k****n
发帖数: 158 | 1 各位同修,
请赐一个梯度离心分离dendritic cells (mouse)的 protocol, 给了文献或者公司的链
接就可,
谢谢 |
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r********n
发帖数: 149 | 2 首先,纳米颗粒的分离有个比较简单的方法,加入不同极性溶剂,让其絮凝,然后离心,超
级容易.当然再分散时,需要在加入溶剂后超声分散.
纳米颗粒容易团聚,所以一般都是分散在溶液中保存,在离心/洗涤过程中,始终要保持纳
米颗粒上面吸附一定溶剂(湿的),且离心分离后尽快分散,不然就会发生不可逆团聚.^_^
不加别的溶剂,只能用高速离心机,10000-16000,这个时候在离心以后重新分散需要超声
时间比较长,大概30分钟吧.以前搞过一段时间的纳米粒子. |
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g***y
发帖数: 4784 | 3 呵呵，我都用20,000转
首先,纳米颗粒的分离有个比较简单的方法,加入不同极性溶剂,让其絮凝,然后离心,超
级容易.当然再分散时,需要在加入溶剂后超声分散.
纳米颗粒容易团聚,所以一般都是分散在溶液中保存,在离心/洗涤过程中,始终要保持纳
米颗粒上面吸附一定溶剂(湿的),且离心分离后尽快分散,不然就会发生不可逆团聚.^_^
不加别的溶剂,只能用高速离心机,10000-16000,这个时候在离心以后重新分散需要超声
时间比较长,大概30分钟吧.以前搞过一段时间的纳米粒子. |
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a**********3
发帖数: 86 | 4 各位大牛，请问flushing out和离心分离两种方法哪种更好？我看文献有冲洗分离好像
是常规的方法，但为了方便想采取离心分离出骨髓，不知道这种方法好不好，请有经验
者不吝赐教。另外，一个wistar鼠的两个股骨提取出来的细胞数够不够？想放在100mm
dish里养着传代 |
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y*******n
发帖数: 127 | 5 超速离心应该比较靠谱，2nm的金纳米粒子都可以用超速离心分离。 |
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a***m
发帖数: 174 | 6 我猜想可不可以把第一次的离心的细胞悬液中感兴趣的内容取出来再稀释, 再配方，二
次离心分离？ |
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发帖数: 1 | 7 九、冶炼
方法一三氧化二铝保护碳电极，水冷铁护套，隔离冶炼土壤岩石。粉碎，填满空隙。
电极，空气不要氮气保护。碳酸钠氢氧化钠溶液吸收废气。电流冶炼。把高电阻岩石投
入低电阻岩浆
1、三氧化二铝保护层，碳芯，渗铝钢，水冷或空冷氮气吹气保护气体。划刻敲碎凝结
玻璃。
2、石墨碳电极高压交（直）流电放电电流加热。
3、二氧化硅蒸发，沸点前，后，2230度。碳化硅管道，高温胶，空冷。
左右移动后置式吹风扇。
烟雾冷却管道，或水冷（帘喷雾）吸收，或负压水冷吸收。二氧化硅水去尘。
空气冷却管道，空、水蒸气混合冷却管道。
出矿。环保。蒸发氯盐去放射性。
如果用空气需要全部吸入碳酸钠溶液中，防止硝酸腐蚀。
换坑。
500千伏高压直流电直流电，即使是花岗岩20万电阻率，10平米5米每秒25mw，25000焦
尔每克，20吨每坑每天，300多万个连坑。
先管道空冷水冷灰尘；吸气风机在碳酸钠池后，气管底孔排气，拍尘，可疏通。多几个
碳酸钠池。酸池吸收，a盐酸水池，b、空冷，c凉水池，d氨水池，e亚硫酸钠池，f碳酸
钠池，再酸洗二氧化硅。竖炭化硅管冷却。酸池盖
蒸发池熔岩水平下降无异常
气流方向控制。
碳电极... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 8 十四、矿产冶炼系统
1、 集中挖一地，运河、水库、蓄能电站。
2、 矿产公司分布在电厂，不集中。
