r**********g
发帖数: 22734 | 1 美帝虽然杀印第安人杀得狠，但是表面文章还是很足的。
况且印第安人基本还是被认为是蛮夷。好比齐桓公（比如啊）杀光了狄人，孔子曰微管
仲吾披发右衽矣。如果齐桓公（比如啊）杀光了燕人，孔子又怎么说？
在文明内部，一个国家要扩张必须持有一种开放的心态，要有天下的观念。欧洲无法统
一的原因也是因为没有一个具有天下观念的国家或者民族。
对应到中国，如果某人说我要带领四川人民杀光其他省的人，用四川人剑为四川人的犁
争取生存空间。他有一点机会吗？ |
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x******a
发帖数: 97 | 2 宏观经济调控指的是政府实施某些政策措施以调节市场和国家经济的运行，这虽然是现
代经济学的观点，但中国古代也有商品经济，并用在不同时期得到了长足发展，因此也
存在着对宏观经济如何调控的问题。
两种主张
在如何管理宏观经济的问题上，中国古代始终有两种不同的看法，一种主张政府不要干
预，如司马迁总结的“善者因之，其次利道之，其次教诲之，其次整齐之，最下者与其
争”，即对国家经济最好是听其自然，其次是随势引导、加以教诲，再次是通过制定法
规加以约束，最坏的做法才是直接与民争利。另一种看法是政府需要对宏观经济进行干
预和介入，实行国家调控，如管仲所主张的“通轻重之权,徼山海之业”、“工立三族,
市立三乡,泽立三虞,山立三衡”，即国家利用货币、价格和市场等手段来调控经济。
前一种看法可以叫做“善因论”，后一种看法可以叫做“轻重论”，是两种截然不同的
宏观经济管理思路，它们在中国古代商品经济产生和发展的早期几乎同时出现了。
春秋时期，奴隶制逐渐走向崩溃，商品经济兴起，政治上又呈现出诸侯争霸的局面，内
外部环境的变化对实现经济发展的突破提供了条件、也提出了迫切要求，管仲于是提出
了国家全面干预经济的主... 阅读全帖 |
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n*******w
发帖数: 6708 | 3 对于“灵魂”是否存在的问题一直被社会各界争论不休。10月30日，俄罗斯媒体《晨报
》发表文章指出，这一问题的答案已变成肯定，学者们找到了有力证据证明，人在心跳
停止以后依然存在灵魂。此消息已经发出，中国大陆多家媒体也大量转载。
研究报告中指出，人的灵魂是较之常规神经元更为根本的某种东西。医学教授认为，意
识是一直存在宇宙中，并且很可能是从宇宙大爆炸时期开始的。据他所说，当人的心跳
停止，人脑中所存储的信息不会随之消逝，而是继续在宇宙中扩散。根据学者的观点，
这一理论可以解释很多经历过临床死亡的人回忆起自己在“深长的隧道里”或者看到“
一束白光”这一现象。
学者表示，“当人的心跳停止，血液停止流动时，微管失去其量子状态，但存在于其中
的量子信息不会被破坏，所以他们就在与在宇宙中传播散布。所以如果重症监护室的病
人存活下来，他们多会讲述那“一束白光”或者看到自己如何“灵魂出窍”；如果病人
去世，那么量子信息就会在不确定的期限内存在与肉体之外，即灵魂。”
美国神经外科教授亚历山大也曾在自己的著作《天堂的证明》一书中描述了自己的“阴
间旅程”，“当时我处于昏迷状态，感觉自己在天堂，周围有蝴蝶飞... 阅读全帖 |
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n*******w
发帖数: 6708 | 4 对于“灵魂”是否存在的问题一直被社会各界争论不休。10月30日，俄罗斯媒体《晨报
》发表文章指出，这一问题的答案已变成肯定，学者们找到了有力证据证明，人在心跳
停止以后依然存在灵魂。此消息已经发出，中国大陆多家媒体也大量转载。
研究报告中指出，人的灵魂是较之常规神经元更为根本的某种东西。医学教授认为，意
识是一直存在宇宙中，并且很可能是从宇宙大爆炸时期开始的。据他所说，当人的心跳
停止，人脑中所存储的信息不会随之消逝，而是继续在宇宙中扩散。根据学者的观点，
这一理论可以解释很多经历过临床死亡的人回忆起自己在“深长的隧道里”或者看到“
一束白光”这一现象。
学者表示，“当人的心跳停止，血液停止流动时，微管失去其量子状态，但存在于其中
的量子信息不会被破坏，所以他们就在与在宇宙中传播散布。所以如果重症监护室的病
人存活下来，他们多会讲述那“一束白光”或者看到自己如何“灵魂出窍”；如果病人
去世，那么量子信息就会在不确定的期限内存在与肉体之外，即灵魂。”
