他家动辄跑出来开CRISPR的讲座。不过也可能是我在
东北的原因。但是zhangfeng他家的讲座实在是，又多又会卡点。其实我很想知道他的
律师有没有告诉过他：大哥你这样在美国是没用的，而且真要是appeal到了federal
court
你这么做对你自己很不好。 |
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m*********9
发帖数: 232 | 29 可是我就是看了他在专利上的做法才让我觉得不舒服。
至于UBC到底拿多少奖，有没有institue，不影响zhangfeng在抢专利这块上的做法不好
看这一点。 |
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m*********9
发帖数: 232 | 30 ==我觉得你是不是完全没看过prosecution history？
其一，这跟法庭目前还无关，还在PTO阶段。
其二，UCB先申请，走的是正常流程。但是zhangfeng走的是一种正常大学一般都不会走
的流程，价格更贵，要求更龟毛，就是为了尽快抢到专利才会用的方法。之后他们抢下
来了，被用作prior art阻止了UCB的申请，UCB律师没办法才启动102(g)。而且既然他
们会主动启动102(g)，应该是律师评估过目前的证据认为其有利于UCB的。如果你搞这
行就知道102g这东西有多罕见，不是证据有利且没有其他办法，一般不会走这条路。
而讲座这玩意儿，哪个教授都会做。但是卡在PTO宣布102g的两三天立马开个讲座，这
时间我也真的只能说是太醉人了。
总之我是就IP技术层面就事论事，要是没啥技术论上来就扣帽子，那就别讨论了。 |
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c*********r
发帖数: 1312 | 31 老拿张锋做讲座说事儿，又不都是他自己主动要去做。排队请他做讲座的人多了去了。
Duadna做的过分的事多了去了。
还有就是你也是做律师的，就算走了Prioritize Track I，你要觉得不舒服，也是
Broad Institute/MIT让你不舒服。Doudna那边就一口一个UBC，到了Broad/MIT这边，
你就一口一个zhangfeng，让你不舒服的帽子都给张锋一个人戴上。至少你要把UBC和
Broad/MIT对等，Doudna和张锋对等起来再做对比啊。
要公正就不要搞偏见、选择性失明、预设立场、双重标准。。。 |
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l***y
发帖数: 638 | 32 这么大的patent都是学校在后面主导的，zhangfeng就是推出来站台的，他肯定不懂啥是
prioritize track。说学校律师不aggressive的肯定没见过多少，私校的那些律师恨不
得把你肉都咬下来，这种关键案子不去拼命是想被fire啊。
这个patent最后还是两个学校在打架，最后归谁先不去说，doudna和ucb当年肯定没意识
到这么有商业价值。 |
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r******k
发帖数: 446 | 33 有些人讨论别人造势不造势真无聊。 zhangfeng自己不想造，他公司哪些投资人（哪些
Venture capital和Private equity）也低找公关公司给他造势。我们钱不是白投的呀
，以为大股东们都吃屎的？现在你不想造势 不想高调都不行。等投资人都exit以后，
你爱怎么低调怎么低调。 |
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s********x
发帖数: 472 | 34 这里先不谈人品，就先分析一下ZF和Lin到底谁可能在说谎？
1. 在专利之争中，Zhangfeng认为从Doutna的体外实验到in vivo应用是个需要天才
创意和智力投入的过程，而Doutna则认为这一步只不过是水到渠成的结果。这个就不在
这深入了，相信任何做过CRISPR的人都有自己的评论。
显然ZF觉得需要更强的evidence，这时Lin的工作就显得非常重要了，因为在Doutna发
出paper之前，只有Lin的实验数据作为证据（这个可见ZF在专利局公示的文件）。而ZF
一直在声明中说他早就认识到CRISPR的巨大应用潜力，长期以来对CRISPR的研究非常重
视，同时他在声明中又把Lin的实验技术和水平贬低得很厉害（具体可以看ZF在专利局
公示的文件），这就本身就很奇怪，如果你是PI，发现一个巨大的金矿，而又非常有信
心，你会只让一个exchange student自己在那里试验吗，而且是你不看好的学生？只要
有点儿野心的PI都会自己跳进去做试验吧。根据这些事实，恐怕ZF当时就把CRISPR当成
