发帖数: 1 | 1 前些天楼下几个河南老乡聚餐，我因为在平顶山上过学的缘故也被邀请了。
菜还挺丰盛的，我吃了特多。其中最好吃的就是两条新鲜大鲤鱼，每条都有7-8斤重。
他们丫做了一个酸菜红烧鱼，一个烤鱼。我很久没吃鱼了，我一个人起码吃了3斤半的
鱼，太好吃了。
然后我就问我说你们鱼哪儿买的。特新鲜特好吃。然后一个开封来的千老就说你根本买
不到这么新鲜的鱼，因为都是现钓的。我说你丫你教教我怎么钓，我也钓点儿，还能省
个肉钱。
然后丫就说你就用lab的培养基，搓个琼脂团子，往钩子上一挂，往水里一扔，就行了。
我说你丫你吹牛呢吧培养基也能钓鱼？？
丫就说培养基营养巨丰富，又香，鱼特喜欢。而且搓的琼脂丸子有一定弹性，不像面粉
团子容易被小鱼偷饵。
尼玛也不知丫说的真的假的，我感觉丫们像是吹牛逼逗我玩儿。版上会钓鱼的索南说说
看。 |
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s*********t
发帖数: 1229 | 2 想要配PDA培养基
网上搜了下，都是要用土豆自己做。
马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基是分离菌物和细菌的常用培养基，其做法是称取200g
马铃薯，洗净去
皮切成小块，加水1000ml煮沸半个小时或高压蒸煮20分钟，纱布过滤，再加10-20g葡萄
糖和17-20g
琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装试管，每试管约5-10ml（视试管大小而定），15
磅蒸气
（121℃）灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
请问这里有买现成的原料自己配吗？就是用 葡萄糖，agar 和（土豆粉？）按比例混合
水？ |
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m*****5
发帖数: 23482 | 3 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: yelo (没有昵称), 信区: Military
标 题: 拿着变黄的培养基,我泪流满面
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Nov 3 11:45:35 2011, 美东)
前天晚上把细菌培养瓶的瓶盖拧的太紧,过了24个小时,里面的培养基变黄发酸了.
酸性环境杀死了我需要的实验菌种,这周又要白干了.
千老的日子不是人过的啊隔壁美女师姐也要回国
我担心她要回去嫁人,早上她来敲门, 递给我一块浸泡了KOH的纱布,告诉我下次把这个
纱布悬在培养瓶里,对改善碳酸有帮助.
我接过纱布,哽咽了一下,她的手很漂亮,指甲精心修过,手背面还有不小心用强酸烫出来的
一些伤痕.真想鼓起勇气去握住.但是我双手都拿着试管.只好用力捏捏试管,仿佛捏住了
她的手指.
她仿佛看出了我的想法,跟我谈谈的说,这次回去,我就不一定回来了.
我不知道她为什么这么说,傻呼呼地冒出一句,我会想你的.
师姐轻轻地带着些哭腔说,你想我干嘛?然后带门出去了.
我左手里拿的那些免疫亲和柱纯蛋白,顿时融化...... |
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k**t
发帖数: 63 | 4 请教大家一个问题：
最近想Check以下，分离得到的一个菌株是否具有trimethoprim 抗性，以便确定下一步
插入transposon的抗生素选择，请问大家用什么样培养基进行trimethoprim 抗性测试
。我试过LB 培养基，不知为什么，到200ug/ml菌还能生长，是不是说明这个菌具有
TMP抗性呢？ 可是我的对照的E.COLi 有时也能生长。请大家指点。
非常感谢 |
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d*****a
发帖数: 53 | 5 各位达人：
小弟正在尝试小规模发酵（50-500升）来生产大肠杆菌（用来表达蛋白），目前用的的
培养基大都大都只能生产几克或者10几克菌体，看了药厂的已经至少可以达到上百克菌
体，因此很是苦恼，还请各位前辈给予指点一些比较有效的发酵培养基配方，感激不尽
！ |
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s*****y
发帖数: 32 | 6 RT。有没有什么培养基是纤维细胞不长，上皮细胞能长的？我需要把一个纤维细胞和上
皮细胞的混合中，把上皮细胞纯化出来。要是有什么培养基可以直接分离出这种细胞就
方便很多了。FACS来分选还是太麻烦了。 |
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h**********r
发帖数: 671 | 7 感谢sunnyday MM,培养基的stock solution发霉，不是最后的培养基发霉。这个stock
solution没有autoclave也没有filter除菌。
Thanks! |
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y**o
发帖数: 8897 | 8 前天晚上把细菌培养瓶的瓶盖拧的太紧,过了24个小时,里面的培养基变黄发酸了.
酸性环境杀死了我需要的实验菌种,这周又要白干了.
千老的日子不是人过的啊隔壁美女师姐也要回国
我担心她要回去嫁人,早上她来敲门, 递给我一块浸泡了KOH的纱布,告诉我下次把这个
纱布悬在培养瓶里,对改善碳酸有帮助.
我接过纱布,哽咽了一下,她的手很漂亮,指甲精心修过,手背面还有不小心用强酸烫出来的
一些伤痕.真想鼓起勇气去握住.但是我双手都拿着试管.只好用力捏捏试管,仿佛捏住了
她的手指.
她仿佛看出了我的想法,跟我谈谈的说,这次回去,我就不一定回来了.
我不知道她为什么这么说,傻呼呼地冒出一句,我会想你的.
