C****1
发帖数: 21 | 1 用evans blue做小鼠brain blood barrier实验，tail vein注射完evans blue以后1小
时，
左心室灌注PBS，然后取脑组织，匀浆后测定。
试了几次都没有结果，有几个问题请教：
1. 取的脑组织直接放入50% TCA溶液进行匀浆，然后离心，取上清测定。
脑组织先在PBS里面匀浆，然后离心； 取上清液500ul，加入50%TCA 500ul，
incubate at 4
度 O/N，次日离心，取上清液测定。
哪一种方法好？
2. 测定的时候，我们试了波长610，615，620，感觉结果都很低。
3. 改用fluorencens测定，用ethanol稀释3倍，比较原液测定，浓度反倒高了。标准曲
线是用
evans blue + TCA +ethanol配置后进行等比例稀释做的吗？
请做过的各位版友帮助，谢谢
再次祝福新年快乐 |
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b*s
发帖数: 82482 | 2 你要吃鸡蛋，现在打碎了壳吃，跟昨天打碎了壳的鸡蛋今天吃，不一样的。
你那个blender匀浆了以后，氧化的时间长，损失多；在嘴里匀浆以后，氧化时间短，
剩下的营养多……
20%。 |
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f*********r
发帖数: 1233 | 3 我不直接回答你的问题，只是提供一个貌似更好的、而且可行的方案。
与其用trizol，加什么氯仿、异丙醇，最后是乙醇这么多步骤，不如用RNAzol一步完成
。pipette的时候，不用担心多吸会有下层液体的污染。因为rnazol根本没有液体分层。
不管用那种试剂，你这种从活体组织提取rna的情况，根本用不着100mg。尤其象肝脏。
有两三粒芝麻大小的组织就完全可以了。当然，还是用1ml试剂比较稳妥。
另外，在加异丙醇（或者别的醇）沉淀rna的时候，不一定按照说明那样离心。可以采
取小一些转速。这样出来的pellet比较松。用酒精洗就会洗得干净。最后溶解的时候也
更容易。不用担心低转速会导致低收获量。你有足够的样品，不存在收获量低的问题。
只要动作快，不用担心常温、低温。比如用rnazol，从匀浆化到形成rna沉淀pellet，
不超过20分钟。从头至尾都有保护：试剂可以保护溶解状态rna不受降解，沉淀状态的
rna也不容易降解。
为了提高匀浆化效率，可采用sonication。10秒钟可以完全打散任何组织。 |
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s****a
发帖数: 454 | 4 真的是太感谢了.
组织匀浆的时候加了50U/ml的RNAsin,还用不用加heparin了?用的一般浓度多少?
我还没有注意到这个gradient有W/V,W/W的区别.我用的是W/V,那我就是还需要加两个
gradient?我的是10ml的gradient.15-50W/V的话,那就是差不多1.25ml一个5%的梯度.我
的是机器上的梯度.不过谢谢你的手动梯度的方法.
取样的话,我们这里没有realtime的UV reader.所以不是很准.我现在想, 要不要改成
250ul一个fraction.
上样之前我没有测OD,只是去了30mg的组织.那我等下次预实验的时候测一下.
还有,就是组织匀浆可以冻存吗,还是每次要新鲜配置?
收集的fraction我想用RNeasy Plus minikit来提RNA,正在看手册,不知道这么多的蔗糖
会不会太绸 |
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b*******e
发帖数: 6920 | 5 凉皮儿大部分人都吃过吧。简单说一下做法，然后提问题
1，把面和成面团
2，在水里洗面团，直到剩下面筋
3，洗出的淀粉水沉淀过夜
4，去除上清液
5，沉淀物加水稀释成匀浆
6，匀浆摊在金属盘上水浴加热制成薄皮
7，切条加佐料凉拌既成
下面问题来了
根据步骤所述，使做成的凉皮口感筋道的关键是什么，注意不要提议使用添加剂。
（如果做不好，凉皮就会粘、易断） |
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b*******e
发帖数: 6920 | 6 凉皮儿大部分人都吃过吧。简单说一下做法，然后提问题
1，把面和成面团
2，在水里洗面团，直到剩下面筋
3，洗出的淀粉水沉淀过夜
4，去除上清液
5，沉淀物加水稀释成匀浆
6，匀浆摊在金属盘上水浴加热制成薄皮
7，切条加佐料凉拌既成
下面问题来了
根据步骤所述，使做成的凉皮口感筋道的关键是什么，注意不要提议使用添加剂。
（如果做不好，凉皮就会粘、易断） |
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t*****o
