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c*****o
发帖数: 18 | 2 谢谢回复，已经换了PVDF膜的filter试了，不过先前用的是 PES膜，也号称 low
affinity for proteins |
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p*******7
发帖数: 23 | 3 一段时间前，本想‘第一次版上发贴，真心求教’，写了下文。后真的烦不愿再提。今
天读‘中国RA的文，以及回复，希望
分享我的’drama'：
长话短说，RA:发 IF 》12 的一作时我还在本科，不知’科研‘何物。我, 薄厚前活泼
开朗，心直口快（现在，真的知道是
大毛病)，喜欢宏观的可以见效果的。薄厚4年了，文章去工业界多了（朋友言），留学
术界又差着。‘人生的九曲湾
中’放弃追梦. 博后到了距家最近的Lab， 虽然lab focus 与我的Ph.D. training有出入
与此RA曾为朋友，老板3 年前发现课题有潜力， assign 此 RA， 非大陆的。我还开心
，不是因有RA，而是因为是朋
友。（领域真的labor intensive, grad school 与三RA 共事，另一美国博生是我好友
，亦次次出手在大实验：3－5 小
时能拿到要的sample 就很开心乐。这后面才是set-up study.）薄厚Drama开始于这RA
的指定。几乎合作刚开始，朋
友就没了。我傻糊糊的还想继续友谊，修缮关系。直到N 年后被HR告 'forget about
friendship, ... 阅读全帖 |
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r***e
发帖数: 2539 | 4 coating很管用，你用什么方法转啊？
转之前不换液就不会掉了。 |
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r***e
发帖数: 2539 | 5 你可能做的量少，我们都是磷酸钙转的，几十个大盘子，一般不换液。
买sigma的poly-Lysine，50ml一瓶的那种。1/10稀释，加到板子上，15分钟后，吸掉，
加培养液和细胞。 |
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Z******5
发帖数: 435 | 6 养了一年半细胞了，从来没有用过抗生素，也没有污染过。
另外我转染都用罗氏的FuGene HD，不用换液，操作简单。 我们实验室转293T的都用这
个。 |
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b**********8
发帖数: 349 | 7 新手，最近在做一个质粒的稳定转染至肝癌细胞，大概步骤如下，6孔板中转染，24小
时后按1:50的比例传至10cm dish中，（大约1~2万个细胞），再等24小时开始加药筛选
，没隔3天换液维持，至第9天前后开始出现大量细胞死亡，并出现镜下明显可见的
colony，至第12天左右出现肉眼下明显可见的colony，于是用黄色tips直接在肉眼下挑
取单个colony，分别转移至96孔板中培养，并逐渐放大至24孔板，然后进行鉴定。至今
挑了大概40个colony，仅有一个阳性，但是继续放大培养两代后阳性反应突然丢失。
现在我有两个问题,
1）阳性反应突然丢失的原因可能是什么？细胞不纯？阳性细胞被其他细胞取代？筛选
出colony并放大培养的最初几代过程中，是否一定不能中断选择药物？哪怕只有两三天
的中断？
2）在网上翻了些帖子，发现有的人会在挑出单个colony培养贴壁后在做有限稀释，挑
取单克隆，这样做是不是会是拿到真阳性克隆的机会更大？可不可以按照这样的思路来
做，先用我上面的挑取，培养并鉴定出一批（视运气好坏多少不等）有阳性反应的
colony（姑且认定这个colony里面含有我想要... 阅读全帖 |
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s******y
发帖数: 28562 | 8 我们好像是用10% L-929 cell supernatant + 30% FBS + DMEM