3、 空调服，制冰机冰服。
4、 先有炉盖电极防尘。后无炉盖电极提高到2000度。封闭室水冷空冷系统
5、 封闭室密封门，二氧化碳注入吸出系统。
6、 输出二氧化碳管道。每秒2.5立米。管道通多个罐的上端。玻璃钢罐或复合罐。
7、 硅酸钠池对半使用。二氧化碳气体循环系统。液体注入吸出系统。反应时间结
束后吸出压滤。
8、 离心材料，钛，硬塑，玻璃钢，等。
9、 压滤材料，钛，硬塑，铁，塑料复合等。碳化硅、氮化硅轴承。
10、 碳酸钠溶液300度水蒸气蒸发。玻璃管道冷却。数据没问题。
11、 活动转移轨道。
12、 沸腾床？结合光热。玻璃罩。控制在200度，多倍碳酸钠堆列。不完全蒸发可
后期电加热彻底蒸发水分。
13、 冶炼室冷却，水冷。胶密封高温塑料。
14、 轨道交直流电极。
15、 冶炼蒸汽空冷
16、 电厂空冷冷却用金属数量没问题。
17、 1万平方公里镜面2000亿吨水。
18、 ... 阅读全帖 |
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M*********m
发帖数: 2024 | 9 新华网巴黎１０月１０日电（记者卢苏燕）世界大型核工业控股公司阿雷瓦公司及浓缩铀
财团日前决定成立一个联合公司，共同改进开发“离心分离法”浓缩核燃料的新技术。
据此间收到的两大企业联合发布的新闻公报，双方各为即将成立的联合公司投资５０
％，有关合作开发的意向书业已签署。
法国专家介绍说，核电站所使用的核燃料中铀－２３５的含量应该在３％至５％，而
天然的铀中只含有０.７％的铀－２３５。浓缩铀的目的就是要提高天然铀中铀－２３５
的含量，以满足核电站的需要。目前，浓缩铀的方法主要是“气体扩散法”和“离心分离
法”。前一种方法是根据含铀－２３５的分子比含铀－２３８的分子更容易通过多孔障蔽
细孔的原理，把天然铀制成六氟化铀气体，并使它通过多孔障蔽，从而得到铀－２３５含
量高的核燃料；而后一种方法则是使用高速转动的离心机，分离出质量和体积与铀－２３
５稍有不同的铀－２３８，使铀－２３５含量加大。与“气体扩散法”相比，“离心分离
法”更节能、更先进。此次阿雷瓦及浓缩铀财团两大公司即将合作进行的正是改进开发浓
缩铀的“离心分离法”，以进一步提高浓缩铀的效率，降低成本。
阿雷瓦公司是世界上最大的核工业控股 |
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z**n
发帖数: 22303 | 10 【 以下文字转载自 Wisdom 讨论区 】
发信人: lajolla (lajolla), 信区: Wisdom
标 题: 修出离心的几个窍诀—希阿荣博堪布
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Dec 23 23:04:58 2011, 美东)
人们常说把修行融入生活中，可奇怪的是，尽管我们很努力，修行却仍然与我们
的生活若即若离。当我们打坐、念经、微笑面对他人时，我们觉得自己做得很好，真正
是把佛法运用到生活中了；可是在我们沮丧、愤怒、疼痛、委屈的时候，佛陀的教诲便
开始记不清。除了当时极其鲜明而强烈的屈辱感、挫败感外，其他一切都退到模糊的背
景中去了。也许有人不禁要怀疑上师教给我们的种种方法是否真的有效。
为什么修行不能持续地改变我们的生活？为什么让很多人脱胎换骨、自由觉悟
的佛法到了我这里就总是失效？也许答案就在于我们把生活抓得太紧。不论自觉或不自
觉，生活中的一切对我们来说都太重要，工作、家庭、金钱、声誉、感情，我们希望这
一切都尽在掌握中，四平八稳，安全放心。为此，把全副精力都投入进去还不够，还要
通过修行为生活上保险。然而，生活就像我们手里握着的沙，抓得越紧流失得越... 阅读全帖 |
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q****u
发帖数: 1421 | 11 【 以下文字转载自 Wisdom 讨论区 】
发信人: lajolla (lajolla), 信区: Wisdom
标 题: 修出离心的几个窍诀—希阿荣博堪布
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Dec 23 23:04:58 2011, 美东)