发帖数: 55 | 7 在从脂肪细胞中提取总RNA,用的是TRIzol提取的方法,我在有些论坛中看到有人说,因为脂
肪细胞中所含的脂质比较多,所以在匀浆组织时可适当增加脂肪组织的量,但是不知道具体
的比例是多少,也就是说,大概1ml中组织中放入多少脂肪组织进行匀浆比较合适。
Appreciate in advance |
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i***s
发帖数: 39120 | 8 最近美国产妇开始流行吃自己的胎盘了。其实吃胎盘并不稀奇，在中国有悠久的历史，健康孕妇的胎盘经过加工本来就是一味中药，叫做紫河车。
紫河车紫河车
按照中医药典规范，紫河车的功用主治为温肾补精、益气养血。治虚损，赢瘦，劳热骨蒸，咳喘，咯血，盗汗，遗精，阳萎，妇女血气不足，不孕或乳少。包含紫河车成分的中药有“河车再造丸”“先天再造丸”“补天大造丸”等。
现在这世道一提中医难免被拍砖，所以中医的理论我们按下不表，还是从现代医学角度来看看人的胎盘究竟有什么特别。
胎盘中对人体有益的物质
胎盘的成分非常复杂，主要由蛋白质构成，在这里需要特别提出的成分主要可以概括为以下四类：
1. 人的胎盘中含有干扰素。干扰素是动物细胞在受到某些病毒感染后分泌的具有抗病毒功能的糖蛋白，能抑制其对健康细胞的作用。另外还含有能抑制流感病毒的巨球蛋白，称β-抑制因子。
2. 胎盘中含有多种激素，包括促性腺激素A和B，催乳素，促甲状腺激素，催产素样物质和多种甾体激素。
3. 人胎盘中还含有多种应用价值的酶，如溶菌酶、激肽酶、组胺酶、催产素酶等。
4. 人胎盘的酸水解液经原子吸收分光计测定，含有铁、钻、锰、铜、锌、钙、镁等人... 阅读全帖 |
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s*******w
发帖数: 2257 | 9 杨绛先生104岁-岁月难掩她的风华
来源：原载《文史参考》
“我们曾如此渴望命运的波澜，到最后才发现：人生最曼妙的风景，竟是内心的淡定与
从容。”
7月17日杨绛先生104岁的生日，记得去年的今天，也在微信里祝她生日快乐！时间真是
如流水般地飞逝，杨绛先生像一种见证，一种人性的力量与光辉的见证，百年的岁月风
尘难掩她的风华。
安之若素，淡然处之，她历尽沧桑后的温润平和是这个喧嚣浮躁的社会里的一汪清泉。
让我们对这位才华横溢、热爱生活的老人说声：生日快乐！
杨绛真乃百年罕见之奇女子
作者:黄薇
多年前，钱锺书便给了她一个最高的评价：“最贤的妻，最才的女”。现在，她是这个
喧嚣躁动的时代一个温润的慰藉，让人看到，“活着真有希望，可以那么好”。
北京三里河，一个属于国务院的宿舍小区，全是三层楼的老房子，几百户中惟一一家没
有封闭阳台、也没有室内装修的寓所“为了坐在屋里能够看到一片蓝天”，便是杨绛的
栖身之处。
自1977年搬进来，她就再没离开过。曾经的“我们仨”，只剩下她独自一人在整理钱锺
书的学术遗物，笔耕不辍。在她身上，人们会忘掉时间的残酷：103年无情而漫长，而... 阅读全帖 |
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f*********t
发帖数: 11092 | 10 “全羊席”菜色很多，先捡重点讲几个特色菜肴，读者即可一斑而见全身。
发菜山：将上等的熟绵羯羊瘦肉切成厚约4分的大片，用食盐、味精、花椒水，胡
椒粉抓煨好，发菜拣净泡软。摆盘时，把羊肉再切成一块块片状尖顶山石模样，把发菜
铺入盘底，每一层片肉夹一撮发菜，发菜上又扦入尖头肉块，要让发菜大部分露有外面
，尖头肉片象怪石一样悬插在发菜上。最后在发菜和羊肉片构成的发菜山上插现两根细
长的香菜，山边饰以红萝卜雕花。这道菜浇上清场可以热吃；浇三花油可凉吃。吃起来
肉烂、味香，清爽可口。
扣麒麟顶：扣麒麟顶为全羊席之首菜。将羊头烫毛刮净，下锅煮熟，捞出取骨取舌
，使羊脸和下颠肉保持完整，不变形。将羊脸肉用酱油上色入味，炸成金黄色，放入碗
内，将羊眼(挖去黑眼珠)放在眼窝内，将羊舌片按原形放在羊脸肉上面，再将下颏肉按
原形压在羊嘴周围，仍是完整的羊头形状。然后加入食盐、酱油、花椒水、葱段、蒜片
、姜末、八角一颗，上笼用旺火蒸烂取出，拣去调料，将羊头完整地翻扣在凹盘内，使
羊脸压在下颏上，羊嘴衔一根香菜，梢部露在嘴外，盘的四周放一些发菜，萝个刻的红
菊花和黄菊花。这道菜，色泽金黄，五彩缤纷，头形完整... 阅读全帖 |
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s******s
发帖数: 13035 | 11 你太土。
国内那个奶才叫一个香，美国这些都不行，也就是local farm的有机奶稍微有点奶味，
其他的都像水。
牛奶好喝太容易了，那一步叫匀浆，把制备低脂奶脱下来的脂肪打回去，再卖力点
