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全部话题 - 话题: 细胞株
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d********a
发帖数: 9567
1
【 以下文字转载自 Boston 讨论区 】
发信人: Jeffen (维京师之老忙), 信区: Boston
标 题: 近日有人从波士顿到广州吗?带细胞株报销一半机票
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Dec 10 00:51:52 2009, 美东)
中山大学一教授从MIT要到一个实验用的细胞株,如有人近日从波士顿到广州并愿意帮
忙把细胞(绝无毒害)带给他,该教
授愿意报销一半路费。有意者速站内联系,谢谢。
p*****x
发帖数: 670
2
来自主题: Returnee版 - 求教:往国内寄细胞株/菌株
【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: ponyfox (恒久忍耐), 信区: Biology
标 题: 求教:往国内寄细胞株/菌株
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Apr 14 20:45:57 2015, 美东)
有一些细胞株/菌株/质粒等要寄到国内去,数量比较多。
请问大家都是怎么寄?
多谢回复。
x******n
发帖数: 577
3
来自主题: Biology版 - 请问向国外要细胞株的经验
向国外(美国国外)的一个实验室要了两株细胞株,已经答应给我了。请问大家细胞株
一般如何邮寄,过美国海关有问题吗?
还有什么要注意的?
谢谢
b*****s
发帖数: 169
4
如题,有哪些免疫细胞株可以用来研究药物对机体细胞免疫或体液免疫的影响吗?如果
有的话,可以用细胞株先在体外对一些化合物进行粗筛,然后用动物实验进行验证。
h*********y
发帖数: 79
5
回国能在托运行李里放带干冰的小盒子装冻存的细胞株吗?跪谢
h*********y
发帖数: 79
6
不用开证明说明是什么细胞株吗?
J****n
发帖数: 156
7
中山大学一教授从MIT要到一个实验用的细胞株,如有人近日从波士顿到广州并愿意帮
忙把细胞(绝无毒害)带给他,该教
授愿意报销一半路费。有意者速站内联系,谢谢。
y**********t
发帖数: 20
8
想知道是什么细胞株
一般的细胞从ATCC买也就几百刀吧,应该少于路费都一半
l******h
发帖数: 31
9
我马上要回国,想带回国几个细胞株,需要老板写封同意科研使用的证明,以便万一被
海关查到的时候可以有个证据。虽然这不是合法途径,但是办理正常邮寄太麻烦了。
请问这样的信有什么模板可以参考么??谢谢了
f*********0
发帖数: 1851
10
来自主题: Biology版 - [供求]求一株hela细胞株 (转载)
【 以下文字转载自 Boston 讨论区 】
发信人: franklu1980 (franken), 信区: Boston
标 题: [供求]求一株hela细胞株
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Feb 1 22:47:15 2013, 美东)
有在longwood上班的xdjm有hela细胞吗,能分点给我做点试验吗?愿意请吃饭,多谢!
m***i
发帖数: 2013
11
查了atcc,没有。不知道有没有达人偏巧知道的。我在做alpha7 nAChR敲除,有细胞株
的话会更方便验证。
多谢多谢!
p*****x
发帖数: 670
12
来自主题: Biology版 - 求教:往国内寄细胞株/菌株
有一些细胞株/菌株/质粒等要寄到国内去,数量比较多。
请问大家都是怎么寄?
多谢回复。

发帖数: 1
13
来自主题: StartUp版 - 想成立一家技术服务
想成立一家技术服务+研发的公司,早期以技术服务为主,在有利润充分保障的情况下
,再考虑向 研发倾斜。
就我自己能力而言,我在质料克隆,基因表达细胞株的建立和某些方面的生物信息学方
面有所专长。
在基因的亚克隆方面(就是把一个基因从一个质粒载体转到客户指定的另一个质粒中)
,我有独门技巧,可以节省不少耗材和时间。亚克隆一个<1kb和5kb基因的质粒的平均
周期分别为3天和10天, 试剂耗材成本平均分别为$15和$80左右。 对于<2kb基因的质
粒亚克隆,以我的方法,一般只要挑选3个克隆即可以得到至少一个阳性质粒克隆,所
以我估计每三天我可以完成至少20个基因以上的亚克隆。我的问题是, 基因亚克隆这
方面市场大不大?
