c****1 发帖数: 1095 | 1 请教做乙酰化的专家:
1. 通常的乙酰化的抗体,都是用一个短肽做免疫原。比如,一个用来做K9ac抗体的短
肽,是4-15的序列,但是这个序列中,K9是ac修饰的,但是还有其他没有修饰的K,比
如K5,K12。我的问题是,这个抗体,是不是只能识别K9乙酰化,同时K5和K12没有修饰
的序列?这样一来的话,这个抗体,并没有识别所有的K9乙酰化的状态。好像还没有那
个paper提到这个情况。
2. 乙酰化修饰是否稳定?去乙酰化需要能量么?在RNAlater中解剖组织对乙酰化修饰
有没有什么影响?
非常感谢!!! |
|
K****e 发帖数: 32 | 2 ubiquitin是没有,但是又没有发挥类似UPS作用的体系呢?
细菌中乙酰化的报道较多,提示细菌中有成套的乙酰化修饰体系,是不是可以认为外源
性蛋白在进行质粒表达后也可能会被Ecoli中的乙酰化酶作用,从而产生乙酰化位点。
不知道这方面有没有报导? |
|
d****i 发帖数: 2346 | 3 最近在做p65的核内乙酰化,total的p65做得很好,但是乙酰化检测不到。抗体用的是
CST的。看到有的公司的western图片注解上说竟然用了180ug蛋白。。。。。。顺便请
大家推荐乙酰化p65抗体。谢谢! |
|
d****i 发帖数: 2346 | 4
etc
谢谢!是提取nuclear protein做乙酰化western好 还是 从total cell lysate 里IP
以后做乙酰化好?我需要比较各个时间点乙酰化程度的不同。。。。 |
|
x****s 发帖数: 29 | 5 没做过甲基化或者乙酰化的实验,想问一下这种epigenetic的修饰是不是transient的
实验无法检测。
比如说,我发现在稳定转染一个外源A基因的细胞株里,B基因的表达有上调,体外构建
了B基因promoter的报告基因,但是没有发现A对其有任何激活。不过,分析稳转细胞株
发现,B基因的启动子区域有乙酰化(对照株没有),这样的结果能解释A对B的上调吗?
这能不能说明表观遗传的修饰需要相当的时间呢?谢谢。 |
|
L****T 发帖数: 169 | 6 首先回答你第一个问题,答案是不确定,因为我的经验里Epigenetic修饰的变化有时候
transient实验可以检测到,有时候不能。
具体而言,你描述的实验分别检测的是short term与long term的效应。稳定转染看的
是long term的效应(>1 week),而luciferase reporter assay一般是short term的
效应(24-72h)。short term和long term效应有可能会不一致的。正如你所说可能需
要更长的时间,也可能你的reporter压根不能很好模拟B基因的染色质结构。你检测到
稳转细胞株里B基因启动子区域有乙酰化(对照株没有),这个结果确实可以解释为A基
因编码的蛋白质通过表观遗传方式来调控B基因,
One question: 你试过transient over-expression A基因,是否可以检测到B基因表达
水平的变化以及启动子乙酰化的变化? |
|
d****i 发帖数: 2346 | 7
非常感谢!ac-p65我试了abcam的抗体,能看见信号,就是很弱很弱。有个问题就是,
如果用total lysate就没法证明乙酰化的蛋白是核内起作用的。有人说乙酰化也可能发
生在胞浆。 |
|
d****i 发帖数: 2346 | 8 我用LPS刺激细胞,一直检测不到p65的乙酰化。查文献说p65乙酰化是NF-kB激活的必要
步骤。。。。。
请大牛指点!谢谢! |
|
|
K****e 发帖数: 32 | 10 请教各位:
最近在Ecoli中表达真核细胞蛋白后跑胶用质谱检测,以外发现多种翻译后修饰,包括
甲基化、乙酰化和泛素化,从图谱上分析这些位点的鉴定可信度都还不错。按照以往的
知识Ecoli缺乏对真核蛋白翻译后修饰系统,不知大家之前是否观察到过同样现象或看
到过类似报道?谢谢 |
|
K****e 发帖数: 32 | 11 ser/thr acetylation 可能是由于处理过程中发生的酯化反应,如果是lysine上的乙酰
化呢?是否可以认为偏向于E. coli中酶的作用?
