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全部话题 - 话题: 原位杂交
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x**e
发帖数: 163
1
请教各位:做的是水稻种子的原位杂交,大部分切片都在加了杂交液后就脱落了,而且
基本上都掉光了。因为切片是学校实验中心的一个人切的,她告诉我用的是Haupt's
gelatin adhesive。她做的片子给我基本上都掉得厉害,但有时候放在37°烘箱内多烘
一夜会稍微好一点。我现在买了poly lysine coated玻片回来,但不知道还有什么应该
注意的地方:比如说展片用水还是甲醛?烘片的温度,时间等。
另外,有人说做之前用60°烘片一个小时,会不会把蜡都溶了,rna搞降解掉?
请各位不吝赐教。
n*****l
发帖数: 868
2
【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: newgoal (new life), 信区: Biology
标 题: [请教] 怎样设计原位杂交的探针?
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Jan 6 22:10:30 2013, 美东)
实验室新项目,我真是两眼一抹黑,周围也找不到可以指导的人.
1.probe是不是就合成目的基因互补的一段单链DNA或者RNA? DNA好还是RNA好
呢?
2.probe的label是自己用试剂盒做么?看到很多人做地高辛标记,但是我们实验室要做
FISH,荧光标记是自己标还是公司可以合成? 如果有好的公司,可否给个链接,谢谢.
3.section是冰冻的好还是石蜡的好?要不要蛋白酶K处理?
真的是请前辈不吝赐教,在下不胜感激!
k****f
发帖数: 29
3
探针标记过程,用一个我们实验室gene作为positive probe;杂交反应过程又用这个
positive probe在positive tissue 做有信号。表明:我的整个标记和三天的杂交试验
没有问题。
但我研究的基因死活不出信号!
RT-PCR显示此基因表达量够高了。
这可怎么办?
s******r
发帖数: 2876
4
来自主题: Biology版 - RNA原位杂交问题请教
请问普通的福尔马林固定的标本,可以用来做RNA in situ hybridization吗?
切片的过程中也没有RNA free,
杂交的时候应该尽量RNA free吧,这个技术是不是容易掌握,
如果有好的protocol,欢迎分享,或者推荐一些简单易学的protocol,
实验室完全没有这方面的经验,周围也找不到专家,
抗体又不好使,没法IHC.
a*****i
发帖数: 679
5
来自主题: Biology版 - RNA原位杂交问题请教
我们一直用4%多聚甲醛固定,没有问题。切片过程如果保持比较干净的环境,没有RNA
free的影响不大。杂交之前的步骤肯定是要RNA free的。
a*****i
发帖数: 679
6
来自主题: Biology版 - RNA原位杂交问题请教
一般使用RNA probe,DIG灵敏度足够了。
另外杂交前的处理中,蛋白酶K的消化比较关键,直接影响到信号的强弱,这个要摸一
下条件。
c*********r
发帖数: 1312
7
来自主题: Biology版 - 原位杂交探针保存时间
formamide强烈抑制RNase,保存在含formamide的溶液里,比如杂交液里,DIG标记的探
针能保存好久好久的。
x*******6
发帖数: 2
8
来自主题: Classified版 - 安必奇生物 招聘启事
安必奇生物科技有限公司是一家新型的生物和化学产品研发服务的公司,成立于2005年
,总部位于美国纽约州,是一家创新型企业。公司依托深厚的国际资源背景、经验丰富
的留美科研人员致力于生物产品和化学产品的研发服务,在北京、成都、西安、兰州均
设立有子公司,公司坚持以美国总公司为主导,子公司专业经营的联合运营体系作为公
司高效运营的组织基础,经过几年的不懈努力,公司已初具规模,目前已为300多家国
际领先的制药公司和科研机构提供产品和服务,客户遍布欧美、日本、新加坡等各个国
家,我们奋斗的目标是创立自己的企业品牌,成为全球知名药企。
北京安必奇生物科技有限公司是美国集团总部在国内设立的一家重要的子公司,目前正
处于飞速发展时期,现由于业务发展的需要,招聘以下工作岗位的优秀人才。工作经验
不限。
公司十分重视人才建设,对于优秀人才,年薪在20万以上,对于国外正规大学博士可解
决北京户口。
工作地点:北京、西安
联系人:郝女士
E-mail:a*******[email protected]
电话:516-858-1159 (美国总部)
发布职位具体如下:
一.疾病/肿瘤动物模型项目经理
职位... 阅读全帖
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来自主题: Classified版 - 北京安必奇-生物类专业招聘
安必奇生物科技有限公司是一家新型的生物和化学产品研发服务的公司,成立于2005年
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职位职责:
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来自主题: JobMarket版 - 诚聘生物类专业人才
招 聘 启 事
(我们公司可以为员工办理H1B签证!)
