c*********1
发帖数: 22 | 1 http://military.people.com.cn/GB/18248262.html
2012年06月20日14:08 来源：解放军报
“肯定有人钻了门禁系统的空子！”6月4日，沈阳军区某炮兵团安全保密检查之后
，团自动化站站长李洪波站在办公楼门禁系统旁一脸肯定地说。这套涉密载体监测门禁
系统，是李洪波精心挑选的一款最新产品，而且通过了军队权威部门鉴定。没有监控室
授权，谁也别想把涉密载体带出机关楼。
然而，本以为“一夫当关万夫莫开”的高科技产品，却让李洪波遇到了不小的尴尬
与无奈。
从插翅难飞到“不翼而飞”
当天上午，团保密委员会对机关保密情况进行检查。“这次检查，不会有什么问题
吧？”检查前，团长满洪涛问李洪波。“有了这套门禁系统，涉密载体保证插翅难飞。
”李洪波信心十足。
“1台涉密笔记本电脑和1个移动硬盘不在位。”检查结果，让李洪波大吃一惊。他
随即来到监控室，经过仔细查找，没有发现涉密载体带出机关楼的监控记录。难道是门
禁系统出了故障？李洪波经过认真检查，发现系统一切正常。他还带着涉密载体实地检
验，刚刚靠近监测门禁，系统就立即发出警报。这个结果，更令他一头雾水。
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y***u
发帖数: 7039 | 2 从书写载体看希腊流传文献的不可信度
原作者：maxwhema1023
转自何新博客
这段时间上网找了一些关于古希腊文明的资料，发现了关于希腊载体与书写工具的问题。
一、阿基米德、亚里士多德时代，没有羊皮纸技术，书写的载体只有埃
及产的纸莎草纸。
二、古代仅尼罗河三角洲流域一小片区域才有野生纸莎草。
尼罗河流域肥沃的地区都用来生产粮食，用以养活两岸上百万的人民，只有相对贫瘠的
区域才有纸莎草。
现在尼罗河流域经过改造，这种草在尼罗河流域已经绝迹，需要从别的地方引种，可见
就算是埃及，古代的纸莎草纸产量也是很低的。
三、埃及的纸莎草不仅用来造草纸，更多的用来编织绳索，甚至制造战船，能够用
来造纸的只有一小部分的草茎。
四、纸莎草纸工艺复杂，制作成本高昂，不可能形成大规模制作生产的工业。因此
，这种书写品在古埃及被称为“法老的财产”，产品基本上被法老垄断——成为特供品。
在此情况下，出口到古希腊的书写纸草有没有可能数量
很多？大家可以想象一下，如果沙特完全垄断石油生产和出口，我们普通人开得起车吗？
... 阅读全帖 |
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C**S
发帖数: 522 | 3 用病毒载体做瞬转，载体的DNA整合效率也会很高吗？我的理解是病毒载体包装成病毒
只是增强其进入细胞的效率，整合入基因组DNA的效率取决于病毒载体的序列本身。是
这样吧？
我们这里对涉及到病毒的规矩很复杂，所以想可不可以直接把载体做瞬转。要用的细胞
系挺容易做瞬转的，载体也有筛选标记。 |
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j****x
发帖数: 1704 | 4 想构建一个单载体诱导表达系统single-vector Tet-inducible lentivector，类似
clonetech的Tet-One system（据称是目前唯一的商品化载体），但是手头的载体系统
都是基于Invitrogen的pLenti系列的，不太想再换clonetech的kit了。
不知道有没有人基于pLenti载体构建过这种single-vector Tet-on系统，或者知道是否
可以在Addgene上找到类似的质粒。理论上讲，合成Tet-one上个那段包含Tet-on-3G以
及pTRE3GS-MCS的cassette然后置换掉pLenti载体上相应的区域即可。如果有人有经验可
以指点，非常感谢！ |
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发帖数: 1 | 5 不得不承认，目下的中国文化重建工作，正在面临着一种非常复杂微妙的局势。一方面
，国学的复兴热潮正在吸引大量的社会资源与学者的精力，去从事对于中国传统文化的
理解与注释和传播工作；而另一方面，人工智能、大数据等新技术载体的出现，又在全
面地削弱各种传统的文化信息传播模式（特别是对于纸媒）的社会影响力，进而通过对
于“娱乐至上”理念的扩散来抵消严肃文化的传播学效应。耐人寻味的是，国内从事儒
家政治哲学研究的学者，大多倾向于将自己的理论谈话伙伴，定位为同样属于学者意识
形态的自由主义或政治保守主义，却很少顾及信息技术载体下的大众意识形态样态产生
的动力学机制。在笔者看来，这种过于“不食人间烟火”的态度，或许既会削弱儒家在
新技术条件下的说服力与传播学效力，亦会加高在不同专业群之间业已存在的信息壁垒
。而本文的目的之一，也便是本着“消除跨专业对话壁垒”的学术初心，向读者展示激
活传统文化资源应对新技术时代的可能性，由此甚至为一种具有“数码化的儒家”（
digitalized Confucianism）色彩的新技术路线的发育，提供思想层面上的预备性讨论。