once |
|
x****s 发帖数: 29 | 12 多谢详尽的解释,就是说表观遗传修饰是不好用transient的方法来检测的吧,至于你
说到reporter不能模拟实际B基因染色质结构,我觉得可以理解,不过想问一下有没有
相关文章可以参考一下,谢谢。
实际上这是别人文章的结果,自己以前也有类似的疑惑,所以就问了一下。至于你提到
的那个问题,我在文章里没有看到,所有数据都是来自稳转细胞株,或者是knockdown
结果,没有瞬时转染。其实这里面也有点小问题,如果乙酰化修饰导致的上调的话,应
该是个long term的结果,knockdown和overexpression都是看short term,把
knockdown结果放这里似乎跟机制有点矛盾。 |
|
s******y 发帖数: 28562 | 13
取决于具体的抗体,有的是可以识别所有的acetyl-lysine,有的则对背景序列
也敏感
一般比较稳定。
去乙酰化不需要能量,但是需要酶催化才能高效。
RNAlater具体是什么成分?如果不是碱性很强, 应该问题不大。 |
|
|
J********3 发帖数: 3151 | 15 非组蛋白乙酰化一般不大好检测, 最好先IP下来,再做WB。 |
|
d****i 发帖数: 2346 | 16
用nuclear lysate会不会更好?乙酰化应该是发生在核内。 |
|
g*********d 发帖数: 233 | 17 夏荣辉,李江
上海交通大学医学院,上海(200011)
E-mail:e******[email protected]
摘 要:基因的表观遗传学修饰正越来越受到人们的重视,它包括DNA甲基化和组蛋白修
饰,组蛋白修
饰又包括组蛋白乙酰化和组蛋白甲基化。基因的表观遗传学改变在基因转录调节方面有
重要作用。最
近研究较多的是多种组蛋白修饰方式和DNA甲基化在基因转录调节方面的共同作用,本
文详述组蛋白
修饰和DNA甲基化的发生机制,并且总结了组蛋白乙酰化和组蛋白甲基化与DNA甲基化之
间的相互作
用,提示不同位点的组蛋白甲基化与DNA甲基化共同作用于基因转录,并且发挥不同的
作用,具体体
现在组蛋白乙酰化、组蛋白H3K9、H3K27和H4K20甲基化与DNA甲基化协同作用,使基因
发生转录抑
制,而组蛋白H3K4甲基化与基因转录激活有关。
关键词:组蛋白修饰;DNA甲基化;关系
1. 引 言
目前,在研究肿瘤发生发展的过程中,基因的表观遗传学修饰所起的作用日益得到人们
的重视。组蛋
白修饰和DNA甲基化是两种最重要的表观遗传学修饰方式。研究表明,人类几乎所有类
型的肿瘤都存
在组蛋白及DNA甲基化的异常... 阅读全帖 |
|
g*********d 发帖数: 233 | 18 目前表观遗传学(Epigenetics)通常被定义为基因表达通过有丝分裂或减数分裂发生了
可遗传的改变, 而DNA 序列不发生改变[1, 2]。表观遗传学的机
制主要包括DNA 甲基化、组蛋白修饰及非编码RNA。DNA 甲基化(DNA methylation)是指
在DNA甲基转移酶(DNA-methyltransferases, DNMTs)的催化下, CpG 二核苷酸中的胞嘧
啶被选择性地添加甲基, 形成5-甲基胞嘧啶[3, 4]。DNA 甲基转移酶有两种, 其中
DNMT1 主要起维持甲基化的作用, 能使半甲基化的DNA 双链分子上与甲基胞嘧啶相对应
的胞嘧啶甲基化, 可参与DNA 复制双链中新合成链的甲基化[5]; 而DNMT3a 和DNMT3b
主要起形成甲基化的作用, 能在未发生甲基化的DNA 双链上进
行甲基化[6]。DNA 甲基化一般与基因的沉默相关,DNA 去甲基化则与基因的活化相关[7
~9]。
组蛋白修饰(Histone modifications) 是指组蛋白的基础氨基末端尾部突出于核小体,
常在转录后发生变化, 包括甲基化、乙酰化、磷酸化和泛素化等翻译后的修饰... 阅读全帖 |
|
b*****r 发帖数: 203 | 19 美《科学》杂志罕见同时发表两篇中国专家文章 中新社
美国当地时间2月19日,最新出版的《科学》杂志,罕见地同时发表两篇复旦大学
生物医学研究院的最新成果。其中关于蛋白质向能量转化过程中“乙酰化修饰”的重要
发现,对肝病、肿瘤等代谢疾病的药物研发提供了开拓性的思路,生物医学研究在一个
全新的层面上呈现出广阔的前景。
19日,该项目的课题组负责人在此间介绍了此项研究在药物研发等方面的意义。两
篇分别题为《代谢酶的乙酰化协调碳源的利用和代谢流》和《蛋白赖氨酸的乙酰化调控
》的文章,分别研究了乙酰化对蛋白质进行修饰以及对代谢通路进行调控的问题。
据介绍,人体好比一个“战场”,细胞就是士兵,维持着人体的基本功能;“赤手
空拳”的蛋白质被乙酰“武装”起来后,才可以变成为人体“作战”的士兵。嫁接上一
个乙酰基分子,修饰后的蛋白质就可以对细胞内的各类通路进行精确调节与控制。
