由买买提看人间百态

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全部话题 - 话题: 多抗
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t***n
发帖数: 1494
1
这么说,感情上的问题,直人和拉拉半斤八两,没显著差异。这还不提,拉拉小群体,
在大世界中被稀释后,遇上同类概率上的劣势。 (除非你故意不承认这一点)。
而关于社会压力,社会现实就是拉拉的社会压力要比直人大。如果不大,就没那么多抗
议啥地。也不会大家都对同性婚姻的批准那么欢呼。 恩,除非你无视这一点。
然后,就在这些现实的基础上,给了还在感情路上犹疑的小朋友一些的建议。恩,这么
说吧,如果面对我的妹妹,好吧,我没亲妹妹,如果有的话,我就会告诉她,慎重,除
非找到同性爱人,除非无可接受异性感情,除非把同性爱当成了信仰,那么直人婚姻或
许不是很差的选择。 因为大多数人其实都是那么家人般过了一辈子。
-----请仔细看,我们谁都没承认直人婚姻稳定,只不过假如可以凑合的时候,或许直
人婚姻来的比较轻松,前提是可以接受异性婚姻。
-----再一句,同性爱,从来都不是信仰。只不过是遇上的爱人恰好是同为女人。
c********4
发帖数: 111
2
来自主题: LES版 - 太boring了,有人聊天吗
这么热的天气如果不让吃冰淇淋的话,生不如死呀
胖点没事,世界末日来了,还能多抗几天呢
r****y
发帖数: 26819
3
来自主题: Comic版 - 去电影院看了《起风了》
看来你懂日语,那么起风了是讲日本侵略的故事么?
指责恐怖袭击没有问题,指责恐怖袭击者不反省比较奇怪。前面说过了,反省是当事人
自发自愿做的一种事情,勉强不来,就好比一个人不爱你,指责管用么。。。
比如日本人不道歉,不反省,这不显然么,土共国家政府主动放弃官方赔偿,还说感谢
日本侵华,才有机会走出陕北咸鱼翻身。。。
反过来说,我们拍了那么多抗日神剧,人家拍不反省的动画,都是站在各自立场上的,
难道不是很正常么。
r****y
发帖数: 26819
4
来自主题: Comic版 - 去电影院看了《起风了》
看来你懂日语,那么起风了是讲日本侵略的故事么?
指责恐怖袭击没有问题,指责恐怖袭击者不反省比较奇怪。前面说过了,反省是当事人
自发自愿做的一种事情,勉强不来,就好比一个人不爱你,指责管用么。。。
比如日本人不道歉,不反省,这不显然么,土共国家政府主动放弃官方赔偿,还说感谢
日本侵华,才有机会走出陕北咸鱼翻身。。。
反过来说,我们拍了那么多抗日神剧,人家拍不反省的动画,都是站在各自立场上的,
难道不是很正常么。
w********g
发帖数: 805
5

虽然从小受到国内的爱国主义教育,看过很多抗日神剧,精神上被烙下了对日本的“仇
视”,但我不得不是日本的文化,有很多吸引我的地方。对于文化传承,我真的觉得我
们的民族文化真的是流失了!我在日本呆过两年,感觉日本的老人都很慈祥,日本的城
市也很美丽,有很多寺庙,能感受那种远离城市的。。。。艾玛,不敢说了,等等楼下
的愤青该骂我崇洋媚外,骂我汉奸了1
l*****d
发帖数: 7963
6
来自主题: Poetry版 - 有愿意参加诗词大赛的吗?
