s******n
发帖数: 37 | 1 “伯母，我请小安出去说几句话。”
“不用，不用，我出去买菜，你们在这里说，尽管说。”妈妈看着面前
这个一表人才的男人，很满意，尤其是他眼底的红丝和脸上的憔悴，说
明了他对小安的在乎，妈妈赶紧拿着钱包离开，还替他们反锁上门。
两个人，谁也没动，就这样隔着距离，少斌望着小安，小安低着头。
“你自己说，我是不是应该打你屁股，坏丫头。”少斌心里又酸又甜。
终于见到丫头了，可是她那么憔悴那么忧郁。“或者，我应该，应该狠
狠地吻你？”少斌汹涌的感情喷发出来。
小安的眼泪就不自觉地涌出来。他怎么会来的呢？他怎么会找到自己家
的地址的呢？他怎么会知道自己躲回家了呢？他。。他怎么不陪他的女
朋友就这样飞过来呢？
少斌大步走上前，一把就把小安紧紧地搂住，“丫头，你存心折磨我，
是不是？”
小安靠在少斌的胸前，泪水已经打湿了少斌的胸口，她缓缓的摇头，无
声的说，不是，不是，我不是要折磨你，我只是不要你，因为我要不起
一个完整的你，我又不能不爱你。
小安抬起头，止住泪水，从少斌的怀里挣扎出来，
“不要，我们不能在一起。”
“你说什么？”少斌不相信自己的耳朵，他的不解和怒气一点一点的积
累“我们为什么不能在一起 |
|
b*********k
发帖数: 35031 | 2 【 以下文字转载自 LeisureTime 讨论区 】
发信人: bos (Bart), 信区: LeisureTime
标 题: 关于自己出版电子书
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jan 15 10:35:03 2013, 美东)
自己出版电子书的几个连接
看见夏安出版电子书的故事，提到关于什么支付宝的问题。想指出一下，其实如果在美
国的的话，可以有一些更加方便的办法。
一个就是smashword:
http://www.smashwords.com/about/how_to_publish_on_smashwords
根据他们的网站：
Smashwords Distributes your ebook to the Apple iBookstore, Barnes & Noble,
Sony Reader Store, Kobo, the Diesel eBook Store, Baker & Taylor's Blio and
Axis360 (libraries!) and more
Earn 60% of List Price from Major Ebook R... 阅读全帖 |
|
b*********k
发帖数: 35031 | 3 【 以下文字转载自 LeisureTime 讨论区 】
发信人: bos (Bart), 信区: LeisureTime
标 题: 关于自己出版电子书
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jan 15 10:35:03 2013, 美东)
自己出版电子书的几个连接
看见夏安出版电子书的故事，提到关于什么支付宝的问题。想指出一下，其实如果在美
国的的话，可以有一些更加方便的办法。
一个就是smashword:
http://www.smashwords.com/about/how_to_publish_on_smashwords
根据他们的网站：
Smashwords Distributes your ebook to the Apple iBookstore, Barnes & Noble,
Sony Reader Store, Kobo, the Diesel eBook Store, Baker & Taylor's Blio and
Axis360 (libraries!) and more
Earn 60% of List Price from Major Ebook R... 阅读全帖 |
|