乙酰调控蛋白质活性变化,使其中活跃、不活跃的部分相互平衡。而当平衡出现问
题,就会导致代谢疾病。据了解,人类疾病中与代谢相关的占80%,包括肝病、肿瘤等
。如果研制出一种药物能使乙酰“改邪归正”,对细胞进行正确调控,将成为一种全新 |
|
s******r 发帖数: 2876 | 20 这两片主要是用了新技术,
高通量的mass spec,看到了以前看不全的结果,
看来国内应该大力推广这样的研究。
美《科学》杂志罕见同时发表两篇中国专家文章 中新社
美国当地时间2月19日,最新出版的《科学》杂志,罕见地同时发表两篇复旦大学
生物医学研究院的最新成果。其中关于蛋白质向能量转化过程中“乙酰化修饰”的重要
发现,对肝病、肿瘤等代谢疾病的药物研发提供了开拓性的思路,生物医学研究在一个
全新的层面上呈现出广阔的前景。
19日,该项目的课题组负责人在此间介绍了此项研究在药物研发等方面的意义。两
篇分别题为《代谢酶的乙酰化协调碳源的利用和代谢流》和《蛋白赖氨酸的乙酰化调控
》的文章,分别研究了乙酰化对蛋白质进行修饰以及对代谢通路进行调控的问题。
据介绍,人体好比一个“战场”,细胞就是士兵,维持着人体的基本功能;“赤手
空拳”的蛋白质被乙酰“武装”起来后,才可以变成为人体“作战”的士兵。嫁接上一
个乙酰基分子,修饰后的蛋白质就可以对细胞内的各类通路进行精确调节与控制。
乙酰调控蛋白质活性变化,使其中活跃、不活跃的部分相互平衡。而当平衡出现问
题,就会导致代谢疾病。据了解,人类疾病中 |
|
s****2 发帖数: 4569 | 21 http://news.wenxuecity.com/messages/201002/news-gb2312-1021776.html
美《科学》杂志罕见同时发表两篇中国专家文章 中新社
美国当地时间2月19日,最新出版的《科学》杂志,罕见地同时发表两篇复旦大学
生物医学研究院的最新成果。其中关于蛋白质向能量转化过程中“乙酰化修饰”的重要
发现,对肝病、肿瘤等代谢疾病的药物研发提供了开拓性的思路,生物医学研究在一个
全新的层面上呈现出广阔的前景。
19日,该项目的课题组负责人在此间介绍了此项研究在药物研发等方面的意义。两
篇分别题为《代谢酶的乙酰化协调碳源的利用和代谢流》和《蛋白赖氨酸的乙酰化调控
》的文章,分别研究了乙酰化对蛋白质进行修饰以及对代谢通路进行调控的问题。
据介绍,人体好比一个“战场”,细胞就是士兵,维持着人体的基本功能;“赤手
空拳”的蛋白质被乙酰“武装”起来后,才可以变成为人体“作战”的士兵。嫁接上一
个乙酰基分子,修饰后的蛋白质就可以对细胞内的各类通路进行精确调节与控制。
乙酰调控蛋白质活性变化,使其中活跃、不活跃的部分相互平衡。而当平衡出现问
题,就会导致代谢疾病 |
|
m****g 发帖数: 530 | 22 马普生物化学研究所和丹麦哥本哈根大学的研究人员发现,人体蛋白质化学组分中的醋
酸根对人体细胞的变化有很大影
响,不管是细胞分裂,还是DNA遗传,或是细胞老化过程,醋酸根都起着分子开关的作
用。这一发现将对开发治疗癌症、
老年痴呆症和帕金森氏病药物有重要意义,该项研究成果已被刊登在最新一期的美国《
科学》杂志上。
研究人员发现,蛋白质分子与醋酸根的结合,可以控制蛋白质特定功能的开启或关
闭,而通过特定化学酶的乙酰化作
用,醋酸根可以与蛋白质分子分开,这一可逆过程对细胞的许多变化起着决定性的作用
。德国马普生物化学所的研究人员
利用他们自己开发的新技术,首次对蛋白质与醋酸根的结合,及整个蛋白质分子开关的
过程状态进行了检测,在约1800个
蛋白质中总共发现超过3600个分子开关节点,并发现蛋白质乙酰化的能力远远超过迄今
的想象。
研究人员过去认为,蛋白质的乙酰化对细胞核的基因调节只起到一定的作用,而最
新的研究结果显示:所有的细胞变
化过程都与此有关,例如细胞分裂、DNA信息的遗传或DNA的修补。没有乙酰化,细胞就
丧失功能。使蛋白质乙酰化的是
各种酶,例如Cdc28,这种酶对酵母细胞 |
|
c****s 发帖数: 5892 | 23 据温州市侨联消息,日前,应温州医学院附属第二医院邀请,加拿大McGill大学Goodman肿瘤研究中心杨香娇教授来温讲学。有感于温州医学院近年来的快速发展,杨香娇教授与医学院领导均表达了彼此加强交流,优势互补强强联合进一步合作的意愿,为进一步促进交流合作,学校特聘杨香娇教授为温州医学院客座教授。温州市侨联秘书长林春雷参加了上述活动。
杨香娇教授祖籍永嘉,1985年毕业于浙江大学化学系,1990年获得中科院上海生化研究所博士学位,并赴美国NIH从事博士后研究。1997开始一直在加拿大McGill大学Goodman肿瘤研究中心从事分子生物学方面的研究工作,在包括Nature在内的国际权威学术杂志上发表论文数十篇,取得了非凡的成果。特别是在蛋白乙酰化/去乙酰化、类泛素化以及诱导性多能干细胞(IPS cell)等方面的研究在国际上取得了一定的影响。