人们常说把修行融入生活中，可奇怪的是，尽管我们很努力，修行却仍然与我们
的生活若即若离。当我们打坐、念经、微笑面对他人时，我们觉得自己做得很好，真正
是把佛法运用到生活中了；可是在我们沮丧、愤怒、疼痛、委屈的时候，佛陀的教诲便
开始记不清。除了当时极其鲜明而强烈的屈辱感、挫败感外，其他一切都退到模糊的背
景中去了。也许有人不禁要怀疑上师教给我们的种种方法是否真的有效。
为什么修行不能持续地改变我们的生活？为什么让很多人脱胎换骨、自由觉悟
的佛法到了我这里就总是失效？也许答案就在于我们把生活抓得太紧。不论自觉或不自
觉，生活中的一切对我们来说都太重要，工作、家庭、金钱、声誉、感情，我们希望这
一切都尽在掌握中，四平八稳，安全放心。为此，把全副精力都投入进去还不够，还要
通过修行为生活上保险。然而，生活就像我们手里握着的沙，抓得越紧流失得越... 阅读全帖 |
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l*****a
发帖数: 31 | 12 人们常说把修行融入生活中，可奇怪的是，尽管我们很努力，修行却仍然与我们
的生活若即若离。当我们打坐、念经、微笑面对他人时，我们觉得自己做得很好，真正
是把佛法运用到生活中了；可是在我们沮丧、愤怒、疼痛、委屈的时候，佛陀的教诲便
开始记不清。除了当时极其鲜明而强烈的屈辱感、挫败感外，其他一切都退到模糊的背
景中去了。也许有人不禁要怀疑上师教给我们的种种方法是否真的有效。
为什么修行不能持续地改变我们的生活？为什么让很多人脱胎换骨、自由觉悟
的佛法到了我这里就总是失效？也许答案就在于我们把生活抓得太紧。不论自觉或不自
觉，生活中的一切对我们来说都太重要，工作、家庭、金钱、声誉、感情，我们希望这
一切都尽在掌握中，四平八稳，安全放心。为此，把全副精力都投入进去还不够，还要
通过修行为生活上保险。然而，生活就像我们手里握着的沙，抓得越紧流失得越快。在
无常面前，以强化生活和自我为目的的 修行变得支离破碎，收效甚微。我们若能放
松下来，不把生活中的每件事都看得至关重要，而是将更多的注意力放到修行上，生活
并不会因此变得更糟。相反，真正的转变会在这时出现，我们也会因为放松而第一次尝
到自由的滋味... 阅读全帖 |
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g***y
发帖数: 4784 | 13 这种因情况而定了，有的时候离心以后团聚了，很难重新分散的
找找相关文献吧
多谢
前几天刚刚尝试了下离心的方法，但好像有些问题，一是离心后
还是有很多颗粒在溶液里，还有就是离心后沉淀到离心管底的颗粒
很难再分散开，不知为什么.. |
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f***o
发帖数: 883 | 14 中新网6月18日电 环保部日前在其官方网站公布《关于全国民用核设施综合安全检查情
况的报告》，并征求社会各界的意见和建议。报告指出，中国民用核燃料循环设施风险
受控，安全是有保障的。民用核设施在选址中对地震、洪水等外部事件进行了充分论证
，发生类似福岛核事故的极端自然事件的可能性极小。
日本福岛第一核电厂核事故发生后，国务院常务会议立即部署对全国核设施开展综
合安全检查。环境保护部(国家核安全局)、国家发展改革委、国家能源局和中国地震局
共同组织实施了运行和在建核电厂的检查工作；环境保护部(国家核安全局)组织实施了
民用研究堆与核燃料循环设施的检查工作。
报告称，中国目前共有15台运行核电机组，分别为位于浙江秦山核电基地的秦山核
电厂1 台30 万千瓦级压水堆型机组、秦山第二核电厂4 台在参照大亚湾核电厂基础上
由我国自行设计建造的60 万千瓦级压水堆型机组、秦山第三核电厂2 台从加拿大引进
的70 万千瓦级重水堆型机组；位于广东大亚湾核电基地的大亚湾核电厂2 台从法国引
进的百万千瓦级压水堆型机组、岭澳核电厂4 台在大亚湾核电厂基础上改进的机组；江
苏田湾核电厂2 台从俄罗斯引进的百... 阅读全帖 |
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k**i
发帖数: 93 | 15 多谢