现在市面上的克隆服务多是基因的直接克隆,即用PCR方法将获取的基因插入到公司或
客户指定的质粒中。收费都在$250以上(对<1kb基因而言, 5kb基因大概要上千元)。
这方面我并没有特别的技巧,和那些公司比没有竞争优势。而且基因碱基的多态性太
普遍,PCR克隆到的基因蛋白编码序列不一定会是客户所想要的。暂时无意开展这种类
型的克隆服务。
在基因表达细胞株的筛选与建立方面,... 阅读全帖

发帖数: 1
14
来自主题: Biology版 - 征寻有意自己创业的合作伙伴
想成立一家技术服务+研发的公司,早期以技术服务为主,在有利润充分保障的情况下
,再考虑向 研发倾斜。
就我自己能力而言,我在质料克隆,基因表达细胞株的建立和某些方面的生物信息学方
面有所专长。
在基因的亚克隆方面(就是把一个基因从一个质粒载体转到客户指定的另一个质粒中)
,我有独门技巧,可以节省不少耗材和时间。亚克隆一个<1kb和5kb基因的质粒的平均
周期分别为3天和10天, 试剂耗材成本平均分别为$15和$80左右。 对于<2kb基因的质
粒亚克隆,以我的方法,一般只要挑选3个克隆即可以得到至少一个阳性质粒克隆,所
以我估计每三天我可以完成至少20个基因以上的亚克隆。我的问题是, 基因亚克隆这
方面市场大不大?
现在市面上的克隆服务多是基因的直接克隆,即用PCR方法将获取的基因插入到公司或
客户指定的质粒中。收费都在$250以上(对<1kb基因而言, 5kb基因大概要上千元)。
这方面我并没有特别的技巧,和那些公司比没有竞争优势。而且基因碱基的多态性太
普遍,PCR克隆到的基因蛋白编码序列不一定会是客户所想要的。暂时无意开展这种类
型的克隆服务。
在基因表达细胞株的筛选与建立方面,... 阅读全帖
b**********8
发帖数: 349
15
来自主题: Biology版 - 大家有没有经历过这种情况?
多谢楼上各位的建议,rescue的实验我们确实还没做过。今天又想向大家反应点新情况
,如下:
当初shRNA敲除A的时候,B基因在mRNA和protein水平都有显著下调。如前文所述,包括
B基因启动子的报告基因实验,组蛋白乙酰化和甲基化修饰,DNA甲基化等都是阴性结果
。后来实在没办法了,和别的组里的人讨论了下,觉得是否有可能A通过维持B基因转录
产物的稳定性,于是我又做了这个实验,转染A基因的siRNA后,等待48小时,再向
medium中加入Actinomycin D,每隔4小时收集细胞提取RNA,分别收集0,4,8,12小时,每
次3个wells,然后做realtime RT-PCR,结果在两个细胞株中发现siRNA组细胞中B基因
mRNA降解的比siCONTROL更快,但是在另外两个细胞株里没有观察到这种分别。现在又
出现几个问题:
1)观察到分别得那两个细胞株里,48小时候(即加药的第0小时),A基因的knockdown
效率只有50%。而在另外两个没有分别的细胞株里,48小时的沉默效率却有80%,老板觉
得即使mRNA降解实验阳性,很有可能是artifact,认为我的数据... 阅读全帖
U*******n
发帖数: 824
16
在导师任先达的指导下完成学位论文一个月后,李红良迎来了答辩。这也意味着他在暨
南大学药学院药理学专业的三年硕士学业即将结束。那是在2002年的5月。在《致谢》
部分,李红良说,导师三年来对他的教诲,“令学生终生受益”。
的确,这三年,师生二人的合作可谓“硕果累累”。在这本73页的硕士学位论文中列出
了期间发表的14篇文章(7篇英文,7篇中文)——除去两篇外,李均是第一作者;而其
导师则是绝大多数文章的通讯作者。
作为一名硕士研究生,李的创记录的“高产”引起一片哗然。2001年在其他绝大多数学
生还没有来得及收结果的时候,他就发论文了,而且一发不可收拾,当时就有同学举报