师姐轻轻地带着些哭腔说,你想我干嘛?然后带门出去了.
我左手里拿的那些免疫亲和柱纯蛋白,顿时融化...... |
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发帖数: 1 | 9 具体办法是把grant一年25万全部拿来买培养基。然后在ebay卖掉,然后钱分了。 |
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f********n
发帖数: 6465 | 12 pertussis toxin (PTX，Ｇｉ蛋白的抑制剂)使用时为什么培养基中不能加ＦＢＳ？
谁给科普一下啊。 |
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s******s
发帖数: 13035 | 13 你用啥玩意发酵的？你有发酵罐？
跟培养基没啥关系，LB一样能长到OD15甚至更高，除非你的蛋白有啥毒性啥的 |
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h***n
发帖数: 1793 | 14 为什么在完全培养基中要加入putrescine呢？ |
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h**********r
发帖数: 671 | 15 辛辛苦苦地折腾了大半天，配trace soltuion,配stock,调pH。配完后放4c,一个月后发
现长毛了。请问如何应对？加点CH3CI?又怕太毒了。用之前要autoclave的。培养基是
养微生物的，也做转化实验。
多谢建议！ |
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s******y
发帖数: 28562 | 16 培养基不会无缘无故发霉的，一般只有两个原因：
１。消毒不严格； ２。瓶子没盖好
如果是１，那就加强高温消毒的过程，如果原来用20分钟消毒那么就加到30分钟
如果是２，那么就用更好的盖子，如果是用铝膜的话注意要用双层 |
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w*****1
发帖数: 121 | 18 最近我们正准备研发某动物血清细胞培养基的制备工艺，如果有如胎牛血清制备经验的
朋友可以与我联系，项目发展前景较大，相关部门提供大力支持。
我的邮箱：[email protected]
/* */ ，微信：xizhongzhu |
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b******n
发帖数: 4225 | 19 RP-HPLC
流动相是a gradient of 0–35% CH3CN (with 0.1% TFA) in water (with 0.1% TFA)
目的是检测medium中的我们感兴趣的物质被细菌利用的情况
我查了一下，MEM-alpha中磷酸二氢钠的浓度大概1 mM
这个medium我直接拿过来酸化之后用0.22um的filter过滤
能否直接上HPLC的柱子[Vydac C18 (22 x 250 mm) column]
会不会堵上？
请有经验的人，尤其是做过细胞培养基分析的人指点一下
谢谢啦 |
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v**********t
发帖数: 9 | 20 先附上猎头联系方式：qq3386366586，微信：futing2870
职位一：生物大分子发现总监（Phage Display）
岗位职责：
1. 负责构建人抗体的噬菌体展示库，利用展示技术进行新单克隆抗体序列的筛选、
鼠源抗体人源化、亲和力成熟以及抗体成药性的优化；
2. 负责除单克隆抗体外的其他新型结构抗体包括双特异抗体、单域抗体的噬菌体展
示筛选、优化；
3. 在创新生物大分子药物的研发过程中，协同其他专业团队，保证项目研发快速高
质量推进；
4. 协助调研临床疾病治疗需求，进行创新项目的选题立项；
5. 负责噬菌体展示实验室仪器设备、试剂耗材等的综合管理；理；
6. 负责相应团队的培训和建设、指挥与管理。
任职要求：
1. 学历要求：博士学历；
2. 专业要求：分子生物学、生物化学、免疫学等相关专业；
3. 工作经验：
1) 具有8年以上噬菌体展示技术开发生物大分子药物工作经验者；
2) 或具有5年以上国际大药企的噬菌体展示筛选部门成功... 阅读全帖 |
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G****a
发帖数: 10208 | 21 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: Clonetech (Clonetech), 信区: Biology
标 题: 故事人生______我的博后生涯
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Nov 18 15:39:43 2010, 美东)
按版主的要求，将零散的段落连在一起重发一次， 不好意思。
***********************************************************************
在我以往的科研生涯最困难的时候，曾在此版得到好心网友的指点。 怀着感恩的心写
下自己的一点切身经历，或许能给版上的兄弟姐妹点滴启迪。
(一 )