然而，使得本文的讨论得以展开的“元语言框... 阅读全帖 |
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f***y
发帖数: 4447 | 6 http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2014/4/292863.shtm
中国科学家率先解析生命信息载体的结构奥秘
一个困扰生物学界30余年的最基本问题被中国科学家破解了。
据来自中国科学院方面的确切消息，4月25日，美国Science杂志将以长篇幅研究论文形
式报道中科院生物物理研究所一项关于30nm染色质高级结构解析的重大成果，标志中国
科学家在这个现代分子生物学难题上的研究得到世界同行的认可。该论文的评审人评论
该成果是“目前为止解析的最有挑战性的结构之一”，“在理解染色质如何装配这个问
题上迈出了重要的一步”。
61年前，同样是在4月25日，剑桥大学卡文迪许实验室的沃森和克里克在英国Nature杂
志上发表了一篇划时代的论文，向世界宣告他们发现了DNA的双螺旋结构，揭开了遗传
信息如何传递这个“生命之谜”。这个发现使生命科学的研究深入到分子层次，开启了
现代分子生物学时代，成为20世纪最伟大的科学发现之一。
虽然DNA是遗传信息的载体，但DNA在生命体内并不是独立存在的，任何遗传信息的传递
和调控等生命活动都是在DNA与其所缠绕的蛋白质形成的染... 阅读全帖 |
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b*********8
发帖数: 44 | 7 最近想做酵母双杂交，但发现现在的载体（pGADT7/pGBKT7, pDEST22/pDEST32）都是把
目标蛋白融合到Gal-AD或Gal-BD的C端。 我的蛋白融合到C端不表达，请问有Gal-AD或
Gal-BD在C端，这样目标蛋白可以融合到Gal-AD或Gal-BD的N端的Y2H载体吗？非常感谢
！有Gal-AD或Gal-BD在C端的载体吗？ |
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j****x
发帖数: 1704 | 8 多谢诸位！
查了下前面给出的Addgene上的载体，感觉不是特别合适（表达shRNA和mRNA有一个很关
键的差别），最后还是决定自己手动改造了。根据Clonetech的pLVX-TetOne载体合成一
段大约3kb的cassette，置换到pLenti载体的backbone上，不含插入gene的话大概是9kb
，这样表达2kb以下的ORF应该问题不大，更大的插入就像铁牛所说，要严重影响包装效
率了。 |
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f**x
发帖数: 4325 | 9 某一个团体发行了一套保钓纪念钞以美元为载体，而不是土工所有保钓纪念钞都以美元
为载体。
大惊小怪个屁阿，lzsb |
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发帖数: 1 | 10 陈薇她们做的。
已经在武汉开始打针了。
这种疫苗采用基因工程方法构建，以复制缺陷型人5型腺病毒为载体，可表达新型冠状
病毒S抗原。
项目负责人、中国工程院院士、军事医学研究院研究员陈薇是这样解释它的原理：在“
学习”病毒的前提下，对病毒进行“手术”，用移花接木的方法，改造出一个我们需要
的载体病毒，并注入人体产生免疫。
I期试验需要的志愿者并不多，仅限武汉地区常住居民，武昌、洪山、东湖风景区户籍
居民优先，年龄18-60周岁。
志愿者会被分为低剂量组、中剂量组和高剂量组三组，每组36人。
经过筛选和体检后，符合要求的志愿者可以接种疫苗。此后的14天，为集中隔离观察期
。 |
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m******5
发帖数: 1383 | 11 现在在进行一个大载体（13k）单酶切连接大片段实验
因为遇到种种问题一直不奏效，所以想设计实验把连接步骤改造为双酶切
方法设想为：将大载体单酶切线性化后，用PCR引物把线性化的质粒p出来，期中一端引
物添加一个新酶，之后把pcr产物胶回收后用新酶进行一次酶切，就形成了两个粘性末
端，于是就成为双酶切连接。
请问这样可行么? 另外 ，ＬＡ Ｔａｑ引入突变的几率大么
另外，补充问题，这么大的质粒用ｐｆｕ做定点突变靠谱么／ |
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C*****9
发帖数: 63 | 12 我要克隆的基因可能对E.coli有毒性，用过几个ta克隆载体，pCRII， pGEM-t等，可以
连上，但是再往下做就不对了，怀疑是被突变了，现在想找一个没有Promoter的TA克隆
载体，谁能推荐个。 |
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s**********a