美国神经外科教授亚历山大也曾在自己的著作《天堂的证明》一书中描述了自己的“阴
间旅程”，“当时我处于昏迷状态，感觉自己在天堂，周围有蝴蝶飞... 阅读全帖 |
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v***t
发帖数: 27100 | 5 这表明老毛是微管理，是现代管理学的大忌。凯神同志棋高一着 |
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t*****y
发帖数: 1421 | 6 混球时报这垃圾，当年狂骂呼吁检测公布PM2.5的人是“反华汉奸”，是
敌对势力，别有用心，用词之狠令人侧目，这才过去多久啊
现在好了，中南海的空气也不行了，党中央这次支持柴静，在陈吉宁公开
支持柴静之后，混球时报立马跟进，180°大转弯，狂舔柴静纪录片。
环球时报微博
当一些人在对柴静从一个母亲和一个公民的角度，自费制作的这个片子”吹毛求疵“时
，环保部长却积极肯定了她的做法：”值得敬佩“。或许柴静的片子，在一些人看来特
别不科学、全是漏洞，但科普是靠柴静一个人吗？柴静做了，是希望更多的人也去做。
与其当键盘侠，不如咱都行动起来吧！(小编)
@环球时报
【环保部长陈吉宁：已看柴静雾霾纪录片，值得敬佩！】环保部部长陈吉宁今日与媒体
见面，这是他接任部长后的第一次对外活动。陈吉宁在见面会上说，已完整看过《穹顶
之下》，并发短信对柴静表示了感谢。他说，柴静从一个特殊的角度，从公众和健康的
视角，换取公众对环境的关注，“值得我们敬佩。”新京报
转发 822
评论 252
1129
3月1日 18:08 来自 人民微管家
3月1日 18:16 来自 微博 weibo.com |
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N*******e
发帖数: 3872 | 7 妈个逼，一棒子对历史和文化完全无知的傻逼居然也来乱评儒家思想
第一点就是完全暴露了史盲本质
孔子和他之前时代的夷夏斗争，根本就没有什么边陲前线，到处都是前线
因为当时华夏大地上基本是一种夷夏杂处的状态
西周所分封的各诸侯国其实只是黄河中下游广大地域上一个个孤立的据点而已
春秋时卫国一度被狄人族灭，后来在齐国等其它诸侯国帮助下才渡河重建
看看卫国的位置，考虑到当时尚未发明马镫，就知道消灭卫国的北狄绝不可能从所谓塞
外的基地出发，长驱跋涉上千公里，却只是为了跟卫国为难。事实上，当时各诸侯国都
只能控制首都和其它要塞城市及其近郊地区，而更远的“野”外地区，则是“戎狄蛮夷
”这些游牧蛮族的天下。他们在中原大地上四处流窜，寻找一切机会攻击劫掠华夏诸侯
国。齐桓公和管仲的伟大，正在于他们在西周东迁周王室权威衰弱的情况下，领导了当
时华夏各国联合对抗游牧民族冲击的斗争事业，挽救了华夏文明。所以孔子称赞“微管
仲，吾其披发左衽矣”。
后人考证发现，灭掉西周的犬戎，是从东南方向进攻的，而非从西北方向，说明这支灭
掉西周的“犬戎”，并非来自西北边疆地区，而是同灭掉卫国的狄人一样，是一支流窜
于华夏大地的游... 阅读全帖 |
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t******e
发帖数: 2504 | 9 这不是李奇微管的事，5次战役时，李已升官了，是远东总司令，司令部是在日本，朝
鲜是第8集团军司令范弗里特负责具体指挥。
至于触角战术，是美军的长见的战术侦察手段，一般是连级，带上装甲分队，在炮火或
空军的掩护下（朝鲜战争是对空军的联络还不太灵光， 但炮兵联络员肯定是有的），
这些小部队，像章鱼的触角向前伸，没有碰到抵抗或抵抗不力，就伸进去了，后续部队
，往往是团级再跟进，如果抵抗强烈，撤回来，炮兵和空军狂轰烂炸。
在5此战役后期，这些连级别小部队之所以得逞，正是因为中朝军的进攻太勉强，超过
了极限，后勤和人的精力都已经耗尽，碰到这些尖锐美军小部队，都没有什么大的抵抗
能力。 |
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d********m
发帖数: 3662 | 11 病毒反转录，癌症基因组，微管蛋白
我们千老的G点你们不懂 |
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w***u
发帖数: 17713 | 12 你这个戴法证明了WHO的普通人戴n95口罩无用的说法，能阻挡病毒颗粒的微管，沿程阻
力相当的大，而且很快就会被空气中悬浮微粒所阻塞。别指望有效还能忍受。
