x******n
发帖数: 8550 | 1 去离子水，就是通过离子交换柱把水里的离子去掉后得到的一种纯净水。
一般自来水，如果是比较‘硬’的水，含钙，镁离子多。
比如这个大花蕙花对水质要求比较高，喜微酸性水，对水中的钙、镁离子比较敏感。也
有个建议用雨水。如果家里有净水机，可以用净化水。 |
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b*s
发帖数: 82482 | 3 来自主题: LeisureTime版 - 异国的雪 建议过一下离子交换柱
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.2 |
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x*******a
发帖数: 11067 | 4 来自主题: LeisureTime版 - 异国的雪 离子交换柱是软化水用的，没有用。这个你撞我枪口上了。 |
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l*****k
发帖数: 5933 | 5 来自主题: LeisureTime版 - 异国的雪 半杯绿水一鉴开，
天尘碧影共徘徊。
问茶那得清如许，
离子交换过滤来。
兼献给茶总老师 |
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f*******e
发帖数: 8974 | 6 不知道这些辐射源能不能过滤掉，就像普通的离子交换这类方法 |
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H********g
发帖数: 43926 | 8 不会吧，锅炉那是软化水，过了离子交换（磺化煤）的。装磁铁啥原理啊，真想不出来。 |
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a***n
发帖数: 1993 | 11 《方术纪异》 王亭之
王亭之原名談錫永，廣東南海人，雖攻讀化學，但出身八旗世家，少習琴棋書畫、醫卜
星相諸學，對子平、易理更為有研究，雖從事金融，但性喜文史哲學，信仰佛教，後隨
中州派劉惠蒼師父習紫微斗數，得其真傳，使其在香港發揚光大，收門徒四十人，成立
紫微斗數學會，從事學術性研究。然其平生所慕，實為佛學，自大學時代即已研究，二
十八歲時得機緣修習西藏密宗，隱居夷島六年，配合經論修習，近年更編纂《佛家經論
導讀叢書》、《甯瑪派叢書》，甚得好評。
序
对於方术，王亭之一向抱著既不全面否定，亦不全面肯定的态度。为甚么不否定，
因为有些人的确具有超乎常人的根识，例如人的听觉受声波幅度限制，假如能超越这些
限制，那就可以听到一般人所不能听到的声音，在方术的层面，就可以称为「道术」，
或如今人之称为「异能」。
然而为甚么又不肯定呢？
任何方术，包括星相风水，都有它的局限性，是故许多称为「大师」的人，渔色渔
利或者得意，可是其际遇却往往不足为外人道。由是可见方术之不足尽恃。至於不学无
术之辈，假方术之名，迹同行骗，那就更不在讨论范围之内。
了解方术的局限，非常重要，否则便会变成迷信。古往今来，许... 阅读全帖 |
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c*******n
发帖数: 1648 | 12 《连线》杂志近日刊载文章，讲述了特殊玻璃和陶瓷材料的全球领导厂商康宁（
Corning）是如何创造超薄的、强度超高的未来玻璃材料的。文章指出，玻璃是一种经
常都会看到，以至于实际上已被人们熟视无睹的材料，但在实际上现代工业玻璃是极其
复杂的一种东西。
以下是这篇文章的全文：
Zoom out
熔融态玻璃冷却后变得很有粘性，以至于可用剪子切割
唐· 斯图基（Don Stookey）原以为自己把实验搞砸了。在1952年的一天，
这位康宁玻璃厂（Corning Glass Works）化学家将一块光敏玻璃的样本放
到火炉中，将温度设定在600摄氏度。在加热过程中的某个时刻，一名控制员犯了错误
，将温度提升到900摄氏 度。斯图基原本以为这块玻璃将会熔化，火炉也将被烧
毁；但当他打开炉门时却奇怪地发现，这块锂硅酸盐玻璃已经变成了一块奶白色的薄板
。当他试图拿出这块薄 板的时候，由于钳子未能夹紧的缘故，导致这块玻璃样本
滑落在地，但却没有摔碎，而是弹了起来。
斯 图基后来入选了美国国家发明家名人堂（National ... 阅读全帖 |
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w***g
发帖数: 712 | 13 简历
卓仁禧,男,汉族,福建厦门人。1931年2月出生于福建厦门。高分子化学家。现任武汉大学化学与环境科学学院教授、博士生导师。1997年当选为中国科学院院士。1953年7月复旦大学毕业后,到武汉大学化学系任教。1957-1959年去天津南开大学进修,在前苏联专家指导下进行有机硅化学研究。1983-1984年在美国耶鲁大学从事生物活性化合物研究。现任武汉大学"教育部生物医学高分子材料开放实验室"主任,兼任教育部科技委员会委员、中国生物材料委员会副主席、国家自然科学基金委员会学科评审组成员等职务,还担任《离子交换与吸附》和《Chinese Journal of Reactive Polymers》副主编,《Polymer International》执行编辑,《高等学校化学学报》、《高分子学报》等杂志编委。