发帖数: 92 | 13 大家好，
对于病毒载体，也像一般plasmid那样，瞬时转染后提蛋白，做western鉴定么？
还是收集上清直接做infection，然后再western鉴定呢？谢谢！
我的情况是：pBABE载体，瞬时转染293后，提蛋白，做western没蛋白表达。 |
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b*****o
发帖数: 150 | 14 aav 是个相对promising 安全的载体 和retro比起来
但不太明白他那个是怎么进入神经的 明天到单位再看他的paper
题外话 老夫当年宿舍卧谈的时候还臆想那改造的rabies病毒去做基因治疗的载体 对付
神经系统疾病 现在想来真是 哈哈哈哈 |
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f*****f
发帖数: 195 | 15 病毒载体主要是转染效率高，甚至可以接近100%。但一般整合基因组的效率和普通的基
本一致，所以要构建稳定表达系的话一般要抗性筛选。
病毒载体也可以做瞬时转染后直接抗性筛选，只是初始转染效率要低些。病毒转染筛选
一样也有假阳性。
提高基因组整合效率需要特定序列，如flp-in system。 |
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C******2
发帖数: 97 | 16 求助各位，最近我在操作一个逆转录病毒载体，在两个ltr 之间插入了大概 4kb 的片
断 ，两个ltr呈反向排列，但是之间只有20bp的间隔，具体情况见下图，但是最终不能
正常产生病毒，请教各位有什么好的建议么，或者说这样的载体本身就不能正常工作？
谢谢大家的建议。 |
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C******2
发帖数: 97 | 17 我猜想，只是猜想可能是两个ＬＴＲ 之间的插入片断太大，导致了病毒产率和感染效
率较低，另外由于两个ＬＴＲ 另一端基本上直接被连接在了一起，只有几个酶切位点
相隔，是不是这对病毒有不好的影响，因为在一般情况下，ＬＴＲ另一端是被载体的骨
架隔开的，但是我这里把载体骨架也包装进入病毒了。 你有什么建议么？再次感谢
。 |
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Z******5
发帖数: 435 | 18 我最近也在为这事折腾呢。
我们最近买了pLKO-Tet-on，表达shRNA非常好用。整个载体10k多一点。插入shRNA后载
体也不会太大。
也考虑把这个载体promoter改成表达蛋白的，但是如果插入蛋白表达基因就会很大。最
近还在纠结中。 |
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w*********1
发帖数: 27 | 19 之前一直用的四质粒系统包装慢病毒。包括shRNA和普通的DNA表达。但都不是tet
inducible的。最近需要换成Tet inducible的。我想包装系统就不用变了。但需要重新
购买用于包装上shRNA和DNA的tet inducible的表达载体。老板让我去addgene上去搜。
请问各位老师有何推荐的比较好用的载体？谢啦。 |
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a******s
发帖数: 37 | 20 有几个在pLKO载体上用的效果不错的shRNA打算移植到MSCV-miR30载体上，不知道会不
会一样有效？ |
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s*******h
发帖数: 3731 | 21 行。。。要不咱们一起开发吧。。。
为啥要用高分子做载体，要从化学和化工两个方面来考虑。。。
1. 无机物上能放啥官能团，怎么才能发产物从载体上释放下来。。。变化多否？
2. 负载孔径大小直接影响mass transfer等一系列工程问题啊。。。 |
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l******g
发帖数: 1623 | 22 制药公司大概都有自己构建的表达载体，构建这种载体主要考虑promoter和selection
marker. 现在比较常用的promoter有EF1的成分promoter和CMV，主流selection marker
有GS和DHFR。无论哪种组合，表达抗体很容易做到4g/L
想省事就用lonza的GS system,专利过期了。 |
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s********n
发帖数: 26222 | 23 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: smokinggun (硝烟), 信区: Military