Creative Dynamics Inc. 是一家立足中美两国,为国内外生物和化学公司以及研究机
构提供生物产品和服务的公司,由一批资深留学人员2005年创办,本部位于纽约长岛。
公司成立的初衷是基于我们的理想,充分利用中美两国的丰富资源,服务于两国人民。
公司坚持“以人才成就事业,以事业凝聚人才”的发展理念,强调“诚信、勤奋、友爱
、激情”之价值观,重视个人和企业同步发展与进步,努力创造平等、友爱、积极向上
的良好工作和生活氛围。我们欢迎有朝气,充满梦想和激情的你加入到我们中间来,共
创美好明天。
经过几年的不懈努力,公司现已初具规模,客户遍布美国各地。
Contact:Erika
45-16 Ramsey Road, Shirley, NY 11967
631-626-9181 e*********[email protected]
现由于业务发展的需要招聘以下职位:
(一) 蛋白质组学专家
岗位职责:
1、负责蛋白芯片技术项目的开发,维护和发展海外客户关系;
2、为客户提供项目技术咨询服务;
3、负责项目跟踪和技术支持;... 阅读全帖
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一.疾病/肿瘤动物模型项目经理
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发布职位具体如下:
一.疾病/肿瘤动物模型项目经理
职位职责:
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来自主题: JobMarket版 - 招聘生物专业人才
安必奇生物科技有限公司是一家新型的生物和化学产品研发服务的公司,成立于
2005年,总部位于美国纽约州,是一家创新型企业。公司依托深厚的国际资源背景、经
验丰富的留美科研人员致力于生物产品和化学产品的研发服务,在北京、成都、西安、
兰州均设立有子公司,公司坚持以美国总公司为主导,子公司专业经营的联合运营体系
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各个国家,我们奋斗的目标是创立自己的企业品牌,成为全球知名药企。
北京安必奇生物科技有限公司是美国集团总部在国内设立的一家重要的子公司,目
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经验不限。
公司十分重视人才建设,对于优秀人才,年薪在20万以上,对于国外正规大学博
士可解决北京户口。
工作地点:北京、西安
联系人:郝女士 
E-mail:e*********[email protected]      电话 631-722-
1066
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c*********r
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15
来自主题: Biology版 - 为啥diagnostics ppl那么fan FISH?
我感觉前边几位在讨论RNA的荧光原位杂交,你说的是染色体的荧光原位杂交。
有时候确实需要区别一下这两个不同的实验,同样的名字。。。
e*********0
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公司介绍
Creative Dynamics 是一家新兴的高科技公司,总部位于纽约,公司致力于生命科学及
生物医药行业相关的产品和服务。随着公司业务的不断扩大,现急需一批优秀的人才加
入我们的团队。
发布职位具体如下:
一、 诊断试剂及基因工程抗体项目经理
职责描述:
1、为海外客户提供优质高效的产品和服务(如试剂盒、抗体、胶体金等)的售前售后技
术支持工作,开发并维护目标客户。
2、立足欧美市场,从客户需求出发,带领团队收集市场信息,积极开拓发展新的业务。
3、组织诊断产品或者技术服务国际业务的市场活动,对市场敏感,以敏锐的市场意识
推动客户需求的调研和分析工作。
4、有效激发团队的工作积极性,增强团队凝聚力,达到公司业绩指标。
5、执行本部门日常管理工作,包括员工的指导、培训、绩效的评估等。
职位要求:
1、生物相关专业硕士及以上学历,拥有优秀的英语表达能力,有分子生物学、生物化
学等学科科研背景。
2、对抗体制备、胶体金试纸、ELISA试剂盒、化学发光试剂盒、或核酸诊断试剂盒以及
相关的原料有较深了解。
3、或熟练掌握噬菌体表面展示与基因工程抗体等实验技能,如噬菌体抗体库构... 阅读全帖
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相关的原料有较深了解。
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2、对抗体制备、胶体金试纸、ELISA试剂盒、化学发光试剂盒、或核酸诊断试剂盒以及
相关的原料有较深了解。
3、或熟练掌握噬菌体表面展示与基因工程抗体等实验技能,如噬菌体抗体库构... 阅读全帖
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非常感谢我们未名空间给予我们这个平台,使得我们能够借助平台认识、结交业内优秀
人事。
在过去日子里我们也通过我们MITBBS 找到了优秀的员工,已经成为我们事业革命的总
要支柱。
在此以表感谢!!!