研究领域
生物医用高分子,有机磷高分子,磁共振成像造影剂,固定化酶,有机硅高分子。
所开课程
主讲《当代化学》、《生物医用高分子化学》等课程。
科研成果
70年代,研制成功长链烷基三烷氧基硅烷作为光学玻璃防雾剂,应用于多种光学玻璃器件作为保护涂层。80年代以来,开 |
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r****o
发帖数: 105 | 14 本文献给YL
（八）”液体DEAE“
绕了这么大一圈，现在再回到第一个模块的实验来。前面提到Dr.Burgess要我们
试Gudn HCl溶解sigma32之后的重折叠，结果很糟糕。我们接着试了用sarkosyl做
变性剂的蛋白重折叠。步骤和前一个类似，只是这一次是突然稀释至25倍体积。效果
好了很多，至少没有浑浊现象了。接着我们用Poros HS 50，一种阳离子交换柱，
来把可溶的sigma 分离了出来。为什么这一次用Poros HS 50 而不是前面用的阴离
子交换柱呢？因为sarkosyl带负电，会与阴离子交换柱结合得很好。再加上sigma32
很奇怪，既有负电的表面，又有带正电的表面，所以可以用阳离子交换柱。值得一提
的是绝大部分蛋白质都是偏酸性，所以阴离子交换柱用的比阳离子交换柱频繁得多。
好了，聊完离子交换柱，现在回到Dr Burgess要我们作的另一个很重要的实验。
Sigma32在大肠杆菌过表达的时候，绝大部分都是inclusion body,但是也有一部分
是可溶的。这些可溶的sigma 32可以和细菌体内的Core RNA polymerase结合形
成复 |
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j*********n
发帖数: 168 | 15 如果对蛋白的纯度还没准确测量，那就分别上5、10、15（加了loading buffer）后的
，大致估一下，下次照此办理……
细胞裂解的上清，杂蛋白比较多，可以稍微少上点样；经过凝胶柱或者离子交换提纯的
，要少上些……
跟做菜一样，放多少盐，你自己嘴巴尝尝就有数了……
当然，你得先会做菜。
你问的好几个蛋白分离，检查的问题都很入门啊，不是入错了行吧…… |
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l*******1
发帖数: 128 | 16 NaCl在Ni柱纯化中是用来避免杂蛋白非特异性地以离子交换方式吸附到介质上。
如果没有记错，至少0.3M是必须的。0.5M很多人用。0.1M太低了。 |
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T**********t
发帖数: 1604 | 17 gel filtration是最难填好的柱子了，因为它的分离完全是靠样品的size difference
，所以柱子的均匀程度直接影响分离效果。其他像亲和柱，离子交换柱什么的，因为有
一个先结合再洗脱的过程，所以对柱子的填装质量要求没那么高。
柱子均匀与否，有的时候肉眼很难判断的。你装好了之后跑一个蓝色葡聚糖，看看条带
会不会跑成歪歪斜斜的就知道了。 |
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g*********r
发帖数: 9366 | 18 恩，没错
离子交换没有办法直观判定
很多时候离子吸附和解离的效果类似，于是峰甚至完全重叠 |
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e****s
发帖数: 1125 | 19 为什么不在Nickle以后试一下离子交换柱子或者疏水柱子？ |
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m********r
发帖数: 124 | 20 Btw,你的蛋白在我眼里已经很纯了，250或者 500的盐都是，我都不好意思上我的胶图
了，我的融合蛋白量（25KD）在全菌裂解里也有70%以上是目标蛋白，但是到了咪唑洗
脱就成了40%的样子，主要就是在10-15KD有两个很大量的杂蛋白。这个让我感觉是降解
的；
GST 我有另一个麻烦，就是free GST很多，摇再多的菌，也有一半以上的GST 结合到
beads上，fusion protein相对结合的少啊，这也是我GST表达一直没解决的问题。
至于说离子交换，我还没试。但我想尝试上来就用它，而不是Ni之后。我们没有mono的
，都是大体积的。不知道有什么要注意的
还有就是大家有没有用那个pET-DUET载体成功表达稳定蛋白的例子啊，我在国内的时候
试过，不是很好用。 |
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z******g
发帖数: 5 | 21
1.不知道你是不是纯化做的不多还是太矫情，从你的电泳图来看，那已经很纯了。下次
优化一下
ni column的过程，再过个Q、S，gel filtration之类的，那点杂带早就不见了。而且
你做NMR，
又不用结晶，也用不着那么纯。