词部评委初评集合帖 001号——200号(非评委勿跟帖)
001
浣溪沙 夜
一柝更生许梦沈,参商隔却两知音。奈临水镜照桐琴。
无觅云槎汎弱水,但凭雁柱寄冰心。有风相和似君吟。
002
浣溪沙 寂寞空虚冷
欲拭缁尘看镜花,恨无君手饰簪斜。今年依旧去年嗟。
时节不堪开柳眼,侬心无奈系梅芽。偏生有雪又红遮。
003
山花子 寂寞空虚冷
骤雨黄昏落满庭,残枝摇曳舞秋声。无奈尘心随客远,任飘零。
燕去楼空波渺渺,烛红泪尽影茕茕。欲系愁丝无觅处,一更更。
004
眼儿媚 铁网中的玫瑰
娇艳芬芳暗香流,铁网锁温柔。 枝悬燕羽,刺伤蝶翅,无意成囚。
而今往事难重省,失误在红楼。 秦淮梦醒,京城义绝,万念皆休。
005
蝶恋花 感辛弃疾诱杀赖文正事
君著新词犹贵纸。更挽弓刀,跃马胡沙洗。婉以双安争并美,壮哉似煮长江水。
偶读平生疑一说。急就功名,胡作招降计。肯刈人头追白起,贩茶成贼教横死。
006
鹧鸪天 寂寞空虚冷
一袭青衫抵玉尘。心花开谢有余痕。清芬已付霜先劫,浊泪还浇劫后身。
教执手,却离分。三生... 阅读全帖
l*****d
发帖数: 7963
7
☆─────────────────────────────────────☆
ladyred (落红万点,好运名:小旺红) 于 (Sat Nov 12 17:59:42 2011, 美东) 提到:
国内二十几个大小诗词论坛、贴吧、诗社等联合举办2011年年终诗词大赛,不知有人愿
意参加否?特点是对诗词的格律要求很严格。
要求如下:
2011年岁末网络二十六坛诗词联赛方案实施细则
为弘扬诗词文化,交流创作技艺,由半生缘论坛茶韵发起,5460论坛跑堂总策划,
二十六个网络论坛、诗社与诗词群决定联合举办2011年岁末网络诗坛诗词联赛,并一致
认同本届联赛重在参与、交流和提高。秉承公平、公正、公开的原则,认定本联赛方案
实施细则。
一、联赛主题
1、主题:五个“一”;
A、一个字:“夜”;
B、一个词:“寂寞空虚冷”;
C、一句话:“是月(淳熙二年闰九月),辛弃疾诱赖文政杀之,茶寇平”;
D、一张图:
图片.jpg
E、一首歌:《那时候哥还小》;
2、要求:以上五个主题,参赛作者可以诗、词俱选或任选,数量不限。
(1)诗限平水韵五、七言绝句、律诗,接受排律。不接受古风,组诗... 阅读全帖
s****r
发帖数: 266
8
周小川曾经说过言不由衷的话,比如在股市已经一蹶不振之时,说中国股市已经调
整到位,总有忽悠人再入市嫌疑,但其说了一句大实话,也是实际,中国经济真正的发
展得易于外贸,权重可以达到百分之六十。尽管多年房地产在拉动经济,但还是一个内
量,更多体现在财富分配上。在全球经济一体化时代,外贸才是真正的开拓,当下世界
的所有争端包括战争在内,其核心都是扩充和保卫市场之战,表现在财富最终的分配上
,所以两个经济概念却是不一样的外延和内涵。
现实我们遇到的情况就是,房地产拉动已经到了极限,其边际效应急剧递减,甚至
理性看来已经到了公害的地步,正是这样当局由重新激发房地产活力已经到苦费煞心竭
力挽救房地产崩溃的命运,因为房地产已经拖死了金融,房价悬崖式跌落,金融必将崩
溃,引发一系列严重的社会后果,当权危机,所以现实房价不仅仅是一个经济元素,更
多是政治命脉。
而外贸长期徘徊在低端,技术并没有如期提升,恰恰由于公权过度倚重扶持房地产
,形成社会资本一边倒,进一步恶化其他行业,特别抑制了制造业的转型,故此总体讲
国内民营制造企业基础急剧弱化,除个别以外整体就没有什么竞争力,同时房地产垄断
暴利催生的社会不... 阅读全帖
x*a
发帖数: 4968
9
来自主题: TrustInJesus版 - 在信的人,凡事都能

既然反基们喜欢这里,就让他们牵扯进来,粘在这最好。
这里花费精力多了,跑到别处去“活动”的比例自然就少了。
既然弟兄你看是“毒”,那就牺牲我们几个替别处多抗抗毒呗。
当然,反基们若是不喜欢这里,那也不错,爱来不来。
我们就慢慢聊着。
x*a
发帖数: 4968
10
来自主题: TrustInJesus版 - 转载:从广告大战谈起
原文连接:http://www.oc.org/web/modules/smartsection/item.php?itemid=4697
真有上帝嗎?