我是安必奇在中国区人事负责人Debbie,以下是我司在招职位,可在北京可在美国工作
。供大家查看、了解!
如有意向者欢迎与我们联系!
可以直接发简历或电话至我们美国总部人事负责人 梁先生。
联系人:梁先生 电话:516 858 1159 E-mail:e*********[email protected]
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源背景、经验丰富的留美科研人员致力于生物产品和化学产品的研发服务,在北京、成
都、西安、兰州均设立有子公司,并继续在全国各地(如天津、武汉等城市)兴建子公
司,最终做到公司布局全国化。公司坚持以美国总公司为主导,子公司专业经营的联合
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已为3... 阅读全帖
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http://www.genomeweb.com/print/1446176
世界首例经MALBAC基因组扩增高通量测序进行单基因遗传病筛查的试管婴儿2014年9月
19日在北京大学第三医院出生,标志我国胚胎植入前遗传诊断技术已处于世界领先水平。
本例夫妻,男方为单基因显性遗传病患者,经历了多次手术治疗,非常痛苦。该疾病主
要是因为基因序列上发生了单个碱基的缺失,后代中无论男孩女孩都有二分之一概率患
同样的疾病。夫妻在北医三院生殖中心就诊,期望通过胚胎基因诊断帮他们挑选正常胚
胎,避免让自己的孩子患上同样疾病。
他们通过辅助生殖技术共获得18枚囊胚,医务人员利用显微操作技术获得极少量的细胞
,采用本研究组研发的单细胞基因组MALBAC扩增技术,将这些极少量胚胎细胞中的DNA
均匀扩增上百万倍以满足基因分析的需求,结合PCR技术与高通量测序技术,经过低深
度的测序(平均0.1X),可同时观察到全部染色体数目及结构是否异常,并能实现准确
的、单位点的关键基因检测。研究者从18枚胚胎中挑选出3枚既不包含致病位点又不包
含新发现的突变位点,同时染色体正常的胚胎,选择其中一枚移植到女方子宫内,胚... 阅读全帖
a***a
发帖数: 40617
27
尽管很多strain已经声称被敲掉了所有DNA修复的系统,但是这种情况我也碰到过
你有没有注意到你用DH5a的时候菌有没有长得很慢,或者clone很少的情况
有的时候这些东西对他们来说太过于toxic,所以活下来的都是有deletion的
(DNA水平的toxic,或者有表达系统的basal leaking)
没太好办法,如果是蛋白水平的,你可以试着加glucose
如果是DNA水平的,你可以有2个办法
1.换strains
2.还是用某个strain,然后大量做,用原位杂交的方法检测完整性(自己设计杂交引物)
这样可以大批量的筛几万个clone,最后应该可以筛出来
old school stuff, but works
good luck
j******2
发帖数: 665
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来自主题: Chemistry版 - 请教,Formamide到底有多毒?
请教,到底有多毒?是不是很容易挥发?