标 题: 侯鸟可以跨亚洲美洲迁徙，可能成为携带病毒载体
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Apr 4 11:19:49 2013, 美东)
在俄国繁殖的鸟可能到旧金山过冬，而阿拉斯加的鸟有可能飞到马来西亚。
靠，神奇啊。
These transcontinental migrants, which traveled primarily in the daytime,
flew far too high to be observed and identified visually. However, evidence
suggests that they are mostly shorebirds—such as Red Phalaropes and Long-
billed Dowitchers—along with some species of tern and skua. By flying east
to the North American mai... 阅读全帖 |
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A*******e
发帖数: 12486 | 24 要在深化认识上下工夫，准确把握中央和省委的新部署新要求，把党的政治优势转化为
科学发展优势，把党组织活动转化为改革发展动力，把党员先进性转化为推动改革发展
的实际行动。要在搞好结合上下工夫，把创先争优活动与服务全省工作大局结合起来，
与改善民生服务群众结合起来，与本单位本岗位实际工作结合起来。要在体现特色上下
工夫，搭建特色鲜明、务实管用的实践载体，确保活动开展得有声有色。要在突出效果
上下工夫，推动事关群众切身利益问题的有效解决，兑现向群众作出的承诺。 |
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n********e
发帖数: 1655 | 25 http://news.artxun.com/qianbi-1722-8607569.shtml
京报网讯 保卫钓鱼岛纪念封、纪念钞今日发行。纪念封图案为中国钓鱼岛主岛并附有
中华人民共和国国旗邮票。纪念钞以美国法定货币为载体，在一美元四连体钞上加印由
中国钓鱼岛主岛、五星红旗和钓鱼岛中英文字样组成的彩图。由香港保钓行动委员会和
美中人才交流基金会、美国钱币总公司联合制作的该款纪念钞，全球范围内限量发行
10000套。
众所周知，钓鱼岛及其附属岛屿自古以来就是中国固有领土，中国对钓鱼岛主权拥有充
分历史和法理依据。而自今年以来，日本在钓鱼岛问题上闹剧不断，直至今年9月一意
孤行通过所谓对钓鱼岛“国有化”协议。这一挑衅行径是对中国主权的严重侵犯，是对
中国人民的民族感情的严重伤害，也是对国际法理的严重践踏、对战后国际秩序的严重
挑战。中国政府和人民对此强烈抗议，在主权问题上中国绝不会退让半步。此次保钓纪
念封、纪念钞的发行，再次表达了中华儿女捍卫钓鱼岛领土主权的决心和意志是坚定不
移的，是任何外来压力都丝毫不能动摇的。
视频在这里：
http://v.qq.com/cover/a/ahe... 阅读全帖 |
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q********u
发帖数: 15519 | 26 中国静悄悄地开始造075两栖攻击舰了，三四万吨位，舰载武装直升机五十架，还可以
载垂直起飞战机十来架，同时可以运载坦克、装甲车、火炮、外加两个营的海空军陆战
队，075两栖攻击小型航母的本身，就有强大无比的反潜战力、发射对空对地对海短中
远程导弹能力、和强大无比的雷达探测力，也就是说，075两栖攻击小型航母同时具有
海军、空军、陆军的立体作战能力，所以称之为海空军陆战队，有别于美国的海军陆战
队。
中国已经有了海军陆战队的雏形，两个海军陆战队旅，外加两个两栖作战师转化的四个
海军陆战旅，总共六个海军陆战旅，不久的未来，中国完全可能增加到十个甚至十五个
海军陆战旅，大势所趋。
美中不足的是中国目前完全缺乏垂直起飞战机的研发能力，不过，按照中国军事武器的
发展速度，完全可能在五年到十年内，中国再次来一个一鸣惊人，山寨或研发出新一代
垂直起飞战机。
这样一来，中国就有了新军种，就是两栖攻击小型航母为载体的海空军陆战队。 |
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q****5
发帖数: 1660 | 27 任何一种语言都是特定文化的载体，既然如此自恨为啥坚持来中文论坛 |
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发帖数: 1 | 29 个人评价：腺病毒载体的疫苗，比那种mRNA疫苗要相对可靠。 |
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h*y
发帖数: 208 | 30 请教： 生物海归－－如何带载体，抗体，生物试剂回国。能托运吗？ |