随便养上一个月没有问题。
就是太耗serum 了。。。３０％。。。每次换液都很心疼。
,
5 |
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s******y
发帖数: 28562 | 9 你倒是来说说这个博士后的工资的钱从哪里来？在目前大部分实验室的经济来源
依赖于NIH, NSF的局面下，除非国家大幅度增加投资，否则要加工资，就必须
开人，比方说本来有两个博士后，把其中一个开掉，然后把所有出数据的任务全部压在
这个剩下的博士后身上。
另外，博士后这个职位设立起来好像是仿照医学界的intern/residency，他们的
训练期，比起我们其实一点都不短，工资也几乎一样。比方说大部分内科需要
三年，如果是放射科，则需要一年以上的其他科的经历，加上5年的放射科训练。
那些做手术的更是没完没了，如果连fellowship 都算上，有的科几乎超过10年。
而且他们和我们不一样的是，他们不可以提前走人。当然，这个的本质区别就是
医学的人，熬完那个训练期之后就肯定有光明的前途在等着他们，因为有这个社会
需求等着他们。
但是科学家的社会需求在哪里？你做完5年博士后之后，自豪的对社会宣布说你会换液
做western? 跑胶 and PCR? 你现在站在生物学人的角度来看当然理直气壮地觉得自己
应该有高工资，但是在社会看来呢？
我前面一个贴也说过了，生物界里并不缺客观的奖励机制，如果一个... 阅读全帖 |
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s******y
发帖数: 28562 | 10 就是那种全自动的，把膜放进去后就给你换液block, binding, wash 的机器。
我只在会展上见过两种，一种是invitrogen 的，需要用他们生产的小盒子，
盒子很贵，还不能循环使用，太不合算了。 另外一个是一个小公司的，
用的是一个大盒子，可以循环使用，但是必须最少放20mL 才能把膜全部泡到，
这个又太浪费抗体了。虽然说一抗可以回收使用，但是效果会越来越不好。
不知道大家有没什么其他的推荐？ |
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r***e
发帖数: 2539 | 11 病毒吸附到细胞上很快，半个小时就够了。当然做实验的时候没人这么快就换液的。 |
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l******g
发帖数: 1623 | 13 这东西早就有了, 自动换液, 传代, plate assay plates, 收集培养液, 纯化特定蛋白
, 测蛋白浓度, 都是在机器里面完成. 可以去TAP biosystem看看, 大大小小的还有选
择. 公司里面早就用了; 学校里面估计比较难推广, 用机器肯定比雇人要贵. |
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a*******a
发帖数: 4233 | 14 不需要洗， 收病毒上清以后pall 0.45um滤器过滤一下。
我一般用fugene hd， 更省事
10cm dish 20ug质粒，50ul fugene。
我是用plko+r8.91+vsvg的。
ps 我个人觉得钙转最省事
5min转完， 10-24小时之内看心情换液就可以了。。。。
脂质体的话还要等半个小时穿插传其他细胞，麻烦。。
，不洗的 |
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d***s
发帖数: 1062 | 15 关注。
我养的phoenix gp也这样，很容易成团。要每天换液才行，我觉得可能是细胞老了。 |
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e**o
发帖数: 345 | 16 如图。
以前没看到过这么多洞洞啊。不过这次染色之前，周末懒了一次，没有去换液。 |
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t**********a
发帖数: 14 | 17 我用的lentivirus 感染而不是siRNA。