的再加点奶粉，调均匀了保证醇厚香浓，就是你最爱的那种，花钱就有。 |
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v**e
发帖数: 8422 | 12 有人做的抗流感研究
大蒜油抗流感病毒作用及机制研究
山东大学 | 郑倩倩
目的 流感是一种由流感病毒感染引起的急性呼吸道传染病,具有发病快、传染性强等特
点,曾多次造成世界范围的大流行,严重影响人们的日常生活和身体健康。对于流感的防
治,目前还没有安全性和有效性都较理想的方法。大蒜油有防治冠心病、酒精性脂肪肝
、杀菌、抗癌、杀虫等多种功效,其抗巨细胞病毒、肠道病毒、鼠肝炎病毒、生殖器疱
疹的研究已经有了初步进展,但大蒜油抗流感病毒作用的研究还未见报导。本研究通过
体外培养的细胞和动物模型,对大蒜油的抗流感病毒作用进行了研究,并对其机制进行了
初步的探讨。为大蒜油用于流感的防治提供了科学依据。 方法 1、流感病毒的增殖：
将0.2mL人季节性H1N1流感病毒(以下简称流感病毒)接种于10日龄的鸡胚尿囊腔内,于34
℃孵育箱里孵育44-48h,每日照检,收获前放于4℃冰箱6h。无菌吸取尿囊液,接种于下一
代鸡胚,方法同上,直至尿囊液中流感病毒的血凝滴度>1：128。然后将符合条件的尿囊
液混匀,-80℃保存备用。 2、大蒜油抗流感病毒作用的体外研究：常规培养MDCK细胞,
采用细胞病变法(... 阅读全帖 |
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q****i
发帖数: 6923 | 13 you can search with keyword as "零失败做豆腐花"
http://web.wenxuecity.com/BBSView.php?SubID=cooking&MsgID=648254
the first one in wenxuecity is good
简单易做，
我是豆腐花的死忠，每次去喝早茶不吃到豆腐花就不离开，等多久都等，结果就有开发做豆腐花的钻研精神了。
拿出做实验的劲头，我试了无数牌子的豆浆，老中的，老美的，新鲜的，合装的，大牌的，无名的，结果就只有唯一的一个牌子100%成功（100%哦，看下面材料），其他的就时成时不成的。如果不幸你所住的地区没这牌子，那你就只好用传统的方法了（一杯的水，8杯的黄豆的做法）。
材料：a.豆浆：大田牌淡豆浆一瓶（1/2 gal，约8杯）；
b. 浆水：凉开水 1杯 ；熟石膏粉 2 tsp(茶匙)；玉米粉 2 Tbsp（汤匙）；
用具：煮豆浆的深锅；冲浆用的大碗（要深的，忌用浅的）
步骤：1.在碗中放入a，搅拌均匀，不要有沉淀（这关系到能否做成功的关键！！）
2.煮滚豆浆，快速冲入上述的浆水中（记住冲前再晃匀浆水，不 |
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a****8
发帖数: 2771 | 14 http://www.cnpatentinfo.com/ipc/zyys_B09C_detail_200710049528.html
重金属污染土壤的双孢蘑菇修复技术
重金属污染土壤的双孢蘑菇修复技术
申请专利号 200710049528
专利申请日 2007-07-17
公开（公告）号 101088641
公开（公告）日 2007-12-19
类别 B09C 1/10、C02F 1/62
申请（专利权）人 四川大学
地址 四川省成都市一环路南一段24号
发明（设计）人 徐恒、佘红英、宋鹏、辜文博、季金虎、冯军
摘要
本发明属于资源环境技术领域中的一种重金属污染土壤的双孢蘑菇修复技术，是在污染
土壤上种植双孢蘑菇，当菌体成熟后，采收菌体并经搅碎、匀浆、腐烂、过滤得到富含
重金属离子的菇浆液，再采用化学电泳或螯合沉淀方法将菇浆液中的重金属离子去除。
本发明以双孢蘑菇为主要生物富集器，充分利用其生长周期短，田间栽培技术成熟，富
集重金属离子能力强等特点，结合化学电泳或螯合沉淀等简单成熟的化学方法电析出或
沉淀出重金属离子，从环 |
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g*****y
发帖数: 6325 | 15 我特别爱吃鸡蛋饼，但是面食太容易发胖，如是想出了这个方子。 最主要的原料是花
菜(cauliflower), 混合其他任何蔬菜，
这里是混的胡萝卜。 我也用过西葫芦。放到搅拌器里加上鸡蛋液 (我用的是egg
beater, 不含任何胆固醇). 匀浆。 然后倒
出来， 加上1/2 cup 面粉，葱花，和盐。 混匀。 然后就摊饼了!! 不过因为面粉很少
， 比较容易碎， 我会用2个铲子来翻
面。 用paper towl出去多余的油。 开吃!! 口感比较软， 不过非常好吃！！ |
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l*******g