2007年 4月我完成博士论文答辩，7月1号高高兴兴地正式进入博后老板的实验室。 高
兴的原因有三： 1) 老板是领域大牛；2) 课题新颖前沿；3) 面试的经历让我觉得老板
能给我提供一个施展才华的平台。
我所承担的课题，老板原来的一个博后(法国人/代称 A)已经启动，分离了有特定遗传
性状的大量突变体，而且构建好了用来克隆基因的群体。所以老板给我交待工作的时候
还得意地... 阅读全帖 |
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C*******h
发帖数: 75 | 22 <三 >
圣诞节休假回来后，我着手克隆另外的三个基因， 在所里专门负责培养基制作的人员
处填写了订单。因苗量数目庞大，培养基自然也多，所以我把所有的培养基都统一放在
一个靠近我 BENCH的地方。因为第一个基因已经到手，工作大致走上了正轨，连夜加班
已经没有必要，正好也腾出些时间来阅读文献了。
2008年1月16号，在兄弟C的帮助下，我们俩用这批培养基上了总数10000颗幼苗进行特
定的抑制剂筛选重组单株。然而万万没有料到，24小时后，所有的苗无一幸免，全都死
亡。思忖了一会儿，回办公室把所有可能出现的问题都一一罗列出来。分析来分析去无
外乎两种可能：(1)抑制剂出了问题 & (2)培养基出了问题。在和专门负责培养基的技
术员讨论完后，感觉到培养基有问题的话，也该是到我手头后的事情。死亡的形态让我
推测有可能培养基的pH 值要么过高要么过低。于是把养苗的培养基回收测定pH，NND，
14！缺德啊，出离了愤怒，谁在我的培养基里加强碱了。虽然事实就摆在面前，可是对
于是谁干的，确没有确戳的证据。我只能打掉牙，把苦水往肚里咽。
在这里我内心真的被兄弟C所打动了。是你的衷心帮助，让我即刻走出了... 阅读全帖 |
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C*******h
发帖数: 75 | 23 按版主的要求，将零散的段落连在一起重发一次， 不好意思。
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在我以往的科研生涯最困难的时候，曾在此版得到好心网友的指点。 怀着感恩的心写
下自己的一点切身经历，或许能给版上的兄弟姐妹点滴启迪。
(一 )
2007年 4月我完成博士论文答辩，7月1号高高兴兴地正式进入博后老板的实验室。 高
兴的原因有三： 1) 老板是领域大牛；2) 课题新颖前沿；3) 面试的经历让我觉得老板
能给我提供一个施展才华的平台。
我所承担的课题，老板原来的一个博后(法国人/代称 A)已经启动，分离了有特定遗传
性状的大量突变体，而且构建好了用来克隆基因的群体。所以老板给我交待工作的时候
还得意地说了句 "WE HAVE A GOOD START" 。
A 从老板手下出来，有老板的鼎力支持，在老板所在的研究所于2007年6月成立了A自己
的研究小组，继续研究他在老板实验室的课题。
A本人的博士后(代称 B)和我各自从 A手上接手4个已构建好 MAPPING ... 阅读全帖 |
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C*******h
发帖数: 75 | 24 按版主的要求，将零散的段落连在一起重发一次， 不好意思。
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在我以往的科研生涯最困难的时候，曾在此版得到好心网友的指点。 怀着感恩的心写
下自己的一点切身经历，或许能给版上的兄弟姐妹点滴启迪。
(一 )
2007年 4月我完成博士论文答辩，7月1号高高兴兴地正式进入博后老板的实验室。 高
兴的原因有三： 1) 老板是领域大牛；2) 课题新颖前沿；3) 面试的经历让我觉得老板
能给我提供一个施展才华的平台。
我所承担的课题，老板原来的一个博后(法国人/代称 A)已经启动，分离了有特定遗传
性状的大量突变体，而且构建好了用来克隆基因的群体。所以老板给我交待工作的时候
还得意地说了句 "WE HAVE A GOOD START" 。
A 从老板手下出来，有老板的鼎力支持，在老板所在的研究所于2007年6月成立了A自己
的研究小组，继续研究他在老板实验室的课题。
A本人的博士后(代称 B)和我各自从 A手上接手4个已构建好 MAPPING ... 阅读全帖 |
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y***u
发帖数: 7039 | 25 柴卫东：不要注射被外国人插手过的诡异的麻疹疫苗！
http://www.wyzxsx.com/Article/Class4/201110/268207.html
不要注射被外国人插手过的诡异的麻疹疫苗！
一、令人震惊的消息——2011年麻疹疫苗再掀波澜，矛头直指育龄妇女
2011年，媒体披露，全国多个省市部署对大中专学校在校生进行麻疹疫苗注射。有
地方称，在2011年到2012年期间，将按照自愿免费原则，为所有20-35岁育龄妇女接种
一剂次麻疹风疹疫苗。
我国已经成功控制住的儿童疾病，为什么突然要大规模给成年人注射疫苗，且特别
针对育龄妇女？
政协委员何新先生评论说：“有必要指出，毒疫苗所内涵的恶果，其实有些是要在
许多年后才会逐步显现的，有些甚至是隔代显现的。而作为此次疫苗来源地的荷兰——
这是一个非常特殊的低调金融、石油和医药国家，这个国家不仅是上世纪５０年代神秘
的“比德伯格俱乐部”的发起国，自１８世纪以来也是被共济会最早控制的主要欧陆国
家之一。”