,药学院领导查了,但不了了之。
时光飞逝,当年的硕士“小李”,在获得北京协和医科大学博士,经历2年多国外博士
后,2008年11月从多伦多回到了武汉大学人民医院(当年3月以李红良为第一作者出版
的一篇论文随后被撤稿),并成为了教授。几年下来,李红良组建了据说是100多人的
研究团队,更有“杰青”,“长江”加身,事业可谓如日中天。
然而,2017年是他喜忧参半的一年。喜的是他一年发了5篇《自然医学》论文,忧的是
有举报人向... 阅读全帖
C********g
发帖数: 9656
17
转基因玉米的神话
http://www.rainbowplan.org/bbs/topic.php?topic=107689
送交者: 六指 于 2010-03-25 12:25:45
转基因现在是网上的热门话题,这其中自然少不了在转基因食品上市前就已试吃过的方
老师的身影。学习完他的科普熊文“转基因玉米更有益健康”后,再做延伸阅读,稍加
搜索就看到一篇2004年的洋文”Bt corn reduces serious birth defects”【http://westernfarmpress.com/news/10-27-04-Bt-corn-birth-defects/ 】。方老师的文章基本观点,数据,内容编排都和这篇雷同,不少句子更是原文照译。这进一步验证了一条世人皆知的谣言“方老师写的东西,也有成段的引文献或者直接是英语文章翻过来的”。方老师打开门辟谣,关上门立马就造谣,此等大无畏的勇气和人格力量实在是让我等折服。
方老师涉嫌抄袭早已不是什么新鲜话题,这里说说转基因。这篇洋文的两位作者实际上
是做”二阶科学传播“,主要介绍了当年在“营养学杂志”发表的一篇综述【http://jn... 阅读全帖
p******d
发帖数: 3737
18
来自主题: Biology版 - 再次请教cancer stem cell
CSC这个概念看你怎么看。我觉得本身它是个毫无意义的概念,除非和临床结合。
临床上CSC的提出一部分原因是因为有一小部分的细胞对chemo有强烈的抵抗能力,在
chemo后导致
肿瘤的复发。这就和你说的sp细胞的概念扯上关系了,因为后来发现这些细胞表达的基
因例如
multiple drug resistant protein导致chemo drug被泵出了细胞外,导致了细胞对这
些药
物耐受,这也是sp细胞用来寻找各个组织干细胞的一个起源。
另外一个临床的原因是转移。很显然,转移的细胞导致新的肿瘤灶形成。这也是为啥
Weinberg实验
室会把CSC和EMT联系在一起了。
不论人类原发肿瘤本身或者建立的细胞系,在细胞表型上肿瘤常常是heterogeneous的
,病理上往
往要划定一定的百分比标准来判断是否某一标志物阳性,例如淋巴瘤的CD20或者乳腺癌
的ER受
体。还有关于你说的hela细胞,hela也是从人肿瘤里面分离出来的永生化细胞株。永生
化或者单克
隆筛选不等于获得的细胞株中每个细胞就在表型上完全一致。根据表面标志物来分,这
些细胞仍然
heterogeneous,尽管遗传... 阅读全帖
v**********m
发帖数: 5516
19
来自主题: Biology版 - stable cell line 筛选问题
我的理解是商业途径来源的hela细胞株已经是单克隆细胞株,所有培养皿里的每个细胞
的遗传背景都是一样的。
你没必要在做稳定细胞株前还再筛选一次。

sure

发帖数: 1
20
来自主题: Biology版 - 征寻有意自己创业的合作伙伴

我说的是克隆挑三个到至少会有一个阳性
至于细胞株,我说的的诱导表达型的细胞株,需要做两次转染,筛选两次细胞株,所以
需要6周
您觉得这效率还行吗?谢谢
m******8
发帖数: 2153
21
来自主题: QueerNews版 - 同性恋生殖有望?