: 不至于，我上周一出去采购食物戴着N95两个店兜下来3，4个小时，从进车库到
开回车
: 库没脱过，没觉得啥
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f****o
发帖数: 8105 | 13 【 以下文字转载自 WoldMiscNews 俱乐部 】
发信人: fuxeto (富士德), 信区: WoldMiscNews
标 题: 念救命的九个字 脑血管瘤不见了
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Nov 5 15:31:54 2015, 美东)
二零一五年八月十五日，我突然头晕呕吐。到县医院检查确诊为脑供血不足。经治疗未
见好转，到延边医院（我是朝鲜族）检查，住院治疗，医院确诊为脑血管瘤，并建议去
省城（长春）医院做手术。
我已是六十六岁的老太太，要开颅取瘤，真是晴天霹雳，当时的心情真是无法形容，但
是，又无可奈何，只好去长春。
我弟妹修炼法轮功。从延边医院回家的途中，她说：“大姐，只要诚心默念‘法轮大法
好，真善忍好’就会出现奇迹，你还是默念吧！”
原来我是不太相信法轮功的，弟妹屡次劝我“三退”（退党、退团、退队），我就说：
“共产党是‘爹娘’怎么能退出？”都被我拒绝了。可是，此刻连我自己都不知是怎么
回事就脱口而出：是啊！想想“真、善、忍”这三个字，多好啊！还跟弟妹说想看今年
的神韵演出。
到家后，弟妹立刻去外地的表弟妹家拿来神韵光盘，当天晚我从头到尾看了一遍。... 阅读全帖 |
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f**********n
发帖数: 29853 | 14 这不大可能。
床铺性格有点微管理。手下这些人都只是工具而已。这些人在布什手下就考虑私有化社
保，在床铺手下就会照床铺的社保政策走。 |
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f**********n
发帖数: 29853 | 15 所以总统只需要喊口号？和外国政府企业谈判叫微管理？
真球迷你真是微智商。 |
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z*******i
发帖数: 598 | 16 嗯，我知道你希望领袖微管理你一下，狗粮每个月多给点，地下室在拓宽点。可惜，教
主只希望你看门，对你屎二不见 |
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f**********n
发帖数: 29853 | 17 你搞清楚微管理的定义再来啊。你骂我不会为你加分的。
俺这么帮你，都是因为你主动跟我攀亲戚。 |
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b**********y
发帖数: 7371 | 18 肯定得这样，微管理是行不通的。孩子就应该在安全的范围内让他们自己figure it
out |
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c*******c
发帖数: 93 | 19 国内亲人前列腺肥大，去一个专门的男科医院，里面的医生推荐一个什么导管清洗
说是一个微管，进入前列腺，然后什么专业的药物导入加上清洗
这个靠谱么？ |
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l*****e
发帖数: 2447 | 20 我很酷地觉得陪着，不说话，陪上一两个月，然后隔一天陪，然后偶尔陪。盖因为现在
主要矛盾是走神。时间管理是另外一件事情，现在先解决大问题，不串线，不去微管理。 |
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l*****e
发帖数: 2447 | 22 对方便友实际上指出了一个重要的道理：就是在普通娃和神娃这两个概念上玩文字游戏
，意思是不大的。。。重要的是，在我们为人父母的，在还能给孩子影响的阶段，用制
造氛围而不是命令去诱导孩子的兴趣，用让静静地流淌的心而不是急功近利的做法对待
孩子的不足，用支持和鼓励给孩子更多自己做决定的机会，而不是越俎代庖去微管理孩
子的前进的脚步。。。这些是长效培养的做法，也是对方便友说的慢工细活的内涵。 |