杨香娇教授此次来温,特在温州医学院附属第二医院举行了《从赖氨酸乙酰化到类泛素化修饰以及IPS细胞的研究过程》讲座。杨教授从染色质的核小体的结构入手,深入浅出的对蛋白质的乙酰化、类泛素化修饰这一国际前沿领域研究进展进行了详尽的介绍和解释。
杨教授的讲... 阅读全帖 |
|
h********y 发帖数: 627 | 24 有人就是好笑,自己不看,就乱评论。
美国当地时间2月19日,最新出版的《Science》杂志罕见地同时发表了两篇复旦大学生
物医学研究院的分子细胞生物学研究室的相关研究人员对乙酰化作用的新机制的最新研
究成果。据介绍,两篇题为《代谢酶的乙酰化协调碳源的利用和代谢》和《蛋白赖氨酸
的乙酰化调控》文章分别研究了乙酰化对蛋白质进行修饰以及对代谢通路进行调控的问
题,具有重要的学术意义,奠定了这项开拓性工作的地位。而《Science》杂志以如此
大的篇幅同时聚焦一个科研成果,充分显示了复旦大学相关研究的重要性和开拓性。 |
|
o*****y 发帖数: 699 | 25 11101433 彭君 中南大学 “补丁”马氏过程
及其相关问题的研究 A0110 青年科学基金项目 22
2012-1-1 2014-12-31
2 11101434 徐勇 中南大学 无限时滞随机泛
函微分方程及其在种群动力系统中的应用 A011003 青年科学基金项目
22 2012-1-1 2014-12-31
3 11101435 周岳 中南大学 三类常数项恒等
式的数学机械化研究 A0116 青年科学基金项目 22
2012-1-1 2014-12-31
4 11102239 李地元 中南大学 ... 阅读全帖 |
|
i***s 发帖数: 39120 | 26 人类的寿命预期能有多长?按照澳大利亚新南威尔士大学医学院院长彼得?史密斯的说法,随着人类在医药、生活方式和公共卫生事业等方面的进步,一位在今天出生的澳大利亚女孩活到100岁应该不成问题。与此同时,随着干细胞治疗等新技术以及用于帮助人体自身修复的新药物的研发,人类寿命预期将很有可能达到150岁。
新药将助人类多活几十年
哈佛大学教授、来自澳大利亚的老龄化研究专家大卫?辛克莱尔指出,人类衰老的进程是由一组基因所控制的,事实上“人体自身有非凡的自我修复能力”。辛克莱尔曾经证明,在红酒中发现的植物化合物白藜芦醇(resveratrol)可以激活一种叫做去乙酰化酶(sirtuins)的蛋白质,延长酵母、蠕虫、果蝇和非洲肥鼠(Steatomys pratensis)的寿命。
目前,科研人员正在一群罹患二型糖尿病等老年病患者中进行一种合成分子药物的临床试验,并已取得初步的效果。据了解,这种药物的性能比白藜芦醇的效力要强1000倍。这项研究的目的首先是要找到治疗老年病的药物,然后再延缓造成人类衰老的疾病的发生。
辛克莱尔说,尽管这种用来进行身体自我修复的新药尚且处于研发的初期,但是“我相信随着技术的进... 阅读全帖 |
|
a*****n 发帖数: 2835 | 27 很好呀
一个第一作者(在另一个上面是共同通讯作者)据说是一个讲师,直接生教授了,他09
年还有一篇science
很好的工作,idea方面可能管坤良起比较大的作用,管之前还有一篇关于乙酰化的
paper
估计接下来蛋白(组蛋白以外的蛋白)乙酰化和去乙酰化会有更多的研究 |
|
x****6 发帖数: 4339 | 28 表观遗传学 是现在生命科学里的一个热点,它和调控序列起类似的作用:精确控制编
码基因在时空上的出现。
但你要知道表观遗传修饰(甲基化、乙酰化),这些化学过程,都是由遗传来决定的。
换句话说,如果你把编码甲基化酶和乙酰化酶的基因敲出,那么表观遗传现象就不会发
生了。
表观 和 调控序列 的异同还不是很清楚,是目前研究的热点。 |
|
l***d 发帖数: 1828 | 29 【 以下文字转载自 Pharmaceutical 讨论区 】
发信人: lrpwd (lrpwd), 信区: Pharmaceutical
标 题: 屠呦呦的主要学术成就
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Oct 14 21:39:00 2015, 美东)
科学出版社
屠呦呦近日在接受《新京报》记者采访时,向记者推荐的两本书中有一本是《20世
纪中国知名科学家学术成就概览》(简称”概览“)。概览·医学卷·药学分册收录了
屠呦呦的传文。本文节选其传文中主要学术成就以飨读者。
目录
屠呦呦简介
一、青蒿素发现历程
二、青蒿素及青蒿素类药物的诞生
三、青蒿素发明的国际影响
屠呦呦主要论著
屠呦呦 简介
“呦呦鹿鸣,食野之芩” (出自《诗经》,“芩” 泛指“蒿类植物”),父亲就是用《
诗经》 这句诗文中的“呦呦” 二字,为自己的女儿取了个名,加上屠姓,她就是屠呦
呦。
屠呦呦(1930 ~ ),浙江宁波人。药学家。1955 年毕业于北京医学院(现北京大学医学
部) 药学系,1955 年分配到卫生部中医研究院( 现中国中医科学院) 中药研究所工作