2.做complex的都愁着蛋白不结合，没有人愁着结合的分不开。想分开办法多着呢，提
高NaCl浓
度，离子交换什么的都可以试试 |
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e****s
发帖数: 1125 | 22 Fast Flow应该就能用于Gravity column。 |
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C*******e
发帖数: 4348 | 23 谢谢!用的就是这个guide
选出来三个
Capto S
SP
CM
然后Capto S比后两个贵一倍
不想用FPLC是本来就是粗提
条件摸好了以后gravity column也比较快
然后后面再上亲和层析(有tag)
还有一个是我们没有空柱子
然后这个县Cation exchange再Affinity的想法我没有试过
不知道好不好使
所以不想一下子再买好多东西
就想gravity column先试试
http://www.gelifesciences.com/aptrix/upp00919.nsf/Content/86545
257628001CC7BA/$file/18112731AH.pdf |
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T**********t
发帖数: 1604 | 24 哦，没有空柱子那就用gravity column先试试吧，空柱子买一根还挺贵的。既然你是粗
提，那就不需要用那么贵的Capto S了。用SP column吧。我的蛋白也是pI在10左右，就
是用SP纯化的。没用过CM柱子。 |
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C*******e
发帖数: 4348 | 25 谢谢!已经订了.
等东西到了可能还会有技术问题请教哈. |
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g*****p
发帖数: 451 | 26 你这个结果没办法自圆其说
你用阳离子再用亲和
和先用亲和有啥区别
原来纯化出来的容易沉淀，现在的就不沉淀了？
我想你还是得把原因搞明白才行
除非你的蛋白本身要么是什么核酸结合造成溶解性降低
要么结合了其他乱七八糟的东西导致这个结果
你用离子交换的的时候不小心把这些组分去掉了
不过这个可能性很低了
你这个实验结果太可疑了 |
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l*******6
发帖数: 378 | 27 从一个醇，想做成pyrophosphate （farnesol pyrophosphate）; 反应应该做成了，纯
化了几次没成功。
谁做过类似的，给个具体纯化procedure，用离子交换柱子的，我没有hplc。 我做出来
后，付100伪币。 |
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s*******e
发帖数: 1010 | 28 说句玩笑话，这个问题的答案永远是case by case。如果你的蛋白表达量很高（>mg/
Liter）是有可能的，但是一般都需要在亲和洗脱后加一步分子筛或离子交换进一步纯
化一下才能达到90%。如果你在蛋白质和亲和标签之间加了特异性蛋白酶（TEV，
FactorXa之类的）位点的话，可以考虑上柱之后用蛋白酶切下蛋白而非洗脱，这种情况
一般比洗脱得到的蛋白纯度高（因为相当于针对标签和酶切识别序列进行了双重纯化）
，但要小心有的蛋白结合亲和柱后对蛋白酶有抗性的情况。 |
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k******0
发帖数: 1073 | 29 试试vivapure spin column离子交换柱。
基本上象质粒抽提，上样离心，蛋白质结合，其它（包括ATP）通过，加高盐洗脱蛋白
质。5min搞定。
很好用的柱子。我用于浓缩蛋白质长晶体。 |
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s******y
发帖数: 28562 | 30 可是这个如果是离子交换柱，应该和具体的蛋白的PI值有关系吧？
会不会限制于只能用于碱性蛋白什么的？不然的话ATP也会结合上去啊。
还是莫非其实是一个疏水结合柱？ |
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b******y
发帖数: 627 | 31 For LZ,
sunnyday's desalting method is the best to try. I will be surprised if it
doesn't work. I guess you have to use a syringe because nobody likes to
inject 32P into their FPLC. In that case, you should be careful of the
fraction size. Don't mix two well separated peaks during fractionation.