lentivirus感染后第二天换液，不加puromycin筛选，前2天细胞长得好好的，3天后细
胞开始减少，而对照一直长得好。
如果加pyromycin筛选的话3-5天后细胞开始减少（未感染的blank细胞在加puromycin后
第二天几乎全死光），直到剩下寥寥无几（估计是感染效率不高的细胞），得1-2周后
才慢慢长满，此时细胞生长仍然慢于对照细胞。 |
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i*****g
发帖数: 11893 | 19 lenti不清楚
retrovirus 我知道最快8hr可以看见绿色荧光了
纯粹就infection而言，30min就进入细胞了。考虑到半衰期持续，我估计3hr后，可以
安全换液 |
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s******y
发帖数: 28562 | 20 20个小时太长了！很多正常细胞都死了，活下来的很多都是怪胎。
一般我对这种实验的处理都不超过9个小时。
另外，注意看我上面的回复，要提前一天换液。加药品处理的当天不要加新培养液。 |
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s******y
发帖数: 28562 | 21 这里应该是指用serum free 的培养液来冲调cycloheximide (usually dissolved in
DMSO), 然后再加进原有的培养液里（就是不换液）。在我的经验中这样是可以的，只
要加进去的东西不要超过总体积的20%。
至于说加药到18小时，这个就要赌运气了。在大部分情况下，我不会相信任何超过12个
小时的数据，因为细胞都开始调亡了，谁知道蛋白的变化是什么造成的啊？
对于半衰期特别长的蛋白，标准做法是用同位素标记法。
另外，再多说一句，对于半衰期特别短的蛋白，同位素标记法其实不是一个好方法（除
非是体外转录直接加到反应液体里），因为标记需要至少半个小时到一个小时，其实并
不是一个真正的instant pulse，再加上immune pulldown 本来就不是容易重复的量化
手段（实验的随机误差很大），对于短寿命的蛋白测出来的数值很不可靠。所以这个方
法只对于比较长寿命的蛋白适用。
。 |
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J******9
发帖数: 736 | 22 另外，在falsk里面养悬浮神经球，半量换液，如何操作？
吸管吸取瓶子里面陈旧培养液的时候，不是有可能将神经球也顺带吸取出来了吗？ |
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t******k
发帖数: 599 | 23 我换液一般都是离心，2000rpm，10min，1000rpm也可以。感觉挺干净的。 |
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s******y
发帖数: 28562 | 24 谢谢，不过我们最近转战细胞生物了，现在反而不怎么用WB了。呵呵。
iBind 这个东西，机器便宜，但是耗材贵（每次要用一个卡，大概10美元一个，不能回
收）。这个好像是invitrogen 的特点？卖你一台便宜一点的机器然后从耗材上赚回来。
我们实验室里已经有了一台自动化WB的仪器（其实就是自动换液而已），不需要用耗材
，能够回收一抗。缺点就是溶液（尤其是冲洗液）消耗量大，而且比较慢。作完一次需
要4个小时。 |
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j******n
发帖数: 941 | 25 HEK293本来就容易detach。 会不会是换液的时候不小心动作太大？ |
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j****x
发帖数: 1704 | 27 更简单的办法是超滤浓缩，millipore的100K Ultra Centrifugal Filter，可以直接浓
缩100-200倍。
4质粒共转染293T/293FT细胞，隔天换液，3天后收上清，然后超滤浓缩，浓缩后的病毒