——從“可能沒有上帝”的廣告運動思考起
文/臨風
2009年初,“英國人文主義協會”在副會長理察‧道金斯博士(Richard Dawkins
)的大力推動下,在全英國有大約800輛巴士上,掛上廣告:“既然很可能沒有上帝,
請你寬心地享受生活。”(There’s probably no God. Now stop worrying and
enjoy your life.)
巴士廣告大戰
這個廣告做得聰明的地方是,它用“意見”的方式表達,而不是鐵板釘釘地宣告,所以
得以通過審查的尺度。但是,審查局還是收到很多抗議。一位基督徒司機更是拒開這樣
的巴士。而且,他說:如果把“上帝”改成“阿拉”,全英國的穆斯林一定會起來暴動
!此話誠然。
仔細想想,這個廣告似乎在暗示人:既然沒有上帝,那麼就讓我們盡情享樂吧!這豈不
是在說,不信上帝的人都是自私的享樂主義者嗎?這當然不是廣告的原意,也不符合事
實。所以,我覺得這廣告雖然可以引起大家的好... 阅读全帖
q******r
发帖数: 6542
11
来自主题: PKU版 - 感冒发烧
不建议长期吃抗过敏药。一定要长期吃,最好几种药换着吃。以前我只是在很受不了的
时候才吃几片。(很多抗过敏药里有扑尔敏,吃完了瞌睡是正常的。)
现在过敏可能是季节的原因,花花草草的。可以出门带口罩,别往树丛里钻,尽量避免
接触过敏源。另外注意休息,多吃水果补充Vc。
喝花蜜针对性不一定强,不过对身体没坏处,可以喝着玩。
这个爆发和消失都没什么规律,不过既然今年有了,以后就小心些。
f**********r
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12
【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
发信人: fatblackliar (千里追铊, 正义与邪恶的较量), 信区: WaterWorld
标 题: 小伙因男友患艾滋赴院检查 得知感染号啕大哭ZZ
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Nov 29 23:42:30 2014, 美东)
文章来源: 燕赵都市报 于

原标题:查出艾滋病,小伙子号啕大哭
近年来,男男性接触感染艾滋病例比例逐年升高,其中青年学生感染增加。
如何实现向“零”艾滋迈进,还有艰难而漫长的路程。
他们绝望的哭声令人心碎
石家庄市疾病预防控制中心一楼,有一个艾滋病自愿咨询检测门诊,门口的牌子是“
健康咨询门诊”,每天要咨询检测几十人,来检测的人,个个脸上都堆满凝重。
咨询、检测都是免费的,如果有人发生过高危行为,觉得自己有可能感染艾滋病,都
可以来这里检测。另外,在各级医院以及各个社区卫生服务中心都可以提供艾滋病咨询
检测服务。石家庄市疾控中心的艾滋病咨询检测门诊,现在每年的检测人数已超过2000
人。
石家庄市疾病预防控制艾滋病防治所刘淑君所长已在这里工作了近30年,现在她还坐
诊,这是一... 阅读全帖
f**********r
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13
【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
发信人: fatblackliar (千里追铊, 正义与邪恶的较量), 信区: WaterWorld
标 题: 小伙因男友患艾滋赴院检查 得知感染号啕大哭ZZ
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Nov 29 23:42:30 2014, 美东)
文章来源: 燕赵都市报 于

原标题:查出艾滋病,小伙子号啕大哭
近年来,男男性接触感染艾滋病例比例逐年升高,其中青年学生感染增加。
如何实现向“零”艾滋迈进,还有艰难而漫长的路程。
他们绝望的哭声令人心碎
石家庄市疾病预防控制中心一楼,有一个艾滋病自愿咨询检测门诊,门口的牌子是“
健康咨询门诊”,每天要咨询检测几十人,来检测的人,个个脸上都堆满凝重。
咨询、检测都是免费的,如果有人发生过高危行为,觉得自己有可能感染艾滋病,都
可以来这里检测。另外,在各级医院以及各个社区卫生服务中心都可以提供艾滋病咨询