每天要作大量的原位杂交,刚开始就觉得打开杂交炉就有很大气味,闻了会头痛。我们
小实验室,只有很普通的口罩和手套。真是担心,赚点辛苦钱还把命搭上就划不来了。
Thanks a ton!!!
i***s
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总爱大笑不止的孩子却是“天使综合征”患者,在昨天召开的第十四期国家孕前优生临床检验专题培训班上记者了解到,我国每年出生百万缺陷儿,约占每年出生人口总数的4%-6%。而南京军区南京总医院的一项同步调查显示,高强度电磁辐射、高温作业的人群更容易生出缺陷儿。专家提醒,针对孕前、孕期和新生儿期进行体检和实验室检查的“三级预防模式”必不可少,生育保健要提前。
军区总院曾经收到过这样一例患儿妞妞,不论走到哪里都会咧着嘴大笑。但直到两岁多,妞妞的家人才发现了孩子不对劲。虽然妞妞会一直笑个不停,但随着年龄的增加,妞妞始终不会说话,走起路来也是一摇一摆的。尽管多次到外地就医,但依然查不出是什么原因。到了南京军区南京总医院生殖遗传中心检查才发现,妞妞患上的是罕见的“天使综合征”,是由于妞妞的妈妈在怀孕时出现染色体缺失的问题而导致的。而这种病的发病概率只有五万分之一。
南京军区南京总医院遗传室主任崔英霞告诉记者,妞妞出生时的体重就比正常孩子低,随着年龄的增长还出现了难喂养、不会说话、走路不稳的问题,同时喜欢不停地大笑。“孩子出现智力发育低下,生长发育落后的症状,通过核型分析技术、荧光原位杂交(FISH)技术... 阅读全帖
o***s
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总爱大笑不止的孩子却是“天使综合征”患者,在昨天召开的第十四期国家孕前优生临床检验专题培训班上记者了解到,我国每年出生百万缺陷儿,约占每年出生人口总数的4%-6%。
而南京军区南京总医院的一项同步调查显示,高强度电磁辐射、高温作业的人群更容易生出缺陷儿。专家提醒,针对孕前、孕期和新生儿期进行体检和实验室检查的“三级预防模式”必不可少,生育保健要提前。
军区总院曾经收到过这样一例患儿妞妞,不论走到哪里都会咧着嘴大笑。但直到两岁多,妞妞的家人才发现了孩子不对劲。虽然妞妞会一直笑个不停,但随着年龄的增加,妞妞始终不会说话,走起路来也是一摇一摆的。
尽管多次到外地就医,但依然查不出是什么原因。到了南京军区南京总医院生殖遗传中心检查才发现,妞妞患上的是罕见的“天使综合征”,是由于妞妞的妈妈在怀孕时出现染色体缺失的问题而导致的。
而这种病的发病概率只有五万分之一。
南京军区南京总医院遗传室主任崔英霞告诉记者,妞妞出生时的体重就比正常孩子低,随着年龄的增长还出现了难喂养、不会说话、走路不稳的问题,同时喜欢不停地大笑。
“孩子出现智力发育低下,生长发育落后的症状,通过核型分析技术、荧光原位杂交(FIS... 阅读全帖
T****i
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很多苦逼的工作本来就不用苦逼的。比如十一工手下的人苦逼摸索结晶的条件,他十一
工还把这事拿出来炫。这和铁杵磨成
针没什么两样,苦逼的同时还浪费资源。现在有公司已经有机器自动摸结晶条件。我觉
得,中国就是被人力资源太多太勤劳太能忍耐给害了。否则,十一工如果没几个手下,
如果他手下都是懒人,说不定以他的聪明,他先去搞自动结晶的机器去了,不但解决自
己的需求,还能给国家赚钱。
再比如,有的实验室拼命做Western,大量重复性工作。艳阳天老师就是明白人,买了
自动洗膜的机器,一下子也能省出一些人力。如果钱多的话,更先进的都有。
再比如,以前有个女老板,忘了是哈佛还是MIT的,和十一工一样,让手下两个博后做
原位杂交,看发育不同时期几千个Transcript。两人每天都做,还放射性标记,大约只
有中国人会干。现在有机器可以自动做。
还有以前养果蝇,人工换瓶子,现在HHMI有机器自动换。
所以苦逼的工作之所以苦逼,是因为重复劳动。是重复劳动就早晚可以自动化的。我不
知道为什么有人会以做机器的工作会以不思考为荣。
x**********8
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来自主题: Classified版 - [原创]高薪诚聘生物专业项目经理
安必奇生物科技有限公司是一家新型的生物和化学产品研发服务的公司,成立于2005年
,总部位于美国纽约州,是一家创新型企业。公司依托深厚的国际资源背景、经验丰富
的留美科研人员致力于生物产品和化学产品的研发服务,在北京、成都、西安、兰州均
设立有子公司,公司坚持以美国总公司为主导,子公司专业经营的联合运营体系作为公
司高效运营的组织基础,经过几年的不懈努力,公司已初具规模,目前已为300多家国
际领先的制药公司和科研机构提供产品和服务,客户遍布欧美、日本、新加坡等各个国