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s********n
发帖数: 26222 | 31 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: smokinggun (硝烟), 信区: Military
标 题: 侯鸟可以跨亚洲美洲迁徙，可能成为携带病毒载体
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Apr 4 11:19:49 2013, 美东)
在俄国繁殖的鸟可能到旧金山过冬，而阿拉斯加的鸟有可能飞到马来西亚。
靠，神奇啊。
These transcontinental migrants, which traveled primarily in the daytime,
flew far too high to be observed and identified visually. However, evidence
suggests that they are mostly shorebirds—such as Red Phalaropes and Long-
billed Dowitchers—along with some species of tern and skua. By flying east
to the North American mai... 阅读全帖 |
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b*******n
发帖数: 1267 | 32 杂志是愉悦的载体—《纽约时报杂志》总编辑杰拉尔德·马尔佐拉蒂访谈录(转)
[ 2007-04-13 17:51:05 | 作者: zany ]
【调整阅览字体大小】: 大 | 中 | 小
uploads/200704/13_175858_tuesday.gif
理念：出色的杂志能够同时扮演好“镜子”和“窗户”两种角色
记者：能谈谈《纽约时报杂志》（The New York Times Magazine）的编辑理念吗？
杰拉尔德·马尔佐拉蒂：和《时代》《新闻周刊》这类归纳、分析或概括过去一周新闻
的杂志不同，我们将新闻作为杂志的内容。我们努力使用长篇的、纪实性表达方法和技
巧去探索现在的生活方式。
比如说，这个星期天的封面报道是关于亚历桑那州一个基督教福音派教堂的。周日人们
去教堂并不仅仅是进行宗教活动。他们在那儿做理财计划、进行娱乐活动，把孩子送去
上课。这些地方原本没有福利设施，教堂能够将大家聚集起来。在美国的各种社团中，
这类社团发展最快。这是个典型的《纽约时报杂志》故事。以叙事、讲故事的方式探究
普通人的生活方式—这是最能定义《纽约时报杂志》的东西。我们也报道国际新闻、政
治新闻 |
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e*******e
发帖数: 342 | 33 这几天老板让找一下有没有真核细胞用的、非融合表达GFP的DEST载体，只是用GFP来监测转化
效率，并不想作为标签蛋白。各位大侠，如有知道的，请提供信息，谢谢！ |
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e***o
发帖数: 344 | 34 版上各个领域的牛人不少，集思广益，大家来说说自己的一手心得体会吧，说不定这个
帖子就变成一个chapter了呢
各种病毒载体如 AAV,HSV,AV,VSV， Lenti,PRV,Rabies，还有 amplicon。。。。。都来说说
什么安全性，宿主细胞，表达效率，免疫原性，毒性，一起“研究研究” |
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D******9
发帖数: 2665 | 35 大家有没有好的miRNA表达载体推荐， 希望有个GFP和IRES。 |
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h*y
发帖数: 208 | 36 生物海归－－如何带载体，抗体，生物试剂回国。能托运吗？ |
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s********n
发帖数: 2939 | 37 载体和菌株可以理解，但是抗体和试剂不是实验室的财产么？据为己有？ |
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w*********g
发帖数: 69 | 38 菜鸟问个问题。有人用过pVAX1做真核表达载体么？能在vero、BHK、CHO或者pk15细胞
里表达吗？有没有相关的文献啊？
小弟先谢过了。 |
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j******i
发帖数: 939 | 39 认为这个领域落败了这样对中国人今后在这个领域贡献不好吧 自从十年前用