中央社
2010-12-09
美国科学家首创以干细胞技术从2只雄性老鼠身上孕育出幼鼠,科学家表示这项新
突破可帮助保育濒临绝种的动植物,甚至有一天能帮助人类同性情侣拥有自己血缘基因
的孩子。
据今天刊载于生殖科学期刊(journal Biology of Reproduction)的研究表示,
德州再生科学家成功操控雄性(XY染色体)老鼠胚胎细胞,发展出「诱发性多功能性干
细胞」(induced pluripotent stem cells,iPS)细胞株。
这些「诱发性多功能性干细胞」就是所谓已接受过基因重编,以便成为类胚胎干细
胞状态的成人细胞。
部分从新细胞株成长出来的细胞会直接失去Y染色体,成为XO细胞。
这些XO细胞注入到雌性老鼠胚胎并移植到代理孕鼠体内后,就会生下带有原先雄性
老鼠X染色体的幼鼠。
这些幼鼠长大与正常的雄性鼠交配后,生下的幼鼠无论雄性或雌性,都带有原先2
位鼠爸爸的基因。
这份研究是由美国德州大学的癌症治疗中心(MD Anderson Cancer Center)研究
员所执行。 (译者:中央社陈禹安,中央社华盛顿8日法新电)
b*****f
发帖数: 851
22
来自主题: Immigration版 - 【求助】求request work证明信的模板
大家好。我是生物医药领域的一名博士后,2012年发表的一篇文章里面构建了一个细胞
株,有美国的两个组的PI写email问我老板要过这个细胞株,我想请这两个PI给我写一
封证明信,证明他们request过我构建的细胞株并用于他们自己的研究工作。但是这个
证明信草稿要怎么写呢?各位牛哥牛姐们能好心提供下模板不?我的邮箱是pengcan2011
@gmail,小妹不胜感激。
祝好!
w*******d
发帖数: 3714
23
哈哈因为细胞株事件在波版很出名嘛~
我脑海中,波士顿版过去几年的有趣的事件
1.哭包
2.儒雅姐夫
3.细胞株
4.春晚
版主应该搞一个投票选出十大新闻哈哈
s*****e
发帖数: 970
24
4月12日,国际著名期刊《Nature Cell Biology》(《自然-细胞生物学》)网络
版上公布了上海交通大学生命科学技术学院吴际教授研究团队的一项新的研究成果。
传统观点认为,女性和绝大多数雌性哺乳动物卵母细胞的产生仅发生在胎儿期,出
生后卵母细胞数目不再增加,反而逐年减少, 这意味着出生后卵巢无生殖干细胞存在。
该研究经过长时间的探索,首次在出生后的小鼠(包括成年和出生后五天的小鼠)
卵巢中发现了生殖干细胞。同时,尝试了各种方法,进一步分离出该生殖干细胞,摸索
出适合其生长的培养条件,得到了能长期自我更新的生殖干细胞株。接着,运用一系列
生化、细胞、遗传和分子生物学手段,鉴定了该生殖干细胞株。最后,将该生殖干细胞
移植于经药物处理的不孕成年小鼠体内,能产生新的卵母细胞,并发育至成熟,与雄性
交配后能生出正常后代。
这一惊人发现改变了人们的传统观点,向教科书发起了挑战,开辟出一个崭新研究
领域。该研究成果能为动物生物技术和人类提供卵母细胞新来源,建立性细胞途径转基
因动物和开发优良动物品种,对治疗卵巢功能早衰,不育症等雌性生殖细胞发生障碍性
疾病,再生医学及抗衰老,避孕药的开
t****o
发帖数: 442
25
来自主题: Biology版 - 我请教一个测序的问题
我把一段DNA转染到真核细胞,建立了稳定细胞株。有没有直接的测序方法,可以确定
这段DNA插在了哪里?
我试过INVERSE PCR。因为细胞株太多,所以一一做来很麻烦,成功率也很低。
能推荐一个公司直接测序吗?
s******y
发帖数: 28562
26
来自主题: Biology版 - 用 SNL feeder是不是就不用LIF了?