kaka1000's vivapure spin column离子交换柱 is a cation/anion exchange column,
to which unlimited volume can be loaded. In the end, elute with B buffer.
The peak is sharp because the salt concentration is high ... 阅读全帖 |
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s********n
发帖数: 2939 | 32 离子交换是根据pI来的，pH>pI，anion exchange; pH
用size exclusion会比较方便 |
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s********n
发帖数: 2939 | 33 离子交换是根据pI来的，pH>pI，anion exchange; pH
用size exclusion会比较方便 |
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c******y
发帖数: 148 | 34
我解释一下吧：我说的是“不差”。
先比较一点吧，想到哪里写到哪里！
硕士在国内上的，要做蛋白纯化，06年的时候，可能全校也就两台akta蛋白纯化系统吧
，一台就在本科教学实验室。2010年，在德的第二年，系里面组织参加akta的培训，到
了现场，我一下子就愣住了：刚买的16台仪器......
随后，我想起来了我们本科专业实验，2003年的时候，我们的生物技术大实验，要做蛋
白纯化，2个人一组。其中包括离子交换层析和凝聚过滤层析，都是我们自己装的柱子
，然后链接蠕动泵和核酸蛋白检测仪。
好吧，我想说明的问题是：虽然我不知道2003年lmu生物系的本科教学情况，但是，母
校生物技术系也为我们创造了当时最好的条件。就是钱多少的问题，决定了用什么样的
仪器... |
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s*****g
发帖数: 7857 | 35 王镜岩的生物化学+
本科生物技术大实验，要做蛋白纯化，2个人一组。其中包括离子交换层析和凝聚过滤
层析，都是我们自己装的柱子，然后链接蠕动泵和核酸蛋白检测仪。
----泪奔而过。。。 |
|
c******y
发帖数: 148 | 36
我解释一下吧：我说的是“不差”。
先比较一点吧，想到哪里写到哪里！
硕士在国内上的，要做蛋白纯化，06年的时候，可能全校也就两台akta蛋白纯化系统吧
，一台就在本科教学实验室。2010年，在德的第二年，系里面组织参加akta的培训，到
了现场，我一下子就愣住了：刚买的16台仪器......