至今。1959 ~196... 阅读全帖 |
|
l***d 发帖数: 1828 | 30 科学出版社
屠呦呦近日在接受《新京报》记者采访时,向记者推荐的两本书中有一本是《20世
纪中国知名科学家学术成就概览》(简称”概览“)。概览·医学卷·药学分册收录了
屠呦呦的传文。本文节选其传文中主要学术成就以飨读者。
目录
屠呦呦简介
一、青蒿素发现历程
二、青蒿素及青蒿素类药物的诞生
三、青蒿素发明的国际影响
屠呦呦主要论著
屠呦呦 简介
“呦呦鹿鸣,食野之芩” (出自《诗经》,“芩” 泛指“蒿类植物”),父亲就是用《
诗经》 这句诗文中的“呦呦” 二字,为自己的女儿取了个名,加上屠姓,她就是屠呦
呦。
屠呦呦(1930 ~ ),浙江宁波人。药学家。1955 年毕业于北京医学院(现北京大学医学
部) 药学系,1955 年分配到卫生部中医研究院( 现中国中医科学院) 中药研究所工作
至今。1959 ~1962 年参加卫生部全国第三期西医离职学习中医班。1973 ~1990 年任中
药研究所化学室主任,1979 年任中药研究所副研究员,1985 年任研究员。1997 年开
始任中药研究所青蒿素研究中心主任。1980 年被聘为硕士研究生导师,2001 年被聘为
博士研究生... 阅读全帖 |
|
a****y 发帖数: 1035 | 31 【 以下文字转载自 Pharmaceutical 讨论区 】
发信人: lrpwd (lrpwd), 信区: Pharmaceutical
标 题: 屠呦呦的主要学术成就
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Oct 14 21:39:00 2015, 美东)
科学出版社
屠呦呦近日在接受《新京报》记者采访时,向记者推荐的两本书中有一本是《20世
纪中国知名科学家学术成就概览》(简称”概览“)。概览·医学卷·药学分册收录了
屠呦呦的传文。本文节选其传文中主要学术成就以飨读者。
目录
屠呦呦简介
一、青蒿素发现历程
二、青蒿素及青蒿素类药物的诞生
三、青蒿素发明的国际影响
屠呦呦主要论著
屠呦呦 简介
“呦呦鹿鸣,食野之芩” (出自《诗经》,“芩” 泛指“蒿类植物”),父亲就是用《
诗经》 这句诗文中的“呦呦” 二字,为自己的女儿取了个名,加上屠姓,她就是屠呦
呦。
屠呦呦(1930 ~ ),浙江宁波人。药学家。1955 年毕业于北京医学院(现北京大学医学
部) 药学系,1955 年分配到卫生部中医研究院( 现中国中医科学院) 中药研究所工作
至今。1959 ~196... 阅读全帖 |
|
a****y 发帖数: 1035 | 32 【 以下文字转载自 Pharmaceutical 讨论区 】
发信人: lrpwd (lrpwd), 信区: Pharmaceutical
标 题: 屠呦呦的主要学术成就
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Oct 14 21:39:00 2015, 美东)
科学出版社
屠呦呦近日在接受《新京报》记者采访时,向记者推荐的两本书中有一本是《20世
纪中国知名科学家学术成就概览》(简称”概览“)。概览·医学卷·药学分册收录了
屠呦呦的传文。本文节选其传文中主要学术成就以飨读者。
目录
屠呦呦简介
一、青蒿素发现历程
二、青蒿素及青蒿素类药物的诞生
三、青蒿素发明的国际影响
屠呦呦主要论著
屠呦呦 简介
“呦呦鹿鸣,食野之芩” (出自《诗经》,“芩” 泛指“蒿类植物”),父亲就是用《
诗经》 这句诗文中的“呦呦” 二字,为自己的女儿取了个名,加上屠姓,她就是屠呦
呦。
屠呦呦(1930 ~ ),浙江宁波人。药学家。1955 年毕业于北京医学院(现北京大学医学
部) 药学系,1955 年分配到卫生部中医研究院( 现中国中医科学院) 中药研究所工作
至今。1959 ~196... 阅读全帖 |
|
r*******3 发帖数: 10886 | 33 冰毒的毒害和成瘾性远不及海洛因
冰毒是甲基苯丙胺,海洛因是乙酰化的吗啡
冰毒因为分子结构简单可以用化工原料直接合成,海洛因分子结构复杂,全合成成本高
,一般是鸦片里提出吗啡来再乙酰化。
应该没记错,你可以百度一下 |
|
a********e 发帖数: 3771 | 34 【 以下文字转载自 MedicalCareer 讨论区 】
发信人: freecamel (freecamel), 信区: MedicalCareer
标 题: 请教某种试剂的购买 急
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jan 21 01:42:39 2010, 美东)
国内有位朋友托我带
荧光标记乙酰化低密度脂蛋白(荧光标记乙酰化低密度脂蛋白,Dil-acLDL),是美国
加州Invitrogen公司的产品。
我在网站上看到必须得公司/机构才能购买,个人可以购买么?
