s*******w
发帖数: 2257 | 1 从医疗改革看中国高层的无能和胡来
(2015-08-09 22:01:09) 下一个
民生保障：新中国经验vs市场化教训
——玛雅专访北京大学中国健康发展研究中心主任李玲
中国走到今天，在民生保障方面曾经走出一条适应国情、适应我们制度安排的路。但后
来在民生领域盲目 “与国际接轨”，导致今天形成了“四座大山”——看病难、上学
难、养老难、住房难。
我们曾经笃信市场，以为市场真的能搞定一切，然而，市场却往往失灵，特别是在民生
领域与社会建设上。现在仍有不少人依旧沉浸在市场迷思之中，这是在下一步发展过程
中需要我们时刻注意的。
李玲教授
仇和落马与私有化医改的不归路
玛雅：7月31日，仇和因严重违纪违法被开除党籍和公职。仇和曾经是地 方改革的风云
人物，2000年担任宿迁市委书记时，卖掉了当地所有的公立医院。然而2011年，当他在
昆明市委书记任上，以“企业+医院”模式推行公立医 院改制时，以私有化著称的宿迁
模式却改辙易途，由政府财政全额出资，建造一所大型公立医院。从医疗改革的角度看
，应该怎样认识宿迁现象?其中最大的教训是 什么?
李玲：最大的教训是，医疗是一个市场几乎完全失灵的领域，... 阅读全帖 |
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h**c
发帖数: 2376 | 2 写了篇小文回忆下我和她，结果到现在才有空敲上来。
科学的逃兵
研究生的第一个暑假，我要选导师进实验室。面对系里那么多教授，我选择了格蕾。不仅仅是因为她的领域是无机类，还因为传说中，她很严格。
格蕾身材高挑，面容姣好。组里的师兄师姐都说，我们组最聪明的是我们老板，最勤奋的也是我们老板，最漂亮的，还是我们老板。我偷偷以为，她要是不做教授的话，还可以做模特。呵呵。不过她确实容貌与智慧并存，我进组那年她三十四岁，已经拿到终身教职了。据说她从牛津大学博士毕业，才用了三年。
我生性惫懒，以为有个严厉的老板，自己就能按部就班的做研究然后顺利拿PHD了。 --
显然这是小看了旅途的艰难了。这一个个科学之路的特征，随着实验的进展纷至杳来，最后竟令我害怕到逃亡。
首先发现的是，做实验竟然如此的枯燥无聊。回忆中我总是在不停的把材料碾磨好，装
进试管，放入那个永远都在运行的核磁共振器。然后就是漫长的等待。等候期间理应勤
奋的看文献，可我每每看几分钟就厌倦了，便偷偷在mitbbs注册个帐号灌水聊天。
无聊不说，做实验还很辛苦。我们实验室要用液氮，而液氮得到隔壁楼的物理系储藏室去取。组里的兄弟姐妹轮流执行这个任务 |
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d********d
发帖数: 3 | 3 今天正在发愁反应没有做对中，老板一本正经地过来找我说有个问题要问我，吓了我一
跳，赶紧把核磁谱藏起来了。
原来他要去中国了，苦于用的苹果本本的电源在中国没法插，问我该怎么办。他的电源
是三个口的，所以肯定是要个转化器的，不知道这种转换器应该去哪里买呢？
谢谢各位~ |
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z***q
发帖数: 907 | 4 【 以下文字转载自 shopping 讨论区 】
发信人: zypsq (妈妈的小猪), 信区: shopping
标 题: 问个lenovo配置的问题（回答详细有包子）
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Jul 22 00:19:15 2012, 美东)
最近想入手一台thinkpad电脑，但对于具体配置不太确定，望高手不吝赐教。
主要是日常用途，office,有可能需要装windows/linux双系统，或者运行topspin,NMR
pipe,sparky等核磁专业软件，实验室有大显示器，所以电脑本身显示器大小无所谓，
需要能外接显示器，键盘，所以对键盘也没有要求，平时也不太用得着光驱。希望携带
方便，开机速度、运行程序快一点，越轻越好，另外不要太热。预算上1000左右（
macbook air 1300左右也可接受）
有几个待选，希望能找到最适合的配置
1) macbook air,轻薄，但据说性能较低，另外价格比较高
2）x220 or x230?看版上都推荐220，请问230除了键盘不好用之外还有其他缺点么？新
一代cpu应该比老的性能好吧？另外选i5还是i7呢？
... 阅读全帖 |
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l*******k
发帖数: 361 | 6 不同的kinase有不同的Motif,查一下就知道了，我想在网上应该有相应的软件
发信人: timememory (光阴的故事), 信区: Biology
标 题: 已知磷酸化位点,能不能推断是什么酶的底物?