检测服务。石家庄市疾控中心的艾滋病咨询检测门诊,现在每年的检测人数已超过2000
人。
石家庄市疾病预防控制艾滋病防治所刘淑君所长已在这里工作了近30年,现在她还坐
诊,这是一... 阅读全帖
f**********r
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14
【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
发信人: fatblackliar (千里追铊, 正义与邪恶的较量), 信区: WaterWorld
标 题: 小伙因男友患艾滋赴院检查 得知感染号啕大哭ZZ
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文章来源: 燕赵都市报 于

原标题:查出艾滋病,小伙子号啕大哭
近年来,男男性接触感染艾滋病例比例逐年升高,其中青年学生感染增加。
如何实现向“零”艾滋迈进,还有艰难而漫长的路程。
他们绝望的哭声令人心碎
石家庄市疾病预防控制中心一楼,有一个艾滋病自愿咨询检测门诊,门口的牌子是“
健康咨询门诊”,每天要咨询检测几十人,来检测的人,个个脸上都堆满凝重。
咨询、检测都是免费的,如果有人发生过高危行为,觉得自己有可能感染艾滋病,都
可以来这里检测。另外,在各级医院以及各个社区卫生服务中心都可以提供艾滋病咨询
检测服务。石家庄市疾控中心的艾滋病咨询检测门诊,现在每年的检测人数已超过2000
人。
石家庄市疾病预防控制艾滋病防治所刘淑君所长已在这里工作了近30年,现在她还坐
诊,这是一... 阅读全帖
f**********r
发帖数: 18251
15
【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
发信人: fatblackliar (千里追铊, 正义与邪恶的较量), 信区: WaterWorld
标 题: 小伙因男友患艾滋赴院检查 得知感染号啕大哭ZZ
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Nov 29 23:42:30 2014, 美东)
文章来源: 燕赵都市报 于

原标题:查出艾滋病,小伙子号啕大哭
近年来,男男性接触感染艾滋病例比例逐年升高,其中青年学生感染增加。
如何实现向“零”艾滋迈进,还有艰难而漫长的路程。
他们绝望的哭声令人心碎
石家庄市疾病预防控制中心一楼,有一个艾滋病自愿咨询检测门诊,门口的牌子是“
健康咨询门诊”,每天要咨询检测几十人,来检测的人,个个脸上都堆满凝重。
咨询、检测都是免费的,如果有人发生过高危行为,觉得自己有可能感染艾滋病,都
可以来这里检测。另外,在各级医院以及各个社区卫生服务中心都可以提供艾滋病咨询
检测服务。石家庄市疾控中心的艾滋病咨询检测门诊,现在每年的检测人数已超过2000
人。
石家庄市疾病预防控制艾滋病防治所刘淑君所长已在这里工作了近30年,现在她还坐
诊,这是一... 阅读全帖
m**i
发帖数: 8296
16
嗯。。。毕竟不是笔记本哪。。。主要是炒出来的便携和时髦的概念。。。
那天看一人用个华硕的小本,合上也就平板大小,一个成年人多抗那几百克也是个办法
。。。
主要还是竞争还没白热化。。。完后还没有达到配置对得起价格的地步。。。
//blushing~``
s***t
发帖数: 13743
17
话说台式机也就多那么几千克,一个成年人多抗那几千克也是个办法。
l*b
发帖数: 4369
18
盘算买个netbook,一来晚上睡觉前抱着看看小说,二来放在客厅里放ppstream(VGA接
电视),三来出差的时候带着(我现在的t61p太沉了)。
由于考虑出差带着,打算买个轻薄的。我有个同学去年买了个u100,我觉着挺小的,跟
一本书差不多,掂着也挺轻的(据说2.3lb)。据说电池能抗3个小时,我估摸着也差不
多了。后来出的u120/u123好像越来越重,特别是电池越来越大,样子比较丑了。近来
听说asus出了1008ha,在网上看评价好像非常轻薄(据说2.23lb),样子也好看。电池似
乎比u100能多抗1个小时。电池不能换,不过大概电池废掉的时候电脑也该扔掉了吧。
现在u100比1008ha便宜100块的样子,想不好该出手哪个,或者是再等等打折?大家有
啥建议没?