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g****d
发帖数: 3461 | 23
CharleBrown 好久不见。
房地产发了，回来指点事实。
马云是在难看是真的。
麝香实在爱指手画脚，
想让别人管钱，却又三天两头打电话，
微管理自己不懂的东西。
这下好，被据了。 |
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Y***o
发帖数: 4135 | 24 我。。 比较像 ：）。。。2017 的账号cash/bond 比例很高。。2018年初说看看要稍
微管理一下， 开始多放点到ETF和个股。这次刚刚赶上了 ：） |
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d**w
发帖数: 368 | 25 我在一个公司，项目，manager是个女的，她的脾气特别好，很热情外向，挺有人情味
儿，但是，她可能是比较担心进展吧，经常一天要问我很多次，电话很多次，每天似乎
应该跟她生活在一起一样，不过，这样的话，我每分钟应该做什么都要被她控制，这样
我很没有自由，压力也挺大的，我也不是想偷懒，只是想有一小部分做事情的顺序可以
自由一些。项目我是非常喜欢的。
我该怎么办呢？应该跟manager沟通一下子吗？ |
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d**w
发帖数: 368 | 27 这跟漂亮不漂亮有啥关系，她是50多岁美国大妈，有3个孩子，我是女的，正在怀孕。 |
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t*****n
发帖数: 4908 | 28 基本无解。50岁左右正是更年期，有时很难控制自己的情绪。作为你的直接上司，你没
法回避这个现实。建议走吧。不是所有的manager都这样的。 |
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e******t
发帖数: 47 | 29 老板有点微管理，喜欢别人按照他的想法做项目。
而实践证明，老板的想法一般不work。
为了按时完成任务，需要白天实现老板的想法，晚上和周末做自己的。
最近的方案，基本上都是晚上和周末时间自己做出来的。
尝试过跟老板讨论自己的方案，均不获支持。
但是自己利用非工作时间做出来之后，老板也不反对使用。
（效果比老板的方案好很多）
请问有没有人遇到类似情况？
除跳槽外，有无其他解决办法？
谢谢！ |
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n********8
发帖数: 159 | 30 几百人的小公司，招TA进来不知道是不是因为穆斯林在美国也越来越多了。
背景：
TA来自伊拉克，家里面有一堆兄弟姐妹。毕业于巴格达大学，自称是因为极其优秀，被
他的祖国公费派到美国某农村州校攻读农业经济硕士，3年前毕业找不到工作，回伊拉
克在某学校混了几个月，然后又在伊拉克某公司混了一段时间。
TA看上去很自信。
需破：
TA属于“真不行，却认为自己真行”的类型，维管理平级同事，即使别人在某些方面是
专家，TA该方面是幼稚园水平，TA也一定要把自己拙劣的作品拿出来炫，而且丝毫不觉
得TA自己的水平不行。
其他组都看我们的笑话，人家不知道工作中难看的部分是这位伊拉克同仁的杰作，都以
为是我们组共同的成果，这该如何是好？
怎么破啊。
暗示过TA，但TA丝毫不为所动啊，还跑来微管理我，希望我按照TA那幼稚园的水平干活
儿。都几十岁的人了，如此没有自知之明，该如何是好。 |
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o*******t
发帖数: 1634 | 31 今天刚把RFE邮寄出去，担心的很。一直潜水，从来没有求过祝福，希望这次大家能祝
福一下。
我的CASE比较弱，今年1月21日递交，3月26收到REF，里面把我CLAIM的几条全都挑了点
毛病，要我分别补证明。律师觉得移民局看我材料太不仔细了，因为要求补充的实际上
我开始都交了，估计是OFFICER也没怎么看。于是回REF，又用别的方式把要求的材料又
递了一遍。
另外，我的CASE比较倒霉的一个地方是我同时递交了EB1A和NIW，结果不幸被同一个
OFFICER处理了，同时给我两个RFE（而且信里口气貌似对我也没啥好感）我当时还发贴
问过大家有没有遇到我这样情况的，看来是比较少。今天寄出的回信实际上是两封（回