发帖数: 1 | 4 知乎上看到一个问题，说出了我多年来看三国的一个疑问：
看到一句话：“20岁看三国觉得曹操最厉害，40岁看三国觉得司马懿最厉害，60岁
看三国觉得刘备最厉害。”
20岁觉得曹操厉害我能理解，挟天子令诸侯，拥军百万征战天下，风头无尽。40岁
觉得司马懿厉害也能理解，隐忍善谋笑到了最后，天下归了司马家。60岁看刘备最厉害
？这个，没能理解，刘备有人望所归，有能臣名将，但最后国灭，身边的朋友将领也都
没能保住，从用人和留人心上说确实厉害，但怎么说也不能达到比曹操和司马懿强达到
“最厉害”这个评价吧？
对比其他一流人物，刘备的家庭只给了刘备一个天子姓和门口那棵长相奇特的大树
。又是单亲，和母亲相依为命卖草鞋为生。出身一无所有。
但是，他从开始就以取天下为目标，遇到什么挫折，在多么难的境遇下都没有变过
初心。
半生戎马奔波，年到半百，还寄人篱下，寸土未有。在刘表的荆州痛哭自己年华已
逝，脆弱的像个孩子。但是擦干泪，我们看到他对目标的坚持毫不动摇。
就好像他早知道自己生前绝对能成功一样。
他用超一流的努力和坚持，硬生生改变了自己不入流的... 阅读全帖 |
|
k*****a
发帖数: 7110 | 5 第二卷 沙漠篇 第四十一节 矮人巫师
绕过几个街道，琼恩终于来到集市，先去找了家服装店，结果出现语言交流问题，因为
他的通用语毕竟初学不久，并不纯熟，很多单词都不会，而那个女矮人老板比他更差劲
，通用语说得结结巴巴辞不达意，不时冒出几句矮人语来。两人鬼扯了半天，连蒙带猜
加比划，最终琼恩也没表达清楚自己的意思。女矮人猜测着他的意思，给他拿来几件长
袍，但都不是巫师袍，根本不合要求。弄到最后，大概是有点恼火了，那个女矮人老板
伸出圆滚滚的手，啪地往桌子上一拍，满脸横肉抖动，叽里呱啦冲出一连串矮人语来，
虽然琼恩听不懂，看表情也知道是骂人的话。
所谓好男不和女斗，何况身在对方的主场，琼恩自然不打算奋起反抗，他匆匆落荒而逃
，将刺耳的骂声抛在背后。等逃出百步之外，总算听不见对方的骂声了，琼恩停下脚步
，皱眉开始思索。
这事情可有点难办，自己的通用语还不成，和梅菲斯在一起的时候无所谓，大家都是人
类，而且女圣武士非常聪明，相互理解自然没有障碍。和这些矮人打交道，对于彼此来
说通用语都是一门外语，这就很头疼了。
早知道这样，应该把梅菲斯带出来才是。
他又试着进了一家服装店，这次撞上个男矮人老板，... 阅读全帖 |
|
k*****a
发帖数: 7110 | 6 第二卷 沙漠篇 第四十一节 矮人巫师
绕过几个街道，琼恩终于来到集市，先去找了家服装店，结果出现语言交流问题，因为
他的通用语毕竟初学不久，并不纯熟，很多单词都不会，而那个女矮人老板比他更差劲
，通用语说得结结巴巴辞不达意，不时冒出几句矮人语来。两人鬼扯了半天，连蒙带猜
加比划，最终琼恩也没表达清楚自己的意思。女矮人猜测着他的意思，给他拿来几件长
袍，但都不是巫师袍，根本不合要求。弄到最后，大概是有点恼火了，那个女矮人老板
伸出圆滚滚的手，啪地往桌子上一拍，满脸横肉抖动，叽里呱啦冲出一连串矮人语来，
虽然琼恩听不懂，看表情也知道是骂人的话。
所谓好男不和女斗，何况身在对方的主场，琼恩自然不打算奋起反抗，他匆匆落荒而逃
，将刺耳的骂声抛在背后。等逃出百步之外，总算听不见对方的骂声了，琼恩停下脚步
，皱眉开始思索。
这事情可有点难办，自己的通用语还不成，和梅菲斯在一起的时候无所谓，大家都是人
类，而且女圣武士非常聪明，相互理解自然没有障碍。和这些矮人打交道，对于彼此来
说通用语都是一门外语，这就很头疼了。
早知道这样，应该把梅菲斯带出来才是。
他又试着进了一家服装店，这次撞上个男矮人老板，... 阅读全帖 |
|
U***5
发帖数: 2796 | 7 第二十一章 诡秘的松林
破坏与建设这两个词看似相对，其实又可以说相辅相成。比如不破坏少女的贞操，
又怎么能建设出新生的小孩，又比如不破坏旧社会，那能建设新〖中〗国……扯远了，
莫谈国事，罪过罪过。