前几天刚刚尝试了下离心的方法，但好像有些问题，一是离心后
还是有很多颗粒在溶液里，还有就是离心后沉淀到离心管底的颗粒
很难再分散开，不知为什么.. |
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d*******n
发帖数: 78 | 16 请教一下：孢子从一些固体不溶杂质（比如蛋白之类的），分离出来后，怎么检测纯度
的？
除了离心，还有什么常见的分离方法么？
多谢 |
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C********g
发帖数: 211 | 17 如果你的particle size够大，用超速离心机可以分离.
如果particle size小于5nm,并且particle所属的固体物质密度比较小，很难分开。我
用120000rpm不能从氯苯中离心出7nm的硅particles.
如果你想根据particle size分离得到单一分布的，我想Field Flow-Fractionation可
以做到，表面只有一种有机分子最好。 |
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i*******y
发帖数: 115 | 18 我加入了中国和美国的骨髓库，可是很遗憾，到现在为止都还没有和我配上型的。
科普一下吧。
抽骨髓实际上是需要造血干细胞，现在比较好的方式就是用外周血干细胞动员剂把干细
胞弄到血液中去，然后把血抽出来，将干细胞离心分离，然后把剩余的部分输回去。不
管是中国还是美国，离心的管线都是一次性的，一大包，拆开后直接整体安装到采集机
上面，不存在交叉污染的问题。
这样的好处是不怎么痛，但如果被捐助人太大，捐助人太小等原因，可能造成这种方法
采集到的干细胞太少。
这就需要从骨头里面直接采集干细胞。就像上面有些ID说的那样，会痛，需要麻醉，完
了还需要休息，毕竟这算是一个手术。
但不管怎么说，比起拯救一个生命来说，一些疼痛算什么呢？ |
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r*****5
发帖数: 1876 | 19 谢谢你的建议，
我现在是用NP40 溶，然后冰上放10分钟，之后800G离心，分成两部分， 之后再用NP40
洗两遍核，然后用TBST-OG提取蛋白（我的是膜蛋白，很崩溃，一般的溶剂好像还不可
以），4度剧烈震荡30分钟，之后离心，
不过感觉不是很干净
但是我还觉得比公司的要好，哈哈
first |
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s******s
发帖数: 13035 | 20 是十倍体积，不是10x
用pbs或者medium冲稀了，离心下来，渣子多的话，用histopaque分离一下，
然后洗一下就行了 |
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r********n
发帖数: 149 | 21 20000有点太快了,离心以后很难分散好.最好是加不同极性溶剂和离心相结合
_^ |
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i*****i
发帖数: 1 | 22 超声以后再离心可以分开，那就是因为离心速率太小了？ |
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l*******1
发帖数: 16217 | 23 超速离心分离是根据密度，溶解性不同分离，很多是粗分，
跑胶分是根据分子量和等电点分，细分，还能标识和记录 |
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V********n
发帖数: 305 | 24 如果是lipid raft，似乎可以用超速离心fractionation分离。不过不确定蛋白聚集区
域是否是lipid raft。 |
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c********r