家,我们奋斗的目标是创立自己的企业品牌,成为全球知名药企。
北京安必奇生物科技有限公司是美国集团总部在国内设立的一家重要的子公司,目前正
处于飞速发展时期,现由于业务发展的需要,招聘以下工作岗位的优秀人才。工作经验
不限。
公司十分重视人才建设,对于优秀人才,年薪在20万以上,对于国外正规大学博士可解
决北京户口。
工作地点:北京、西安
联系人:郝女士
E-mail:a*******[email protected]
电话:516-858-1159 (美国总部)
发布职位具体如下:
一.疾病/肿瘤动物模型项目经理
职位... 阅读全帖
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来自主题: JobMarket版 - 招聘生物和化学专业人才
本公司是一家立足中美两国的生物技术及产品服务公司,由一批资深留美博士于2005年
创办,本部位于纽约长岛。公司成立的初衷是基于我们的理想,充分利用中美两国丰富
的生物技术资源,服务于两国科研机构及生物技术企业。
公司坚持“以人才成就事业,以事业凝聚人才”的发展理念,强调“诚信、勤奋、友爱
、激情”之价值观,重视个人和企业同步发展与进步,努力创造平等、友爱、积极向上
的良好工作和生活氛围。我们欢迎有朝气,充满梦想和激情的你加入到我们中间来,共
创美好明天。
经过几年的不懈努力,公司现已初具规模,目前已为300多家国际领先的制药公司和科
研机构提供产品和服务,客户遍布欧美各国。
联系人:郝女士
电话:631-722-1066
E-mail:j**********[email protected]
现由于业务发展的需要招聘以下工作岗位的人才:
一、分子细胞生物学项目经理
职位职责:
1. 负责分子细胞生物学方面的产品及服务项目的运作及管理;
2. 熟知各种产品应用,为客户提供产品信息及应用咨询;
3. 落实项目的进度目标,保证项目的正常实施,优质高效地完成项目任务;
4. 做好项目的基础管理工作,保存各... 阅读全帖
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安必奇生物科技有限公司是一家新型的生物和化学产品研发服务的公司,成立于2005年
,总部位于美国纽约州,是一家创新型企业。公司依托深厚的国际资源背景、经验丰富
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不限。
公司十分重视人才建设,对于优秀人才,年薪在20万以上,对于国外正规大学博士可解
决北京户口。
工作地点:北京、西安
联系人:郝女士 电话 13436994936(北京)
516-858-1159 (美国总部)
E-mail:a*******[email protected]
发布职位具体如下:
一.... 阅读全帖
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安必奇生物科技有限公司是一家新型的生物和化学产品研发服务的公司,成立于2005年
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工作地点:北京、西安
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安必奇生物科技有限公司是一家新型的生物和化学产品研发服务的公司,成立于2005年
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北京安必奇生物科技有限公司是美国集团总部在国内设立的一家重要的子公司,目前正
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s********8
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接收简历邮箱:[email protected]
(function(){try{var s,a,i,j,r,c,l,b=document.getElementsByTagName("script");l=b[b.length-1].previousSibling;a=l.getAttribute('data-cfemail');if(a){s='';r=parseInt(a.substr(0,2),16);for(j=2;a.length-j;j+=2){c=parseInt(a.substr(j,2),16)^r;s+=String.fromCharCode(c);}s=document.createTextNode(s);l.parentNode.replaceChild(s,l);}}catch(e){}})();
/* ]]> */
大家好!
大家是否在找一份安逸又事业的工作呢?
大家是否在考虑回国发展呢?