话说当年萨鲁曼分身在这恐怖的冰峰上开凿不成，便下令半兽人们从远处取雪，就
近烧水，尽快的使得水在运输的时候还没有结冰的时候，就达到目的地，再将之浇注在
山上使之凝结成冰层，进而形成通向山巅的道路。
这样做虽然耗费极大，冻死冻伤的半兽人无数，但工作量最大的无非是运输柴火上
去，顺带搭建避风灶，至于雪huā随处都是，总要好过一点一点的在冰峰之上活生生的
啃出一条道路来。
然而这种筑路的方法也埋下了莫大的隐患，那就是后来浇筑出的冰层路基显然会脆
弱许多，根本无法与冰峰的主体那凝固了千年万年的材质相提并论，甚至可以说相当的
脆弱。
平时就算是没有使用这条盘山而上的道路，也会有半兽人时时在上面扫除雪huā，
清除滚落的岩石，避免塌方。而此时千万吨的冰雪轰然滚过”若巨瀑宣泄而下，在下方
冲激起千丈雪尘，雷鸣般的轰隆声响彻天际，深深的注入下方的深壑。
那条盘... 阅读全帖 |
|
U***5
发帖数: 2796 | 8 第七十四章 黄金支线的真相！
梦魇空间:《最终进化》
这时候方森岩起身敬酒的时候，忽然看到了一件东西，眼神顿时一紧。
这东西是一根大概碗口粗细的木棒，竖直的插在地上，木棒长约三四米，其表面看
起来晶光闪亮，既像是涂抹上了一层树脂，又像是长年累月被很多人摩挲过似的。
竖立的木棒在奥玛蒂卡亚族部族当中相当常见，但是这木棒上面插着的东西，却是
相当罕见，在整个部族当中甚至可以说是独一无二！
这东西是一个头颅，尽管看起来干瘪皱缩，但体积还是庞大若一个成年人，凶恶狰
狞，尽管应该是经过了防腐处理似乎被风干透了，但那黄色红色的警告条纹色依然是鲜
明无比，呼之欲出！
这个东西方森岩看起来十分眼熟，此时团队的储藏空间当中就有一具现成的，正是
那霸王魅影飞龙的头骨！［梦魇空间 www.mengyankongjian.com］而在奥玛蒂卡亚族部
族当中，插着霸王魅影飞龙头骨的那木桩下面的地头，就有点类似于皇帝的宝座。都是
由奥玛蒂卡亚族的族长恩图坎和祭祀莫亚坐在下面。其余的人是没有一个敢去染指那禁
脔之地的。
目睹了这幅场景，方森岩心中一动，却也并不马上张口询问，而是继续热情劝酒，
没过一会儿又有几名族人... 阅读全帖 |
|
A*******s
发帖数: 8645 | 9 【 以下文字转载自 Seattle 讨论区 】
发信人: LeftEye (左眼观心), 信区: Seattle
标 题: 刘备上《非诚勿扰》---- 大結局：牽手
发信站: BBS 未名空间站 (Mon May 24 02:30:52 2010, 美东)
劉備：我選“是否願意和我的兄弟同席吃飯，同床就寢？”
孟非：讓我們來看三位男生的答案是什麽。。。曹操的答案是：和紅臉的就願意，和黑
臉的就不不願意；孫權的答案是：只要是英雄，都願意；孔明的答案是：不願意，因為
別人吃飯吧唧嘴會讓我煩，睡覺打呼嚕會影響我做春夢。。。
孟非：好，你還可以向三個男生提出一個你最關心的問題。
劉備：嗯，我想問的是：汉室倾颓，奸臣窃命，主上蒙尘。孤不度德量力，欲信大义于
天下；而智术浅短，遂用猖獗，至于今日。然志犹未已，君谓计将安出？
孟非：誰先回答？
劉備：從左到右吧。。。
曹操：從董卓篡政開始，我曹操就開始和一切反大漢政權的反動勢力做堅決的鬥爭，是
我組織了十八路諸侯討伐董卓，后因為各路諸侯各懷鬼胎，相互火拼，討伐董卓失敗。
但是我重整旗鼓，屢敗屢戰，終於到了今天能夠“奉天子而令不臣”，我和天子現在就 |
|
R*o
发帖数: 3781 | 10 一) 千禧年的認識
「千禧年」，的很多聖經學者探討的題目，究竟「千禧年」是指什麼，讓我們從啟示錄
及聖經認識「千禧年」。
１)千禧年的名稱
在聖經裏「千禧年」，還有不同描述生動的名稱，例如天國（太６：１０），神的國（
路１９：１１），主基督的國（啟１１：５）復興的時候（太１９：１０），萬物復興
的時候（徒３：１８－２４），安舒的日子（徒３－１９），日期滿足的時候（弗１：