“愿卫生部高抬贵手，不要强制人们注射诡异的外国加工麻疹疫苗————让多灾... 阅读全帖 |
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w*********g
发帖数: 30882 | 26 柴卫东：不要注射被外国人插手过的诡异的疫苗！
| 作者：柴卫东
一、令人震惊的消息——2011年麻疹疫苗再掀波澜，矛头直指育龄妇女
2011年，媒体披露，全国多个省市部署对大中专学校在校生进行麻疹疫苗注射。有
地方称，在2011年到2012年期间，将按照自愿免费原则，为所有20-35岁育龄妇女接种
一剂次麻疹风疹疫苗。
我国已经成功控制住的儿童疾病，为什么突然要大规模给成年人注射疫苗，且特别
针对育龄妇女？
政协委员何新先生评论说：“有必要指出，毒疫苗所内涵的恶果，其实有些是要在
许多年后才会逐步显现的，有些甚至是隔代显现的。而作为此次疫苗来源地的荷兰——
这是一个非常特殊的低调金融、石油和医药国家，这个国家不仅是上世纪５０年代神秘
的“比德伯格俱乐部”的发起国，自１８世纪以来也是被共济会最早控制的主要欧陆国
家之一。”
“愿卫生部高抬贵手，不要强制人们注射诡异的外国加工麻疹疫苗————让多灾
多难的中国人在当今这个风云诡谲变幻莫测的世界上，多多少少留下几个健康人的种子
吧！
去年陈竺先生曾经就麻疹疫苗注射问题对我做出三点明确的说... 阅读全帖 |
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w*********g
发帖数: 30882 | 27 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: wayofflying (小破熊), 信区: Military
标 题: 不要注射被外国人插手过的诡异的疫苗！
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Nov 27 16:13:06 2011, 美东)
柴卫东：不要注射被外国人插手过的诡异的疫苗！
| 作者：柴卫东
一、令人震惊的消息——2011年麻疹疫苗再掀波澜，矛头直指育龄妇女
2011年，媒体披露，全国多个省市部署对大中专学校在校生进行麻疹疫苗注射。有
地方称，在2011年到2012年期间，将按照自愿免费原则，为所有20-35岁育龄妇女接种
一剂次麻疹风疹疫苗。
我国已经成功控制住的儿童疾病，为什么突然要大规模给成年人注射疫苗，且特别
针对育龄妇女？
政协委员何新先生评论说：“有必要指出，毒疫苗所内涵的恶果，其实有些是要在
许多年后才会逐步显现的，有些甚至是隔代显现的。而作为此次疫苗来源地的荷兰——
这是一个非常特殊的低调金融、石油和医药国家，这个国家不仅是上世纪５０年代神秘
的“比德伯格俱乐部”的发起国，自１８世纪以来也是被共... 阅读全帖 |
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S*****N
发帖数: 242 | 28 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: wayofflying (小破熊), 信区: Military
标 题: 不要注射被外国人插手过的诡异的疫苗！
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Nov 27 16:13:06 2011, 美东)
柴卫东：不要注射被外国人插手过的诡异的疫苗！
| 作者：柴卫东
一、令人震惊的消息——2011年麻疹疫苗再掀波澜，矛头直指育龄妇女
2011年，媒体披露，全国多个省市部署对大中专学校在校生进行麻疹疫苗注射。有
地方称，在2011年到2012年期间，将按照自愿免费原则，为所有20-35岁育龄妇女接种
一剂次麻疹风疹疫苗。
我国已经成功控制住的儿童疾病，为什么突然要大规模给成年人注射疫苗，且特别
针对育龄妇女？
政协委员何新先生评论说：“有必要指出，毒疫苗所内涵的恶果，其实有些是要在
许多年后才会逐步显现的，有些甚至是隔代显现的。而作为此次疫苗来源地的荷兰——
这是一个非常特殊的低调金融、石油和医药国家，这个国家不仅是上世纪５０年代神秘
的“比德伯格俱乐部”的发起国，自１８世纪以来也是被共... 阅读全帖 |
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f********s
发帖数: 115 | 29 你说的很多我都同意。只不过现在我想定量的的来分析一种特定的 progenitor （ex.
CMP） 分化到各个lineage 的能力。我觉得在把多个progenitor 接种到同一个盘子上
有几点非常影响我做定量分析：
1.你在挑集落的时候是可以看到集落的样子的，所以也许你会不自觉的多挑或者少挑某
些集落，引入bias;
2.在挑集落的时候，大的集落容易挑出来，小的集落不容易挑，即使挑了小集落在后续
实验过程中不知道怎么就不见了 (而且大小通常意味着不同的lineage)，也会严重影响
实验者的判断。
因此，我觉得一定要接种单细胞到96孔板里，在不看孔的情况下, 随机挑选比如说20个
孔来观察，这样可以得到各种百分比，比如说百分之多少的单细胞能形成集落，百分之
多少的细胞能形成红细胞集落，多少能形成粒细胞集落……不知道关于这一点你是否同
意？
在这个基础上，我想知道半固体和全液体培养基在这个实验里的优劣。我能想到的半固
体的坏处在于，1.如果你不看孔，不知道这个克隆在哪里，你就要把全部的200ul半固