发帖数: 27064 | 16 不知道真假，不会又是类似微波炉加热食物残留微波这样的民科文章吧？
有一种蔬菜我们常吃,但科学证实它有强致癌性
楼主 ：hehuade1 发表于: 14-07-14 20:20
美味的蕨菜是餐桌上的常见菜，而且由于其野生在林间、山野、松林内，因此受到人们
欢迎。
但有关蕨菜、蕨根粉致癌的说法，曾在网上风传。 也有研究指出，蕨菜有强致癌性。
2010年，著名的民间科学组织科学松鼠会在互联网上发布了一篇有关纯天然野菜致癌的
文章，食品工程学博士云无心在其所写的文章中指出，蕨菜并非传说中的〝安全〞、〝
无污染〞和有〝抗癌〞的作用，而是有着明确的致癌能力。
另外，网上有文章指，莱百食品安全实验室就此课题开展了实验，经过一系列实验，得
出结论：蕨菜确实致癌，而且有强致癌性！
从事该项研究的贵阳医学院药理学教研室的黄能慧等数位专家在《蕨菜致癌作用的实验
研究》中指出，用新鲜甜蕨和苦蕨、处理甜蕨和苦蕨干粉饲养大鼠7个月后，4组动物中
分别有6只（33.5％）、3只（18.75％）、2只（12.5％）、1只（6.25％）动物发生肠
腺瘤；同时新鲜甜蕨、处理苦蕨两组，各有1只动物发生乳腺瘤。另外，用上述四... 阅读全帖 |
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p*******m
发帖数: 3059 | 17 快要加辅食了。目前只有high chair，是不是还要买特别的餐具，小勺子，小碗什么的
？还有那个做蔬菜水果泥的小匀浆器，哪个牌子好呢？多谢 |
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Z*********1
发帖数: 627 | 18 我, 亲手杀过猪, 在美国. 200磅的生猪, 用铁栏杆慢慢地赶到角落, 卡住, 拿电棒叉
头, 电倒, 尖刀捅脖子, 放血, 破肚, 掏心, 分离心房和心室, 匀浆. 所有的步骤一气
呵成,5分钟完成.
第一次师兄带着, 后面自个就成师兄, 带着小师妹们, 杀猪的任务责无旁贷地落到了我
头上,就只能自己动手了.
每次实验室杀猪可欢乐了. 跟过节一样.
当年我们主要研究肌肉里的钙通道, 研究对象包括心肌, 骨骼肌和大脑平滑肌. 话说我
师兄最大的理想就是以后当了老板后就以龙虾的大脑为研究对象,每天龙虾除脑袋以外
的部分带回家. |
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w*****m
发帖数: 414 | 19 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: mayo (千万别笑), 信区: Biology
标 题: 生物博士的死期
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Dec 23 20:52:54 2012, 美东)
一生物博士意外去世变为厉鬼，法师收服他后为其普渡超生，问他：年轻人，超生后要
干嘛呀?答：超声?超声后离心取上清上镍柱!
法师摇摇头说：“年轻人，我看你资质不错，想不想我培养你啊?”答：“培养?你一没
血清二没1640，拿什么培养我啊?”
法师大怒说：“莫非你一心要去地狱?也罢，十八层地狱个个酷热难耐，你随便挑一个
吧。”答：“哪个地狱是95-60-72度循环的?”
法师说：“你就不怕我把你打成孤魂野鬼吗”?“野鬼是野生型吗”?生物博士问道。
法师和生物学博士说：“听说那唐三藏将前往西天取经，不如你就前往西方的部落投胎
迎接唐三藏吧”。生物学博士说：“恐怕我看到三藏法师我也识别不出，因为我
Western Blot做得不好”
法师问生物学博士：“你是怎么死的”?生物学博士说：“游泳的时候，被闪电击中触
电死的。。”。法师问：“请问姑娘芳名是否为凝娇?”
法师：来... 阅读全帖 |
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b*******0
发帖数: 1695 | 20 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: mayo (千万别笑), 信区: Biology
标 题: 生物博士的死期
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Dec 23 20:52:54 2012, 美东)
一生物博士意外去世变为厉鬼，法师收服他后为其普渡超生，问他：年轻人，超生后要
干嘛呀?答：超声?超声后离心取上清上镍柱!
法师摇摇头说：“年轻人，我看你资质不错，想不想我培养你啊?”答：“培养?你一没
血清二没1640，拿什么培养我啊?”
法师大怒说：“莫非你一心要去地狱?也罢，十八层地狱个个酷热难耐，你随便挑一个
吧。”答：“哪个地狱是95-60-72度循环的?”