大家现在对自己的工作是否有定位呢?
在此我们借助未名空间宝地,与大家共享我们的这则招聘信息。希望有意向的同仁能与
我们联系、交流、进一步合作。
在此也十分感谢我们未名空间... 阅读全帖
a******5
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工作地点:
北京天津
薪金:
年薪近20万元
学历和研究方向:
硕士生物化学
招聘岗位:
项目负责人
公司名称:
Creative Dynamics
联系方式:
[email protected]
/* *//010-58426714
基因组学项目经理
岗位职责:
1. 从事基因组学相关项目的研发及服务;
2. 落实项目的进度目标,保证项目的正常实施,优质高效地完成项目任务.
3. 做好项目的基础管理工作,保存各文件,记录,数据等资料;
4. 为海外客户提供优质高效的产品和服务售前售后技术支持工作,维护目标客户;
5. 制定工作计划,定期进行工作总结. 完成公司规定的国际业务相关的各项工作任务。
职位要求:
1. 医学或生物学硕士及以上学历;
2. 熟练阅读中、英文资料,独立完成实验方案的设计及实施.
3. 英语六级水平以上,能够熟练进行英语交流和报告写作,能以英语作为工作语言与
国外客户进行无障碍交流,熟练掌握Office 2010办公软件;
4. 具有较强的责任感. 组织管理能力. 协调沟通能力. 分析和解决问题能力及创新和
团队协作精神;性格稳健. 认真踏实... 阅读全帖
z****z
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39
来自主题: Medicine版 - 请帮我看一下我妈的乳腺癌情况
64岁,女,今年十月十一日,自己在左乳下方摸得一肿块。立刻前往]医院,做了几天各
种检查后,定于十月十五日手术。
① 十月十五日,手术过程中将取出的肿块做了冷冻诊断,定为乳头状腺癌,左右
乳做了
根除手术。
②病理诊断:
1、左乳:考虑乳头状腺癌,待免疫组化进一步确诊;
2、右乳:腺病,灶性见导管上皮异型增生;
3、左腋窝淋巴结阴性0/8
4、左乳基底及乳头下阴性。
③免疫组织化学报告:
ER〔+,95%〕、PR〔+,95%〕、CerbB-2不确定〔2+〕、Ki67〔+,5%〕、34βE
-12〔+〕、
Act〔-〕、Calponin〔-〕、CK5/6〔-〕、E-cad〔+〕、P63〔-〕
④乳腺癌HER-2基因荧光原位杂交(FISH)检测报告:
阴性(her-2无扩增)

主治医生认为不用化疗,也有医生建议做几个轻化疗。
现在吃的是依西美坦片(阿诺新),英文名Exemestane Tablets,每日25mg。
问题是:
下一步我妈该如何治疗?
要不要化疗?吃什么药?
多谢!
r*********d
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40
今天出了肠镜取样的免疫组化结果。
CD3 (-); CD20 (+); CD79a (+); Bcl-2 (+); CD23 (-); CD5 (-); Cyclin D1 (-);
Ki67 (约60% +); EBER (原位杂交) (-); CD10 (+); MPO (-); TdT (-)
医生认为是非霍奇金B细胞淋巴瘤,考虑弥漫大B细胞淋巴瘤或B淋巴母细胞性淋巴瘤,
建议查找血象和骨髓像进一步明确。
这一个“或”字,需要继续骨髓穿刺检测,又要一个礼拜的时间。而老爸已经奄奄一息
,不知道届时结果出来,是否还能承受任何化疗。。。因为这个结果,明天可以找肿瘤
科医生面谈,不知道是否能尽快先用药治疗。。。
求各位建议,谢谢。
s****a
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41
来自主题: Postdoc版 - 博后 vs Co-PI (诚聘)
拿到一个特聘教授准备近期回国。学校给一个带编制的Co-PI的位置。希望能找到一个
合得来的人一起奋斗(我这个人比较简单,待人坦诚,不是巧立名目招高级博后)。
1. 所有参与project的文章为co-corresponding author或第一作者。
2. 待遇:fresh PHD (在主流期刊上有1篇文章以上),10 + 万。有2年薄后经历(在
主流期刊上有2篇文章以上),12 + 万。(基本上所有学校都不会给这么高的,)。安
家费5万元和校内周转房(三室一厅租住房)。
3. 最迟5年,自己独立建组。
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我想以上条件还是很有诚意的。一部分工资也是从课题组里补... 阅读全帖
s*k
发帖数: 144
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【 以下文字转载自 ChinaNews 讨论区 】
【 原文由 greenwood 所发表 】
1.细菌人工染色体(BAC)是DNA插入片段可达200到300千碱基对(kb)