发帖数: 15 | 25 如果你的样品不是单分散的，你似乎不应该用Marlven HPPS来分析。我看网上的信息
，Hpps不适合测粒径分布。
测试出来多个峰，可能原因1，你的PS衍生物有多个分子量分布，2，样品没有完全溶
解好就测试。对于原因2，你可以先恒温搅拌振荡一定时间或者超声振荡，然后离心分离
，把你看到的小颗粒分离掉。
测粒径分布一般都是用光闪射dynamic light scattering。 |
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g***y
发帖数: 4784 | 26 离心
各位都是怎样分离纳米颗粒和溶剂的呢？比如反应后润洗的过程，
或想改变体系溶剂等，由于尺寸比较小，过滤应该很难吧？
还有一个问题，怎样解决颗粒之间或同容器壁的互相团聚呢？
抱歉可能问题比较低级，以前没怎么做过相关的工作，多谢各位！ |
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c***s
发帖数: 70028 | 27 网上出现的各种“寄血验胎儿性别”广告
一家性别鉴定中介公司客服人员在网上向记者介绍寄血验胎儿性别的服务流程
抽10毫升静脉血冷藏空运到深圳，由黑中介将血样转运至香港，胎儿性别检测报告出来后反馈给孕妇。单独二孩政策放开后，很多家庭想选择二孩性别，但又苦于内地禁令。于是一个跨香港、深圳，辐射到北京及其他省市的“寄血验子”服务应运而生。法律和医学专业人士提醒，在这种情况下得出的检验报告，不但承担着很高的法律风险，其可信度也值得怀疑。
个案
为了儿女双全选择二孩性别
36岁的小曾（化名）刚刚查出自己怀孕了，惊喜之余又有些许纠结，因为家中大宝是个女孩，如今二宝已经“发芽”，她特别希望是个男孩。“以前只让生一个也就没什么可选的了，现在让生两个了，我们觉得还是设计一下比较好，要是一儿一女，儿女双全那该有多么美满。”小曾原本想托个熟人做腹部B超鉴定一下宝宝性别，但是一打听，得需要怀孕16周才能看清楚，“到那个时候孩子长得太大了，如果不要的话，必须得住院做引产手术，那样对身体伤害大不说，最大的风险是可能永远失去生育能力。”小曾对此非常担心。
就在一筹莫展的时候，小曾偶然从网上一家论坛中得知，在内地属于非... 阅读全帖 |
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l*******o
发帖数: 5673 | 29 怎么看这两天曝出来的德国品牌婴儿奶粉氯酸盐超标一事？
李浩
lin lin 赞同
本人学习食品科学，学业不精，有错误欢迎指正。
估计最有可能是奶农故意添加。
以下为分析
奶粉加工流程一般是：
新鲜牛奶-离心分离-灭菌-浓缩-喷雾干燥-包装。
氯酸盐作用最有可能是杀菌。
德国普遍采用UHT灭菌，连孢子也会杀死。奶企不会添加，费钱、砸自家品牌。
不排除是清洗设备时使用了氯酸盐，但是UHT设备每次清洗都会浪费大量时间和牛奶，
即便是残留也不可能到超标的量，除非-他们把清洗设备后最开始的进入的牛奶回收了
。（但是在和后面的稀释后也不应该超标）
奶农自主添加-企业收购牛奶时常见检测项目有含氮量 含水量 细菌含量 抗生素等。就
像当年三聚氰胺事件一样，因为原来的监测手段有漏洞，只要时还原态的氮就会被认为
是蛋白质---现在监测手段可能只考虑到奶农用抗生素来抑制牛奶里的细菌而一些奶农
可能就用氯酸盐代替。（检测不合格的牛奶只能倒掉） |
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D*****i
发帖数: 8922 | 30 天然铀99%是不能裂变的U238，剩下1%是可以用来发电或做核弹的U235.把U235从U238分
离出来，主要用离心分离。米帝指控伊朗搞离心机就是用来提纯U235做核弹的。
但是不能裂变的U238可以通过反应变成Pu239，这个可以用来做核弹或发电。北棒的核
弹就是用的Pu239。
现在所谓的增值堆，就是在烧U235发电的同时，把U238变成Pu239，Pu239可以接着去发
电或造核弹。相当于提高了铀的利用率。 |
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m*******1
发帖数: 2194 | 31 赞还没怀就计划好!