EB1A和NIW)，不过，材料都差不多。
我一开始没有递交推荐信，这次补材料使劲补了一堆，虽然没有任何大牛，但也希望稍
微管点用。
我觉得如果我的能过，那么版上很多都能过。等我有消息了，我一定上来跟大家分享我
的背景和一些有限的经验。也希望这里所有申请的兄弟姐妹们都能顺顺利利地通过！谢
谢了！ |
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k******s
发帖数: 12 | 32 很长一段时间，我对国内IC设计产业的困境感到迷惑不解。
在这个产业里，聚集了中国最聪明的头脑（其中绝大多数是海归精英）。政府很舍得花
钱支持，VC也很重视，有硅谷的成熟商业模式，又背靠全球最大的移动通信和消费电子
市场。
但事实很悲哀，远在整个经济的冬天到来之前，这个产业就处在集体委靡之中。不断有
公司倒闭的消息，仅有的三家海外上市公司，有两家——中星微（Nasdaq：VIMC）和展
讯（Nasdaq:SPRD）都处于亏损之中，市值甚至远远不到1亿美元。
上个月，我的同事和我一起，专门拜访了中星微的创始人邓中翰，北极光创投的合伙人
陈大同，他曾是展迅通信的创始人之一兼CTO，以及一些业内人士。
有意思的是，每个人都会提到一个台湾公司的名字：联发科（MediaTek Inc., TW:2454
），它很像旧社会的“三座大山”，把整个大陆IC设计产业压得无法喘气。
过去，我的媒体同行常常把联发科称为“黑手机之父”，它比中星微仅仅早出生四年，
但如今已经是市值超过80亿美金，年营收约30亿美金，全球第三大手机和第二大数字电
视IC设计公司（国内前十大IC设计公司加起来的营收总和也不到它的一半... 阅读全帖 |
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a*******d
发帖数: 3041 | 33 老猪的时候 还有一个arthan当班副 娱乐性是空前绝后 知识性有一帮人写稿 扑克 飞
鱼大方块还不时客串金刚 你看看精华区就知道 班上掐架老猪的管理相比于熊猫的微管
理也更合适于bbs
熊猫干了啥我就不说了 大家都看得到 |
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P****S
发帖数: 2457 | 34 金老帅的底板就是这个Stiga Hybrid NCT纳米碳王，又称“纳米9.8"，因为是9层木加8
层含有”纳米碳微管“的胶水粘接层。
他配的是单面2.2海绵厚度的TSP SuperSpin pips正胶，但不是生胶，反面则贴了一整
片不能用于击球的黑色护板绵。 |
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n*******w
发帖数: 6708 | 35 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: northsnow (北雪飘), 信区: Military
标 题: 学者：人死后“灵魂”仍在已找到有力证据
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Nov 2 23:14:37 2012, 美东)
对于“灵魂”是否存在的问题一直被社会各界争论不休。10月30日，俄罗斯媒体《晨报
》发表文章指出，这一问题的答案已变成肯定，学者们找到了有力证据证明，人在心跳
停止以后依然存在灵魂。此消息已经发出，中国大陆多家媒体也大量转载。
研究报告中指出，人的灵魂是较之常规神经元更为根本的某种东西。医学教授认为，意
识是一直存在宇宙中，并且很可能是从宇宙大爆炸时期开始的。据他所说，当人的心跳
停止，人脑中所存储的信息不会随之消逝，而是继续在宇宙中扩散。根据学者的观点，
这一理论可以解释很多经历过临床死亡的人回忆起自己在“深长的隧道里”或者看到“
一束白光”这一现象。
学者表示，“当人的心跳停止，血液停止流动时，微管失去其量子状态，但存在于其中
的量子信息不会被破坏，所以他们就在与在宇宙中传播散布。所以如果重症监护室的病
人存活下来，他们多... 阅读全帖 |
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e*********e
发帖数: 2013 | 36 找白mm吧，中国文化的根基之一是血缘文化和农业思维。即使进入现代社会，长期没有
社会保障，什么都靠自己和亲人，形成对自己的孩子什么都成，对别人的孩子的生死非