法师说：“你就不怕我把你打成孤魂野鬼吗”?“野鬼是野生型吗”?生物博士问道。
法师和生物学博士说：“听说那唐三藏将前往西天取经，不如你就前往西方的部落投胎
迎接唐三藏吧”。生物学博士说：“恐怕我看到三藏法师我也识别不出，因为我
Western Blot做得不好”
法师问生物学博士：“你是怎么死的”?生物学博士说：“游泳的时候，被闪电击中触
电死的。。”。法师问：“请问姑娘芳名是否为凝娇?”
法师：来... 阅读全帖 |
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b*s
发帖数: 82482 | 21 这个研究好像没有什么重大意义，funding很难申请，而且谁会把脑子给你打匀浆玩？ |
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b*s
发帖数: 82482 | 22 看见有人把什么水果都用食品加工机打成匀浆，很无语……
这个握手一下。我不吃很多东西，喜欢的也就是一些粗苯的东西。煎饼果子，凉皮，不
怎么加工的水果蔬菜都很好。 |
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b*s
发帖数: 82482 | 23 咀嚼能够打成匀浆？扯吧你就……
这人说的oxidation的问题我上面解释过了，是个伪命题
几乎没有营养学家会反对细嚼慢咽吧，但这些在blender时被氧化的成分在细嚼慢咽的
过程中都会被氧化。有本事让他做个实验，用同样的测量方式，咀嚼必然kill up to
90 percent of the nutrients。人还能不咀嚼了？
and
with
juicing
He
percent |
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b*s
发帖数: 82482 | 24 能够生吃当然最好啊，水果一般都不cook的。你这平白增加一个processing工序，肯定
有损失啊
而且，匀浆化是一个很野蛮的吃法。就像是好好的filet mignon不吃，非要切成小块做
香肠，
食物总是要cook的嘛，那你说蒸来煮去会损失多少营养？ |
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b*s
发帖数: 82482 | 25 嗯，这个说法靠谱：
Fresh fruit, followed closely by dried fruit, with sweetened dried fruit a
distant third, and juice in fourth place.
Blender以后的估计还在juice下。细胞结构都没了，整个就是匀浆…… |
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d**b
发帖数: 1286 | 26 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: mayo (千万别笑), 信区: Biology
标 题: 生物博士的死期
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Dec 23 20:52:54 2012, 美东)
一生物博士意外去世变为厉鬼，法师收服他后为其普渡超生，问他：年轻人，超生后要
干嘛呀?答：超声?超声后离心取上清上镍柱!
法师摇摇头说：“年轻人，我看你资质不错，想不想我培养你啊?”答：“培养?你一没
血清二没1640，拿什么培养我啊?”
法师大怒说：“莫非你一心要去地狱?也罢，十八层地狱个个酷热难耐，你随便挑一个
吧。”答：“哪个地狱是95-60-72度循环的?”
法师说：“你就不怕我把你打成孤魂野鬼吗”?“野鬼是野生型吗”?生物博士问道。
法师和生物学博士说：“听说那唐三藏将前往西天取经，不如你就前往西方的部落投胎
迎接唐三藏吧”。生物学博士说：“恐怕我看到三藏法师我也识别不出，因为我
Western Blot做得不好”
法师问生物学博士：“你是怎么死的”?生物学博士说：“游泳的时候，被闪电击中触
电死的。。”。法师问：“请问姑娘芳名是否为凝娇?”
法师：来... 阅读全帖 |
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m*******r
发帖数: 13263 | 27 发信人: mayo (千万别笑), 信区: Biology
标 题: 生物博士的死期---zt
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Dec 23 20:52:54 2012, 美东)
一生物博士意外去世变为厉鬼，法师收服他后为其普渡超生，问他：年轻人，超生后要
干嘛呀?答：超声?超声后离心取上清上镍柱!
法师摇摇头说：“年轻人，我看你资质不错，想不想我培养你啊?”答：“培养?你一没
血清二没1640，拿什么培养我啊?”
法师大怒说：“莫非你一心要去地狱?也罢，十八层地狱个个酷热难耐，你随便挑一个
吧。”答：“哪个地狱是95-60-72度循环的?”
法师说：“你就不怕我把你打成孤魂野鬼吗”?“野鬼是野生型吗”?生物博士问道。
法师和生物学博士说：“听说那唐三藏将前往西天取经，不如你就前往西方的部落投胎
迎接唐三藏吧”。生物学博士说：“恐怕我看到三藏法师我也识别不出，因为我
Western Blot做得不好”
法师问生物学博士：“你是怎么死的”?生物学博士说：“游泳的时候，被闪电击中触
电死的。。”。法师问：“请问姑娘芳名是否为凝娇?”
法师：来呀!把这个孽鬼绑上柱子!
