P1 transduction紧急求助。 - Biology版

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Biology版 - P1 transduction紧急求助。

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K*F
发帖数: 120

简而言之吧，我在做大肠杆菌的P1 transduction。我要把donor菌（ArgE::Tn10(Tet_R
)）转化到
recipient 菌(Tet_sensitive).
做P1 transduction好多次做不出来，一个colony都长不出来。然后做了一个P1 lysate
的titer，
发现稀释到10E-6之后，噬菌斑直径仍然有2cm大小。我该怎么办？
疑问：
（1) recipient菌本身已经有一个Tn10（Tet_sensitive, Streptomycin_resistent）
。奇怪吧，
第一次听说Tn10是Strep抗性的，一般都是Tet抗性的啊。问题是：如果recipient菌已
经有一个
Tn10，我还能通过抗生素筛选的方式转化入另外一个Tn10么？
（2）我的P1 phage lysate 是不是太浓了？我是不是应该做很多个phage lysate的梯
度呢？
不胜感激。

K*F
发帖数: 120

自己顶一下，希望Bio版上有人来帮助一下。

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