常冷漠。
此外，女人和孩子都容易记仇。孩子成长过程中需要不断管教，母亲又担任“微管理”
的任务，要孩子吃蔬菜，收拾房间，勤洗澡，给孩子买衣服等等，都是容易起矛盾的。
能成功的继母都是圣人。
建议lz找白mm的另外一个原因是人对和其他文化的圈的人起矛盾更容易彼此让。因为彼
此敬畏好奇，除了问题还自己问一下是不是自己错了或者对方观念有可以借鉴的地方，
同文化的人直接争起来了，没有这个过程。我知道的带孩子二婚的最平稳的是找老外的
，其次是找对方也带孩子的，各自小心翼翼，顾各的孩子不管对方孩子。最鸡飞狗跳的
是华人二婚男找华人未婚女的，孩子和老婆都委屈愤怒。 |
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B******u
发帖数: 23763 | 37 外面的电视里正在放广告，
一个女性，娇滴滴的抱怨着，
哎呀，又怀孕了，都怪你，怎么办啊？
男的就接上了，
宝贝，咱们去协和医院做无痛人流吧。
画外音就跟上了，
意外怀孕怎么办？
协和医院，微管（？）微创人流，无痛，无后遗，不影响以后怀孕。
整个当人流是吃饭啊？
也不知道这个广告怎么通过审核的。
整个一个管麻子不叫麻子，叫坑人啊。 |
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s*****e
发帖数: 970 | 38 近日，上海交通大学张大兵教授指导的博士生胡丽芳在水稻花药发育分子机制研究上获得
新进展。该项研究找到了水稻MADS-box基因MADS3的一个新突变位点，该突变体（mads3
-4）花药发育后期花药转变成异常的褐色，花粉败育，表现为完全雄性不育。深入研究发现，
MADS3可以控制MT-1-4b等基因表达来调节花药发育后期活性氧分子的动态平衡，当该基因
突变后，花药中会异常积累活性氧分子，影响花药发育和花粉的成熟。这个工作提出了水稻花
药发育和花粉形成一个新的分子机制，为阐明植物生殖发育机制以及水稻遗传改良提供基础。
该论文2011年2月6日发表在植物分子生物学领域的著名刊物《The Plant Cell》
（http://www.plantcell.org/cgi/reprint/tpc.110.074369v1.pdf）。胡丽芳是2006年考
取交大的博士研究生，在张大兵教授实验室开展水稻生殖发育方面的研究。
近日，上海交通大学张大兵教授指导的博士生张铮和北京师范大学任海云教授指导的博士
生张毅等在水稻形态建成及植物细胞骨架调节机制研究上获得新发现。该项研究找到了一个影
响水稻生长发... 阅读全帖 |
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l****y
发帖数: 293 | 39 张春霆教授，生于1936年，1961年毕业于上海复旦大学物理系。1984年5月调入天津大
学物理系工作至今，先后任讲师、副教授和教授。张春霆教授在理论分子生物学研究中
的主要成就和贡献表现在以下两个方面：其一是系统地开创了DNA序列分析中的几何学研
究途径，得出了关于天然蛋白质的稳定性与密码子的选用之间存在着强关联等的重要结
论。其二是在蛋白质结构类的预测研究中取得了世界领先性的成果。此外，他又提出了
三项非常有效的方法来预测HIV蛋白酶对蛋白质的剪切活性部位，所有这三种方法已经成
为美国普强研究所用于寻找治疗艾滋病有效药物的强有力的工具；进而，他还提出一种
非常精妙绝论的理论来解释细胞内微管蛋白质装配过程的内部运动机制。 |
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p******e
发帖数: 4263 | 42 所以这次要给苹果点颜色看看
这次事件支持苹果骂微管的，都是没有民族大义的 |
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S*******e
发帖数: 17 | 44 电镜差不多有一百年,最初的模型仅能放大几倍,但现在已经可以看清硅晶体里的原子束
了.冷冻电镜约有二十年的历史,是为观察蛋白活性状态发展出来,之前大家用重金属盐
染色法样品严重失水变形, 而且看到的图象实际是密度大的盐包围蛋白形成的轮廓,分
辨率限制在20-30A样子. 应用液态乙烷速冻蛋白溶液可使样品被包埋在密度低的玻璃态
冰里从而突显密度稍高的蛋白质,因后者密度仅是前者的1.5倍不到样品信号基本上被掩
埋在噪音里,因此这技术适用于大蛋白复合物,目前下限大概在200-300KDA.
