h**********r
发帖数: 671 | 1 340 nm下测NADH，能否用普通的一次性的塑料比色皿还是得用石英的？多谢！ |
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j****n
发帖数: 3370 | 2 我们用plate reader读 用的普通的plate
普通比色皿应该没啥问题 |
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j***h
发帖数: 130 | 3 用比色皿测水溶液中色氨酸的浓度，但是发现现在无论如何都洗不干净了。
有稀硫酸浸泡，用稀NaOH 浸泡，水冲，醇洗，都试了，但是“洗”干净的比色皿装上
溶剂后总是还能看到色氨酸很强的荧光峰。
以前没有做过这方面的实验，大家能帮我出出主意么？
谢谢啦！ 同时也祝大家在新年快乐！ |
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E*****e
发帖数: 417 | 4 自己拿空比色杯测一下吧。普通比色杯有些340nm吸收还是有一些。 |
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a***a
发帖数: 40617 | 5 一个150kd，一个还大于500kd
不用UV都行，只要你柱子合适（s200）且上样量足够
组分手工收集的细一点（analytical的柱子，bed vol约28ml），那就0.5ml一个组分
prep柱子，bed vol约120ml，1ml一个组分
然后每个fraction取一点做bradford就可以判定峰的位置了（可以肉眼直接看）
如果你上样量不够，你没有连续动态监测UV的装置（如FPLC上自带的）
光靠取样用比色皿去自己测，那误差和variation都够你喝一壶的，你根本无法判断
峰的位置
结论就是
上样量必须够。如果上样量不够，还是得FPLC，虽然也是用UV的，但是那个很稳定
variation小，所以灵敏度和复现性都远远好于你用比色皿
这个讨论我看了半天，跟以前好多次一样，感觉学生物的大部分还是停留在书本 |
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a***a
发帖数: 40617 | 6 100ug，只能用FPLC了，别考虑比色皿了，根本测不出来，你测出来的都是
不同比色皿或者样品的variation
而且这个量，就是跑小柱子（而且基本跑完也不剩什么了，算上跑柱子，再浓缩
损失至少70%以上（因为你起始量就少，所以损失比例大）
你就你们学校或者附近学校找个有fplc的lab给你跑一下，equilibrate柱子30min
跑30min
1个小时的事情 |
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r********1
发帖数: 7345 | 8 近日，一则《十大街边小吃惊天内幕，真相令人胆寒!》的信息在微信上流传甚广，麻
辣烫、米线、烤鱿鱼、面筋都上了黑榜，不少网友惊呼“中枪”。连日来，记者从芙蓉
街、杆石桥、民生大街、七里山、山师东路等地小吃街或农贸市场购买了米线、烤鱿鱼
、面筋等多种小吃，送至食品快检单位进行检测，为您揭开济南部分街边小吃的真面目。
一个推车、几口不锈钢盆、一个液化气罐，再加上调料和各式串好的涮品就是一个麻辣
串小吃摊的全部家当。这样的摊位在济南街头随处可见，食者云集。然而，市民在尽享
“美味”的同时，殊不知这样的食品对身体有啥危害?制作的背后有多少秘密?
实验结果
4份麻辣烫汤底均含亚硝酸盐
记者从济南不同地点随机购买了4份麻辣烫的汤底送至食品检测机构。
工作人员从每份汤底中取5ml溶液，然后加入脱色剂使汤底颜色变清，并放入离心机。
离心机可使汤底中的固体与液体分离，减少数据误差。汤底经以上操作后，工作人员取
清液加入检测管中，滴入亚硝酸盐检测试剂并摇溶，10分钟内与标准色板对比，样品呈
现出紫红色的即为含有亚硝酸盐，颜色越深表示含量越高。实验结果显示，4份汤底均
含亚硝酸盐，分别为：1.0mg/L、0.... 阅读全帖 |
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m*********s
发帖数: 1188 | 9 狂赞你的分析...
呵呵, 俺不是学生物的....
我要分的东西没那么多, 撑死了0.1 mg.估计用不了那么大的柱子..
照你的分析, 120mL做120个比色皿测试, 俺还是饶了我自己吧, 宁可不做....要做我也
得弄个384 microplate, 然后用plate reader搞定. |
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h**********r
发帖数: 671 | 10 我圡，没怎么用过microtiter plate reader，都是用分光光度计来着，但是太费比色
皿。准备去别的实验室蹭microtiter plate reader，问题是OD超过1或者2是不是就要
稀释呢?问过他们实验室的人，也不清楚。请教了！
另外用nanodrop测DNA呢？上次测了个500ng/ul,应该也就不准了吧？
多谢！ |
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h**********r
发帖数: 671 | 11 我做微生物的lacz assay,手上待测和重新engineer的promoter有30多个吧，用lacZ的
酶活来看不同promoter的activity.有的还得用不同的诱导条件。
想在自己实验室反应完全后再出去测。
没想到这么挫啊！用分光光度计测还行，就是累和太费比色皿。 |
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F******k
发帖数: 55 | 12 用漂白剂试试，就是家用的那种含氯的就行
多泡一会 |
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