１０），和將來的世界（來２：５）綜合來看，都是指耶穌基督（或彌賽亞）將要返來
管治的國度與時候。
２)千禧年的實質性
a)實質的「千禧年」國度
有人指啟２０章所講的１千年只是象徵數字，指代表一段很長時間，無千禧年派更指這
是象徵主兩次回來之間這段長時間，即現在，因基督已在信徒，教會時代的基督徒心中
掌權，但我們留意上下文，卻沒理由支持是象徵時間，因為２０：１－７共提及「１千
年」６次之多，多次強調而且接說明，不作任何解釋（如是象徵，為何提６次仍不解釋
其意）．，明顯若按字義解經原則，是指實質的「１千年」國度了！
b)實質的「有土地」之國
這國度是實實質質建立在地上，不是單在心上、靈裏的國度。以下經文明証：
啟２０：３「... 阅读全帖 |
|
R*o
发帖数: 3781 | 11 一) 千禧年的認識
「千禧年」，的很多聖經學者探討的題目，究竟「千禧年」是指什麼，讓我們從啟示錄
及聖經認識「千禧年」。
１)千禧年的名稱
在聖經裏「千禧年」，還有不同描述生動的名稱，例如天國（太６：１０），神的國（
路１９：１１），主基督的國（啟１１：５）復興的時候（太１９：１０），萬物復興
的時候（徒３：１８－２４），安舒的日子（徒３－１９），日期滿足的時候（弗１：
１０），和將來的世界（來２：５）綜合來看，都是指耶穌基督（或彌賽亞）將要返來
管治的國度與時候。
２)千禧年的實質性
a)實質的「千禧年」國度
有人指啟２０章所講的１千年只是象徵數字，指代表一段很長時間，無千禧年派更指這
是象徵主兩次回來之間這段長時間，即現在，因基督已在信徒，教會時代的基督徒心中
掌權，但我們留意上下文，卻沒理由支持是象徵時間，因為２０：１－７共提及「１千
年」６次之多，多次強調而且接說明，不作任何解釋（如是象徵，為何提６次仍不解釋
其意）．，明顯若按字義解經原則，是指實質的「１千年」國度了！
b)實質的「有土地」之國
這國度是實實質質建立在地上，不是單在心上、靈裏的國度。以下經文明証：
啟２０：３「... 阅读全帖 |
|
|
w*****r
发帖数: 7106 | 13 初刻拍案惊奇
卷之六 酒下酒赵尼媪迷花 机中机贾秀才报怨
诗曰：
色中饿鬼是僧家，尼扮繇来不较差。
况是能通闺阁内，但教着手便勾叉。
话说三姑六婆，最是人家不可与他往来出入。盖是此辈功夫又闲，心计又巧，亦且走过
干家万户，见识又多，路数又熟，不要说那些不正气的妇女，十个着了九个儿，就是一些针
缝也没有的，他会千方百计弄出机关，智赛良、平，辨同何、贾，无事诱出有事来。所以宦
户人家有正经的，往往大张告示，不许出入。其间一种最狠的，又是尼姑。他借着佛天为
由，庵院为囤，可以引得内眷来烧香，可以引得子弟来游耍。见男人问讯称呼，礼数毫不异
僧家，接对无妨。到内室念佛看经，体格终须是妇女，交搭更便。从来马泊六、撮合山，十
桩事到有九桩是尼姑做成、尼庵私会的。
只说唐时有个妇人狄氏，家世显宦，其夫也是个大官，称为夫人。夫人生得明艳绝世，
名动京师。京师中公侯戚里人家妇女，争宠相骂的，动不动便道：“你自逞标致，好歹到不
得狄夫人，乃敢欺凌我！”美名一时无比，却又资性贞淑，言笑不苟，极是一个有... 阅读全帖 |
|
B***o
发帖数: 133 | 14 观音灵感录续编
菩萨戒弟子惕园毛凌云敬述
第一章 绪言
第二章 救刀兵劫
第三章 救灾祸难
第四章 救疾病苦
第五章 救产婴苦
第六章 善恶劝惩
第七章 示现接引
第八章 结劝流通
第九章 礼念方法
第一章 绪言
第一节 略叙圣迹
观世音菩萨是古佛再来，在无量劫前早已成佛，号正法明如来，故称观音古佛。但以度
生念切，救苦心殷，不离寂光，倒驾慈航，为西方极乐世界阿弥陀佛之左辅，又为娑婆
世界释迦世尊之良弼，遍十方微尘国土，度二乘六道众生，共生极乐。应以何身得度者
，即现何身而为说法，虽常现佛身，而复普现菩萨、缘觉、声闻、及人、天、修罗、畜
生、饿鬼、地狱等九法界身；即山河道路，桥梁船筏，药草树木，楼台房舍，墙壁村落