这个除了网购之外,有local的店么,因为我可能等不到寄过来就回国了。
这个东西需要用冰块冷冻,密封,可以带上飞机么?不是什么限制品吧? |
|
s******y 发帖数: 28562 | 35 初步打算弄个15 Aa, 不知道乙酰化到底有多麻烦?因为我们需要这个乙酰化的
纯度非常高,必须用HPLC 和 Mass Spec看起来有95%以上的纯度,不知道一般的
小公司能不能做到那么好。如果你知道哪个公司可以推荐的话能告诉我一下么? 谢谢
! |
|
n******i 发帖数: 374 | 36 在乙酰化反应时,只要N-氨基是去保护的,侧链基团都是受到保护的,
当乙酰化完成后,再用TFA强酸裂解侧链保护基团,所以你无需担心这个问题 |
|
d****i 发帖数: 2346 | 37
都没出现过信号。
我曾经LPS刺激细胞后IP/WB p65的乙酰化K310的,做不出来乙酰化信号,但是total-
p65信号很强。以前也来版上求教过,搞不懂我在那里出了问题。 |
|
|
b**s 发帖数: 589 | 39 毋庸置疑,新型药用辅料的应用对于药物制剂性能的改良,生物利用度的提高及药物的缓
、控释等都有非常显著的作用,因此,药用辅料的更新换代越来越成为药剂工作者关注的
焦点。随着有关方面的研究增多,各种新型药用辅料不断问世,并在实践中得以广泛应用
。下面笔者介绍几种新型药用辅料的应用情况。
甲壳素(甲壳质) 它是一种含氨基多糖的天然高分子物质,广泛存在于海洋生物如
虾、蟹等甲壳中,资源丰富。甲壳素经化学修饰能生成多种衍生物,如其部分脱乙酰化可
得甲壳胺,也是重要的药用辅料。甲壳素完全脱乙酰化得到壳聚糖,同样是一种很有应用
价值的药用辅料。
片剂 甲壳胺既可作为粉未直接压片的辅料,且具有极优良的特性,又可用于药物控
、缓释给药系统。如常用辅料(甘露醇、乳糖或淀粉)中加入甲壳胺,可降低休止角而改
善混合粉未的流动性。将甲壳胺与乳糖、盐酸心得安混合直接压片,溶出实验结果表明,
属零级释放。有人采用气相色谱法研究了10名男性健康志愿者随机单剂量口服市售和以甲
壳胺为辅料的硝苯地平片后发现,后者与前者相比,其生物利用度为151. 8%,显著提高
了硝苯地平的生物利用度,明显改善了药物吸收。直接粉未压片所 |
|
f*******l 发帖数: 66 | 40 国内有位朋友托我带
荧光标记乙酰化低密度脂蛋白(荧光标记乙酰化低密度脂蛋白,Dil-acLDL),是美国
加州Invitrogen公司的产品。
我在网站上看到必须得公司/机构才能购买,个人可以购买么?