生物博士：上... 阅读全帖 |
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P*A
发帖数: 7996 | 28 脂奶分层是自发过程，全脂奶灌装前要匀浆重新搅匀，所以脱脂奶其实是少一道工序 |
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O*******d
发帖数: 20343 | 29 上页 http://www.mitbbs.com/mitbbs_article_t.php?board=Memory&gid=10746362&ftype=0
（二十）
谈谈在拉萨吃的。
藏人传统食品糌粑是把青稞，也就是一种大麦，在烫沙子中爆熟再筛过磨成面。喝的饮
料就是酥油茶。 酥油茶的制法是把云南出的砣茶放在壶里煮30分钟，然后趁热去掉茶
叶，加上酥油和盐，放到一个3尺高半尺粗的酥油茶桶中用一个活塞状的东西上下抽推
把酥油和茶水混匀，再到入热水瓶中备用。热水瓶是汉人引进的东西，极受藏人喜爱。
在林卡节郊游时，藏人背上的背包里常有几个装满酥油茶的热水瓶。 酥油茶桶其实就
是一个匀浆器, 其作用是把不能混合的油和水混和到一块。 云南砣茶是把老茶叶压制
成象中国北方的窝窝头那种形状成块的。大片的茶叶，粗糙的茶梗，和汉人喝的茶叶嫩
尖相比，很有一种豪爽粗放的风格。 酥油茶是咸的，油而不腻，倒是不难喝，其味道
很难用文字描绘，需要亲身体验。
酥油就是从牦牛的奶里提炼的奶油。 外观淡黄色固体。 藏人不光把酥油食用，还用酥 |
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p****y
发帖数: 23737 | 30 【 以下文字转载自 Food 讨论区 】
发信人: az2008 (举步维艰，是该消瘦一下了), 信区: Food
标 题: Re: 我们还该不该吃蘑菇？
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Dec 10 13:29:39 2009, 美东)
http://www.cnpatentinfo.com/ipc/zyys_B09C_detail_200710049528.html
重金属污染土壤的双孢蘑菇修复技术
重金属污染土壤的双孢蘑菇修复技术
申请专利号 200710049528
专利申请日 2007-07-17
公开（公告）号 101088641
公开（公告）日 2007-12-19
类别 B09C 1/10、C02F 1/62
申请（专利权）人 四川大学
地址 四川省成都市一环路南一段24号
发明（设计）人 徐恒、佘红英、宋鹏、辜文博、季金虎、冯军
摘要
本发明属于资源环境技术领域中的一种重金属污染土壤的双孢蘑菇修复技术，是在污染
土壤上种植双孢蘑菇，当菌体成熟后，采收菌体并经搅碎、匀浆、腐烂、过滤得到富含
重金属 |
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r****o
发帖数: 105 | 31 本文献给YL
（十一）核抽提物
上回谈到纯化AP-1转录因子的大致流程。其实在过柱子之前的核抽提物的准备
也是十分关键的。从天然产物中纯化蛋白，如果大概知道蛋白在什么细胞器官，把
细胞器先分离出来作为纯化的起始原料，可以省好多事情。因为细胞器官的分离的
方法已经很成熟了。
核抽提物是怎么准备的呢？首先，融解Hela细胞。我们在这个模块用的细胞都不
是自己长的，而是直接从一个公司Biovest 买来的。据说这个公司有NIH的补贴，
所以价钱不贵。一升media的Hela细胞才要１７刀。冻存在-80度的hela泡在有
glycerol的buffer里面，第一件事情就是要用有镁离子的PBS来冲洗几遍。然后用
一种低渗buffer来重悬细胞。这种低渗buffer盐浓度很低，所以由于渗透压的影响，
hela细胞膜会变得比较脆弱。这个时候呢，把重悬的细胞用Dounce 匀浆器处理一
下,把细胞膜弄破。低渗buffer里头虽然盐浓度很低，但也不是没有盐在里面。主要
有两种成分，一个是10mM KCl ,另一个是 1.5mM MgCl2。KCl没有什么好说的，
可以换成NaCl。MgC |
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f*********r
发帖数: 1233 | 32 与细胞/组织匀浆不同，血清中dna极低。粘稠主要因为蛋白和血脂。楼上说超高速离心
，是个不错的办法。能够去掉很多悬浊微粒。如果样品量有限，可以加过lysis buffer
以后再离心。
稀释总蛋白浓度。如果5ul/well这个量不能再降低，可以象楼上所说，用大胶、厚胶，
想办法增加volume/well。
如果有条件，可以用filter过滤掉不需要的蛋白。一般，条带扭曲多发生在小分子量。我估计你要的蛋白就不大。那么，你可以根据分子量，过滤掉大分子蛋白。millipore就有很多不同孔径的过滤系统可供选择。
条带形状不规整，很大程度上还因为蛋白denature得不够好。可以适当在loading buffer里增加sds浓度。
由于loading buffer与running buffer之间在表面活性上有差异，可以造成条带的扭曲
。为此，可以选用taurin buffer（代替glycin buffer）以弱化条带扭曲。甚至，有的
pi曾经建议，在上样之前，空跑至少10分钟。
用一般的样品跑胶，那么胶的品牌与型号之间的优劣不是很明显。你的sample比较特殊
，可能就放大了各厂家产品之间 |
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m****a
发帖数: 427 | 33 用kit提了RNA,浓度还可以但是260/280=2.2了，这样是不是说RNA已经降解了呀，还能
用吗？还有一个问题，在提取的时候匀浆那一步是不是要在冰上进行？谢谢啦 |
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F*****e
发帖数: 182 | 34 我觉得tissue extract和cell lysate的区别就是tissue多了匀浆分散成单细胞这一步
。其他的应该都一样。 |
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s****a
发帖数: 454 | 35 需要从小鼠的心肌组织提取polysome,然后在提取RNA做RT.比较某个蛋白的翻译在两组
之间的差异.