一个high risk的项目，自己并没有信心能够做成，所以才会让一个交换学... 阅读全帖 |
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z*******o
发帖数: 1794 | 35 这事我还真愿意相信林说的是事实。他作为一个交换学生，张峰一开始显然不会把好的
马上出活的project给他做。张应该是看到D那边出来了后觉得这是个机会所以把全部身
家押上，张这边你不得不佩服他的眼光，但到了林这边显然是变成了抢课题。不过话说
回来，林这个邮件发得确实欠考虑，当然极品的是D，居然把这种邮件拿出来炒作造势
也是够狠。
elix (Tod) 的大作中提到：]
:这里先不谈人品，就先分析一下ZF和Lin到底谁可能在说谎？
:1. 在专利之争中，Zhangfeng认为从Doutna的体外实验到in vivo应用是个需要天
才创意和智力投入的过程，而Doutna则认为这一步只不过是水到渠成的结果。这个就不
在这深入了，相信任何做过CRISPR的人都有自己的评论。
:显然ZF觉得需要更强的evidence，这时Lin的工作就显得非常重要了，因为在Doutna发
:出paper之前，只有Lin的实验数据作为证据（这个可见ZF在专利局公示的文件）。而
ZF一直在声明中说他早就认识到CRISPR的巨大应用潜力，长期以来对CRISPR的研究非常
重视，同时他在声明中又把Lin的实验技术... 阅读全帖 |
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w****e
发帖数: 1883 | 36 能不能把Doudna拼对？强迫症看着难受死了
：这里先不谈人品，就先分析一下ZF和Lin到底谁可能在说谎？
：1. 在专利之争中，Zhangfeng认为从Doutna的体外实验到in vivo应用是个需要天
才创意和智力投入的过程，而Doutna则认为这一步只不过是水到渠成的结果。这个就不
在这深入了，相信任何做过CRISPR的人都有自己的评论。
：显然ZF觉得需要更强的evidence，这时Lin的工作就显得非常重要了，因为在Doutna发
：出paper之前，只有Lin的实验数据作为证据（这个可见ZF在专利局公示的文件）。而
ZF一直在声明中说他早就认识到CRISPR的巨大应用潜力，长期以来对CRISPR的研究非常
重视，同时他在声明中又把Lin的实验技术和水平贬低得很厉害（具体可以看ZF在专利局
：公示的文件），这就本身就很奇怪，如果你是PI，发现一个巨大的金矿，而又非常有
信心，你会只让一个exchange student自己在那里试验吗，而且是你不看好的学生？只
要有点儿野心的PI都会自己跳进去做试验吧。根据这些事实，恐怕ZF当时就把CRISPR当
成一个high r... 阅读全帖 |
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g****g
发帖数: 74 | 37 你太naive了，不管这个证据多nb，D都不会给钱老的位置啊，要是给了那D才真是脑子
秀逗了，不联系不回应才是最有利于D的措施，联系了反倒说不清了。 估计D本来就有
一定的把握赢下这场官司，可能在D眼里 这封信无非就是把球轻松踢进球门的那一脚而
已，只不过力度虽小，却是最为致胜那一脚
没想到那人知道哪么多内幕，不知道林回国后回来有没有接着做那个课题吗？如果是被
踢出来的话，那zhangfeng的做法多多少少对林不公道吧 |
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g****g
发帖数: 74 | 38 你说的运作一下替林活动一个别的地方，有这个可能，但也不大可能，这个不好猜测了
但你后面说的那些就不大可能了，首先D为什么要当面或者电话询问，这些都是可以录
音留下证据的，当你对你面前的一个完全不了解的情况下，为什么要做这些呢，做了反
而有可能留下污点，什么都不做才能立于不败之地，就算有把握赢，你有这么一封信，
先不管是真是假，那都是天上掉下来的馅饼，那封信真的话，那zhangfeng丢的可就不
是专利这么简单的事情，这里面还涉及到了ethic的问题，如果那封信是假的，那对D没
有任何影响，她只是如实呈贡收到的一些supporting 材料而已，但对zhang来说，就要
呈贡更多真实的证据来反驳，没有的话那就难辨了，但是证据呈贡的越多，就相当于给
对手更多有可能找出纰漏的材料
只有真正弄清为啥林和张不欢而散的原因，才能有希望来弥补这些不该有的事情。。。
但开工没有回头箭，难。张难道就一点没有意识到这个问题吗，还是意识到了，也不想
补救一下， 这个也很难猜了。也许只有当事人清楚这其中的原委。 |
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