这个除了网购之外,有local的店么,因为我可能等不到寄过来就回国了。
这个东西需要用冰块冷冻,密封,可以带上飞机么?不是什么限制品吧? |
|
n***g 发帖数: 5027 | 41 这个总结不错:
申请精华帖:我了解的Epigenetics牛人一览
我是从C.D.Allis,Danny Reinberg,Tony Kouzarides,Yi Zhang, Yang Shi这几个
人发的文章看起的,这几个人基本上就是目前做表观遗传最牛的一批人了。然后你看看
他们文章citation里面出现频率比较高的人名,那往往就是大牛了,然后一点一点扩展
。个人感觉看CNS及其子刊还是王道。另外推荐一个很好的网站,http://www.epidna.com/ 可以查这个领域最top的lab,也可以查该领域最新的论文。
# ^2 P/ }, _0 h" U8 m) P6 b
; l* o$ y- |- V5 g0 I0 T然后在申请选校的过程中,我也逐渐了解到一些
epigenetics领域的big names和rising stars。所以我感觉看各个牛校的faculty也是
了解一个领域的好学校好lab的方法。我的做法是每看一个学校,就把相关领域做
epigenetics的faculty留下来,然后以后看CNS时或者Journal club上看到熟悉的名字
,就重点关注下。$ ... 阅读全帖 |
|
C**8 发帖数: 536 | 42 原文:http://discover.news.163.com/11/0423/10/72AM4BK3000125LI.html
卫生部公布敌敌畏等食品非法添加物名单
2011-04-23 10:06:48 来源: 新华网(广州) 有3474人参与 手机看新闻 转发到微博(
380)
核心提示:卫生部日前汇总发布了《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品
添加剂名
单》。名单中包括苏丹红、三聚氰胺、敌敌畏、罂粟壳、镇定剂等添加剂。
中新网4月22日电 为进一步打击在食品生产、流通、餐饮服务中违法添加非食用物质和
滥用食品添
加剂的行为,保障消费者健康,全国打击违法添加非食用物质和滥用食品添加剂专项整
治领导小组自
2008年以来陆续发布了五批《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂
名单》。为
方便查询方便,卫生部日前将五批名单汇总发布。
表一 食品中可能违法添加的非食用物质名单
序号 名称 可能添加的食品品种 检测方法
1 吊白块 腐竹、粉丝、面粉、竹笋 GB/T 21126-2007 小麦粉与大米粉及其
制品中甲醛次硫酸氢钠含量... 阅读全帖 |
|
o*****l 发帖数: 203 | 43 细胞自噬是机体一种重要的防御和保护机制。但是这种自噬“信号”如何传递给细胞从
而使其“执行”自噬过程,则一直是科学界的难题。近期,我校生命科学学院林圣彩教
授课题组成功找到高等动物细胞在生长因子缺失条件下,启动自噬的部分“密码”,从
而在细胞自噬机制研究方面取得重大突破。
4月27日,最新一期的美国《科学》杂志以研究文章的形式刊发了这项研究成果,
并配发专门评述。这也是近三年来,我校生命科学学院第二篇发表在这一世界顶级学术
刊物上的论文。2009年6月,该院韩家淮教授的一篇有关细胞选择死亡方式机制的研究
文章曾“登上”该杂志。
所谓自噬,是指细胞消化自身蛋白质或细胞内的结构(细胞器)的一种自食现象。
通过这种现象,细胞可以降解、消除和消化受损、变性、衰老和失去功能的细胞器和变
性蛋白质等生物大分子,为细胞的生存和修复提供必须的能量。
科学家们认为,自噬与细胞凋亡、细胞衰老一样,是一种十分重要的生物学现象。
有关实验表明,包括肥胖症、糖尿病、神经退行性疾病、免疫失调及癌症在内的人类许
多重大疾病的发生都与该过程的异常有关。为此,自噬也是当前生命科学中最热门的研
究领域之一。
据林圣彩介绍... 阅读全帖 |
|
g*********d 发帖数: 233 | 44 封面故事:《自然》杂志年度新闻人物
今年的“Nature年度新闻人物”是Jane Lubchenco。作为美国国家海洋和大气管理局局
长,她深入
参与了今年最大新闻事件之一——英国石油公司“深水地平线”钻井平台在墨西哥湾的
石油泄漏事件。
远古西伯利亚“人族”个体的基因组被测序
从解剖上来讲,现代人在距今20万年前之后的某个时间点上还在非洲,在此之后相当长
时间才达到欧
亚大陆。与此同时,包括“尼安德特人”(穴居人)在内的古“人族”至少在23万年前
就已在欧亚大陆
了,只是在距今约3万年前才从化石记录中消失。现在,来自南西伯利亚Denisova Cave
中的一个女
性古“人族”个体的基因组已根据从一个手指骨中提取的DNA被测序。这个“Denisovan
”个体所属的
群体与“尼安德特人”有一个共同的起源,而且尽管它并不涉及假设中的从“尼安德特
人”向欧亚人的基
因流动,但它对今天美拉尼西亚人的基因组的贡献达4%~6%。另外,一颗牙齿的线粒体
基因组与手指
骨的线粒体基因组非常像,这颗牙齿的形态表明,这些“人族”个体在演化上与“尼安
德特人”和现代人
都是截然不同的。
与冲动行为有关的... 阅读全帖 |
|
发帖数: 1 | 45 转帖:今天一早打开微信发现“转基因自闭症猴”研究报道刷屏了,两大知名科普微信
公众号“赛先生”和“知识分子”都在第一时间推送了相关报道,同时国内外各大媒体
做了较为详尽的报道。这篇研究论文于今日凌晨在Nature在线发表,标题为《Autism-
like behaviours and germline transmission in transgenic monkeys
overexpressing MeCP2》,同时Nature配发了评论文章《Monkeys genetically
modified to show autism symptoms》。
这项研究是由中科院上海神经科学研究所研究院仇子龙课题组和孙强研究组合作
完成的。这项研究是全球首例利用非人类灵长类动物建立的自闭症研究模型,为后续深
入研究自闭症致病机理和探索治疗自闭症的研究方法奠定了基础。在这里小编就不再重
复今日媒体报道的内容了,今天写这篇文章主要是综合了国外媒体的报道,谈谈这项工
作受到某些人质疑的内容或者说是不足吧。小编首先声明不是来黑这项标志性的具有重
要意义的文章的,本人只是从另一个角度聊聊国内媒... 阅读全帖 |
|
x*****8 发帖数: 10683 | 46 多谢您的夸奖!