是的。
不过某些细胞株分泌的量不一定够多,所以如果是你第一次用那个细胞株的话,
要注意观察embryo cell的形态。
r***e
发帖数: 2539
27
来自主题: Biology版 - 再次请教cancer stem cell
上次和大家讨论cancer stem cell 或者cancer initiating cell的问题,受益匪浅。当
时我认为primary tumor中可能存在一小部分的CSC,但是通常用的limited dilution在
免疫缺陷老鼠中长瘤的的方法说服力不强。当时我举例说established cancer cell li
ne比如说HELA,做transplantation的话,也能看到类似的结果,而HELA细胞里难道也有
cancer stem cell吗?今天看到几篇文章,竟然就是从细胞株中分离CSC,他们的说法是
"An alternative approach for isolating stem cell populations is through enri
chment of side population (SP) cells, SP cells are identified by the capacit
y to efflux Hoechst dye",就是说这些细胞能通过这个机制获得drung resistance。
http://cancerres.aac... 阅读全帖
b**********8
发帖数: 349
28
来自主题: Biology版 - 有谁用过pSingle-tTS-shRNA吗?
如题,Clontech公司的,自己买回来构建某基因的shRNA质粒,在一种肿瘤细胞株里加
Dox诱导后work perfectly,但是在同一肿瘤系的其它细胞株里就不work,或者不是那
么efficiently,有什么原因可以解释?欢迎讨论和建议。
c*******t
发帖数: 962
29
来自主题: Biology版 - MDA-MB-231生成肿瘤失败
你是稳定转染的细胞株?敲掉/加入了什么基因?没处理之前的细胞株长不长?
如果只做过一次不能确定不能成瘤。比方消化时间过久也可能。
这个细胞系应该很容易做。绝对不要等6个礼拜。

line
derivatives. I
"ArtyArty").
Massague'
grows
AB,
h*****t
发帖数: 103
30
来自主题: Biology版 - 请教:Leukemia/Lymphoma转染
请教一下高人们:
1. 对于Leukemia stem cell,大家一般用什么细胞系来筛选,能否告知一二,具体的
细胞株名称?
2. 对leukemia/lymphoma cell line,大家觉得哪几个细胞株最容易转染?
由于种种原因,暂无法建小鼠leukemia/lymphoma model;同时也无法使用病毒等进行
感染,只能使用细胞系,同时用最原始的方法操作,望大家不吝赐教。
谢谢!
h******u
发帖数: 602
31
来自主题: Biology版 - 请教:Leukemia/Lymphoma转染
借贵贴问个问题哈。我无意中发现一个很重要的调控铁代谢的基因在K562中表达相当
高。之前大家一直认为此基因只在肝脏表达。我想做一个实验看一下此基因是否在血液
细胞的分化中起作用。
我想找一个比较原始的hematopoietic cell line, 此细胞株能够在不同条件下分化成
leukocyte, lymphcyte, and red cells。完了检测此基因在不同阶段的表达,如果结果感兴趣的话,可以knock down此基因看它的功能。
那种细胞株合适呢?
h******u
发帖数: 602
32
来自主题: Biology版 - 请教:Leukemia/Lymphoma转染
你说的分离造血干细胞,具体如何做?分离后可以用不同的生长因子诱导成下级细胞?
有没有这方面经典的文章让俺拜读一下?对这领域实在是不熟悉。现在在医院工作,
白血病的病人很多,CD34阳性的细胞很容易找到。
如直接比较leukemia, monocyte, lymphoma细胞株的话,可否推荐一下细胞株?
h*****t
发帖数: 103
33
来自主题: Biology版 - 细胞如何从美国带回中国
这里告诉一下我的经验,还在国内的时候,朋友给我寄过细胞株,是直接从邮局走的。
用的25m培养瓶,细胞放于其中,装满培养基,封好,三天就收到了。这是从美国寄到
中国的情况。
来这里之后,欧洲有个教授,寄过几个细胞株给我,冻存管,埋在冰里面,很大一个包
,走的Fedex,包的封面贴了一张纸,详细列出1-7:细胞,用于科学实验,无害,请放
行。也是3天收到的。
我的建议是:采用第一种方式,同时封面贴一张纸,一样列出1-7...请教授签字,最好
用官方的信签纸(可自行设计),上邮局寄就可以了。我还寄过老鼠,不过是找的另外
的了。
希望对你有所帮助。
h*****t
发帖数: 103
34
来自主题: Biology版 - 如何寄干冰包裹到北京?
为何非要用干冰?