体培养基吸出来，非常不利于cytospin. 2.而且半固体培养基会有一部分粘在t... 阅读全帖 |
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z******g
发帖数: 1331 | 30 健康元：地沟油是原料培养基 专家称不影响质量
2012年08月31日 09:29 已有38人阅读 字号：T | T 复制链接 打印
[财讯网]针对健康元用地沟油制药，健康元董事长表示，地沟油只是用来做培养基，出
产出来的产品完全合格。专家也表示：使用油酯类物质作为头孢菌的营养成分，不会对
7-ACA产品质量造成影响。
根据公安机关侦查，健康元全资子公司――河南焦作健康元生物制品有限公司涉嫌采购
地沟油制药，并用于生产制药原料7-ACA。根据公诉机关指控，2010年初至2011年7月，
河南惠康油脂有限公司及其关联企业与焦作健康元签订购销合同，共销售1.62万吨地沟
油，金额高达1.45亿元。
对此，健康元称地沟油只是培养基，用来作为食物提供给微生物，进而在一系列的工艺
下生产出7-ACA，并不是直接作为产品原料，不会影响产品的最终质量。健康元董事长
朱保国称，地沟油只是培养基，化工原料没有质量问题，如果不合格我们愿意承担任何
责任。
军事医学科学院毒物药物研究所药剂学研究室主任梅兴国撰文表示，7-ACA生产过程中
使用油酯类物质作为头孢菌的营养成分，生产过程中需要经过多次分离纯化处理，... 阅读全帖 |
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M*****3
发帖数: 259 | 31 生物学投入高产出低是目前短期内难以改变的现状，为什么要投这么多钱了？
感觉美国投资是要把整个产业链培养起来，虽然，真正投资到research上的钱，基本没
啥产出，但是这些钱除了人头费之外，都买了药品，试剂，并且这些药品试剂美国产的
居多，其实，NIH的钱间接的流入了美国的生物试剂公司，这些钱的稳定流入，保证了
这些美国公司有长期的订单，从而降低了产品成本，并且保证了生产线不被关闭，使美
国的公司更有竞争力。并且，生产生物试剂的这些公司，大部分应该属于生物以外的，
比如化工，机械等，这些行业是可以赚钱的。
我不是生物内行，做个可能不恰当的比喻，美国投资搞微生物，就要买培养基，培养基
大部分是美国公司产的，不管通过了那个大学的账户，这部分的经费最终流入了生产培
养基的公司。这样，美国政府就间接给了这批公司稳定的订单，而培养基的公司就可以
安心的搞技术改进而不用担心明年没订单了，这样这个公司就可以低成本的生产优质的
培养基，卖到全世界去。世界其他国家发现了一种很有用的微生物，那产业化也极有可
能在美国完成，因为只有在美国能方便的买到大量廉价的培养基。
中国投了很多经费，然后自己有生产不出培... 阅读全帖 |
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W*****B
发帖数: 4796 | 32 无公害的人粪尿发酵肥
人粪尿是富含氮素的速效有机肥，肥效良好，果蔬栽培应用广泛，有显著的增产效
果，但发酵方法不当可使氮素损失40%以上且污染无公害栽培的大气环境。科学的发酵
方法是保证肥效和无公害生产的首要技术。
1、新鲜的人粪尿放入发酵池，按3%的比例加入优质的过磷酸钙和少量的硫酸亚铁
（每100千克人粪尿加入0.5千克硫酸亚铁）。人粪尿中加入磷肥能使细菌繁殖力增强，
加快发酵速度，还能使人粪尿中易挥发的碳酸铵转化成磷酸铵，防止氮素的损失，而且
弥补了人粪尿中磷肥含量低的缺点。人粪尿硫酸亚铁，可使其中的碳酸铵转化成性质稳
定的硫酸铵，也能起到防止氮素损失的作用。人粪尿中的腐殖酸能使土壤减少对铁的固
定，充分发挥硫酸亚铁松暄土壤，预防缺铁性黄叶的作用。
2、加入加速发酵菌剂。
3、搅拌均匀后覆盖薄薄一层田园土。能阻挡发酵放出的氮素气体挥发进入空气中
，保证无公害果蔬生产的环境质量。
4、如果是早春，要在池上搭设竹弓子，铺上塑料棚膜，四边用土压严实，搭设小
拱棚可起到升温保温的作用，也是肥料快速发酵，完全发酵的关键技术之一。
... 阅读全帖 |
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a****a
发帖数: 26187 | 33 ☆─────────────────────────────────────☆
lonelycloud (floatingcloud) 于 (Tue Oct 18 12:29:31 2011, 美东) 提到:
唉，前些日子没事就开始捉摸着种植蘑菇，喜欢家乡的平菇，这里叫oyster mushroom
。以前在DC地区的大中华（Great Wall）经常见到，四块多钱一磅，觉得好贵，因为我
们老家很便宜，比青菜稍微贵点，现在老爸说也就2.5人民币一斤；搬到这里看到沃尔
玛更黑，一片要卖一块多，天哪，我要多少片我才能吃一顿，不过我也不能确定那是不
是oyster mushroom，因为就一片一个包装。那天转到附近的nursery 听到mushroom
compost，才激发自己探索种植蘑菇之路。
到网上找菌种，一看价钱放弃了，还不如直接买蘑菇吃呢？可还是不甘心，尤其上
次经刚刚点拨可以自己培养菌种，最近开始研究如何培养菌种。不过从蘑菇培养菌丝这
一步，因不能确认蘑菇，只能到网上购买grain spawn，然后繁殖。今天通过我免费拿
鸡粪的养鸡人找到了卖rye grain的店... 阅读全帖 |
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t*******n
