g*********5
发帖数: 2533 | 1 黄色有可能是你loading buffer.
恶臭？是不是巯基乙醇？loading buffer里面加多了？样品变性了吗？
loading buffer是你自己配的？巯基乙醇得加多少？ |
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H*******r
发帖数: 3143 | 2 western里面用到的巯基乙醇，甲醇，还有ECL, ACRYLAMIDE这几样东西比较有害，不过
口罩和gloves应该就够了，H3和S35理论上应该都没事，穿透力很弱，我依稀记得好像
就算是p32之类比较强的，孕期不超过100uCi也是没事的(单位记不太清楚了。。。。)
，但是还是小心的好，能不做就不要做
isotope, |
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l*****a
发帖数: 20 | 3 今天周一,九点半爬起来,到了实验室,第一件事就是喝了一杯水.
呵呵,以前景叮嘱我多喝水,我总不听话,现在我要乖一点.呵呵,况且
昨天电视上一个漂漂姐姐说,早晨一杯水是对自己最好的保养.
今天把昨天的膜strip了一下,仍旧要做western.最不喜欢巯基乙醇
的气味了,嗯,闭气,哈哈.下午两点的时候,用牛奶封闭上后,就和
猩猩一起出去了.
要去银行还我信用卡上的钱.到了那,取了号,可爱的保安叔叔我都认得
他了,办了两次汇票,都是他在做我的指导老师.在我前面等候的人数
有15个之多,于是,就和猩猩出去逛逛路边的小店,银行旁边不远的地方
有一家灯具店,全都是水晶灯饰,好漂亮啊.
就像童话世界里的一样,璀璨的水晶上面做成蜡烛的灯灯,啊哈,好纯洁
好美丽啊,给人以无限的遐想.
我情不自禁的说到,以后我和景的家里也要买一个.猩猩也一脸陶醉的样子,
说,我也要买一个,我和他努力赚钱,买一个小的就好,大的肯定太贵.
我喃喃的说,我要买一个最大的.景会看到最漂亮的.我又流了一滴泪,我想
他,可是我没有猩猩那么幸福,可以看见自己心爱的人,相守在一起.以后我会
有家吗?我都不知道.
回去银行办完了,到了一 |
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e******y
发帖数: 106 | 4 硫醇类的味道都比较大 甲硫醇是气体, 闻了一个月,通风大开, 还能闻到, 会头疼.
乙硫醇我见过从通风橱里倒灌的情况. 国内通风不强, 四层楼同一个位置的通风橱是一
个风机, 四楼用EtSH, 结果一二楼味道很大.
用这种东西只要通风好, 小心 其实问题都不大,最后用bleach一擦就没事了. 就怕什么
都不懂的蠢才瞎搞. 搞得实验室进不去人 我都想去按那个emergence chemical spill的
按钮了.
这些东西浓度很低的时候其实是香的. 巯基乙醇稀释之后味道还挺好闻的. 【 在
gmails (蟾蜍) 的大作中提到: 】 |
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O******e
发帖数: 4845 | 6 ☆─────────────────────────────────────☆
happyfly (快乐小苍蝇) 于 (Fri Feb 24 03:44:20 2006) 提到:
我在e.coli和bacmid里表达一个小蛋白，大约8.7kD，检测用抗
c-末端的单抗，但在sds电泳中，能检测的信号基本上都在浓
缩胶里，只有极其微量的单体在8.7的位置上。看来这个蛋白是
以一种复合体的形式存在的，这个复合体不能被尿素、SDS和
巯基乙醇解离。初步分析发现复合体包含DNA/RNA，但不能被
核酸酶解离（可以完全被蛋白酶降解）。现在我们想得到单体
蛋白，但没有方法。
我个人感兴趣的是这个现象，就是有谁见过不能跑进分离胶的
蛋白吗？或者说蛋白能形成难解离的复合物吗？
欢迎讨论。
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royluo ( 罗马情结) 于 (Fri Feb 24 11:26:38 2006) 提到:
Where exactly does this band lrton.u] |
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b******n
发帖数: 4225 | 7 取决于你的目的啦
Talon基于cobalt跟his tag结合，
优点是不太容易被lysate里面的巯基乙醇，DTT等还原
跟E.coli内源的含his的蛋白(如SlyD)结合力弱，纯化效果好
缺点嘛，就是有时候跟目的蛋白都不能结合
Ni-NTA的缺点差不多跟Talon反过来吧
NI-NTA 和 Talon mental beads 相比， 纯化的效果那个好些？
谢谢！ |
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K**********e
发帖数: 188 | 8 前两天有人问过，但是没人回答。我也有这个问题。
跟蛋白有关的buffer里面的盐，多数时候是NaCl，但是nuclear extract经常用KCl，这是为什么呢？
也常常加1mM 的Mg，不过Mg不是protease需要的吗，会不会导致蛋白降解？
更疑惑的是还有同时加Mg和EDTA的，EDTA不是chelate二价离子吗，这样的话不是互相取消了吗。EDTA的目的是什么
呢？
有时候加1mM DTT在buffer里面，有时候又加beta 巯基乙醇。这有什么区别呢？
盼回答。谢谢。 |
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p****l
发帖数: 291 | 9 你觉得不是自己的问题，就心理素质好一点
或者说脸皮厚一点，别人怀疑你随便，关键是不要给老板造成不好的印象
我有一次用显微镜拍bright field照片，拍6孔板的，别人很少这么拍
结果我拍完1几个星期以后，40倍的镜头坏了
负责显微镜的mm就高度怀疑是我弄坏的，但是我确信不是自己弄坏的，因为我只用20倍
而且根本没有转镜头
后来他们跟老板说要买新镜头，几千吧，我老板也没找我
不过你要是觉得自己有问题的话，；老板nice可以跟老板说一下的，大家都是讲道理的
我刚开始做实验的时候把半瓶b巯基乙醇洒hood里了，老师也没说我
不过后来我自己头疼了一晚上 |
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a****d
发帖数: 1919 | 10 半瓶b巯基乙醇洒hood里? 这个还是太危险了。。。 |
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i***l
发帖数: 1656 | 11 蛋白胶Ｓａｍｐｌｅ Ｂｕｆｆｅｒ，
上 ５Ｍ Ｕｒｅａ ＋５％ＳＤＳ ＋０．５％ Ｂ－巯基乙醇， 煮沸？
膜蛋白不要煮沸，反而～４０度左右更好。
。。 |
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i***l
发帖数: 1656 | 12 蛋白胶Ｓａｍｐｌｅ Ｂｕｆｆｅｒ，
上 ５Ｍ Ｕｒｅａ ＋５％ＳＤＳ ＋０．５％ Ｂ－巯基乙醇， 煮沸？
膜蛋白不要煮沸，反而～４０度左右更好。
。。 |
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h***3
发帖数: 63 | 13 我是做生物的，最近经常提核酸，裂解液里加了1% B-巯基乙醇，操作过程中不可避免
的闻到那股臭味。。。。今天觉得有点头晕恶心，会不会是中毒了啊？？？？刚才查了
下，没这个症状啊。。。。。学化学的兄弟指点下，感激不尽，不要实验没做出来，小
命给搭了。。。。跪谢了 |
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