等，亦随机化现，以施无畏，而垂济度。世人据迹而论，只云菩萨或大士而已。尤对我
等娑婆世界，因缘甚深，昼夜六时，常以大悲眼，观照世间一切众生，求救苦难、或求
赐福利、而称名之音声，即施护祐，拔苦与乐，故名观世音，简称观音。又名观自在，
谓自利利人皆能得大自在也。菩萨、简称也，音译具名为菩提萨埵；义译旧为大道心众
生，新译曰觉有情，又译大士。释为：菩者、觉也、度也，萨者、有情... 阅读全帖 |
|
z**********e
发帖数: 22064 | 15 http://www.ycwb.com/ePaper/ycwb/html/2014-04/30/content_432818.
本期登场：《耶路撒冷》 十月文艺出版社 徐则臣 著
北大博士初平阳为了筹集求学耶路撒冷的费用，回故乡典卖旧居，接连与几位儿时
伙伴相遇。他们各自的人生境遇、理想追求和对往昔生活的回顾，映照出一代人的成长
，也提供了当代中国从乡村走向城市、再走向世界的转型时代的多个侧面。
车过运河桥，铜钱还在路边走。这次是往回走。杨杰停下，初平阳从车窗里问铜钱
，要不要捎他回西大街。铜钱摆摆手又摇摇头，“我不回！不回，平阳。”他说，“警
察来抓人啦！车很大，那么大，我就藏起来了。我趴在青草上，他们没看到我！”他的
衣服前襟和裤子的膝盖上沾了泥水，真趴过了。
“真不回？”杨杰问。
“不回。”铜钱说，又摆手又摇头。
初平阳说：“走吧。铜钱纠结着呢，想走远不敢，让他老老实实待着又不甘。被雷
吓怕了。”车继续往前走，初平阳在后视镜里看见铜钱转了个身，开始往北走。走到临
近他恐惧底线的距离时，他再走回来。如此反复，很可能从此贯穿他的后半生。
被雷电吓怕了的铜钱肯定让杨杰想起了天赐。两人... 阅读全帖 |
|
|
w***n
发帖数: 4358 | 17 ☆─────────────────────────────────────☆
judien (judien) 于 (Mon Jul 4 13:51:06 2011, 美东) 提到:
湖北果然武汉一市独大
☆─────────────────────────────────────☆
aiyoaiyo (上班就是打酱油) 于 (Mon Jul 4 21:56:39 2011, 美东) 提到:
这里也很多宜昌襄樊的呀
☆─────────────────────────────────────☆
ie (江城晃晃) 于 (Mon Jul 4 23:08:48 2011, 美东) 提到:
神农架的野人表示压力不大。
☆─────────────────────────────────────☆
vanBasten9 (仙4……仙1之后好久没为游戏感动过了……) 于 (Tue Jul 5 13:09:26 2011, 美东) 提到:
这个问题你去买买提的纽约版看看，那儿也早成了city专版，问关于别处的问题都没得
搭理的，精华区也只有关于NY... 阅读全帖 |
|
|
|
|
wh
发帖数: 141625 | 21 还有虾米电台！最开始是别人推荐我去听星座电台，说很准，放出来的都是你喜欢的歌
。后来又听怀旧电台，各个年代的都有。真是不错。 |
|
|
|
w********2
发帖数: 16371 | 24 如果你买server 档的，就会有些份量，但放行李里，不显重。
我曾经有一次在饭店呆几天，当时我把一小箱子的装备安出来，我要不在的时候，
酒店的服务员打扫的时候都跑过来围观。。 一个小corner基本上是8个屏幕，n 个cpu
的lab 了。
立起 |
|
|
k***g
发帖数: 7244 | 26 windows vista 我是从 beta2 开始装的 beta2 的版本号是 5383 ，然后 pre-RC1 是
5536 （幸好有写blog的习惯，这些都记下来了），RC1 和 RC2的版本号忘记了，不过我
用的最后一个测试版就应该是 RC2 吧，之后好像没有再升过级。