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Apr 25 11:58:16 2010, 美东)
我在http://www.phosphosite.org网站上查到蛋白磷酸化的位点(多数是核磁测出来的),比如"MANRGPayGLSREVQ"中的y,能不能从这片段就推断出它是什么酶的底物?这方面完全不懂,不知道靠谱么? |
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s***i
发帖数: 603 | 7 确认合成的有机小分子结构，产物用核磁啥的和标准物一对比不就可以了？再不行用啥
ms，EA就可以了吧 |
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f*********r
发帖数: 1233 | 8 都数字化了。从x光平片、到ct、核磁，一水的联网在线观看。就连给病人的copy都是
cd。 |
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p****s
发帖数: 3153 | 9 你们那里没有NMR专门的staff么，他们应该知道怎么设定实验。
field
parameter |
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z***q
发帖数: 907 | 10 有NMR manager, 不过他也不会，博后也不会，老板20年没做实验了，我们组的人都比
较弱。。。 |
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u**s
发帖数: 384 | 11 Bruker has manuals, but be careful because I really dont think it is a good
idea to ask someone without a training to do something like you are going to
do.
field
parameter |
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m****m
发帖数: 395 | 12 我的专业就是固体核磁，我PHD就学这个，所以我也想通了，那么容易就学会了，我就
该毕业了。不过我主要不研究仪器，我研究蛋白，使用仪器，所以常用，而且不懂不同
的脉冲序列会很吃亏，导致做不出好的谱来。所以需要生物和物理知识的结合。我的背
景几乎为0，是一张纯粹的白纸。
我觉得如果将来我当了学长，我一定会做个好人，花时间去教师弟师妹的，不过我现在
没有太多的学长，因为老板中间几年没收到学生，我来了，最高那年级的学长正好毕业
，现在只有比我高一届经验也不是特丰富的学长，他们自己也在学，结果我就去BOTHER
博后和技术员了，其实我觉得学长会更容易接近些，更易交流。实在不想麻烦专家级人
物，虽然我很羡慕我同学有老板亲自教。那个仪器确实是专人负责，暴贵仪器，不过专
人都不怕被我这种小孩弄坏了。。
让人教，我也一直都是感激人家的，觉得亏欠了，还送点小礼。我也想RESPECT人家的
宝贵时间，所以我很为难，一面自己想问，一面又不敢，我想最好的解决办法是多自学
些先。。我每次都跟别人说我的实验，还有计划，让人家了解我，但是我觉得人家对我
的实验比较冷漠吧，除了有个博后现在挺帮我的，但他也是人家组的博后 |
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b******3
发帖数: 377 | 13 核磁出来没多少峰，导师认为蛋白没有折叠，大肠表达，纯化什么的都没问题，怎么办
？谢谢！ |
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m********r
发帖数: 124 | 14 唉，我跟楼主情况类似，也是两年半了。做蛋白的，第一个考qualify的时候被人抢了
，第二个纯化出来发现不折叠，好容易有个homolog折叠了，现在老板又不急着让我做
；催我的是另一个课题，结果那个蛋白降解，相互作用也做不成，我觉得怎么不好做的
蛋白都让我遇上了。关键是他催的这个课题性价比太低，因为人家做遗传只是要我们一
个确定相互作用位点，我用核磁得做老久，还取决于蛋白的稳定性，就是做出来了我也
不是一作。头大啊 |
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m********r
发帖数: 124 | 15 我们是做生化的，体外纯化蛋白，做相互作用（fluorescence，ITC，pulldown），
顺便做点结晶和核磁，mapping作用位点。我第三年下了。
Rotation 的时候做一个真核信号通路蛋白的A domain（这也是老板postdoc做的
domain），是个很好纯化的蛋白，做的还行，有个coauthor的paper（师兄一作，4分左
右，话说我觉得实验室就这个水平了）。
加入实验室之前，另外一个rotation的学生做B和C蛋白，是原核的信号通路。当时
我感觉我加入实验室是不就做这个了。结果老板让我先做D和E， 顺便做原来的真核蛋
白的F domain，理由是应用的技术是一样的，要charaterize的蛋白性质也是相同的。
这是实情。这个时候有个小的grant, 关于蛋白BCDE的。结果我第二年冬天发现F
domain太大，不好做。而D和E表达起来比较困难，不可溶。加上B和C合作者有genetics
的data，所以就做了点这个。之后回国，春天回来做助教，上课考qualify，几乎春季
没做实验。完了之后，发现D和E 已经被马普的两个组发了。人家一... 阅读全帖 |
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x*****o
发帖数: 441 | 16 我觉得可能是有很多dynamics, 结构不稳定. 你看到到的有可能有好几个comformation
的混合物. RNA的结构很多变,dynamics是特点.