【更新】刚刚注意到S10-2,好像也很轻薄啊,是不是身材和1008ha差不多啊?价格要便宜一点的样子,是不是也很不错啊?哎,不知道该咋选啦。。
r****o
发帖数: 105
19
来自主题: Biology版 - Re: help me with cyclin D1 western
做科学要讲究严谨和逻辑性。你这样问问题不明不白,什么
背景也没有,很难让人帮你分析。
先问你几个问题:
(1) 你的一抗是单抗还是多抗?
(2)你有无对照证明二抗没有坏?
(3)你的阳性对照( 100KD)是Whole Cell lysate 还是纯的Cyclin D1?
(4)你用的是何种封闭剂?non-fat dry milk?BSA? Gelatin?
(5)你有没有做较长时间exposure,确定另一个样品和对照根本没有
36KD的带?

建议你首先找一个非常肯定的阳性对照,用没坏的一抗二抗试一遍,
然后再做样品。
p****l
发帖数: 291
20
需要一个rabbit anti mouse b-actin 抗体做westernblot对照
对于哪个公司的更好没有任何idea
我目的蛋白抗体来自BD transduction laboratories
请帮忙推荐一个,谢谢!
此外,有人有用多抗unlabeled antibody做intracellular staining的么?比如检测
phospho-stat5.有经验的给一个protocol
最好了,感激不尽!
l*********s
发帖数: 5409
21
多抗一般不太可能。
e********r
发帖数: 147
22
细菌里有个测序后annotated的基因(编码一个还原酶),我们有RT-PCR的证据表明这
个基因不但有正义的mRNA转录,同时也有反义的非编码RNA转录,原以为应该是个作用
于自身的cis-encoded antisense RNA,很感兴趣打算继续分析下去。
用大肠杆菌表达了这个基因的产物(表达量那叫一个高),制备了抗体以后做Western
(多抗那叫一个好),呵呵,现在麻烦出来了:至少在我们目前的诱导条件和上样量(
15 μg总蛋白)下,在该细菌里一点都没检测到这个蛋白的表达。难到它是个假基因?
那转录正义和反义干啥?这个东西自已觉得很有趣,对于如何开展下一步,请大家帮忙
出出主意,谢了先!
W****C
发帖数: 1937
23
来自主题: Biology版 - help: crosslink co-immunoprecipitation
SCIENCE 2008 320(5882): 1496-1501
YASEMIN SANCAK et al.
The rag gtpases bind raptor and .....