这是我在另外一个帖子里面答的,这都是我自己的经验。
还在国内的时候,朋友给我寄过细胞株,是直接从邮局走的。
用的25m培养瓶,细胞放于其中,装满培养基,封好,三天就收到了。这是从美国寄到
中国的情况。
来这里之后,欧洲有个教授,寄过几个细胞株给我,冻存管,埋在冰里面,很大一个包
,,走的Fedex,包的封面贴了一张纸,详细列出1-7:细胞,用于科学实验,无害,请
放行。也是3天收到的。
我的建议是:采用第一种方式,同时封面贴一张纸,一样列出1-7...请教授签字,最好
用官方的信签纸(可自行设计),上邮局寄就可以了。我还寄过老鼠,不过是找的另外
的了。
希望对你有所帮助。
b**********8
发帖数: 349
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最近要做一个inducible shRNA 的stable transfection,采用的细胞株之前已经做过
一遍稳转,G418 resistance。现在改用Hygromycin B筛选新的稳转株,已经挑了将近
100个克隆了,一个阳性的都没有挑到,很郁闷。想问下有经验的战友们,已经做过一
轮稳转的细胞株,再做新的稳转,是不是难度特别大?什么原因呢?难道是我人品太差
b**********8
发帖数: 349
36
来自主题: Biology版 - 急,请教lentivirus shRNA技术问题
最近开始自己包装慢病毒shRNA,用的是之前组里师姐的protocol,基本上是基于TRONO
LAB的protocol。之前师姐包装的病毒,效率很高,基本上能KD八成到九成。最近我自
己包装了两次,浓缩后根据之前师姐包装的病毒用量感染肝癌细胞,细胞生长速度明显
延缓,形态改变也跟之前的相似。但是做western却只能看到很marginal的蛋白水平降
低,在有的细胞株甚至完全看不到KD。我用GFP质粒转染HEK293FT,效率很高,24小时
至少看到90%的细胞有GFP表达,然后我收集这些上清直接去感染肝癌细胞,24小时候也
能看到至少80%的细胞表达GFP,说明包装过程中所用的包装质粒,试剂以及细胞应该没
有问题。我现在有两个疑问,请有经验的战友指点:
1)师姐留给我的protocol上,转染HEK293FT的方法如下,以10cmdish为例:
prepare the following transfection mix:
10.0 ug GFP(or other gene of interest)
10.5 ug pLP1
10.5 ug pL... 阅读全帖
l**x
发帖数: 52
37
来自主题: Biology版 - 来自于肌肉的cell line
现在用的是C2C12细胞,经常一不小心就长满整个平板,ATCC说这个细胞株不能长满平
板,另外,这个细胞表达myosin regulatory light chain的磷酸化特别低,很难用
WESTERN测出来,用的是Cell Signaling的regulatory light chain S19的磷酸化抗体。
大家有什么好的细胞株推荐吗?特别是来自于skeletal muscle的。另外,对抗体有什
么推荐的最好了,谢谢
l******g
发帖数: 1623
38
来自主题: Biology版 - 寻大牛,细胞大规模培养相关
你说的大规模是多大?如果是指体积,用10L的发酵罐还不如用shake flask, 几个3L的
shake flask就抵得上一个10L罐,用shake flask简单,便宜,同一个细胞株在shake
flask里面可能比发酵罐表达还高点。
如果你就是想玩点没玩过的,建议你买wavebag系统,袋子是disposable. 少了灭菌的
麻烦。
CHO细胞株接种生产罐一般用1E6 cell per ml, 几毫升细胞进不了发酵罐。
h******y
发帖数: 351
39
你说的比较温和是指什么?