看看能不能再多加点一价金属,稳定一下结构.其实稳定结构镁离子最好,但是听说NMR不
能用镁. |
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s***m
发帖数: 6197 | 17
comformation
没这个说法。Mg2+这么重要的阳离子怎么可能不用。 |
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x*****o
发帖数: 441 | 19 和很多做RNA NMR的谈过,镁离子浓度过高会使谱图看起来很差,所以他们使用不超过5mM
. 要是想要稳定RNA结构,在buffer里面至少需要10mM.
你是做RNA NMR的?你平时用什么浓度? |
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r********d
发帖数: 58 | 20 hehe,多重构象
把盐脱掉
buffer用5个mM就可以了 |
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r********d
发帖数: 58 | 21 如果9个base pair中只有两个GC的话，那你的这个结构肯定不稳定 |
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z***q
发帖数: 907 | 22 非常感谢！
NMR可以用镁，但是浓度不能太高，因为镁可以broadern peaks.至于降解，只要温度低
于30C应该没有太大问题。
但是，想请问一下，如果没有已知的镁binding site,generally 镁仍可以稳定结构么？
非常感谢！
comformation |
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z***q
发帖数: 907 | 23 非常感谢!
请问你说buffer用5个mM是指5mM NaCl? 盐离子不是用来稳定结构的么？为什么脱盐后
反而可以改善多重构向呢？
谢谢！ |
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z***q
发帖数: 907 | 24 感觉结构是不太稳定，因为20C以上峰就更broad,完全成了馒头，连小叉子都看不见了。
但是为什么在imino region看不出多重构向呢？主要是imino region太好了，搞得老板
总是不想放弃，就说我做得不对，但他也不知道哪里不对。
请问现在只有改序列这一种办法了么？ |
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z***q
发帖数: 907 | 25 对的，镁离子浓度过高会使谱图看起来很差，所以一般不会超过5mM
但是，请问“要是想要稳定RNA结构,在buffer里面至少需要10mM”这个是对于任何浓度
的RNA都适用的么？
谢谢！
5mM |
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r********d
发帖数: 58 | 26 盐浓度越高，越有利于稳定dimer,trimer等结构
盐浓度低一点对single hairpin好
你干脆别加盐了，如果buffer是用phosphate来控制pH的话，那么加5mM的phosphate就
可以了
你sample concentration是多少？ |
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r********d
发帖数: 58 | 27 在结构末端多加两个basepair,把结构稳定下来
同时把盐脱掉，防止dimer的形成
再就是做NMR之前用heat and fast cool,不过个人感觉这个没啥帮助
了。 |
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r********d
发帖数: 58 | 28 在25度的时候，imnino region还好吗？
了。 |
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s***m
发帖数: 6197 | 29 同意rutherford的说法
你按他的建议试试看先
～～～～～～～～～～～～～～～～～～～～～～～～～
这个是要在不形成dimer的前提下
10mM |
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z***q
发帖数: 907 | 30 非常感谢你的建议！
我们实验室现在一般不用phosphate，直接用H2O+NaCl,然后pH the sample,据说得到的
谱图比较好，所以我从来没有试过加phosphate。
不过这样做可能的确有问题，pH 也不太准，我试试用5mM的phosphate，不加盐离子看
看吧
sample concentration 大约0.9-1mM.
请问这个浓度能做natural-abundance N15-HSQC么？
非常感谢！ |
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z***q
发帖数: 907 | 31 不好了。
不过即使稳定的结构，imino到了25度也会因为fast exchange 看不到了吧？ |
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z***q
发帖数: 907 | 32 就是说结构不稳定主要是端基没有GC的原因了？
我曾经做过一个mutation,就是把端基的2个UU都去掉，再把邻近UU的AU变成GC，这样就
有2个GC连在一起，可以transcribe了。然后发现得到的样品dimer有大概30%-40%，这
是不是说明不仅stem,其实loop也不稳定？
非常感谢！
~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~
这个我感觉也没什么用 |
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r********d
发帖数: 58 | 34 我觉得15N实验悬
不过可以试试吗，呵呵
pH还是要控制的，一般都是用buffer控制，不明白你说pH the sample是什么意思？ |
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r********d
发帖数: 58 | 35 那真是不稳定啊，呵呵
举个例子，DNA双螺旋的imino你到40度可能都还看得到，就因为这个结构非常稳定，呵呵 |
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r********d