离心分离精子, 70-80%准确率, 额外收一两千往上, 试管或者直接注射.
试管婴儿选择性别, 100%准确率. 比普通试管多花几千.
这些都不能保证你能怀上. |
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S******M
发帖数: 64 | 32 你好！我小的时候得过同样的病 差不多在我六岁的时候 当时血小板的指数在10k左右
也是发了病危通知书。因为太久远，具体记不清了，大概是记得输了100cc离心分离的
纯的血小板，留院观察了半个月，一直住单人的加护病房。现在二十多年过去了，一直
身体健康，出院后的前半年定期去医院检查，我记得每天吃五颗带花生衣的生花生是帮
助凝血的，我吃了好长一阵子。
请你放宽心，现在的医疗环境比20多年前应该先进很多，孩子会好起来的。如果你还有
问题，可以私信我。
Bless your Daughter! |
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O**********n
发帖数: 5504 | 33 靠！看来你是真不明白！
用离心分离呀，无非就是快点儿甩，再就是提纯难度大点，但是我有绝招。用胶囊，还
干燥啥呀？
FDA的要求我现在就没问题！ |
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M*****e
发帖数: 279 | 34 一种推测是：当年大规模在孩子（小学生）中推广接种疫苗（比如卡介苗）时接种针（
不是注射器的针头）消毒不严有关。
肝炎有种亚型。甲、乙、丙、丁、戊、己、庚。乙肝、丙肝常见。
乙肝“是可以通过母婴垂直传播的（如同HIV）。再加上”乙肝"病毒在体外还能比较顽
强地一些时间（比HIV强多了）；还有并不需要很多乙肝病毒就可以感染。要知道只要
一个孩子有“乙肝"病毒（病人或者携带者），就可以感染很多别的孩子。”所有这些
就可以导致中国有上亿的人体内有乙肝病毒。
这种情况就像河南省多年前，应为卖血而导致的HIV感染。先采多个人血，再离心分离血浆和血细胞，然后将血细胞回输该卖血人。这过程中，只要有一个人有HIV病毒，所有接受回输血细胞的人就会感染HIV。
其它传播途径：如注射针头消毒不严格，甚至不消毒，理发工具不消毒；牙医的工具不消毒或不严
格消毒；吸毒者共享针头；性途径传播；等等。
乙肝属于广义的性病的一种。主要通过体液（比如 血液、精液）传播。 |
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l****i
发帖数: 4609 | 36 今天老发给我打电话， 我没有接着，他就留言，结果他最后不甘心，又连着打了三四
个，我终于接着了
他说，他第9个grandbaby 降生，终于是个女生
老发一儿一女，一儿一女各生了4个儿子，就是老发有8个孙子
我记得2010 年的时候他就叨咕要儿子或者女婿去做离心分离
这次好象成功了 |
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k****n
发帖数: 158 | 37 最近老板要我同步化MEF(mouse embryonic fibroblast) 在G2期然后释放（release）
，分析
细胞分裂（cell division）；
请问有什么效率比较高的protocol推荐吗，只考虑用化学试剂的方法来诱导--我认为这
样最省事；-
）。
当然在发帖之前我也google了一下，没有找到一个非常通用的方法，一些文献说用血清
饥饿法（serum
starvation）；我担心效率不会太高，而且好像同步在G1期，还有一些提到离心分离的
方法，这个对
我来说就太麻烦了。
最后找到下面的组合：
1）Thymidine-Nocodazole block
2）Aphidicolin and Hoechst
各位在做细胞分裂的大虾们，能不能提点下比较好的方法，或者帮我分析分析如上方法
是否可行？
不胜感激！ |
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l**********1
发帖数: 5204 | 39 //webdoc.nyumc.org/nyumc/files/sun-lab/attachments/CPCB.ch02.Isolate%20cells
.pdf |
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k***g
发帖数: 4904 | 42 俺想知道不同细胞（比如whitebloodcell，yeast, E.coli）在自由沉降和不同离心力