有可能是序列号的问题，但是光盘上写的是 Windows Vista Business Express Upgrad
e，刚看到这个名称我还以为只能在联想的机器上升级呢，结果发现不是，fresh insta
ll也可以。
回头找个Ultimate的序列号试试看，看看能不能安出Ultimate来。 |
|
t**********n
发帖数: 283 | 27 谢谢分享！一路走来，不容易。
有两个问题：
一是楼主早期来美国的，参照系是国内890年代，容易满足。现在中国高速发展，大有
赶超美国的势头，像楼主背景似乎还不错，在这边就这样混日子是否心理平衡？？
为了孩子？？这个理由听起来不够充分。再说，等孩子长大时，到时到底是美国还是中
国好过还是个两说的事情。
二是看美国目前的发展趋势，像偶们稍年轻一辈就这样混吃等死（不好意思，说习惯了
）十年之后可能就混不下去了（离退休还远），这里楼主也提到可能要撤但是退休没到
。到时怎么办？
计将安出？ |
|
e********r
发帖数: 147 | 28 我现在手里有1个含有PDZ domain的蛋白酶，参与信号转导，但不知道它的底物。我在
想能否用比较蛋白质组学的方法，用WT做负对照，用蛋白酶点突变失活的重组突变体做
样品，通过CoIP加MS来分析可能的底物。但据说这种方法可能拿到太多的假阳性，对后
面的功能验证挑战性很大，请问各位亲，还有木有更靠谱的筛选－鉴定策略，计将安出
？ |
|
e********r
发帖数: 147 | 29 实验室用BL21(DE3)和PET系列的蛋白表达载体差不多有10年，一直都没啥问题。
可最近出现了噬菌体严重污染，蛋白表达菌株经常性的摇不起来，我们已经用了很多方
法，包括各种清洁措施、84消毒、实验室每天紫外长时间灭菌、污染区域高温处理、甲
醛熏、以及换Rosseta菌株等等，但还是控制不住。
请问有经验的朋友们，这可肿么办？ |
|
J****T
发帖数: 20 | 30 重要的实验交给其他lab或者公司做，然后再自己lab慢慢想办法 |
|
l********8
发帖数: 197 | 31 我和楼主遇到过类似问题，谈谈的当时查到和询问到的方法
1.确认是否是噬菌体污染
其实有时候，如果加入的抗生素或者IPTG等，本身有毒性，就会使细胞裂解死亡。比如
我使用了当时来我们实验室推销的新牌子的抗生素，当我换回原来的抗生素后，就没有
任何裂解的现象的。还有噬菌斑的实验可以帮你确认，是否真的有噬菌体污染。
2.如果真的污染了你重要的菌株，简单的去除噬菌体的方法是，把细菌划线到平板上，
挑取单克隆，然后再划线，如此重复多次。得到的单克隆基本是没有噬菌体的。你可以
多挑几个，看看是否还有污染。
3.清洁确实很重要，你可能需要看看那些菌也污染了。 |
|
e********r
发帖数: 147 | 32 呵呵，这个恐怕有问题，都是日常表达蛋白的实验，全交给公司，人民币的不够用啊:) |
|
|
e********r
发帖数: 147 | 34 实验室用BL21(DE3)和PET系列的蛋白表达载体差不多有10年，一直都没啥问题。
可最近出现了噬菌体严重污染，蛋白表达菌株经常性的摇不起来，我们已经用了很多方
法，包括各种清洁措施、84消毒、实验室每天紫外长时间灭菌、污染区域高温处理、甲
醛熏、以及换Rosseta菌株等等，但还是控制不住。
请问有经验的朋友们，这可肿么办？ |
|
J****T
发帖数: 20 | 35 重要的实验交给其他lab或者公司做，然后再自己lab慢慢想办法 |
|
l********8
发帖数: 197 | 36 我和楼主遇到过类似问题，谈谈的当时查到和询问到的方法
1.确认是否是噬菌体污染
其实有时候，如果加入的抗生素或者IPTG等，本身有毒性，就会使细胞裂解死亡。比如
我使用了当时来我们实验室推销的新牌子的抗生素，当我换回原来的抗生素后，就没有
任何裂解的现象的。还有噬菌斑的实验可以帮你确认，是否真的有噬菌体污染。