来源于很多组织的人的fibroblast可以通过overexpress hTERT得到immortalization,
这是由于人的fibroblast在体外培养条件下的senescence多是由于端粒渐行缩短而导致
的(telomere-dependent replicative senescence)。与人的fibroblast不同,体外
培养中MEF的senescence并不是由于端粒缩短引起的,而是由于如前所述的过氧基团累积
oxidative stress induced DNA damage。研究表明senescence的MEF的端粒还很长,而
且MEF中有较高的mTERT表达,所以过表达mTERT并不能有效immortalize MEF。因为要抑
制p53和Rb通路,所以表达异源的SV40 T和HPV16 E6/E7都可以immortalize MEF。当然
这样得到的细胞株,由于这些病毒蛋白的过量表达,基因组并不稳定,长久培养会出现
嬗变。
3T3办法引起的自发immortalization实际上主要是由于自发的p53通路抑制(p53 loss... 阅读全帖
x****s
发帖数: 29
40
没做过甲基化或者乙酰化的实验,想问一下这种epigenetic的修饰是不是transient的
实验无法检测。
比如说,我发现在稳定转染一个外源A基因的细胞株里,B基因的表达有上调,体外构建
了B基因promoter的报告基因,但是没有发现A对其有任何激活。不过,分析稳转细胞株
发现,B基因的启动子区域有乙酰化(对照株没有),这样的结果能解释A对B的上调吗?
这能不能说明表观遗传的修饰需要相当的时间呢?谢谢。
z*******9
发帖数: 112
41
来自主题: Biology版 - lentiviral based Cell line 求助
谢谢各位的建议,
我首先监测了在293T trasfection时,蛋白的表达,IFA结果表明我目标蛋白表达良好
,基本是有GFP信号的细胞,目标蛋白都是表达的,
接着,我对我的细胞株用不同的抗体又从新做了IFA和WsternBlot,这次两次监测的结
果都是阳性,我都能监测到目标蛋白(这表明我上次IFA没有监测到我的蛋白很有可能
是抗体的原因)
不过,对细胞株的IFA又看到一个现象,我的目标蛋白并不与gfp信号完全重合,我可以
观察到有些细胞有很强的gfp信号但却没有我目标蛋白信号,或者反之,(重复一下,
我目标蛋白是和GFP fused with 2AA protease linker)?
请问各位,这是不是经常出现的现象?
l*******e
发帖数: 170
42
我目前的理解是
Oncomine只有transcript data (mRNA)。
TCGA: The Cancer Genome Atlas 来自病人的组织,而且都是raw data
CCLE: Cancer Cell Line Encyclopedia 数据来自大约1000肿瘤癌症细胞株
cBioPortal: 数据来自组织和细胞株,数据做了处理,比较容易查找
b**********a
发帖数: 930
43
这个化合物如果没有化合物本身化学结构的专利,其吸引力很小,建议你们队如下几个
方面进行专利相关的工作。
这样的化合物如果对体外的细胞株没有作用而在体内有作用,很可能是体内或组织的酶
参入代谢后的成分起作用,而这些酶在细胞株里面没有。
坦率的说需要注射到实体瘤的药物其应用范围很受影响,能够开打身体进行注射或使用
微创技术进行注射的应用范围还是有局限性,可以作为实体瘤的辅助治疗方法,例如在
手术切除后对周围创面进行清理的方式之一。
此化合物已有专利,但可以在这个化合物的基础上设计或增加一个或几个基团,而不影
响生物学活性,这样对后来加入的竞争者是一道屏障。
对工艺进行专利保护。
对制剂进行保护,注射剂,混悬剂等,也是专利屏障。
现在国内药厂对新的药物渴求很大,可以参加国内的新药展览,准备好所有数据。
找到新的药物非常难,希望早日楼主成功。

发帖数: 1
44
来源:澎湃新闻
北京时间8月3日凌晨,经河北科技大学副教授韩春雨主动申请,其关于新基
因编辑技术NgAgo-gDNA的争议性论文由《自然-生物技术》撤回。
韩春雨团队在撤稿声明中写道:“由于科研界一直无法根据我们论文提供的
实验方案重复出论文图4所示的关键结果,我们决定撤回这项研究。虽然许多实
验室都进行了努力,但是没有独立重复出这些结果的报告。因此,我们现在撤回
我们的最初报告,以维护科学记录的完整性。不过,我们会继续调查该研究缺乏
可重复性的原因,以提供一个优化的实验方案。”
同时,《自然-生物技术》发表题为《是该数据说话的时候了》社论,“现
在,距原论文发表已过去了一年多,我们了解到当初曾报告说初步成功重复出实
验结果的独立研究小组,无法强化初始数据,使其达到可发表的水平。类似的,
在征求专家评审人的反馈意见后,我们判定韩春雨及同事提供的最新数据不足以
反驳大量与其初始发现相悖的证据。我们现在确信韩春雨的撤稿决定是维护已发
表科研记录完整性的最好做法。”
同一日,河北科技大学在其官网刊发《韩春雨团队发布声明》,声明提到:
“鉴于该论文已撤稿,学校决定启动对韩春雨该项研究成果的学术... 阅读全帖
s******g
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再打广告我就报警了哈:)
c****e
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寄回去不就完了嘛
s*******n
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来自主题: Military版 - 老美最牛逼的是不是生物技术?