真想找一个小留做老婆,卵细胞年轻所以遗传基因好并且表观遗传(碱基甲基化,组蛋
白甲基化和乙酰化)也好。 |
|
j****u 发帖数: 1413 | 47 请见:http://www.ustcif.org/default.php/content/2796/
2015年12月19日晚,中国科大生命学院拜会新创基金会并商定:2016年1月26-31日将在
上海推出“生命医学健康行业精英冬令营”。届时将邀请10-20位生命科学、医学与健
康行业领袖开设集中课程,为生院本科生讲述行业前景,并树立职业视野与雄心。
说明:以上课程向上海等地校友开放。
缘起:中国科大生命学院几十年来吸引了一批中国最卓越生源,但部分学生进校后并不
了解学术界之外的工业界的广阔机遇。2014年,新创基金会推出《生命学院校友去哪儿
?中国科大生命科学学院校友职业发展与分布研究》,量化生命科学学院毕业生的职业
发展状况,并期望启发学生职业规划。
为进一步解决生命科学学生的职业困惑,生命学院与新创基金会讨论通过“国内游学计
划,1)邀请行业领袖到中国科大本部开设Distinguished Industry Lecture Series。
2)更进一步:能否在京沪分别推出夏令营与冬令营,就地要求工业界领袖为中国科大
学生开设一周左右的短训课程,辅以参观著名创业公司与外企。
尽管时... 阅读全帖 |
|
b**********8 发帖数: 349 | 48 小弟PhD第二年,一直在郁闷中度过,几度想退学,但是有没有后路,只得煎熬。
废话少说,言规正传吧,不知道大家有没有经历过这种情况。我们的project最初发现
一个基因(暂且称之为A)在肝癌组织和细胞株中普遍高表达,用shRNA方法敲出这个基
因后发现另一个与生长增殖有关的基因(称为B)表达水平也显著下调,在多个肝癌细
胞株里都能重复到这一结果,于是继续深入做了很多功能方面的研究。这一工作主要由
我前面的师姐完成,已经准备毕业答辩,文章也在修稿中,差不多快接受了。我来了后
老板让我继续研究A调节B的机制。后来因实验需要从Dharmacon公司买了针对A基因的
siRNA,是那种smartpool,就是四合一的那种,回来转染细胞后发现对A基因的沉默效率
几乎百分之百,但是不论怎样变换实验条件,就是观察不到原来对基因B的抑制效果,
从转染后第2天,一直到12天,中间还做过double transfection,始终没有结果。后来
实在没办法,把以前shRNA的序列发给Dharmacon公司,让他们合成siRNA,然后又能重复
到以前的现象。
我现在怀疑前面的A调节B的发现很可能是shRNA... 阅读全帖 |
|
b**********8 发帖数: 349 | 49 多谢楼上各位的建议,rescue的实验我们确实还没做过。今天又想向大家反应点新情况
,如下:
当初shRNA敲除A的时候,B基因在mRNA和protein水平都有显著下调。如前文所述,包括
B基因启动子的报告基因实验,组蛋白乙酰化和甲基化修饰,DNA甲基化等都是阴性结果
。后来实在没办法了,和别的组里的人讨论了下,觉得是否有可能A通过维持B基因转录
产物的稳定性,于是我又做了这个实验,转染A基因的siRNA后,等待48小时,再向
medium中加入Actinomycin D,每隔4小时收集细胞提取RNA,分别收集0,4,8,12小时,每
次3个wells,然后做realtime RT-PCR,结果在两个细胞株中发现siRNA组细胞中B基因
mRNA降解的比siCONTROL更快,但是在另外两个细胞株里没有观察到这种分别。现在又
出现几个问题:
1)观察到分别得那两个细胞株里,48小时候(即加药的第0小时),A基因的knockdown
效率只有50%。而在另外两个没有分别的细胞株里,48小时的沉默效率却有80%,老板觉
得即使mRNA降解实验阳性,很有可能是artifact,认为我的数据... 阅读全帖 |
|
f******g 发帖数: 1003 | 50 以下观点纯属猜想
我看到的很多文章,包括很好的文章,象CNS级别的文章,很多都是描述一个现象,展
示某个基因有某些功能,机制上主要是向很经典的pathway靠,其实这些机制不一定是
最主要的机制,但是为了快速发表发文章,就往最经典的通路上靠了。
这样做的结果就是,与很经典的基因,例如p53,有相互作用的基因有成百个,当然了
,在不同细胞中,相互作用的基因可能是不一样的。
我总是想,细胞基因相互作用中有没有可能发现很基本的定律,象物理中的牛顿三定律
,数学中的很多公理定理。
比如影响一个基因的表达的因素有很多,目前我所知道的有:转录因子调控,microRNA
调控,甲基化调节,乙酰化调节,磷酸化调节,泛素化调节。
我们有没有可能应用数学上的知识,用一个方程来描述这个基因的表达,各个参数可以
用不同条件下的实际测量值来解决。
to be continued |
|