随后，我想起来了我们本科专业实验，2003年的时候，我们的生物技术大实验，要做蛋
白纯化，2个人一组。其中包括离子交换层析和凝聚过滤层析，都是我们自己装的柱子
，然后链接蠕动泵和核酸蛋白检测仪。
好吧，我想说明的问题是：虽然我不知道2003年lmu生物系的本科教学情况，但是，母
校生物技术系也为我们创造了当时最好的条件。就是钱多少的问题，决定了用什么样的
仪器... |
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s*****g
发帖数: 7857 | 37 王镜岩的生物化学+
本科生物技术大实验，要做蛋白纯化，2个人一组。其中包括离子交换层析和凝聚过滤
层析，都是我们自己装的柱子，然后链接蠕动泵和核酸蛋白检测仪。
----泪奔而过。。。 |
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b******n
发帖数: 4225 | 38 不知道工业化蛋白纯化怎么弄的
是不是盐析+离子交换柱？
感觉很多限制性内切酶的生产应该是用tag的吧
另外现在来自虾的碱性磷酸酶很少了，不少公司开发来自E. coli的重组蛋白 |
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s******9
发帖数: 283 | 39 NEB大部分的限制性内切酶都是recombinant的，一般不带tag。
提纯是通常就是离子交换，分子筛和疏水作用，要2-6步达到95%的纯度。 |
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a****n
发帖数: 79 | 40 低浓度蛋白的His纯化之前用IP(antibody)浓缩? 在本身就很杂的细胞extract中增加蛋
白不是好的开始,比较routine的办法用离子交换树脂(Ion exchange)浓缩后脱盐再过
His柱,根据结果再继续纯化.前面的步骤不要加任何SDS,SDS不可能靠脱盐就能洗脱的,
会严重干扰后续纯化,最后也很难复性. |
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e**e
发帖数: 166 | 41 谢谢你的答复
我的蛋白复合体是植物组织中提取的天然蛋白。 我测到其中的一个糖基转移酶活性很
高，所以想纯化出来做proteomics. 我的设想是cell lysate 做盐析，然后过sec gel
filtration
最后做离子交换柱。 请问你有什么好的建议吗？
谢谢 |
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t******o
发帖数: 5314 | 42 分盐和PEPTIDE用离子交换更有效吧。
modifier |
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D*****t
发帖数: 324 | 43 沉淀来自于钙镁溶解物吧?
即使是离子交换树脂功能的filter, 是不是对此也无能为力啊? |
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a****n
发帖数: 53 | 44 建议先过过反向柱，成功了ok，不成功的话就怀疑二酸和盐生成了某种adduct，比如超
分子作用，那么也许需要先进行离子交换，再分离。
DMF |
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s*******h
发帖数: 3731 | 46 你是找离子交换树脂还是找proton sponge？
还是找固体强酸？
solvents |
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t******t
发帖数: 3045 | 47 溶液中的离子都是带水的，不是裸的啊
取决于你最后想要什么？
从KCl 到 KOH?
用离子交换柱把离子吸附了，再洗出来？ |
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k****x
发帖数: 2751 | 48 厨房里面装一个2米的fume hood，多大的油烟也不怕老人抱怨美式厨房没有门，搞得家
里到处是油烟。Hood旁边放一温控摇床，酿个米酒，绝对容易。一套蒸汽灭菌锅炉，那
是必须的，保证每次发酵成功。储存市里面丢一套真空泵，连上双排管，（对，就是
chemglass牌的，post dog都认这牌子）对，还要附上氩气罐(氮气太便宜，不要)你说
要这设备干什么？连上真空箱，炸好的馓子、油条放里面，先上真空，然后氩气一直通
着，一万年后拿出来都脆蹦不坏。这不比大农村华人超市里面的冰冻油条强太多了。
老美的自来水还不够好，等上净水器，什么？ PUR是名牌？ 那多不专业， 要上
millipore的一整套，什么离子交换树脂，UV杀菌，0.22um过滤，一个都不能少。一测
电阻，哟，18.2M欧姆，看这数字就知道它够纯，喝着那个放心加舒心啊。瞧这水软的
，洗衣服还省肥皂呢，丈母娘一定喜欢。
咱有钱了，那么用盐就要讲究一个字，纯！不要被什么天然海盐糊弄，谁知道里面有些
什么重金属。sigma 99.5%的NaCl还不能彰显咱有钱人的气势，要上merck 99.99才好。
大功率超声那是一定要备一台，啊... 阅读全帖 |
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j***j
发帖数: 560 | 49 没有用过。
现在要用阳离子交换树脂来把水溶性的磺酸钠盐或钾盐做成磺酸。有没有人做过，分享
一些经验，谈谈如何操作？谢谢！ |
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s*******h
发帖数: 3731 | 50 先把树脂用盐酸还是啥的弄酸了，然后就上钠盐。。。一般树脂都有使用指导啊。。 |
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