发帖数: 446 | 34 我们实验室做表达一般是这样的：头天新鲜转化的平板，第二天早上挖下一堆克隆转到
100-200ml LB的培养基中37度摇到OD1.0，离心后转到新鲜配制过滤的N15标记的1升M9培养基中，37度摇到OD1.0后加IPTG诱导。
一直以来都很顺利，不过这一段时间出了怪事：M9培养基扩增的时候OD值升到0.5-0.6的时候就突然开始猛降，培养基也变得澄清，OD值降到大概0.1。如果接着摇OD值还能再升回来，摇过夜的话还能升到1.5左右。培养基中有很多白色絮状物，闻上去不像大肠杆菌的味。这个时候加IPTG诱导，有时能拿到自己的蛋白，有时候拿不到。
大家帮我看看是什么污染？ |
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f********s
发帖数: 115 | 35 想请教一个实验问题：有没有人尝试过用液体培养基加细胞因子来分化过细胞？
我想做这样一个实验，把MEP用FACS分选出来，然后在每一个96孔板的孔里面放一个细
胞。分化7天以后把这个孔里的细胞cytospin + staining， 然后看每个MEP都能分化成
什么种类的子细胞。用这个实验来比较wt 和mut 的区别。我看到一个protocol， 用
IMDM+ SCF，IL3, IL11, GM-SCF, FLT3-Ligand, TPＯ和EPO 来养细胞。我没有做过液
体培养基，一般用的都是methylcult medium,所以不知道液体培养基的效果好不好。有
没有有经验的人来说一说呢？
不知道在哪里看到说semi-solid的培养基比纯液体好，但是考虑到最后要cytospin,
semi-solid的培养基太粘了，洗一下的话又怕细胞丢失太多，因为本来一个细胞就分化
不出太多细胞。
多谢多谢！！ |
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s******y
发帖数: 28562 | 36 我没有做过血细胞分化啊，所以困惑的来问一下啊，
如果不加半固体培养基的话，乐意贴壁的细胞贴到培养板的底部不就完了么？
然后收集的时候先吸走液体，就把那种不贴壁的细胞移走了，然后再用trypsin
处理，不就把贴壁的细胞收集下来了么？
而且如果要直接在板上观测的话，多了那个半固体培养基反而麻烦，因为对焦
很麻烦的。
当然用半固体培养基的一个好处就是所有的细胞都不贴壁，可能在收集的时候比较
好办吧？但是如果不小心的话会把培养基什么的也收集下来，会很讨厌吧？
所以我奇怪的问一下，为什么一定要用这个半固体培养基啊？ |
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j****x
发帖数: 1704 | 37 关于这个问题，刚读研无聊的时候做过不是很严谨的比较，“结论”是和缺氧无关
当时的培养瓶盖还是老式的，不带filter需要自己拧开一个角度的那种，同时养的三种
细胞293/Huh7/Hela，用的invitrogen的普通DMEM培养基，不含hepes。有一次传细胞的
时候没留神盖子全部拧紧，结果第二天发现所有培养基全部变碱，293/Huh7贴壁出现严
重问题，漂浮大量“死细胞”，活细胞形态也非常差。但是Hela没有任何问题，一切正
常。拧开瓶盖之后不到24小时，多数“死细胞”重新贴壁，细胞形态恢复正常，培养基
颜色也回到正常pH范围。这时候我又把瓶盖拧紧，继续培养差不多48小时，所有细胞生
长一切如常，这时候由于细胞已经生长一段时间自然产酸，即便拧紧瓶盖，培养基也不
会变碱的过分。
我的“结论”是，某些细胞（293/Huh7）对培养基pH比较敏感，尤其是在悬浮后等待贴
壁的时候，而有些糙的比如Hela就不敏感，而缺不缺氧，大部分细胞不在乎，尤其是在
短时间内 |
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R****a
发帖数: 6858 | 38 这种武器用来对付印度、越南、印尼、日本这样人口众多、土地稀少的国家会非常好用
的。
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我国粮食作物病毒病研究的先驱――王鸣岐
2006-01-01 作者:王守正 查看评论 进入光明网BBS 手机看新闻
王鸣岐，植物病理、植物病毒学家。他首次发现粟黑粉菌异宗配合，并突破在人工
培养基上完成其生活史的技术。他是我国粮食作物病毒病研究的先驱
，对粮食作物病毒的鉴定、诊断和防治的研究上取得了许多开创性成果。晚年，他从事
病毒分子生物学和遗传工程的研究，许多成果达到国际先进水平。此外，对粮食安全贮
藏和粮食微生物学的研究，他也做出了一些重要贡献。
王鸣岐，又名凤岗，号济熙。１９０６年２月１７日出生于河南省滑县一个农民家
庭里。幼年常随家人下地耕耘。１９１３年进邻村蚕桑小学学习，毕业后，因家庭经济
困难回家务农，并在本村就读私塾。在此期间，经常聆听老师教导：读书要有益于天下
；学习要博学、审问、慎思、明辩、笃行。这些话他虽然不甚理解，但在幼小心灵中却
留下了深深的烙印。１９２... 阅读全帖 |
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w*********o
发帖数: 830 | 39 偶是一个刚开始工作的新人，最近碰上一件事向大家征求意见：
现在做的一个project跟同组的一个女同事（硕士，在这个部门工作3年了）合作，但是
这个同事做事情特别马虎，接连犯各
种各样的低级错误，归咎到底就是做事情不认真。给大家举个例子吧：我们是做细胞培