直接感染靶细胞，效果会比冻融之后的好几倍到一个数量级。 |
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发帖数: 1 | 28 如果是PI，就应该同学生薄厚打成一片。
本人看到炸药奖PI准备下班，看到技术员还在干活换液，一大堆碟子，二话不说，就去
帮忙。
现在的PI，都是懒蛋，动手能力已经消失，脑汁也不多，都在混日子。 |
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V******t
发帖数: 444 | 29 感觉生物实验没办法啊，光凭讨论是不可能有结论的，没有做那个western、qPCR，你
就是不知道这个基因的变化。要做这个实验吧，你就得处理细胞，打老鼠，就得仔细分
细胞、换液，稍微不注意就状态不好了。然后忙忙碌碌提蛋白、跑胶做western，一次
加样几十个，等等。
忙忙碌碌中，一天一个星期一个月就这个过去了。根本没有时间读文献思考，也没有时
间出去玩耍，也没有时间看闲书看电影逛街美食，人生就这么荒废了。
有没有什么办法，少做实验，尽可能多的获得data？
我觉得一个可能是做deep seq，简单的实验就获得一些DNA，拿去测序，就能得到花花
绿绿一堆分析。
还有什么办法，可以尽可能地少做实验，但是却获得很多data吗？ |
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V******t
发帖数: 444 | 30 如果一个实验室配齐下列仪器 就是天堂了
miniprep质粒 Qiagen的cube 能自动提质粒
western： 自动洗膜换液机
qPCR： 96孔板自动加样机
细胞计数：细胞自动计数仪
co－IP：自动加抗体洗beads仪
除了分细胞传代好像还不能自动化吧？
电动连续加样枪 电动排枪
然后所有sds gel都买预制的， 养细菌的agar plate、LB， 各种running buffer都有
技术员配好
老鼠genotyping有技术员做
各种buffer都买商用的
省下来的时间喝咖啡灌水逛街，当个千老也不是那么难过的事情了吧 |
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s******y
发帖数: 28562 | 31 我们实验室里有 自动洗膜换液机，细胞自动计数仪，电动连续加样枪，电动排枪。SDS
gel都买预制的。有专门技术员来配大部分溶液。
其实这些仪器花不了多少钱。买了可以大大加快实验的进展，我觉得挺值的。
提质粒啥的我对那个机器有担忧，主要怕cross contamination. 不过我们有个vacuum
manifold来用，还是挺方便的。 |
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T****i
发帖数: 15191 | 32 胖老大，你们的自动洗膜换液机是哪家的？
SDS
vacuum |
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a**********3
发帖数: 86 | 33 上周六给细胞换液时发现，部分dish里的培养液混浊化，但其它的没有。第二天去发现
更多的dish里的培养液变混浊，重新解冻细胞(100mm dish)，加入DMEM+10%FBS培养两
天后再次发现同样的情况，是不是整个Incubator都污染了？现在还有29个35mm dish在
里面，发现其中有三个混浊化，但其它的还是清澈的，不知道到底是什么原因？一开始
想是不是FBS或DMEM污染,但是并不是全部的dish都混浊，遂排除了这个可能性，所加的
待检测试剂也不大可能，因为如果试剂污染，全部的dish都会变混浊呀，到底是什么问
题呢？希望大家能够帮忙找找可能的原因及提供如何解决的办法 |
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c*****i
发帖数: 1392 | 34 Hybridoma是最容易复苏的一类细胞了。 37C水浴速融，贴壁的Hybridoma直接加入培养
瓶，2小时后换液，可用20％FBS。悬浮细胞解冻后加1ml培养基，慢速离心1000rpm，
5min，去上清，加新鲜medium，培养。若细胞太少，培养一周后看