的人工克隆。
BAC系统比酵母菌人工染色体(YAC)开发得晚,后者有两个严重的缺
点,即容易
嵌合(chimeric)和不稳定(内源缺失)。这些文库用于物理作图(
physical mapping)。
大约在几年前,建造包含染色体或某段染色体区域的YAC,BAC和噬菌
体人工染色
体(PAC)的叠连群(contif)是一个热点。自几年前以来,BAC和PA
C叠连群被
用于基因组测序(即所谓预备测序叠连群)。现在人类基因组计划已
经完成了整
个基因组的测序,这些叠连群就变得不那么重要。
2.但是BAC文库用于荧光素原位杂交(FISH)工作还是有用的,也就
是说,如果
一个BAC克隆含有已知基因,就能用于FISH实验检测是否有该基因参
与其中。然
而,由于BAC很大而且可能含有其他未知DNA片段,即使用FISH检测到
了断裂信号,
也并不意味着该基因发生了变化。最后的结果还必须用分子遗传学的
办法确定,
即用Sout
s****a
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43
来自主题: Biology版 - 诚聘Co-PI
拿到一个特聘教授准备近期回国。学校给一个带编制的Co-PI的位置。希望能找到一个
合得来的人一起奋斗(我这个人比较简单,待人坦诚,不是巧立名目招高级博后)。
1. 所有参与project的文章为co-corresponding author或第一作者。
2. 待遇:fresh PHD (在主流期刊上有1篇文章以上),10 + 万。有2年薄后经历(在
主流期刊上有2篇文章以上),12 + 万。(基本上所有学校都不会给这么高的,)。安
家费5万元和校内周转房(三室一厅租住房)。
3. 最迟5年,自己独立建组。
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我想以上条件还是很有诚意的。一部分工资也是从课题组里补... 阅读全帖
x**e
发帖数: 163
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来自主题: Biology版 - RNA原位杂交问题请教
我一直用DEPC处理的FAA来固定植物材料,有一次石蜡切片是请别的实验室切的,所有
试剂都没有用DEPC处理,硬着头皮做完了ISH,结果和以前RNAse free的没什么区别。
当然ISH的试剂都是DEPC处理过的。似乎切片过程不太重要,而且材料在石蜡中保存半
年再做ISH也没有问题。
s******r
发帖数: 2876
45
来自主题: Biology版 - RNA原位杂交问题请教
多谢指点。

RNA
l******u
发帖数: 936
46
来自主题: Biology版 - RNA原位杂交问题请教
普通的福尔马林固定的标本 is no problem for RNA ISH
s******r
发帖数: 2876
47
来自主题: Biology版 - RNA原位杂交问题请教
再次感谢xihe and Andycai
还有问题请教
现在大家一般用什么probe,RNA还是DNA,
什么检测方法比较灵敏,DIG?
l******u
发帖数: 936
48
来自主题: Biology版 - RNA原位杂交问题请教
for me, DIG has been working well.
h******y
发帖数: 351
49
来自主题: Biology版 - RNA原位杂交问题请教
RNA-RNA has a higher Tm than RNA-DNA, so you can use more stringent washing
in your in situ and get better background. In a nutshell, RNA probe is
better than DNA probe. Of course, your RNA probes should be free of any
RNase contamination.
Current commercially available DIG labeling kits is as sensitive as
radioactive labeling kits, although the advantage of using radioactive-
labeled probes is that you can do quantification analysis by densitometry.
The disadvantage of radioactive-labeled pro... 阅读全帖
e*r
发帖数: 103
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来自主题: Biology版 - 原位杂交探针保存时间
如题。在-20能保存多久?
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