浓度,时间(高了会使蛋白沉淀很多, 而且假阳性)要优化, 多抗比一抗好。
crosslinking很可能会大大降低单抗的亲和力
t*x
发帖数: 1065
24
我们实验室一直用兔子多抗anti-ubiquitin
可是最近要做ICC,跟另一个兔子抗体一起染,所以想要买个mouse来源的
请大家帮忙推荐一个好用的抗体,尤其是用在ICC比较好的(特异性强,背景低的)
刚才google了一下
IMGENEX, abcam,santa-cruz....很多公司都有,但不知哪个好
请用过的同学不吝赐教。。。
谢谢大家!!^_^
谢谢!
d******r
发帖数: 124
25
来自主题: Biology版 - 求推荐TurboGFP的抗体
我用了GFP的多抗,效果似乎很不好。非常暗。Evrogen有兔子的tGFP的抗体,但是我另
外两个抗体都是兔子的,所以不能用。有别的物种tGFP抗体吗?
v***a
发帖数: 1242
26
我在研究一个蛋白,它是一个跨膜蛋白,有胞外域和胞内域两个部分(见附图,在2楼
)。胞外域和胞内域在某种信号的介导下,会被一切两段,胞外域的那一段就会从细胞
表面上脱落,游离到体液(in vivo)或培养液(in vitro)中(不过也有可能掉回细
胞内出现在tissue/cell lysate中?);而胞内域的那一段(包括跨膜域)就残留在细
胞膜上。
最初做in vivo时,我买了两个单克隆抗体(当时还不知道这个蛋白会被一切两段),
它们都只能检测出tissue lysate中比预期的蛋白分子量要小好多的一条band(IB),
后来又买了两个多克隆抗体,可以检测出一条符合预期的band,以及那条上面的单抗可
以检测出的较短的band。然后又查了文献,猜测可能是由于胞内域和胞外域蛋白分离的
缘故。
两个单抗都是raised against此蛋白的胞外域,而两个多抗是against胞内域。但是不
清楚为什么单抗就检测不出full length的蛋白(现在想可能因为mAb无法识别full
length的conformation?大家觉得这个猜测对吗?)
现在开始做in vitro的细胞培养,
K**********e
发帖数: 188
27
来自主题: Biology版 - 最近WB中邪了
我最近几天遇到一个wb问题。别人做的一个多抗,在他手里,一抗1:500 二抗1: 10000
很干净,几乎没有非特异的带。在
我手里,同样的稀释比例,检测同样的细胞抽提物,无数条带,而且连marker都出来了
。我一抗稀释到1: 1000,1:2000还
是有很多非特异的带,主带区分不出来。二抗稀释到1:20000就没信号了。
我是没办法了。不知道为什么。百思不得其解。有什么建议吗?
怀疑自己手笨。别人用的好好的,到我手里怎么就不work。
incubation时间一样 一抗室温一小时 二抗半小时 洗得也一样啊 每个都是3个8分钟
牛奶封闭也一样 室温一小时百分之5牛

他那个抗体是ChIP级的 人家都用来做ChIP了 效果很好。在我手里这个德性 哭死
p*********g
发帖数: 9527
28
【 以下文字转载自 Joke 讨论区 】
发信人: cdlqin (cdlqin), 信区: Joke
标 题: 生物学男的一个梦(转自开心)
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Nov 12 09:00:09 2010, 美东)
房子不要很大,但是要一个很大的地下室,干什么用,待会儿再说。 大理石地砖,波
斯羊毛地毯,法国的桌子,意大利的椅子,此类物品一概杜绝,墙面,地面,桌面,全
采用PFA材料,耐酸耐碱耐高温易清扫,不用担心污渍,脏了,盐酸,烧碱,双氧水,
换着泼,刷完了,用自来水洗15遍,蒸馏水洗5遍,超纯水洗3遍。(当然是花钱雇人刷
,小姐我养细胞刷的瓶子表面积加起来都铺N 间房的地板了,看见国产玻璃细胞培养瓶
就感觉吃了一口臭鸭蛋。)
德国schott的试剂瓶,大中小买全套,500mL的拿来喝茶,2L的插花,100mL
以下的是佐料瓶,密封好,定量超准,还耐热冲击(这点是我最欣赏的,非常精准的工
艺。国产玻璃器皿,热冲击很容易就爆裂,拿去灭菌,十个有八个拿出来是碎的。)玻
璃的觉得重,还可以用硅化塑料的,防水不吸附,不用刷子也能洗干净。
... 阅读全帖
h******n
发帖数: 221
29
来自主题: Biology版 - 哪个公司做抗体比较好
现在有一个蛋白,不想表达,想根据序列用多肽免疫做多抗或单抗,哪个公司比较好?