10000rpm
了。 |
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D*a
发帖数: 6830 | 35 得，啥叫批次？反正我又看了一遍你帖子还是不知道你到底是怎么做的。
如果只是最后一步，完全去除了细胞生长、换液、不同培养皿之类的影响，这个我觉得
可以类比一个大脑切两半。但凡是有其他因素影响的，都应该类比一窝爹妈生的老鼠。
ps，三个值怎么满足正态分布假设？应该用非参数比较吧。你这个Mann-whitney可能就
小于0.05了。 |
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发帖数: 1 | 36 新的实验步骤有几处更改，其中包括“血清品牌由 Hyclone 变更
为 Gibco”，“293T细胞贴壁不牢，换液时要小心操作”，“溶解和稀释质粒及
gDNA 的缓冲液变更为水（pH 8.0）
实在忍不住爆下粗口，我操，耍人也要有点诚意行吗？joshhaha，替我问候下你老婆，
等你身败名裂了，也许出于人道主义我可以出钱让你家隔壁老王照顾她一下。 |
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m****a
发帖数: 270 | 37 EDTA 是不透膜的，透膜的是EDTA-AM, 残存的那点EDTA早就被DMEM里的钙，镁给中和
掉了。
韩的protocal 转染之前还有一次换液，还剩多少EDTA在里面？ |
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f*****u
发帖数: 71 | 38 新人报道，对护士专业只是处于半懂不懂状态，特来护士版讨教。
我和老公都是国内PHD毕业，然后到美国做博后。我是学微生物的，对生理解剖略
知皮毛。目前已经做了两年的博后了，自知科研之路前途不大，再加上现在已经怀孕，
连着几个周末在实验室加班后，终于下决心转行做护士，不是怕吃苦，只是觉得有了小
孩以后，就不能再过这种晚上7点左右才能回家，晚饭时间是9点，一个星期里面最多开
火3次，周末还得想着老鼠打药，细胞换液这种生活，至少要有一个人抽身出来，有时
间照顾家庭小孩。而且跟几个已经当上护士的朋友聊过天，觉得每周工作3天，虽然上
班的时候很辛苦，但是下班了工作就结束了，不用再去看paper，设计实验，没有每周
的labmeeting，工作汇报，感觉这种生活还是挺适合自己。
小孩大概9月份出生，到时候会有父母过来照顾。因为家中会有五张吃饭的嘴，靠
老公不到4万的薪水养活显然不大可能，所以不想太早quit掉工作，想在职读完正式进
入护士program之前的所有课程，然后辞职并把小孩送回国去读书。目前所在的实验室
压力不算太大，但也绝不轻松。每天晚上抓紧一点应该可以腾出1-2 |
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A*****s
发帖数: 13748 | 39 我觉得换液之前好像engage有问题。。。现在好像可以disengage。。。
以前国内那辆dfbb先是cylinder爆掉，修过了以后系统里有点小气泡
踩起来80%正常就是会有异响，后来bleed了就好了。。。 |
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i****i
发帖数: 322 | 40 您果然是比较专业……专业transmission维修店也说首先可能是电磁阀
主要问题就是着这车是sealed transmission，没有检查变速箱油的量的的途径，只能从底下打开
也就直接放掉了……所以只能放掉然后按量注入新的……另外因为一般情况下放不干净之类的原
因所以也没法根据放出量来看量够不够……
总归还是先琢磨换液时候温度那个怎么办……
去买本手册，仔细研究一下。最好能先不拆阀体就测试一下电磁阀，这样就能做到有的
放矢。最
好有个经常捯持车的朋友帮忙。 |
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K****o
发帖数: 2183 | 41 有人告诉我用针捅，发现捅不进去。compress air也搞不定。
难道只能把nozzle换了？车是03 Accord |