我看了篇文献,似乎是从组织提取多聚核糖体比较麻烦?RNA容易降解?所以,在组织匀浆
的时候都要用液氮和冷的研钵,
接下来就是要把组织上清上样到梯度蔗糖,然后离心.我的问题是我是要吧polysome都收
集起来,应该在下面的部分,但是不需要很多的fraction(网上看到的是10ml的蔗糖梯度
收集了至少10个franction),那我怎么知道polysome是在那些层?
大家看看能不能推荐一下protocol,或者是给指点一下操作中的注意问题,
不胜感激 |
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s****a
发帖数: 454 | 36 首先非常感谢楼上几位的回复.
(1)取材的时候洗组织的液体里面加了CHX
(2)用了电动机子,上样了 1５,２０,２５,３０,３５,４０%的蔗糖梯度.
３８０００ｒｐｍ,２ｈｒｓ,SW41ti 转头.
(3)取样,电动的机子,20fractions,每个500ul,
(4)分光光度计读得OD260.
我做了个读数的曲线,大家帮分析下我标的对不对,那我收集polysome的箭头标记的准确
吗?
这两个分离实验只是在组织匀浆的时候方法不同,其他的都一样. |
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l******n
发帖数: 298 | 37 谢楼上各位。蛋白是血管平滑肌特异性akt.SM22-HA-AKT,加了一个tag的话是90kd,
endogenous是50多，两个能区分。
分离蛋白是匀浆3次，用的是millipore的kit,270块钱能做13毫升的样品。kit里面有
peotease, phosphatase inhibitor mix。
上western, 用cell signalling的抗体，磷酸化和未磷酸化的AKT条带都没有，
endogenous 磷酸化和未磷酸化的条带都有。
因此对他的这个老鼠表示怀疑。不过他给我几个老鼠做genotyping的话还是100%准确，
确实有transgene.今天他们说这个promoter表达很低，我就不知道有多低 |
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g********0
发帖数: 6201 | 38 给你推荐个小仪器 bullet blender
www.wisbiomed.com/ec/index.php?main_page=product_info&products_id=77
原理是用不锈钢珠直接在裂解液里高速击打粉碎组织
一次可同时处理24个样品，放在4度冷室里
心脏组织6分钟，肝组织2分钟，匀浆完基本看不到渣滓。本人亲自实践经历。 |
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v****e
发帖数: 131 | 39 最近用老鼠组织提RNA，准备做microarray，可是RNA降解了。损失了`20个老鼠，非常
不幸。
dissect tissue，每个老鼠take 10分钟，因为比较难剥。是不是这个原因？放在RNA
LATER里比较难剥，因为变硬了。
然后就直接把tiisue放在液氮里了。抽的时候，放在trizol里。用匀浆器打散，抽提。
最后用RNAEASY纯化，
大家觉得有什么问题？有人和我说用液氮磨碎组织再加trizol，有用吗？谢谢 |
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w********r
发帖数: 1431 | 40 之前查过，
很多ChIP是用embryo做的，也有用liver的。都比较嫩，把组织研磨一下基本就可以当
cell用了。
后来我们做muscle的ChIP，比较结实，发现磨半天也磨不碎。。。
后来我就拿剪子狂剪，剪成很细碎的小块，固定15分钟，固定完了用PBS洗洗，放在
lysis buffer里洗洗，匀浆。ChIP-Seq的结果很好 |
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m**o
发帖数: 9137 | 41 一生物博士意外去世变为厉鬼，法师收服他后为其普渡超生，问他：年轻人，超生后要
干嘛呀?答：超声?超声后离心取上清上镍柱!
法师摇摇头说：“年轻人，我看你资质不错，想不想我培养你啊?”答：“培养?你一没
血清二没1640，拿什么培养我啊?”
法师大怒说：“莫非你一心要去地狱?也罢，十八层地狱个个酷热难耐，你随便挑一个
吧。”答：“哪个地狱是95-60-72度循环的?”
法师说：“你就不怕我把你打成孤魂野鬼吗”?“野鬼是野生型吗”?生物博士问道。
法师和生物学博士说：“听说那唐三藏将前往西天取经，不如你就前往西方的部落投胎
迎接唐三藏吧”。生物学博士说：“恐怕我看到三藏法师我也识别不出，因为我
Western Blot做得不好”
法师问生物学博士：“你是怎么死的”?生物学博士说：“游泳的时候，被闪电击中触
电死的。。”。法师问：“请问姑娘芳名是否为凝娇?”