T*********y
发帖数: 643
30
来自主题: Biology版 - 如何选取抗原片段制备抗体?
正研究的一个蛋白有1500多个氨基酸,实验室一个博后原来合成10几个氨基酸的多肽打
兔子,没有得到好的抗体。因为我们希望得到很好的抗体做immunostaining,所以对抗
体的要求比较高。我现在打算从中选取个200-300aa长的两个片段,分别克隆到表达载
体中,然后细菌中表达纯化蛋白,然后送给公司制备两个多抗。我现在的问题是,如何
选取适合的蛋白片段?我所知道的是:1)选取的片段尽量不要含有非常保守的结构域
;2)选取的片段亲水性高,暴露在蛋白的表面。请问还有哪些其它因素需要考虑的?
另外有没有免费好用的软件可以预测抗原决定簇(epitope)?有这方面经验的朋友出
来指导一下,谢谢。
j****x
发帖数: 1704
31
来自主题: Biology版 - 如何选取抗原片段制备抗体?
一般公司都可以提供rational antigen design的服务,从序列中特征性选取多肽片段
然后交联到BSA等载体蛋白上再制备单抗或多抗。如果目标蛋白是有三级结构信息的,
这种表位预测+多肽免疫的成功率很高,一般在70%-80%以上。即便没有高级结构信息,
有经验的设计分析人员也可以将成功率控制在50%左右,一般而言选取2-3条多肽序列就
能至少有一个能制备出不错的抗体。我们这里有core facility专门提供这种服务,这
个技术本身应该说很成熟了。
自己原核表达纯化蛋白的部分片段自然也是一个选择,以前大部分人都不纯化而只是切
胶直接免疫,取决于你要做什么样的staining了,要求抗体特异性好的,就不建议这么
做了,光做western的话还凑合。
h******1
发帖数: 384
32
你说得很对。还有很多抗虫,抗除草剂作物,其实比使用杀虫药的作物健康多了。反转
基因
的轮子们要是早出生30年,肯定也反对化肥和农家肥(细菌有害废物更多)。
r***e
发帖数: 2539
33
来自主题: Biology版 - P53 western 怎么总作不出来?
你这个FL393能用,要强一点可以试试vector lab 的一个多抗CM-5,死贵。
另外你有什么文献说TNFa能活化p53,麻烦告诉我一声。
m******5
发帖数: 1383
34
E10.5-E13.5
全鼠whole mount immune staining, 目的基因可能表达在成骨mesenchymal附近,用的
抗体是兔多抗HA的(knock in 的HA标记目的基因), 二抗想用绿色荧光二抗
z********i
发帖数: 610
35
来自主题: Biology版 - 寻一个好的 phosphoSerine 抗体
可以试试zymed的pSer(现在是invitrogene),purified的多抗,运气好的话能找到一
个好用的。我们买过好几只,其中有很好用的。
sigma的pSer是单抗,信号很弱可以用。
pY很好用,那是因为都是同一个单克隆细胞株,不同的公司名称可能不一样。
W*****o
发帖数: 1780
36
有道理。现在这么多抗药性的出现就是西方这种focus有效分子来使用导致的,大大加
快了病原抗性的出现,最终导致一种循环无解的局面。
和我们做农业昆虫的一样,以前就单一用杀虫剂,哪个毒性大,杀虫快用那个。过两年
不好用了,换一个毒性更大的,永远无解。昆虫抗性越来越强,反倒是把其他物种都给
毒死了。环境也污染了。现在就考虑很多方法来综合使用,延缓抗性,种植不同作物,
使用天敌什么的,甚至开辟一块refuge来保存没有抗性的害虫用来和有抗性的交配来延
缓抗性等等。总之就像中医一样,开始强调整体。而不再盯着一个局部。
而中医最强调的就是整体和平衡的思想。对于一块田地尚且考虑很多因素综合防治,对
于更复杂的人体,当然更要如此。不是说中医是多么正确,但至少这种整体的思想理论
是正确的。
b********h
发帖数: 348
37
再补充1小点。没包子也没关系,因为10块钱也太少了,看不上 :)
我的问题就是:我准备样品的时候,需要control/treated的动物的tissue一样重或者
100%取下来,最后的结果control/treated才可以比较吗?