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x*****n
发帖数: 3422 | 42 那就换个小号的针，把蜡打到孔上成功捅通的人飘过~~~ |
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s**********s
发帖数: 7387 | 43 要自己定时、换液(讲到这两个字，我又回想起那些在wet lab里的青葱岁月....) |
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n*p
发帖数: 1253 | 45 ☆─────────────────────────────────────☆
qingxi (作为兔子一定要长得呆) 于 (Fri Jul 16 17:37:01 2010, 美东) 提到:
引言：
我曾经在mitbbs论坛发了有关妈妈的信息，http://www.mitbbs.com/article/ChineseMed/12563569_3.html 说西医正在谋杀我妈妈，受到很多人的指责，现在就让事实来说话。
我的妈妈胃癌晚期手术后化疗吃的东西全部呕掉，连水都喝不了，我们明智的放弃了痛苦的西医，转为中医治疗。在中医的治疗下，我妈妈再没有受任何罪，既不痛苦又恢复超快。一个月就能够逛街，做全家人的饭，两个多月诸症俱消，心情舒畅。最近看到买买提上很多绝望的人在发
兹瞬×饲笾急富ǖ羲谢睿以埠退且谎淖叩搅巳松淖畹凸取Ｋ煌氖牵笔蔽矣兄幸骄憷植康呐笥衙歉业闹С趾妥８＃易约阂布嵝胖幸侥芄话崖杪杈然乩础Ｎ艺夥菪⑿奶炜闪梦矣龅搅撕靡缴以说淖吖戳恕Ｎ腋庑┤朔⒐ㄒ樗强粗幸剑
有人搭理我，因为没有人相信。所以要把这个帖子发出来，让大家看一看我和妈妈共同经历的这个真实的故事。
我经妈妈同意，贴... 阅读全帖 |
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a******n
发帖数: 1714 | 46 非说没有也是对的，学名，扭力转换器。泡在油里面。所以传递的扭矩有损失。
权威评审
自动变速箱
开放分类： 汽车构件
编辑词条 分享
自动变速箱是相对于手动变速箱而出现的一种能够自动根据引擎转速来换挡的设备。汽
车自动变速箱常见的有三种型式，分别是液力自动变速箱（简称AT）、机械无级自动变
速箱（简称CVT)、电控机械自动变速箱（简称AMT）。自动变速箱(加上扭矩转换器
TORQUE CONVERTER，有的地方叫它湿式离合器) 和手动变速箱(加上离合器) 用完全不
同的方法做到了相同的功用。 汽车中自动变速箱的位置跟手动变速箱一样，自动变速
箱的主要作用就是把引擎的输出变换出很大的速度变化范围输出到驱动轮上.自动变速
箱(加上扭矩转换器TORQUE CONVERTER，有的地方叫它湿式离合器) 和手动变速箱(加上
离合器) 用完全不同的方法做到了相同的功用。
编辑摘要
目录
1 简介
2 汽车自动波的分类
3 液力自动波
4 机械无级自动波
5 电控机械自动波
自动变速箱 - 简介
自动变速箱自动变速箱
动波（自动变速器）的汽车，能根据路面状况自... 阅读全帖 |
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C*****s
发帖数: 129 | 47 这车几乎什么液都少，所以就补了各种液，但唯独没补刹车液，因为当时想以后要换刹
车液，到时候再说，再深挖思想根源就是因为自己猥琐，不想浪费一瓶几块钱的刹车液
，想着以后换刹车液时反正要全换，就省得多开一瓶，因为刹车液开了没用完我以后基
本就不会去用它了。这个决定导致后来换刹车液时多花了无数时间精力和多用了2-3瓶
刹车液的结果。
本打算30分钟解决问题，于是不着急先忙完其他活，到下午四点去换刹车液，想着大不
了到5点结束了，离吃晚饭有足够时间了，一个人优哉游哉开始干。因为我没有补过液
，所以壶里没有多少刹车液，我又是一个人干，等我打开阀门看到刹车液流得飞快，再
去补液有点晚了，液面已经很低了，心想糟糕，有没有空气漏进去了呀。结果就是悲剧
，有无尽的气泡从阀门出来，没办法只好把老婆拉来帮忙，一个人踩刹车，一个人舔刹
车液还要注意阀门处流出的刹车液，忙到天黑还有气泡，不行了，只能手工明天再继续
了。