法师：来呀!把这个孽鬼绑上柱子!
生物博士：上柱子很关键，不然影响纯化回收的效率。我建议你们买进口的柱子。
法师：来呀!把这个恶鬼切了!
生物博士：用什么酶?EcoRI还是HindIII?
法师：我一定要给你点颜色看看!
生物博士：神马... 阅读全帖 |
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B*N
发帖数: 455 | 42 如果你只想分离膜和cytosol，用0.05%digitonin在细胞上打洞，一离心，cytosol会从
细胞内挤出来到buffer中。
如果你一定要提plasma membrane，你用220mM蔗糖溶液重悬细胞，然后用针头或者玻璃
杵匀浆，通过差速离心，可以分离。但是质膜和内质网分不开。 |
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t*****t
发帖数: 773 | 43 经常有动物组织需要匀浆处理， 每次用液氮研磨 ，但太费劲。 有没有好一点的？
性价比高的更好了 。
谢谢大家 ！ |
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n***w
发帖数: 2405 | 45 我就是超声匀浆，四度离心15分钟，收supernatant，测蛋白跑胶 |
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w*******d
发帖数: 396 | 46 我试过下面的方法。材料是小鼠肝脏。供参考。
加PBS，匀浆（homogenize)，离心，裂掉RBC，加PBS，离心，用PBS洗一次，这时的上
清不再是浑浊的了，用RIPA buffer裂解细胞，离心，收集上清，BCA测蛋白浓度，
normalize. |
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d*******3
发帖数: 8598 | 47 是啊
我昨天想到了，懒得说
青蒿一握，以水二升漬，絞取汁，盡服之
原文明显是 吃匀浆果浆那样吃么
这里有谁没有吃过果浆的，举手？
肘子是习惯了实验室吧？ 以为都是Sigma买的超纯试剂，用水溶解了，测溶解度呢 |
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b*******e
发帖数: 6920 | 48 淀粉匀浆的浓度和最终的韧度成什么关系呢？
这件事情应该涉及淀粉糊化机理吧
望深入讨论 |
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L*****i
发帖数: 237 | 49 网友治病经验荟萃（三）
网友MEMPHISL：我看到我们公司的一位洋大姐撑了双拐，一只脚从小腿开始就包裹，穿
着那种墨绿色的夹板类似的鞋子。她星期天在家里，下楼梯，扭伤了脚。我介绍了这个
方子：生鸡蛋打散加盐，棉布浸满液体，包裹扭伤关节，建议用3个鸡蛋，一天一换（
因为她人高大），两天后我看见她，当时她已经没有用拐， 那个墨绿色的东西还在，
她看见我就连声说‘AMAZING '，说她当晚用了后，第二天早上就只感觉这个部位有点
酸， 但不再疼得厉害（踏在地上的时候）， 她说比医生的CREAM管用得多。 再过了一
天她就没有用墨绿色的夹板鞋了。 另有小偏方：被马蜂蛰了，用小苏打糊糊（加一点
点水），敷上，马上就好。 或用鲜蒲公英碾碎，直接敷上，也很好，但蒲公英干掉后
，需要不断换新鲜的。我用过蒲公英，我先生用过小苏打糊糊。首推小苏打，因为它1
分钟就止疼。
网友欲千北：很多网友提到喝醋有助于控制血糖，这的确是有科学实验证据的。亚利桑
那州立大学研究团队就发现苹果醋对胰岛素抵抗患者有非常良好的效果，20克醋（含1
克醋酸）可有效抑制餐后血糖，提高机体对胰岛素的敏感性达34%。苹果醋对血糖偏高... 阅读全帖 |
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b****o
发帖数: 9 | 50 转自《三思科学杂志》 http://www.oursci.org/mag.htm
http://www.oursci.org/magazine/200401/040114.htm
终极巫术——疯牛病小传
（七）
作者 逍遥
５、疯牛漩涡
1985年4月25号这个日子对英国兽医惠特克（Colin Whitaker）来说是难以忘记的，
可以追溯的英国第一例疯牛病案例就来自于他的记录。这天位于肯特郡中部的普仑顿庄园
农场的奶农给惠特克来电说一头奶牛行为怪异，请他过去看看。惠特克检查后认为是卵巢
囊肿导致它出现攻击性并且丧失身体平衡，初步治疗似乎很成功，但数周后病情开始呈进
行性加重，最终它还是死了，被宰杀后送去做了饲料。接下来18个月中，庄园里又有7头
奶牛生病死亡。到1986年，英格兰西南部的三个郡中都发现了相似病例均无法救治。消息
迅速在相关产业中传开。
接获消息后，英国农渔食品管理局实验室展开了调查。到1987年夏季，他们终于在患
病奶牛的脑组织样本匀浆中找到了“羊瘙痒症原纤维”。这项结果以简短报告的形式刊登
在在10月份的英国《兽医记录》期刊上，并将之命名为“牛脑部海绵化病”，不过显 |
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