发帖数: 58 | 36 这个问题要分两重看
第一，你加了GC之后，hirpin是比原来稳定了
第二，你加了GC之后新的序列形成的dimer可能比single hairpin更稳定，这个就和序
列有关了，没拿到结构，谁也说不太清楚，呵呵 |
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z***q
发帖数: 907 | 37 非常感谢你的回复！
pH the sample就是调样品的pH值啊，直接用NaOH,调到6左右。据说磷酸盐也会使谱图
变差，我没有试过。 |
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z***q
发帖数: 907 | 38 哦，长见识了，从来没有试过40C。。。。。
呵呵 |
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z***q
发帖数: 907 | 39 恩，你说的很有道理
感觉RNA的结构基本上由序列决定了，序列不行，怎么做都不行。。
再次感谢你的回复，给你发个包子吧 |
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C*********m
发帖数: 213 | 40 应该比较一下世界上做晶体有多少个组，做核磁多少个组，然后比一下发CNS文章的比
例。 |
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d****z
发帖数: 75 | 41 刚看到此文，很同意你的观点。其实结晶也是一工具， 不比核磁好到哪去。关键是体
系。
13C
MRI |
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b******3
发帖数: 377 | 42 不太清楚是如何操作的？是把溶在A中的高浓度蛋白直接倒到B溶液中吗？谢谢！ |
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g*****p
发帖数: 451 | 43 这个问题不难回答
从你以前的帖子已经知道你找到了酶被水解的位点
那你只需要合成一段相关的底物就可以了
然后还可以标记一下荧光，加点酶，看能不能切
要是能切的话，连kcat/km都可以算出来
如果能切，一般来说trans-leavage和cis-cleavage的认定才是
最头疼的事
一般来说得需要做个核磁或者晶体结构才行
要是你能拿到zymogen的结构呢，这个是比较好回答了
但你也说了这个酶不稳定，你想拿到zymogen的结构不做几个点突变把它稳定住
是不行的
不过现在为止你的实验数据有点让我困惑的地方（我不是说你的实验数据不对，只是说很
难解释这个现象，所以希望你先再确证一下）
1.你说4度放过夜，该酶都会变成truncated，这个和你开始express出来recombinant的
protease有两者混合的现象结合起来看，很难让我相信这个酶会有autocleavage的活性
因为要知道，ecoli表达重组蛋白，其细胞中的protease浓度是很高的。如果真的具有
自剪切活性，你根本不可能拿到full-length的protease,expression的时候就自己切光
了。因... 阅读全帖 |
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p****s
发帖数: 3153 | 44 他是意大利ssNMR的一霸，在意大利没有比他做ssNMR更牛了的吧，据说他有个哥哥是佛
罗伦萨的地方长官，所以他从不缺钱。不过我真没看见他的文章里有很多的中国名字，
估计不是谁想去就能去的。如果完全没有接触过ssNMR，估计是不可能去他那里吧我想.
..如果是做EPR或者生物无机的我觉得还有机会，毕竟他做金属蛋白。 |
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s********m
发帖数: 171 | 45 NMR奇人，固体，液态都做， paramagnetic nmr, NO.1, 应该有1000偏文章了吧。脾气
不好。
所有文章按姓氏排列，所以不是他排第一， 就是另一个教授banci排第一，如果你姓安
（an），可以去他们组，否则建议不要去。 |
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x******g
发帖数: 91 | 46 现在动不动就抨击ry、syg在国内搞大项目
不知道论据从哪来的
据我所知：
syg个人经费比ry多很多，其中最大的一块，是前几年Roche和诺华分别给了八位数
两人手上都有973，3000多万，这都是要分给四到五个课题组五年花的
现在比较大的，一个是联合生命中心，billion为单位的经费，但是国家只给大概60%，
分十年，其余学校从985里面掏；而且也不是给个人的，第一批fellow也有近20人
第二个是凤凰工程（蛋白质大科学工程），这个可能被抨击得最多，当初饶、施批评的
也是这个。不过这个最初就是饶子和和贺福初捣鼓的，后来饶子和到南开、11g到清华
，也是接手这个项目（当时这个项目已经快上马了，中科院在上海也搞了）；北大能挤
进去，主要也是原来核磁中心的实验设备
他在美国的时候” 如何如何。回了美国，看lz的记载，又是口口声声“八位数的经费
，什么项目都是我来审”。啥人啊。
在美国的时候抨击大科研项目，抨击国内科研不平；回了国立马就去抢大项目的钱，通
过中央的关系搞钱。
研究吗？
来学”？？忽悠一轮新的小孩过来贡献青春贡献人生？ |
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a*****v
发帖数: 128 | 47 不能结晶，有很大的区域是IDP
这个对于x-ray基本就是噩梦，所以就只是做核磁了。 |
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h******y
发帖数: 106 | 48 fresh phd，在美国老板不给推荐信，只能找国内的位置了。有一作jacs一篇，二作三
作jacs级别的文章4篇，核磁、电镜和蛋白质结构、动力学方向都可以，不知道在长三
角能找什么样的位置？ |
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x*****m
发帖数: 60 | 49 能做MRI的技术员是挺好的。就是担心MRI的工作职位比较少，不如clinical lab 好找
工作。你想一个医院能有几台核磁呀，能提供的工作岗位应该不会太多。要是学了2年
以后又找不到工作就更悲剧了。 |
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