out了吧,tg的后发优势已经利用上了,已经开始偷美帝的生物技术了,比如俺知道的
某生物wsn,把这边的细胞株给偷回国,然后自己从政府拿了钱建了公司,在国内山寨
这个还在专利期的生物产品,现在该产品在国内的市场非常好,最搞的是美帝这边的公
司砸了好多银子发现了该产品的新的适应症,而国内wsn的公司一分钱不掏直接就把产
品推到新的适应症上....
据说该wsn已经上了FBI的名单,只要他一在美国落地就会被抓.......
L*****G
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国内regulation要跟进啊,我觉得甚至可以比美国做的更好。
http://news.sohu.com/20111207/n328141649.shtml
灰蒙蒙的天气让越来越多的中国公众注意到PM2.5一个由英文和数字组成的专业术语。
其实很多中外学者早已证实,它潜伏在空气中,不仅会伤害人的健康,更给社会造成难
以挽回的经济损失。
所谓PM2.5,是指空气中悬浮的颗粒物,其直径小于2.5微米。因为这些颗粒物太轻
,很难自然沉降落到地面上,而是长期漂浮在空中,不仅小到看不见,更小到可以直接
进入肺泡甚至融入血液,和人体内的细胞“搏斗”并伤害这些细胞。从某种程度上说,
叫它“凶手”并不为过。
根据公开的学术资料和采访领域内权威专家,可以拼合出这个“凶手”的“面貌”
和“行凶手段”,公众则更希望知道应如何“缉凶”。
PM2.5如何“定罪”
从公开的科研资料看,对PM2.5的研究很多聚焦于肺脏。
研究者们从肺脏的毒理学研究入手:以PM2.5对4组大鼠每天进行1次染毒,连续进
行3天。对这些大鼠的肺灌洗液并对肺组织病理切片分析后发现,PM2.5能够引起肺部血
管通透性的改变、肺细胞损伤和加... 阅读全帖
Z********n
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我国白酒里为啥会有塑化剂——告诉你真相
作者: 孤迴(沈.园.千.杨) [212264:7278], 11:25:24 12/04/2012:

有人说是塑料桶里溶解进去的,这是想当然了。 现在的白酒,基本上都是勾兑
的(喝特供的无视啊),当然,国家标准允许这么做。但是勾兑过程中,除了用酒头,
还要用到一种神奇,叫“食品添加剂”。缺了它,口感就差多了,具体名称,大家自己
去问度娘。
所以,市面上的白酒,不管神马“台”啊“液”啊的,只要有胆送检,都会测出
来超标。
那为啥这次偏偏就酒鬼中招了呢?嘿嘿,这就像当官的搞小三,大家都在搞,为
啥偏偏米帝中情局长中招了捏?真是太不小心啦!
叫塑化剂是塑料工业的传统叫法,稍稍严谨一点的应称为酯类。一部分酯可以侧
连塑料的分子结构,有助于改善塑料的理化性质,如韧性等,所以新的塑料制品闻起来
往往有很浓烈、很特殊的香气。塑化剂常添加在塑料制品中,提高塑料制品柔韧度。在
各种塑化剂当中,以综合性能佳、价格廉价易得的邻苯二甲酸酯类化合物使用最为普遍
。邻苯二甲酸酯化合物目前广泛用于工业制品至... 阅读全帖
L****r
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50
引自 http://www.acfun.tv/v/ac334765
第32届安捷伦北京青少年科技创新大赛学生科技创新项目公示名单(up节选)
小学组
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