养的，有次她给细胞换培养基（培养
基就是给细胞提供吃的），结果这个大姐把旧的培养基从培养器中取走后，竟然把新的
培养基加到别的地方去了（用的是
24孔板，只用了两个孔养细胞，结果这个大姐就把培养基加错地方了，如果是学生物的
这样说比较好懂）。如果里面只有
细胞，你看错了好说，但是里面明显还有其他东西，即使个高度近视的人，只要看一眼
就知道啊。结果细胞被饿了至少4个
小时，直到我想重新看细胞才发现，但是已经晚了。这样低级的错误她在不到3个月的
时间里，不知道已经犯了多少次了，
我都会替她cover一下，并且已经照顾了大部分的细胞。
但是最近她养的一种细胞出问题了（不是第一次，以前我跟另外一个人替她补救过），
结果lab manager就知道了。今天她
跟lab manager聊了，然后lab manager来找我，问情况，我说了一点她的... 阅读全帖 |
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s****y
发帖数: 89 | 40
达到
溶液了
我试过在培养基快变黑前换溶液，换过溶液后一两天在下一次溶液颜色快变黑前我离心
细胞，会发现细胞颜色还是淡黄色的，也就是说只有等到培养基颜色变完全黑了（同时
细胞也死了很多了）这时我离心的话才会得到黑色细胞（可这些细胞都基本死了）。这
种情况正常吗？
您是说你们试验中在培养基变黑前离心会得到黑色细胞的吧。
培养基的颜色对我们不重要，重要的是要得到活的黑色的细胞。 |
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v***a
发帖数: 1242 | 41 是关于氯化镉（CdCl2）的溶解度问题，使用的药品纯度>99.99%。
我是在做细胞培养，需要把氯化镉添加到培养基中（终浓度3uM）。我的做法是先配置
一个3mM浓度的stock，再将stock以1:1000的比例稀释入细胞培养基中。
当我用水溶解氯化镉做3mM的stock时，氯化镉能全部溶解，溶液澄清透明，久置也不会
有沉淀产生。但如果用pH 7.4的培养基（DMEN/F12）来溶解，则氯化镉无法彻底溶解，
且放置不久就会有大量的沉淀产生（看起来比我加的氯化镉还多）。
标准做法是应该将氯化镉溶解到培养基中。
对此非常困惑。
恳请高手释疑。 |
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t*******y
发帖数: 21396 | 42 健康元用地沟油制药续：大量制成品已流入市场
昨日凌晨，焦作市政府发布公告称，网上报道“健康元采购掺杂地沟油在内的劣质成品
油制7-ACA”后，焦作市委、市政府非常重视，立即成立了一个由市直相关部门组成的
调查组进驻企业。目前，调查工作正在进行，待调查结果出来后，第一时间面向社会公
布。
4个调查组进驻企业调查
昨日，焦作市委宣传部新闻科工作人员表示，自8月30日获悉此事后，当日下午，已让
质监、工商、药监等部门组成4个调查组，进驻企业进行调查。由于此事专业性较强，
因此，虽然当前已经有一个初步的结论，但还需权威机构的认定。该人士表示，初步调
查结果很快就会以市政府公告的方式进行公开。查出是谁的问题，就由谁承担责任。
由于地沟油成分复杂，按照现有的技术，还无法知道里面到底含有哪些有害或致癌物。
为此，多名专家表示，对用地沟油代替豆油一事，风险不好评估。此前国家食品药品监
管局也发文表示，正组织专家评估豆油质量对头孢类抗生素药品质量安全的影响。
地沟油制成产品已流入市场
此前，全国首例特大地沟油案件开庭审理，牵出重磅内幕：焦作健康元在长达一年半的
时间里，连续采购1.45亿元地沟油，用于生... 阅读全帖 |
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f**e
发帖数: 3343 | 43 【 以下文字转载自 Joke 讨论区 】
发信人: biokold (kold), 信区: Joke
标 题: 转贴：《范博中Cell》， 苦逼千老写照 (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jun 24 00:35:12 2014, 美东)
发信人: dongHei200 (医学小子), 信区: Biology
标 题: 转贴：《范博中Cell》， 苦逼千老写照
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Jun 23 13:33:06 2014, 美东)
范博做完实验回office，实验室刚来的rotation student、一块搬砖的千老俱各欢喜。
正待烧锅做饭，只见他老板Dr. 胡，手里拿着一盒miniprep柱和一瓶培养基，走了进来
。范博向他作揖，坐下。Dr. 胡道：“我自倒运，把个博后位置给与你这现世宝 ，历
年以来，不知累了我多少。如今不知因我积了甚么德，带挈你中了个PLoS ONE ，我所
以带个培养基来贺你。”范博唯唯连声，叫rotation student把柱和培养基收起来，在
实验台边上坐着。Rotation student自和小本科生在细胞间换m... 阅读全帖 |
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l*********r
发帖数: 695 | 44 e.coli生命只有20分钟，那一天72代的数量后代数量是，4x10^21个个体。e.coli的质
量是9.5x10^-9g. 所以，72代后数量是4x10^13g, 4x10^10kg, 4*10^7吨， 4千万吨?