2.如果真的污染了你重要的菌株，简单的去除噬菌体的方法是，把细菌划线到平板上，
挑取单克隆，然后再划线，如此重复多次。得到的单克隆基本是没有噬菌体的。你可以
多挑几个，看看是否还有污染。
3.清洁确实很重要，你可能需要看看那些菌也污染了。 |
|
e********r
发帖数: 147 | 37 呵呵，这个恐怕有问题，都是日常表达蛋白的实验，全交给公司，人民币的不够用啊:) |
|
|
b*****x
发帖数: 17 | 39 1%SDS擦洗所有工作台，洗所有非一次性的容器。 bleach什么的对phage不管用。 |
|
b******y
发帖数: 627 | 40 When we had similar problem 10+ years ago, we determined that the phage is
t1 using pcr. We knew from literature that t1 phage gets into cells via tona
, a copper or ion transporter, or something alike. There are tona knockout
strain commercially availabe bl21de3 and dh5alpha, which are called
something like bl21de3 T1r and dh5alpha T1r. T1r means T1 phage resistant.
That really solved the problem once and for all.
Good luck! |
|
|
e********r
发帖数: 147 | 42 一篇short article, 在2个审稿人的要求下补了很多实验，被迫扩展成full length。
结果第二轮审的时候，补充实验没啥问题，其中一个审稿人把第一次问的问题（字面上
的，都回答或修改了）又问了一遍（心里已经问候他好多次了），另外要求再加一两个
莫名其妙的新实验（完全外行的那种）。Editor看了4天后，decision里建议transfer
到其它Cell的刊物上。
正在Appeal，但估计不容易翻盘了。审稿人真是变态，可拿他没啥办法。关键投稿一来
一去半年就没了，时间很重要啊。大家对这种事情有经验的，下一步该肿么做给点建议
哈。 |
|
发帖数: 1 | 43 换呗，也许是通讯作者不够牛，硬不起来。以后文章早投，差不多了就投，除非你十分
有把我中什么期刊，反正不管你怎么做，reviewers总能提出你可能想都没想过的问题
，让reviewers帮你去开拓思路。 |
|
e********r
发帖数: 147 | 44 嗯，感觉是这样的。好期刊一样看corr. author的名气 |
|
n******7
发帖数: 12463 | 45 跟editor没有connection
没有大牛给文章站台的话
还是赶快换
Cell子刊都是10-20这个档次的吧
也差不多
其实我觉得文章time to the market非常重要
对于期刊，除非是CNS
不然我个人更在乎文章引用率 |
|
e********r
发帖数: 147 | 46 悄悄说：俺就是corr....自认不是牛。唉，看来就得transfer啊，一怒之下Mol Cell，
吼吼... |
|
|
n******7
发帖数: 12463 | 48 不知道怎么我本来默认你之前投的就是这个...
我知道很多年轻PI把他们的mentor挂上投文章的
不过很多这样的是bioinfo垃圾文，他们mentor估计也不太懂 |
|
e********r
发帖数: 147 | 49 千万表这么搞......Transfer会不会在补实验这种问题上，稍好一点？ |
|
e********r
发帖数: 147 | 50 之前不是Mol Cell，本人修炼多年的实验论文：）先搞的CHM |
|