::理论上应该取100%,但是因为常常细胞数太多,可以homogenize之后跑同样的
percentage。比如都跑总sample的10%
--这个不一定,只要是均质的组织细胞,取够染色的细胞量就够了。因为如下所述,最
终得出的是各个细胞所占的百分比。
****需要注意每个sample染色的时候ideally是1个million,细胞太多抗体量不够,BD
抗体一般是按着1微升/1million细胞/100微升体积里.
flow cytometry最后的那个结果,反映的是某种polulation的cell的分布百分比,这个概
念对吗?我们每次杀动物的时候,那个tissue都很100%难取下来,每只动物都只能取下
一部分。
::反应的是某种population 的百分比。尽量多取吧,如果tissue是均质的,你也可
以只取一部分,比如如果是肝脏细胞,但是如... 阅读全帖
g*********5
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用olink.com
duolink
http://www.youtube.com/embed/f_ZTI_A3FtI?rel=0&wmode=transparen
两种抗体,一种是你这个蛋白的单抗,
另外是你这个蛋白磷酸化抗体多抗。
两种抗体可以同时识别你的蛋白,
距离近,二抗靠在一起,这个kit就扩增,原理自己看视频。
h******u
发帖数: 602
39
来自主题: Biology版 - 免疫组化
泛泛的来说,做免疫组化是单抗(monoclonal)好还是多抗(polyclonal)好?谢谢了。
v***a
发帖数: 1242
40
来自主题: Biology版 - 免疫组化
多抗容易做得出来一些

d*****s
发帖数: 647
41
来自主题: Biology版 - 免疫组化
为了精确,单抗
为了阳性,多抗
实验目的决定实验方法

m*p
发帖数: 226
42
来自主题: Biology版 - 免疫组化
有的多抗也是specific.
r***e
发帖数: 2539
43
来自主题: Biology版 - 求推荐 mouse 的 p53 抗体
cm-5,多抗,只认老鼠的p53。
santa cruz fl-393,都认,但是人的强些。
c********r
发帖数: 189
44
来自主题: Biology版 - 如何区分杂带和不同isoform
在用多抗的时候通常有很多带,如何区分杂带和isoforms呢,或者是蛋白剪切的产物。
多谢
s******y
发帖数: 28562
45
Sigma 的monoclonal anti-PAN cadherin (cat# C1821) 还不错。
对VE-cadherin 肯定可以。我前几个星期刚在内皮细胞里试过。
注意要买这个单抗的。他们的那个多抗的质量太不稳定了,可把我坑苦了!
前一阵子还上来诉苦的。

IHC
s******y
发帖数: 28562
46
oh....那就没办法了。。。
Sigma 也有Rabbit anti PAN cadherin,但是是个多抗,每一批都不一样!
倒是每次都能做WB 是没有问题的,染经典的E-cadherin 也每批都行,
就是染N, VE 不是每批都行
z******5
发帖数: 30
47
多谢.目前是想做兔多抗。目的蛋白是人Exoc5。试了几个commercial的(抗原有多肽有
全蛋白),都不好用。
polymerase兄现在在哪家公司呢?

的。
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