retrovirus治疗X-SCID报道两个男孩得了leukemia(病毒激活了癌基因）人们一直在改
良病毒载体 比如病毒结合随机插入的转座子 甚至 site-directed targeting ZFN/
TALN。另外，如果你从另一面看，十年前的那起治疗试验，其实那另外八个小孩已经可
以像正常人一样生活了。基因治疗的效果可见一斑。 |
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V***b
发帖数: 3419 | 40 比如SMA (Spinal Muscular Atrophy) 这种疾病是由于一个叫SMN1的隐性基因缺失引起
的，父母都没有病症但是都缺一个allele，结果孩子很不幸，25%的可能性发生了，
SMN1编码的蛋白SMN没有表达，这个蛋白是负责mRNA剪切的，对运动神经元的存活至关
重要，结果孩子终生不能走和运动，以后吃饭呼吸还会有困难。这种一个基因完全没有
的情况用病毒做载体感染可行吗？肯定有人试过了。主要的难关在哪里？转染效率低？
特定细胞表面没有受体？基因整合困难？ |
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C**S
发帖数: 522 | 41 不好意思，我对病毒的了解只限于卡通图片里面描述的：病毒把尾巴插入细胞，把DNA
注射到细胞里。
你所说的整合酶是从什么地方来的，是包装质粒吗？
我是需要做稳定整合的细胞系，载体retro和lenti的都有。 |
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j****x
发帖数: 1704 | 42 呵呵，卡通基本也就够了。建议找到你所用的载体系统的说明书（比如invitrogen的
pLenti系统）看看就行了，原理不复杂
做稳定整合细胞系，当然用病毒转导比质粒转染的效率高多了，BSL2级实验室就可以操
作了，没啥大不了的
DNA |
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r***e
发帖数: 2539 | 43 有的病毒载体不整合（比如adeno），但是能整合的（比如lenti），只要进去了就是～
100%整合，因为它们有帮助整合的元件。
你说的瞬转和筛选没问题。 |
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j*****q
发帖数: 82 | 44 sybr green的方法。primer express设计的引物， 没hairpin，没dimer，在载体上扩
增很漂亮，线性化也很好。但是拿到基因组DNA上扩增就很差。 不同的底物浓度的ct值
很接近，而且都偏大，28，29的水平。
这样的现象能是什么问题呢？引物本身的问题吗？
多谢了 |
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a****i
发帖数: 21 | 45 在IRES or 2A载体里接入基因,如果基因带了stop codon,会不会影响IRES or 2A后面的
荧光蛋白的表达? |
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B******o
发帖数: 496 | 46 你的载体是啥？具体说说两个LTR之间的序列，通常会有些包装蛋白的element。
另外，4kb算是比较大得了，病毒的产量会随insert 长度有指数的下降 |
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S*********s
发帖数: 304 | 47 你如果要做rescue,没有必要就纠结于这个载体。
换个retrovirus or lentivirus expression vector. |
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z*t
发帖数: 863 | 48 大家知道MSCV最大可以deliver多大的片段（包括两侧LTR）？查了下MSCV的原始基因组
大概是7-10kb,我们想clone一个5.5kb左右的片段到MSCV-GFP载体里，不知道这个size
是否会影响病毒包装侵染的效率？ |
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r**a
发帖数: 121 | 49 我觉得联接酶，应该不会有什么问题的，常用的T4，至少我连6000片段到8000载体没有
什么问题。
你看看前面的步骤，酶切位点有没有特殊性，切没有切好（保护碱基啊），我觉得初问
题可能性更大 |
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d**********9
发帖数: 981 | 50 一直想把PCR产物，连接到一个AAV载体中，但是一直都没有连进去，好像不稳定，有谁
有经验呀？多谢了 |
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