下的沉降速度，请问怎么获得这些数据最简单呢？哪位大侠能否给个网址，或者文献名
啥的？这种过程，需要考虑流动中液体的粘滞吗，还是只需考虑加速度就行了？谢谢！ |
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u**********d
发帖数: 573 | 43 如果是内源蛋白的话，阴性对照需要有两种，一个是用normal IgG，一个是没有转录因
子结合的区域也设计一对引物来扩增。有显著差异就可以了。如果是前一个对照不好，
可能是input里有大的凝聚物没有离心分离干净，也可能是beads没有封闭好，试着预清
除。把功课做好，让老板找不出茬，他再骂，炒了他！此处不留爷自由留爷处。 |
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h******y
发帖数: 351 | 44 你这消化的时间太长了。
我的方法给你参考。
E13.5或E14.5，去头去内脏，转到一个预先装有0.25%Trypsin-0.53mM EDTA的3mL注射
器里，从20G的针头中挤过。如果组织块太大的话，多挤几次。然后在37C消化5分钟。
用FBS终止酶消化，离心收集组织和细胞，用5mL pipette重悬。每1-2个胚胎可以铺一
个10cm的dish。一两天后就长满了，这算P0。需要注意的是所有和组织接触的塑料器皿
用前需要先润湿，否则组织很容易粘到上面。
传代用0.25%Trypsin-0.53mMEDTA，37C，3-5分钟。这算P1。从这里起，seeding
density在4-5 X 10^3/cm2. 3-4天或者接近长满的时候分一次。一般在第2或3次的时候
冻足够多的细胞，1x10^6/vial. 运气好的话，一只孕鼠的6-8个胚胎分出来的MEF足够
你用的了。 |
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r******k
发帖数: 446 | 45 这两天在extract early endosome。 然后想看看一个蛋白的磷酸化在early endosome
里面的变化。 我用的protocol是用不同梯度浓度的sucrose去extract early endosome
。 然后用超速离心分离。 early endosome在 25%-35%之间的液体中。 但是最后一步
early endosome was then precipitated with methanol/chloroform loaded in SDS-
PAGE for western blot analyses.
我没明白methanol/CHLOROFORM抽提后 我的蛋白在哪里？ 而且难道抽提以后还需要
vaccum dryer把蛋白都弄成干粉 然后加loading buffer煮了以后再上样？ |
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r******k
发帖数: 446 | 46 是的 我问了问做过的一些实验室 他们说我用的离心管12cm太长了 加进去以后都mix在
一起了因为重力。 我昨天用了一个比较短的tube做，慢慢的加 确实能看到分层！哈哈
不过像分离early endosome的话 是不是需要5-10 dish的细胞比较好？ |
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r******k
发帖数: 446 | 47 是的 我问了问做过的一些实验室 他们说我用的离心管12cm太长了 加进去以后都mix在
一起了因为重力。 我昨天用了一个比较短的tube做，慢慢的加 确实能看到分层！哈哈
不过像分离early endosome的话 是不是需要5-10 dish的细胞比较好？ |
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x*******2
发帖数: 5333 | 48 【 以下文字转载自 NanoST 讨论区 】
发信人: xmdxx1182 (卡西莫多), 信区: NanoST
标 题: 在问问CNT在DMP, NMP中分散的问题
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Feb 26 10:10:07 2012, 美东)
我的TUBE是-COOH的，10-30UM长，一般配成多少浓度的可以在以上溶剂中均匀分散？一
定要离心分离一下吗？ |
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