你肚子里的一个大肠杆菌有长这么快吗？
你说的e.coli只在营养丰富的培养基中，在对数生长期会长这么快，平时它哪有不停繁
殖？一毫升里有10^9个细菌，就不会长了。如果要你说的后代达到4x10^21个个体，那
培养基的体积会达到4x10^12毫升，也就是4x10^9升，也就是4x10^6立方米，也就是4百
万立方米的培养基，也就是一个边长160米的立方体。 |
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C*****N
发帖数: 301 | 45 年关将至，本来打算顺利的将手上的活儿都结束掉，可以安心过个节。
可是，老板却不是这样打算的，天天追着问结果。
新课题，需要摸索，进展不快也就算了。
谁知道，屋漏偏逢连夜雨。我这个老江湖竟然污染了培养基。培养基污染得也蹊跷，污
染物生长得很慢，过了几天才发现。难怪，这几天的试验结果都怪怪的。可是原因还需
要继续排查，除了培养基之外，似乎还有别的原因。几天的试验结果都白费了。
刚巧，最近在调整系统，试验结果与预想得不一样，也许是因为改了系统。如果，放在
平时，也不算件坏事，因为可能发现了些有趣的新东西。但是，在规定的时间内必须拿
到结果的情况下，可就笑不出来了。
就要放假了，很多部门都要放假了，订购试剂也不方便了。
唉，只能感叹一句，欲速则不达。做实验，就是要心静。
今天把系统调整至原状态，希望一切顺利。 |
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f**********r
发帖数: 18251 | 46 【 以下文字转载自 Joke 讨论区 】
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范博做完实验回office，实验室刚来的rotation student、一块搬砖的千老俱各欢喜。
正待烧锅做饭，只见他老板Dr. 胡，手里拿着一盒miniprep柱和一瓶培养基，走了进来
。范博向他作揖，坐下。Dr. 胡道：“我自倒运，把个博后位置给与你这现世宝 ，历
年以来，不知累了我多少。如今不知因我积了甚么德，带挈你中了个PLoS ONE ，我所
以带个培养基来贺你。”范博唯唯连声，叫rotation student把柱和培养基收起来，在
实验台边上坐着。Rotation student自和小本科生在细胞间换m... 阅读全帖 |
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f**********r
发帖数: 18251 | 47 【 以下文字转载自 Joke 讨论区 】
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范博做完实验回office，实验室刚来的rotation student、一块搬砖的千老俱各欢喜。
正待烧锅做饭，只见他老板Dr. 胡，手里拿着一盒miniprep柱和一瓶培养基，走了进来
。范博向他作揖，坐下。Dr. 胡道：“我自倒运，把个博后位置给与你这现世宝 ，历
年以来，不知累了我多少。如今不知因我积了甚么德，带挈你中了个PLoS ONE ，我所
以带个培养基来贺你。”范博唯唯连声，叫rotation student把柱和培养基收起来，在
实验台边上坐着。Rotation student自和小本科生在细胞间换m... 阅读全帖 |
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b*****d
发帖数: 7166 | 48 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
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发信站: BBS 未名空间站 (Mon Jun 23 13:33:06 2014, 美东)
范博做完实验回office，实验室刚来的rotation student、一块搬砖的千老俱各欢喜。
正待烧锅做饭，只见他老板Dr. 胡，手里拿着一盒miniprep柱和一瓶培养基，走了进来
。范博向他作揖，坐下。Dr. 胡道：“我自倒运，把个博后位置给与你这现世宝 ，历
年以来，不知累了我多少。如今不知因我积了甚么德，带挈你中了个PLoS ONE ，我所
以带个培养基来贺你。”范博唯唯连声，叫rotation student把柱和培养基收起来，在
实验台边上坐着。Rotation student自和小本科生在细胞间换medium。Dr. 胡又吩咐范
博道：“你如今既中了PLoS ONE，凡事要立起个体统来。比如我这行事里，都是些正经
有脸面的人，又是你的同事，你怎敢在我们跟前装大?若是实验室门口这些提质粒的，
养老鼠的，不过... 阅读全帖 |
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A**e
发帖数: 1388 | 49 培养的细胞，在高倍镜下发现小黑点，不多，但是仔细观察这些小点在动，同时培养基
没有混浊，细胞形态影响不大。
查了一下，好像是一种叫“黑胶虫”的东西，不知道英文名字是什么。说是国内实验室
感染这种东西的很多，所以想请教一下大家，你们在国外养细胞有没有遇到过这种东西？
这个东西到底存在不存在呢？英文是什么呢？遇到这种问题了，究竟该怎么处理？谢谢
下面是我在网上搜的：
“黑胶虫”是近十几年才发现的一种细胞污染物，“黑胶虫”的分类目前尚无鉴定确认。
“黑胶虫”可寄生于动物细胞，也可以生存于培养基中，依靠细胞和培养基中的营养为
生，并随细胞传代而传代。“黑胶虫”与细胞竞争性生长，开始时对细胞并没有什么影
响，但当黑胶虫的数量多到一定程度的时候， 细胞生长就会受到影响直至死亡，严重
影响了科研活动的开展和进行。所以“黑胶虫”的污染常在培养条件改变、细胞接种密
度降低、细胞状态不佳时显现并使实验中断，尤其在冻存细胞复苏时可造成大量细胞死
亡。
目前比较公认的观点认为“黑胶虫”是一种微生物，增殖缓慢但对细胞有损害，数量达
到一定程度可引起细胞死亡，其来源可能是细胞本身的污染或从动物取材时污染造成的
。 |
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m****m
发帖数: 395 | 50 膜蛋白难表达是很正常的事。
先把各种可能性一一排除，然后确定原因。各个击破。一次改变一个条件，一次解决一
个疑问。
关于测序的事，如果可以的话，还是想想办法做一下。
先从涂板开始，每个菌落小量摇菌，检测质粒的存在，还有生长活性。标记好有质粒的
菌，挑选最有活力的菌进一步做表达蛋白，有几个问题需要解决：OD生长到多少的时候
开始换培养基最好？（一般是对数生长期吧，不过自己也可以试一下在不同生长期）。
更换培养基后，多久以后开始诱导？（我一般是1个小时以后，不过你可能不同，要试
一下）。分几个不同的温度进行诱导（更换培养基后就用这个温度）、诱导多久后膜蛋
白表达量最高？（这个就要麻烦你要每隔一段时间取点菌去测一下有没有蛋白了）最后
决定最佳诱导温度和时间，还有你说的IPTG量的问题，也可以试一下，抗生素的浓度也
要控制好，太高菌就不长了，太低么要长杂菌。最后裂解细菌，看你用什么方法了，裂
解完离心后膜蛋白有可能在上清液里，也有可能在PELLET里。确定这个以后，就可以开
始纯化了。总之每个步骤都要严格监控，别把蛋白弄丢了。
小小建议呈上，希望对你有所帮助，祝你成功~ 实在不行，最后可以去做 |
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