电镜结构重组涉及到很多图象处理,最重要的技术是通过复合大量单颗粒图象来提高信
噪比,这里隐含的前提是所有单颗粒有同样的组成同样的构象.实际上生物分子总处于动
态的变化中,因此就有上面有人提到的不均一性问题.少数例外是有高对称性的病毒颗粒
(UCLA的ZHENHONG ZHOU实验室发表了几个3.5A左右的病毒结构),和其他一些对称性较高
的分子(BEYLOR的WHA QIU实验室做的4A的GroEL,BERKELEY的EVA实验室有一些微管蛋白
的精细结构).其他对称性不高的蛋白分辨率局限在10A上下(例外 |
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s******y
发帖数: 28562 | 45 我不是业内行家所以只能说来参考吧。其实两种方法都有好和不好的地方。
高压冷冻对于保存细微结构比较好，抗染也很漂亮。但是技术不太容易掌握，
弄不好的话就把微结构全部破坏了。而且很多地方没有那个仪器。
化学固定其实没有他们说的那么糟糕，其实大部分结构保存得还是很好的，
但是最大的问题就是做抗染的时候信号／噪音比太差，除非是阳性结果非常
强的情况下不好下结论。
你问的这个问题，关键在于你的实验到底是在做什么，如果是证明某个蛋白在
某个已知的结构上的位置，比方说要证明某蛋白在线粒体的外膜上，那就没有
什么大问题。尤其假如你已经有其他的证据，比方说生化证据和光学成像证据，
那么基本上不会被挑战。
但如果你要做一个大家都不是很了解的结构，那就容易被人拍砖。比方说你要
做一个以前大家都不知道的微管蛋白的聚合中心，而且要有该形态研究作一个大
的结论，那么就容易死得很惨。其实要做形态学发到高端杂志的话，一般会被
要求做两种以上的方法。除非你老板是大牛。
freeze
elegant
EM |
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c********r
发帖数: 1125 | 46 我很喜欢他做得那个东西呢。。。
他原来老板nogales和barnes组合作的有关dam1复合体的工作很赞啊。。。
之前好几年就有有关dam1复合体的功能研究，但是真正证明其结构和在微管上的功能就
是barnes实验室的westermann和wang hongwei做出来的。。。
当然我承认我兴趣又太小众了。。。kinetochore这种东西很多人根本就不care吧。。
。。 |
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a*q
发帖数: 2109 | 47 另一个关键的区别在于SAXS和冷冻电镜都需要纯化的样品。如果电镜在细胞里面的话，
至少需要能够从形貌上分辨出要看什么分子。大的结构比如说核糖体、微管可以认出来
，如果随便挑一个分子就很难说了，一大堆长的差不多的。荧光的方法就不一样，信号
的来源是知道的。
当然就分辨率而言，荧光还是比不过电镜，毕竟波长的区别在那里。 |
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a*q
发帖数: 2109 | 48 另一个关键的区别在于SAXS和冷冻电镜都需要纯化的样品。如果电镜在细胞里面的话，
至少需要能够从形貌上分辨出要看什么分子。大的结构比如说核糖体、微管可以认出来
，如果随便挑一个分子就很难说了，一大堆长的差不多的。荧光的方法就不一样，信号
的来源是知道的。
当然就分辨率而言，荧光还是比不过电镜，毕竟波长的区别在那里。 |
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f*****f
发帖数: 195 | 49 大部分磷酸化是不会影响大体上的定位的。当然，因为定位本身是高度动态的，比如中
期磷酸化影响其在微管上的loading速度等等，单纯看可能发现不了变化。 |
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