第二天我一个人继续搞，先去再买了刹车液，一个上午过去了，还是有很小的泡。我已
经精疲力竭了，打算试试到底怎么样，发动车子，一脚刹车踩下去，靠，软得像豆腐，
一直到地板，而且刹不住，车直往前溜。我... 阅读全帖 |
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i******n
发帖数: 538 | 48 妖刀记19
第九一折 投瓜报琚，人鬼殊异
趴在池畔的雪肤丽人浑身一震，不敢相信自己的耳朵，一时竟忘了提防，自
水中「泼啦！」昂起一双挺凸美乳，撑着白皙腴臂，茫然四顾：「小……小和尚，
是你……是你么？」
耿照本以来她会吓得魂飞魄散，谁知却转过一张泪眼婆娑的俏美雪颜，全不
复适才的嚣狂跋扈，媚儿——或者该说是统领九幽十类的集恶道之主、「鬼王」
阴宿冥——望着他直发愣，半天才抚胸蹙眉，仿佛生生吞下几斤窝火黄连，颤声
道：
「小和尚！你……你真死了，是不是？只剩一缕魂魄，才让我一招即来，是
……是不是？」弯翘的浓睫眨得几眨，大颗大颗的泪珠自眼眶里滚出，竟不沾颊，
滴滴答答撞碎在雾气氤氲的水面，她却浑然不觉。
耿照吃了一惊，胸口没来由地一闷：「怎地……怎地她竟如此悲痛！这是…
…这是为了我么？」错愕间，见媚儿自温泉中站起，葫芦也似的腻白胴体离水挺
立，两座沉甸甸的乳峰弹颤之间，抖落大把大把的液珠，如倾钟斛。
池水本就不深，她生得肩宽腿长，在女子中算是高大，一直起身子，池面堪
没过腴饱的耻丘，露出顶端一小撮金红卷茸，沾湿的毛尖犹如婴儿壮发，打着涡
卷似的细... 阅读全帖 |
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f**********r
发帖数: 3774 | 49 《妖刀记》卷廿五 五阴炽盛
书目:
第百廿一折 重泉有罅，福祸自生
第百廿二折 何为卿狂，丽藻华菱
第百廿三折 梦外冰凝，古石含菁
第百廿四折 明珂胜雪，朱紫交竞
第百廿五折 玉宇巍峨，牙骨盈坑
内容介绍：
这是一处武林秘境，已为世人所遗。相传谷中有三样宝物：天佛赠予龙皇玄鳞的殿
宇「接天宫城」，玄鳞化出龙形后所遗的巨大尸骨，以及「洞中之月」。「你信不信五
阴大师？」染红霞问。 「我信。」耿照回答。
「我也信。这样，就更令人想不通啦。」染红霞倒抽一口凉气，颤声道：「大师说
三样宝物都是真的。他曾经亲眼见过……就在这里！」
正文：
第百廿一折 重泉有罅，福祸自知
石莲倾倒，三座高台顿时陷入混乱。剧烈的晃动与骇人的轰响如半山崩塌，震得众
人腿软耳鸣，动弹不得，连训练有素的谷城战马都嘶叫着人立起来，抛下了许多不及防
备的骑士。
也不知过了多久，黄尘渐渐散去，广场中央已不见巍峨壮观的九品莲台，破碎的大
块花岗岩交叠错落，十丈方圆以内找不到一块平地；居中的乱石堆较周围略高，盖因莲
台的底座以青砖砌就，作为地基，与寻常屋舍并无不同，... 阅读全帖 |
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f******g
发帖数: 1697 | 50 ☆─────────────────────────────────────☆
porco (porco) 于 (Fri Jul 17 23:53:18 2009, 美东) 提到:
出发前，写于五月份
天气一天比一天热,我又开始蠢蠢欲动,心里又在谋划着一次新的骑行。今天早上跟老板
individual meeting后，老板随口问了一句，暑假打算出去玩吗？咦，居然主动提起，
看来老板忘了去年的事情了。去年年底我回国太久，其实也就5个多礼拜，年初回来后
老板一脸不开心，扣了半个月工资不说，黑着脸说，小伙，你今年不能有假期了。我心
脏一收缩：靠！那我每年计划好的暑期北美骑行计划岂不是泡汤？嘿嘿，看来还是贵人
多忘事，没几个月，早忘了当时有这么个说法。我立刻脱口而出，我要踩单车去大峡谷
。老板说，不错，确定时间后告诉我，好让我在巴黎如果哪天打电话给你，而你不在，
我比较淡定。我说，快开始了。
早上9点多，阳光有点刺眼了，走出系里，抬头望一眼阳光，我真的要去大峡谷吗？或
者，就去附近的Santa Fe好了，来回大概一千公里，时间上比较充裕，不用担心定了机
票回来，却因为在路上耽搁而赶... 阅读全帖 |
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